檢測系統(tǒng)評(píng)價(jià)與驗(yàn)證課件

檢驗(yàn)工作者必備知識(shí)3—

檢測系統(tǒng)評(píng)價(jià)與驗(yàn)證檢驗(yàn)工作者必備知識(shí)3—

檢測系統(tǒng)評(píng)價(jià)與驗(yàn)證本章要點(diǎn)決定性方法、參考方法和常規(guī)方法的概念。檢測系統(tǒng)性能評(píng)價(jià)的臨床意義和臨床應(yīng)用。精密度的概念，精密度實(shí)驗(yàn)的評(píng)價(jià)方法。線性范圍評(píng)價(jià)的概念，實(shí)驗(yàn)方法及數(shù)據(jù)分析。攜帶污染的概念，實(shí)驗(yàn)方法及消除其措施。生物參考區(qū)間的驗(yàn)證方法。室內(nèi)與室間比對(duì)實(shí)驗(yàn)的方法及實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析本章要點(diǎn)決定性方法、參考方法和常規(guī)方法的概念。檢測系統(tǒng)評(píng)價(jià)與驗(yàn)證目錄第一節(jié)性能評(píng)價(jià)在實(shí)驗(yàn)室的應(yīng)用范圍第二節(jié)性能評(píng)價(jià)與驗(yàn)證的基本方法第三節(jié)室內(nèi)與室間比對(duì)實(shí)驗(yàn)

檢測系統(tǒng)評(píng)價(jià)與驗(yàn)證目錄第一節(jié)性能評(píng)價(jià)在實(shí)驗(yàn)室的應(yīng)用范圍第二第一節(jié)性能評(píng)價(jià)在實(shí)驗(yàn)室的應(yīng)用范圍檢測系統(tǒng)評(píng)價(jià)與驗(yàn)證第一節(jié)檢測系統(tǒng)評(píng)價(jià)與驗(yàn)證常規(guī)方法決定性方法經(jīng)詳盡研究尚未發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生誤差的原因準(zhǔn)確度最高，系統(tǒng)誤差最小，測定結(jié)果與“真值”最為接近。主要用于評(píng)價(jià)參考方法和對(duì)一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品定級(jí)。經(jīng)詳盡研究證實(shí)其不準(zhǔn)確度與不精密度可以忽略的方法。主要用于鑒定常規(guī)方法的準(zhǔn)確性，也用于鑒定二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)質(zhì)控血清定值和對(duì)商品試劑盒的質(zhì)量做評(píng)價(jià)等。應(yīng)具有足夠的精密度、準(zhǔn)確度和特異性，有適當(dāng)?shù)姆窒捣秶湫阅苤笜?biāo)符合臨床或其他的需要，經(jīng)濟(jì)實(shí)用。實(shí)驗(yàn)室方法分級(jí)參考方法一、實(shí)驗(yàn)室方法分級(jí)常規(guī)決定性經(jīng)詳盡研究尚未發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生誤差的原因準(zhǔn)確度最高，系統(tǒng)誤臨床檢驗(yàn)部分項(xiàng)目的方法臨床檢驗(yàn)部分項(xiàng)目的方法臨床檢驗(yàn)部分項(xiàng)目的方法臨床檢驗(yàn)部分項(xiàng)目的方法臨床檢驗(yàn)部分項(xiàng)目的方法臨床檢驗(yàn)部分項(xiàng)目的方法常規(guī)方法參考方法決定性方法應(yīng)用范圍不同方法間的關(guān)系常規(guī)方法參考方法決定性應(yīng)用范圍不同方法間的關(guān)系性能評(píng)價(jià)的必要性：每種檢測項(xiàng)目具有多種檢測方法；各室用試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品及其它外部供應(yīng)品來源不同儀器、人員素質(zhì)和技術(shù)管理之間有很大差別等；同一檢驗(yàn)項(xiàng)目各實(shí)驗(yàn)室的檢測結(jié)果之間相差很大，給臨床的診斷和治療造成了一定的困難?！餅楸ＷC檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，增加實(shí)驗(yàn)室之間的可比性二、性能評(píng)價(jià)的應(yīng)用范圍

