離子交換介質(zhì)的選擇

2、離子交換介質(zhì)的選擇策略在實際應(yīng)用中，離子交換介質(zhì)的基質(zhì)、孔結(jié)構(gòu)、配基密度（電荷密度或交換容量）、顆粒大小和分布都會影響介質(zhì)的層析效果。親水性基質(zhì)往往比疏水性基質(zhì)具有更好的生物相容性，更適用于蛋白質(zhì)的分離純化。目前常用的離子交換介質(zhì)的基質(zhì)大多是瓊脂糖。介質(zhì)的配基密度越大，越有利于提高介質(zhì)的處理量和對蛋白質(zhì)的吸附力，但由于蛋白質(zhì)大分子與介質(zhì)間的多位點結(jié)合，其構(gòu)象可能發(fā)生變化，從而導致蛋白質(zhì)的失活，同時這種多位點結(jié)合也可使大分子與介質(zhì)間的結(jié)合過于牢固，難以洗脫，造成不可逆吸附。因此，合適的配基密度是實現(xiàn)大分子高效分離純化的重要保障。介質(zhì)顆粒越小，粒徑分布越均勻，理論塔板數(shù)越高，分離效果越好。介質(zhì)孔徑越大，蛋白質(zhì)分子越容易進入，介質(zhì)的交換容量越高。3、緩沖液的選擇策略通過調(diào)節(jié)pH可以改變蛋白質(zhì)的帶電性質(zhì)，從而影響蛋白質(zhì)的離子交換層析行為。當pH低于蛋白質(zhì)的等電點（pI）時，蛋白質(zhì)可被陽離子交換介質(zhì)吸附；反之則能被陰離子交換介質(zhì)吸附?？紤]到蛋白質(zhì)在層析過程中的穩(wěn)定性，依據(jù)等電點選擇緩沖液的pH值時，一般選用與蛋白質(zhì)等電點相差一個單位的pH值，此時蛋白質(zhì)與介質(zhì)間的靜電作用力大小適中，不僅可以實現(xiàn)蛋白質(zhì)的有效吸附，而且洗脫條件也比較溫和。本中心生產(chǎn)的離子交換介質(zhì)列表貨號IPE-DEAEIPE-CMIPE-QIPE-SP產(chǎn)品名稱弱陰離子交換介質(zhì)（DEAE）弱陽離子交換介質(zhì)（CM）強陰離子交換介質(zhì)（Q）強陽離子交換介質(zhì)（SP）離子交換類型弱陰離子弱陽離子強陰離子強陽離子離子交換容量（ml介質(zhì)）0.11~0.160.09~0.130.18~0.250.18~0.25載量（ml介質(zhì)）110mg(HSA)50mg（核糖核酸酶）120mg(HSA)70mg（核糖核酸酶）

pH工作范圍2~95~102~124~13pH穩(wěn)定性2~134~132~134~13粒徑范圍（頃）45~16545~16545~16545~165耐壓(MPa)0.30.30.30.3最大流速（cm/h）500500500500應(yīng)用純化帶負電荷的純化帶正電荷純化帶負電荷純化帶正電荷生物大分子的生物大分子的生物大分子的生物大分子本中心目前開發(fā)的離子交換層析介質(zhì)有DEAE（N,N-二乙基氨基乙基）離子交換介質(zhì)、CM（羧甲基）離子交換介質(zhì)、Q（N,N-二乙基氨基-2-羥丙基）離子交換介質(zhì)、SP（磺丙基）離子交換介質(zhì)。此外，還可根據(jù)客戶需求提供不同配基密度的離子交換介質(zhì)。貨號IPE-SP產(chǎn)品名稱強陽離子交換介質(zhì)（SP）離子交換類型強陽離子離子交換容量（ml介質(zhì)）0.18~0.25載量（ml介質(zhì)）70mg（核糖核酸酶）pH工作范圍4~13pH穩(wěn)定性4~13粒徑范圍（pm）45~165耐壓(MPa)0.3最大流速（cm/h）500應(yīng)用純化帶正電荷的生物大分子貨號IPE-Q產(chǎn)品名稱強陰離子交換介質(zhì)（Q）離子交換類型強陰離子離子交換容量（ml介質(zhì)）0.18~0.25載量（ml介質(zhì)）120mg(HSA)pH工作范圍2~12pH穩(wěn)定性2~13粒徑范圍（pm）45~165耐壓(MPa)0.3

最大流速（cm/h）500應(yīng)用純化帶負電荷的生物大分子貨號IPE-CM產(chǎn)品名稱弱陽離子交換介質(zhì)（CM）離子交換類型弱陽離子離子交換容量（ml介質(zhì)）0.09~0.13載量（ml介質(zhì)）50mg（核糖核酸酶）pH工作范圍5~10pH穩(wěn)定性4~13粒徑范圍（pm）45~165耐壓(MPa)0.3最大流速（cm/h）500應(yīng)用純化帶正電荷的生物大分子貨號IPE-DEAE產(chǎn)品名稱弱陰離子交換介質(zhì)（DEAE）離子交換類型弱陰離子離子交換容量（ml介質(zhì)）0.11~0.16載量（ml介質(zhì)）11