性能評(píng)價(jià)的必要性：二、性能評(píng)價(jià)的應(yīng)用范圍

性能評(píng)價(jià)的臨床應(yīng)用范圍新檢測方法檢測系統(tǒng)在運(yùn)行過程中性能評(píng)價(jià)的檢測系統(tǒng)新建檢測系統(tǒng)配套系統(tǒng)：實(shí)驗(yàn)室對(duì)照生產(chǎn)廠家提供的儀器使用說明書的承諾進(jìn)行性能參數(shù)的驗(yàn)證。非配套系統(tǒng)：實(shí)驗(yàn)室必須對(duì)其性能進(jìn)行全面評(píng)價(jià)。一個(gè)穩(wěn)定的檢測系統(tǒng)必須保證其檢測誤差在臨床可接受的范圍內(nèi)。新建檢測系統(tǒng)配套系統(tǒng)：實(shí)驗(yàn)室對(duì)照生產(chǎn)廠家提供的儀器使用說明書檢測系統(tǒng)在運(yùn)行過程中由于機(jī)械部件的磨損、材料變質(zhì)，檢測系統(tǒng)的組成發(fā)生變化或檢測系統(tǒng)的運(yùn)行環(huán)境發(fā)生變化時(shí)，各種性能也會(huì)隨之發(fā)生變化。為了保證檢測系統(tǒng)的持續(xù)有效性，必須定期或不定期的評(píng)價(jià)或驗(yàn)證。檢測系統(tǒng)在運(yùn)行過程中由于機(jī)械部件的磨損、材料變質(zhì)，檢測系統(tǒng)的性能評(píng)價(jià)和驗(yàn)證?儀器停修后再次使用檢測方法變更檢測試劑變更新項(xiàng)目在應(yīng)用臨床之前性能評(píng)價(jià)儀器停修檢測方法檢測試劑新項(xiàng)目在應(yīng)對(duì)新檢測方法一個(gè)新的檢測方法的引進(jìn)或?qū)υ袡z測方法的某些技術(shù)進(jìn)行改進(jìn)以后，在對(duì)臨床標(biāo)本檢測以前都要進(jìn)行性能評(píng)價(jià)。完全符合臨床使用要求時(shí)方可用于患者標(biāo)本進(jìn)行檢測。對(duì)新檢測方法一個(gè)新的檢測方法的引進(jìn)或?qū)υ袡z測方法的某些技性能評(píng)價(jià)驗(yàn)證精密度準(zhǔn)確度線性范圍攜帶污染率標(biāo)準(zhǔn)化生物參考區(qū)間What?性能精準(zhǔn)線性攜帶標(biāo)準(zhǔn)化生物What?檢測系統(tǒng)評(píng)價(jià)與驗(yàn)證第二節(jié)性能評(píng)價(jià)與驗(yàn)證的基本方法檢測系統(tǒng)評(píng)價(jià)與驗(yàn)證第二節(jié)檢測系統(tǒng)評(píng)價(jià)與驗(yàn)證課件檢測系統(tǒng)評(píng)價(jià)與驗(yàn)證課件精密度：是指同一標(biāo)本在一定條件下多次重復(fù)測定得到的一系列單次測定值之間的接近程度。通常用標(biāo)準(zhǔn)差（S）和（或）變異系數(shù)（CV）的大小表示，S和CV愈大表明檢測結(jié)果之間的離散程度愈大，重復(fù)性愈差；SD和CV愈小表明重復(fù)性愈好。

精密度評(píng)價(jià)精密度：是指同一標(biāo)本在一定條件下多次重復(fù)測定得到的一系列單次批內(nèi)精密度：在重復(fù)性條件下，在盡可能短的時(shí)間內(nèi)對(duì)同一樣本進(jìn)行多次重復(fù)測定所得結(jié)果的接近程度。日間精密度：將同一樣本分成數(shù)份，用同樣方法每天測定一次，最少連續(xù)測定20天求得的精密度。精密度評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)批內(nèi)精密度：在重復(fù)性條件下，在盡可能短的時(shí)間內(nèi)對(duì)同一樣本進(jìn)行實(shí)驗(yàn)條件必須保證穩(wěn)定檢測系統(tǒng)組成的穩(wěn)定，室內(nèi)環(huán)境基本符合日常工作要求，實(shí)驗(yàn)方法以及試劑、質(zhì)控品、校準(zhǔn)品批號(hào)一致。實(shí)驗(yàn)樣本應(yīng)與真實(shí)標(biāo)本有同樣的基質(zhì)且穩(wěn)定性好選擇2個(gè)或多個(gè)濃度患者血清或冰凍血清或以血清為基質(zhì)的質(zhì)控品或校準(zhǔn)品。檢測系統(tǒng)應(yīng)處于良好的狀態(tài)其運(yùn)行環(huán)境和條件應(yīng)在儀器使用說明書規(guī)定范圍之內(nèi)。每次實(shí)驗(yàn)過程均應(yīng)有質(zhì)量控制。實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)條件必須保證穩(wěn)定檢測系統(tǒng)組成的穩(wěn)定，室內(nèi)環(huán)境基本符合日批內(nèi)精密度測定：將實(shí)驗(yàn)樣本隨機(jī)插入患者樣本中進(jìn)行檢測，一批內(nèi)連續(xù)測定20次。日間精密度測定：每天將實(shí)驗(yàn)樣本隨機(jī)插入患者樣本中檢測一次，20天后對(duì)20次檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)算高、低兩個(gè)濃度批內(nèi)與日間共4組數(shù)據(jù)的均值、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)。樣本測定批內(nèi)精密度測定：將實(shí)驗(yàn)樣本隨機(jī)插入患者樣本中進(jìn)行檢測，一批內(nèi)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析公式為：

式中指在該符號(hào)右側(cè)求總和；i=1表示從第1個(gè)x值開始加，加到第n個(gè)x值，一共加n個(gè)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析公式為：式中指在該符號(hào)右側(cè)求總和；i=批內(nèi)≤1/4衛(wèi)生部臨檢中心規(guī)定的總允許誤差范圍

日間≤1/3衛(wèi)生部臨檢中心規(guī)定的總允許誤差范圍精密度實(shí)驗(yàn)判斷標(biāo)準(zhǔn)批內(nèi)≤1/4衛(wèi)生部臨檢中心規(guī)定的總允許誤差范圍

日間≤1/3定義：準(zhǔn)確度是指測定值（或一組數(shù)據(jù)的均值）與真值的一致性，用偏倚來表示。偏倚又可用系統(tǒng)誤差的大小來表示。評(píng)價(jià)系統(tǒng)誤差的實(shí)驗(yàn)：回收試驗(yàn)：是評(píng)價(jià)比例系統(tǒng)誤差干擾試驗(yàn)：是評(píng)價(jià)恒定系統(tǒng)誤差方法比較試驗(yàn)：是評(píng)價(jià)系統(tǒng)誤差（恒定和/比例誤差）

準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)定義：準(zhǔn)確度是指測定值（或一組數(shù)據(jù)的均值）與真值的一致性，用定義：是指在已知濃度的樣本中加入不同濃度的已知被測物，用被評(píng)價(jià)方法或被評(píng)價(jià)檢測系統(tǒng)測定被評(píng)價(jià)物質(zhì)的濃度，最后計(jì)算實(shí)測濃度與加入濃度之比，以回收率評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)方法或檢測系統(tǒng)的比例系統(tǒng)誤差。方法：無溶血、無脂血、無黃疸正常人血清，將其一分為三，一號(hào)樣本作為基礎(chǔ)樣本；二號(hào)和三號(hào)樣本作為分析樣本。分析樣本中加入不同濃度的被分析的純品標(biāo)準(zhǔn)液，基礎(chǔ)樣本中加入相同體積的無分析物的溶液，使3份樣本的總體積相同，重復(fù)檢測4次，計(jì)算回收率?；厥諏?shí)驗(yàn)定義：是指在已知濃度的樣本中加入不同濃度的已知被測物，用被評(píng)計(jì)算公式：

回收濃度=分析樣本測得平均濃度－基礎(chǔ)樣本測得平均濃度

加入濃度=加入的標(biāo)準(zhǔn)液量（ml）×標(biāo)準(zhǔn)液濃度患者樣本量（ml）標(biāo)準(zhǔn)液量（ml）回收率（%）=回收濃度×100加入濃度比例系統(tǒng)誤差=100%－平均回收率＋回收實(shí)驗(yàn)計(jì)算公式：加入濃度=加入的標(biāo)準(zhǔn)液量（ml）×標(biāo)準(zhǔn)液濃度患者例如：用某被評(píng)價(jià)的檢測系統(tǒng)

測定血清葡萄糖來做回收實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)樣本：血清0.9ml+0.1ml生理鹽水分析樣本1：混合血清0.9ml+0.1ml50mmol/L葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液分析樣本2：混合血清0.9ml+0.1ml100mmol/L葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液用被評(píng)價(jià)的檢測系統(tǒng)對(duì)該樣本進(jìn)行四次重復(fù)檢測計(jì)算回收率和比例系統(tǒng)誤差小于衛(wèi)生部規(guī)定的TEa標(biāo)準(zhǔn)，說明此方法的準(zhǔn)確度性能可接受；大于不可接受。例如：用某被評(píng)價(jià)的檢測系統(tǒng)

測定血清葡萄例如：用某被評(píng)價(jià)的檢測系統(tǒng)測定

血清葡萄糖來做回收實(shí)驗(yàn)回收實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果結(jié)論：平均回收率為96.5%，比例系統(tǒng)誤差為3.5%，小于衛(wèi)生部規(guī)定的總允許誤差標(biāo)準(zhǔn)，該方法的準(zhǔn)確度性能可接受。例如：用某被評(píng)價(jià)的檢測系統(tǒng)測定

血清葡萄糖新鮮正常人混合血清；應(yīng)將被測物配制適當(dāng)濃度的溶液加入實(shí)驗(yàn)樣本中，一般不超過總體積的10%；樣本加入量必須一致，且有高、中、低濃度；加入的濃度必須包括醫(yī)學(xué)決定水平，但不超出本方法的線性范圍；試劑配制和加入量必須準(zhǔn)確，要多做幾次后作出評(píng)定。注意事項(xiàng)新鮮正常人混合血清；定義：是通過定量檢測樣本中的物質(zhì)所引起實(shí)驗(yàn)方法的系統(tǒng)誤差，以評(píng)價(jià)方法的準(zhǔn)確度。首先要確定被試可疑物質(zhì)是否引起誤差；若能引起誤差,再進(jìn)一步探討其誤差的來源是因方法特異性差還是干擾造成。若加入的物質(zhì)本身和分析試劑反應(yīng)并產(chǎn)生讀數(shù)，這是特異性差；若加人物質(zhì)并不與分析試劑反應(yīng)，但它改變了分析物和分析試劑間的反應(yīng)，這是干擾。干擾實(shí)驗(yàn)定義：是通過定量檢測樣本中的物質(zhì)所引起實(shí)驗(yàn)方法的系統(tǒng)誤差，以臨床生化常見干擾物來源：內(nèi)源性：標(biāo)本中存在的（血清固有、病理情況生成的代謝產(chǎn)物、藥物、標(biāo)本采集不當(dāng)或飲食造成干擾物）外源性：加入標(biāo)本中的（抗凝劑、防腐劑、穩(wěn)定劑以及采集和處理標(biāo)本過程中污染物）干擾實(shí)驗(yàn)臨床生化常見干擾物來源：干擾實(shí)驗(yàn)可疑干擾物的選擇：可根據(jù)實(shí)驗(yàn)方法的反應(yīng)原理、廠商的說明書、文獻(xiàn)資料選擇。常見的干擾物包括黃疸、脂血、溶血、防腐劑、抗凝劑、穩(wěn)定劑和某些藥物等。干擾物的制備：如在樣本中加入膽紅素標(biāo)準(zhǔn)品可制備黃疸標(biāo)本，用機(jī)械溶血可制備溶血標(biāo)本、通過添加商品的脂肪乳制備脂血標(biāo)本等。干擾實(shí)驗(yàn)方法可疑干擾物的選擇：可根據(jù)實(shí)驗(yàn)方法的反應(yīng)原理、廠商的說明書、文實(shí)驗(yàn)樣本制備：選用正常患者標(biāo)本，將其一分為二，在其中一份樣本加入一定量的可疑干擾物質(zhì)作為干擾樣本，在另一份加入同等量的不含任何干擾物的溶劑作為基礎(chǔ)樣本。干擾實(shí)驗(yàn)方法干擾樣本基礎(chǔ)樣本

實(shí)驗(yàn)樣本制備：選用正常患者標(biāo)本，將其一分為二，在其中一份樣本樣本檢測：用被評(píng)價(jià)的方法或被評(píng)價(jià)的檢測系統(tǒng)對(duì)每份樣本重復(fù)測定2～3次，求添加干擾物后的每個(gè)混合血清與添加空白液的混合血清的偏差和百分偏差。干擾值計(jì)算干擾值（mmol/L）=干擾管測定值－基礎(chǔ)管測定值干擾率計(jì)算干擾率（%）=（干擾值/基礎(chǔ)值）×100%判斷標(biāo)準(zhǔn)：將干擾引起的系統(tǒng)誤差的大小與衛(wèi)生部TEa進(jìn)行比較，若小于該標(biāo)準(zhǔn)即可接受。干擾實(shí)驗(yàn)方法樣本檢測：用被評(píng)價(jià)的方法或被評(píng)價(jià)的檢測系統(tǒng)對(duì)干擾實(shí)驗(yàn)方法樣本制備：制備正常人混合血清一份，將其一分為二，1號(hào)為基礎(chǔ)樣本，2號(hào)為干擾樣本?；A(chǔ)樣本：混合血清0.9ml+蒸餾水0.1ml干擾樣本：混合血清0.9ml+8.84mmol/L尿酸標(biāo)準(zhǔn)液0.1ml干擾實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果例如：評(píng)價(jià)尿酸對(duì)GOD-POD法

測定血糖的干擾結(jié)論：0.88mmol/L尿酸對(duì)血糖的干擾值為0.62mmol/L，小于衛(wèi)生部臨檢中心TEa，判斷其是可接受的。樣本制備：制備正常人混合血清一份，將其一分為二，例如：評(píng)價(jià)尿控制干擾物的加入量：加入干擾物的數(shù)量應(yīng)不超過實(shí)驗(yàn)樣本總體積的l0%。確定干擾物濃度：加入干擾物的濃度須達(dá)到有價(jià)值的水平，盡可能達(dá)到病理標(biāo)本的最高濃度值。確定干擾的標(biāo)準(zhǔn)：由于干擾物引起測定結(jié)果的偏差有大有小，究竟多大的干擾可影響臨床診斷和治療，這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)至今仍未確定。注意事項(xiàng)控制干擾物的加入量：加入干擾物的數(shù)量應(yīng)不超過實(shí)驗(yàn)樣本總體積的空白實(shí)驗(yàn)采用雙波長或多波長檢測排除干擾。當(dāng)誤差較大又無法消除時(shí)，應(yīng)對(duì)檢測方法進(jìn)行改進(jìn)或更換新的檢測方法。

消除干擾的常用方法空白實(shí)驗(yàn)消除干擾的常用方法新的檢測系統(tǒng)新的檢測方法實(shí)驗(yàn)方法Y原有的檢測系統(tǒng)公認(rèn)的檢測方法比較方法X患者標(biāo)本偏倚方法比較實(shí)驗(yàn)新的檢測系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)方法Y原有的檢測系統(tǒng)比較方法X患偏倚方法比較熟悉分析方法和分析過程：對(duì)檢測系統(tǒng)流程、方法、儀器、環(huán)境、消耗品使用以及評(píng)價(jià)的內(nèi)容和方案十分熟悉和了解。檢測系統(tǒng)應(yīng)處于良好狀態(tài)，檢測系統(tǒng)運(yùn)行環(huán)境和條件在控制范圍內(nèi)，每次要有質(zhì)量控制。樣本準(zhǔn)備：20份患者新鮮樣本，其所含分析物濃度必須分布于實(shí)驗(yàn)方法的檢測范圍內(nèi)，其中至少50%樣本的測定結(jié)果處于實(shí)驗(yàn)室的參考區(qū)間之外、線性之內(nèi)。方法比較實(shí)驗(yàn)熟悉分析方法和分析過程：對(duì)檢測系統(tǒng)流程、方法、儀器、環(huán)境、消樣本檢測：用實(shí)驗(yàn)方法和比較方法每天對(duì)5-7份樣本進(jìn)行檢測，共檢測3-5天。每份樣本在每臺(tái)儀器上雙份測定（隨機(jī)指定第一次測定順序，按反向順序檢測第二次），取平均值。統(tǒng)計(jì)分析：比較方法X，實(shí)驗(yàn)方法Y。將20對(duì)結(jié)果繪制于坐標(biāo)紙上，如所有樣本方法學(xué)間比較的結(jié)果呈良好的直線線性關(guān)系，說明方法學(xué)比較實(shí)驗(yàn)有效。使用直線回歸處理，計(jì)算y=bx+a及相關(guān)系數(shù)r。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析樣本檢測：用實(shí)驗(yàn)方法和比較方法每天對(duì)5-7份樣本進(jìn)行檢測，共評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：相關(guān)系數(shù)r≥0.975，說明回歸式可以較好的反映方法間的真實(shí)關(guān)系，則在所檢測的分析物濃度范圍內(nèi)的任何處，可以估計(jì)方法學(xué)偏倚，偏倚應(yīng)≤1/2TEa。評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：相關(guān)系數(shù)r≥0.975，說明回歸式可以較好的反映方室間質(zhì)量評(píng)價(jià)驗(yàn)證：參加權(quán)威機(jī)構(gòu)組織室間質(zhì)量評(píng)價(jià)定值標(biāo)準(zhǔn)品的驗(yàn)證：質(zhì)控血清、校準(zhǔn)品、EQA剩余標(biāo)本室內(nèi)比對(duì)驗(yàn)證：同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部有公認(rèn)的方法或公認(rèn)的檢測系統(tǒng)做同一個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)目，可以用公認(rèn)的方法或檢測系統(tǒng)的結(jié)果比較其準(zhǔn)確度。室間比對(duì)驗(yàn)證：用本室的測定值與參考實(shí)驗(yàn)室的檢測結(jié)果進(jìn)行比對(duì)，觀察同一個(gè)樣品測定值間的差異。

準(zhǔn)確度驗(yàn)證室間質(zhì)量評(píng)價(jià)驗(yàn)證：參加權(quán)威機(jī)構(gòu)組織室間質(zhì)量評(píng)價(jià)準(zhǔn)確度驗(yàn)證準(zhǔn)確度與正確度、精密度的關(guān)系圖例準(zhǔn)確度與正確度、精密度的關(guān)系圖例AC線性段線性范圍評(píng)價(jià)：是觀察一種檢測方法或一個(gè)檢測系統(tǒng)的檢測范圍。通過該實(shí)驗(yàn)可以了解其最高檢測值（上限）和最低檢測值（下限），是對(duì)患者檢測結(jié)果可報(bào)告范圍的一種評(píng)價(jià)。較好的實(shí)驗(yàn)方法或檢測系統(tǒng)應(yīng)有一個(gè)較寬的線性范圍，起碼應(yīng)覆蓋本項(xiàng)目的醫(yī)學(xué)決定水平和常見疾病的檢測值。目的：選擇線性段作為該測定方法的分析測量范圍。線性范圍評(píng)價(jià)AC線性段線性范圍評(píng)價(jià)：是觀察一種檢測方法或一個(gè)檢測系統(tǒng)的檢標(biāo)本：患者新鮮低值和高值血清標(biāo)本最高濃度樣本：至少高于可報(bào)告范圍上限30%。最低濃度樣本：盡量選擇接近線性范圍下限，低值有臨床意義的項(xiàng)目，應(yīng)選擇盡量低的標(biāo)本。系列濃度樣本準(zhǔn)備1號(hào)樣本：原低值樣本2號(hào)樣本：低值樣本︰高值樣本=4︰1比例混勻3號(hào)樣本：低值樣本︰高值樣本=3︰2比例混勻4號(hào)樣本：低值樣本︰高值樣本=2︰3比例混勻5號(hào)樣本：低值樣本︰高值樣本=1︰4比例混勻6號(hào)樣本:原高值樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備標(biāo)本：患者新鮮低值和高值血清標(biāo)本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備系列濃度樣本在一天內(nèi)分兩批進(jìn)行測定，第一批測定順序從低到高濃度，第二批測定順序從高到低濃度，每批樣本測定3次，計(jì)算實(shí)測平均值。根據(jù)樣本稀釋方案計(jì)算預(yù)期值。

樣本的檢測系列濃度樣本在一天內(nèi)分兩批進(jìn)行測定，第一批測定順序從低到高濃將實(shí)測均值（Y軸）與預(yù)期值（X軸）作比較，初步觀察其相關(guān)性、線性走向及線性范圍。直線回歸統(tǒng)計(jì)，計(jì)算y=a+bx及相關(guān)系數(shù)r或r2。評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：b在1±0.05范圍內(nèi)且相關(guān)系數(shù)r≥0.975，認(rèn)為以上6個(gè)濃度為被評(píng)價(jià)方法或被評(píng)價(jià)檢測系統(tǒng)的線性范圍。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析將實(shí)測均值（Y軸）與預(yù)期值（X軸）作比較，初步觀察其相關(guān)性、

課間休息課間休息定義：是指分析儀器檢測標(biāo)本時(shí)，由于試劑、樣本和反應(yīng)杯等殘留物對(duì)后續(xù)項(xiàng)目檢測結(jié)果的影響?，F(xiàn)代分析儀器共用樣本加樣針、試劑加樣針、反應(yīng)杯、攪拌棒等。共用部件殘留物對(duì)后面標(biāo)本檢測結(jié)果的影響有些時(shí)候是非常明顯的，甚至造成臨床不可接受的結(jié)果。攜帶污染率的評(píng)價(jià)定義：是指分析儀器檢測標(biāo)本時(shí)，由于試劑、樣本和反應(yīng)杯等殘留物熟悉分析方法：對(duì)檢測系統(tǒng)的流程、方法、儀器、環(huán)境、消耗品使用以及評(píng)價(jià)的內(nèi)容和方案十分熟悉。檢測系統(tǒng)應(yīng)處于良好運(yùn)行狀態(tài)。樣本：無溶血、黃疸、脂血的高、低濃度各一份。檢測方法：取4個(gè)樣本杯，分別盛放3個(gè)相同低濃度的標(biāo)本（分別為L1，L2，L3）和1個(gè)高濃度標(biāo)本（H）。按L1，L2，H，L3順序進(jìn)行測定。攜帶污染率的計(jì)算：攜帶污染率=(L3-L2)/H×100%攜帶污染率的評(píng)價(jià)熟悉分析方法：對(duì)檢測系統(tǒng)的流程、方法、儀器、環(huán)境、消耗品使用攜帶污染率的評(píng)價(jià)攜帶污染率的評(píng)價(jià)加強(qiáng)對(duì)分析儀器的日常維護(hù)和保養(yǎng)研究新方法：用雙試劑或多試劑消除或降低攜帶污染率。針對(duì)性解決問題：對(duì)污染的項(xiàng)目從分析原理、試劑組成等多方面進(jìn)行分析。改變分析方法：當(dāng)攜帶污染難以解決時(shí)。其他方法：改變?cè)噭┘訕禹樞颉⒉迦敕歉蓴_項(xiàng)目、先檢測無污染的項(xiàng)目、相互干擾的項(xiàng)目分別指定使用不同圈的比色杯（生化分析儀的內(nèi)圈或外圈比色杯）、采用雙試劑加樣針分別加入試劑等。消除攜帶污染率常用措施加強(qiáng)對(duì)分析儀器的日常維護(hù)和保養(yǎng)消除攜帶污染率常用措施良好的精密度，無樣本的攜帶污染是我們進(jìn)行其它方法學(xué)驗(yàn)證的前提，如果一個(gè)分析系統(tǒng)的重復(fù)性不好或存在著樣本攜帶污染，則其它的方法學(xué)評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)就缺乏基本保障。注意良好的精密度，無樣本的攜帶污染是我們進(jìn)行其它方法學(xué)驗(yàn)證的前提定義：是指某項(xiàng)檢查結(jié)果在正常人群中的分布范圍，是解釋檢驗(yàn)結(jié)果、分析檢驗(yàn)信息的一個(gè)基本尺度和依據(jù)。國內(nèi)實(shí)驗(yàn)室多引用國家權(quán)威機(jī)構(gòu)、權(quán)威刊物頒布的或直接引用試劑廠家提供的生物參考區(qū)間。由于國度、年齡、性別、民族、居住地、生活習(xí)慣等存在差異，引用的參考區(qū)間與本地居民實(shí)際的可能有一定差異。生物參考區(qū)間的驗(yàn)證定義：是指某項(xiàng)檢查結(jié)果在正常人群中的分布范圍，是解釋檢驗(yàn)結(jié)果選擇評(píng)價(jià)對(duì)象：選擇無任何已知疾病，近期內(nèi)未用任何藥物的健康自愿者20名。必要時(shí)可按性別和不同年齡段進(jìn)行分組，每組至少20名。采集標(biāo)本：應(yīng)排除影響檢測結(jié)果的一些因素。如血液標(biāo)本應(yīng)禁食8-12小時(shí)，采血前不能飲用任何飲品、不能服用任何的藥物、禁煙、避免劇烈運(yùn)動(dòng)等。合理選擇采血時(shí)間、采血方法、采血次序、加入抗凝劑的類別等。檢測方法：按實(shí)驗(yàn)室制定SOP文件要求檢測20例健康個(gè)體。20個(gè)檢測數(shù)據(jù)不應(yīng)在一天內(nèi)獲得，建議當(dāng)天標(biāo)本當(dāng)天測定。實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備選擇評(píng)價(jià)對(duì)象：選擇無任何已知疾病，近期內(nèi)未用任何藥物的健康自若實(shí)驗(yàn)對(duì)象的測定值有95%以上在所選擇的參考區(qū)間內(nèi)，可以接受。即：若20例檢測結(jié)果全部在該參考區(qū)間內(nèi)；或有1例檢測結(jié)果在該區(qū)間以外，選擇區(qū)間可以接受；若2例或2例以上超出該參考區(qū)間，應(yīng)再增加20例健康個(gè)體重新進(jìn)行驗(yàn)證，若有10%的檢測結(jié)果超出參考區(qū)間，應(yīng)考慮重新制定本實(shí)驗(yàn)室的生物參考區(qū)間。生物參考區(qū)間結(jié)果評(píng)價(jià)若實(shí)驗(yàn)對(duì)象的測定值有95%以上在所選擇的參考區(qū)間內(nèi)，可以接受檢測系統(tǒng)評(píng)價(jià)與驗(yàn)證

第三節(jié)室內(nèi)與室間比對(duì)實(shí)驗(yàn)

檢測系統(tǒng)評(píng)價(jià)與驗(yàn)證第三節(jié)定義：同一檢驗(yàn)項(xiàng)目在同一實(shí)驗(yàn)室用兩種或兩種以上的檢測系統(tǒng)檢測，檢測結(jié)果之間要有可比性。常用方法：被評(píng)價(jià)的檢測系統(tǒng)與本實(shí)驗(yàn)室完整有效的國際國內(nèi)公認(rèn)的檢測系統(tǒng)或參加室間質(zhì)評(píng)成績合格的檢測系統(tǒng)進(jìn)行比對(duì)。室內(nèi)比對(duì)定義：同一檢驗(yàn)項(xiàng)目在同一實(shí)驗(yàn)室用兩種或兩種以上的檢測系統(tǒng)檢測定義：為了保證本室檢測結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。實(shí)驗(yàn)室將本室的檢測結(jié)果與參考實(shí)驗(yàn)室或經(jīng)ISO15189認(rèn)可的實(shí)驗(yàn)室的檢測結(jié)果進(jìn)行比對(duì)，或者參加權(quán)威機(jī)構(gòu)組織的室間質(zhì)量評(píng)價(jià)，這樣的比對(duì)稱“室間比對(duì)”。室間與室內(nèi)比對(duì)實(shí)際上是兩個(gè)或多個(gè)檢測系統(tǒng)的方法比較實(shí)驗(yàn)，待評(píng)價(jià)或驗(yàn)證的方法為實(shí)驗(yàn)方法，參考方法或準(zhǔn)確度已知的方法為比較方法。室間比對(duì)定義：為了保證本室檢測結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。實(shí)驗(yàn)室將本室的檢測結(jié)果選擇患者血液樣本至少40例，最好包括臨床常見的各種疾病的標(biāo)本。濃度范圍盡可能覆蓋整個(gè)可報(bào)告范圍，其中至少50%樣本的測定結(jié)果處于實(shí)驗(yàn)室的參考區(qū)間之外、線性之內(nèi)。如果從一個(gè)患者得不到所需要的樣本量，可以將兩個(gè)（但不能多于兩個(gè)）病史相同，被測物濃度也大致相近的患者樣本混合使用。最好使用測定當(dāng)天的樣本。比對(duì)樣本收集選擇患者血液樣本至少40例，最好包括臨床常見的各種疾病的標(biāo)本每天測8個(gè)樣本，連續(xù)測定5天，每個(gè)樣本在每臺(tái)儀器上雙份測定，按正反各一次的排序進(jìn)行檢測（隨機(jī)排序）如：第一次序號(hào)為：1、2、3、4、5、6、7、8第二次序號(hào)為：8、7、6、5、4、3、2、1比對(duì)的全部標(biāo)本，均應(yīng)在兩個(gè)小時(shí)內(nèi)測定完畢。減少交叉污染及漂移對(duì)重復(fù)測定標(biāo)本平均值的影響比對(duì)樣本測定每天測8個(gè)樣本，連續(xù)測定5天，每個(gè)樣本在每臺(tái)儀器上雙份測定，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析t檢驗(yàn)相關(guān)系數(shù)分析直線回歸分析F檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析t檢驗(yàn)直線回歸F檢驗(yàn)方法比較實(shí)驗(yàn)所得的結(jié)果是配對(duì)資料t檢驗(yàn)：用于比較兩種方法間的系統(tǒng)誤差（對(duì)隨機(jī)和比

例誤差敏感），用偏差表示。F檢驗(yàn)：用于比較方法間的隨機(jī)誤差或精密度。相關(guān)系數(shù)（r）：對(duì)隨機(jī)誤差敏感，r越接近1表明兩者相關(guān)性越好；r≥0.975或r2≥0.95則認(rèn)為兩者有相關(guān)性。直線回歸分析：Y=a+bxa為回歸線截距對(duì)恒定誤差敏感，a=0時(shí)表示無恒定誤差b為回歸線斜率對(duì)比例誤差敏感；b=1時(shí)表示無比例誤差配對(duì)資料統(tǒng)計(jì)處理方法比較實(shí)驗(yàn)所得的結(jié)果是配對(duì)資料配對(duì)資料統(tǒng)計(jì)處理r≥0.975或r2≥0.95提示兩個(gè)檢測系統(tǒng)的結(jié)果有可比性；室內(nèi)比對(duì)偏差小于可接受范圍，說明被評(píng)價(jià)的檢測系統(tǒng)的檢測結(jié)果可以接受，反之為不可接受，室間比對(duì)相對(duì)偏差不能超過1/2衛(wèi)生部TEa可接受范圍。判斷標(biāo)準(zhǔn)r≥0.975或r2≥0.95提示兩個(gè)檢測系統(tǒng)的結(jié)果有可比性結(jié)論：兩個(gè)檢測系統(tǒng)的檢測結(jié)果差異無顯著性；且r>0.975，證明兩個(gè)檢測系統(tǒng)的檢測結(jié)果具有較好的可比性。結(jié)論：兩個(gè)檢測系統(tǒng)的檢測結(jié)果差異無顯著性；且r>0.975，良好的精密度，無樣本的攜帶污染是我們進(jìn)行其它方法學(xué)驗(yàn)證的前提。如果一個(gè)分析系統(tǒng)的重復(fù)性不好或存在著樣本攜帶污染，則其它的方法學(xué)評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)就缺乏基本保障。小結(jié)良好的精密度，無樣本的攜帶污染是我們進(jìn)行其它方法學(xué)驗(yàn)證的前提5W1H為什么要驗(yàn)？（Why）什么時(shí)候驗(yàn)？（When）驗(yàn)什么？（What）在哪里驗(yàn)？（Where）誰來驗(yàn)？（Who）如何驗(yàn)？（How）？5W1H？空氣動(dòng)力學(xué)速度車體轉(zhuǎn)向架運(yùn)行固定、懸掛的零部件的強(qiáng)度穩(wěn)定性舒適性故障率高速列車性能驗(yàn)證

Why？空氣動(dòng)力學(xué)高速列車性能驗(yàn)證Why？新的檢測系統(tǒng)建立新儀器、設(shè)備新的檢測項(xiàng)目檢測方法變更檢測試劑更換When？新的檢測系統(tǒng)建立新儀器、設(shè)備新的檢檢測方檢測試When？

儀器搬移儀器故障后重新啟用儀器更換重要備件儀器暫停使用后重新使用儀器設(shè)備發(fā)生變化或問題后When？儀器故障儀器更換儀器暫停儀器設(shè)備發(fā)生變化或問題后When

定期:季度、半年、一年。不定期When？

定期:When？初步評(píng)價(jià)（NCCLSEP10）精密度評(píng)價(jià)（NCCLSEP5）準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)（NCCLSEP9）線性范圍（NCCLSEP6）攜帶污染（NCCLSEP7）生物參考區(qū)間（C28-A2）What？初步評(píng)價(jià)（NCCLSEP10）What？試劑盒說明書（先決條件）國際和/或國內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)性能驗(yàn)證合格標(biāo)準(zhǔn)從何而來試劑盒說明書（先決條件）性能驗(yàn)證合格標(biāo)準(zhǔn)從何而來廠家或他單位的實(shí)驗(yàn)室可以嗎？Where？Where？廠家工程師可以嗎？Who？Who？概念的準(zhǔn)備專業(yè)知識(shí)技能的準(zhǔn)備樣本準(zhǔn)備性能驗(yàn)證SOP準(zhǔn)備How？概念的準(zhǔn)備How？檢測系統(tǒng)評(píng)價(jià)與驗(yàn)證課件病人混合血清（理想的樣本基質(zhì)），最好選擇兩個(gè)或多個(gè)濃度水平。建立線性范圍：高值樣本：高于上限20-30%低值樣本：線性低限或更低。可以使用的樣本病人混合血清（理想的樣本基質(zhì)），最好選擇兩個(gè)或多個(gè)濃度水平。檢測系統(tǒng)性能評(píng)價(jià)的臨床意義及應(yīng)用范圍有哪些？檢測系統(tǒng)性能評(píng)價(jià)與驗(yàn)證的內(nèi)容通常包括哪幾項(xiàng)？正確度評(píng)價(jià)包括哪些方面內(nèi)容？如何評(píng)價(jià)檢驗(yàn)方法的精密度與線性范圍？消除干擾的常用方法有哪些？實(shí)驗(yàn)室如何確定檢驗(yàn)項(xiàng)目的參考區(qū)間？思考題檢測系統(tǒng)性能評(píng)價(jià)的臨床意義及應(yīng)用范圍有哪些？思考題方法學(xué)評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)方法學(xué)評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)

方法學(xué)評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)是客觀評(píng)估實(shí)驗(yàn)方法分析性能

的重要手段。

方法的選擇和評(píng)價(jià)是執(zhí)行新方法

過程的關(guān)鍵步驟。

方法學(xué)評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)是客觀評(píng)估實(shí)驗(yàn)方法分析性方法學(xué)評(píng)價(jià)的基本步驟

確定某方法的質(zhì)量目標(biāo),即可允許誤差

進(jìn)行適當(dāng)?shù)慕沂痉治稣`差的實(shí)驗(yàn)

重復(fù)性試驗(yàn)、回收試驗(yàn)、干擾試驗(yàn)、方法比較試驗(yàn)

收集實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,評(píng)估分析誤差

測定誤差與選定的可允許誤差比較,判斷方法的可接受性

方法學(xué)評(píng)價(jià)的基本步驟確定某方法的質(zhì)量目標(biāo),即可允許誤差性能指標(biāo)正確度精密度攜帶污染率可報(bào)告范圍標(biāo)準(zhǔn)化生物參考區(qū)間驗(yàn)證性正精攜可標(biāo)準(zhǔn)化

正確度的評(píng)價(jià)正確度：是指由大量測試結(jié)果得到的平均數(shù)與真值的一致程度，以偏倚來表示，偏倚小則說明正確度高，偏倚大則說明正確度低。*干擾試驗(yàn)*回收試驗(yàn)*方法比較試驗(yàn)正確度的評(píng)價(jià)正確度：是指由大量測試結(jié)果干擾實(shí)驗(yàn)

干擾實(shí)驗(yàn)是評(píng)價(jià)被分析樣本中其他物質(zhì)引起實(shí)驗(yàn)方法的系統(tǒng)誤差，以評(píng)價(jià)方法的準(zhǔn)確度。因?yàn)樘囟舛鹊母蓴_物質(zhì)一般引起恒定數(shù)量的誤差，而與樣本中被分析物的濃度無關(guān)。誤差大小受樣本中干擾物濃度影響。臨床檢驗(yàn)絕大部分反應(yīng)是以血清為介質(zhì)，在測定某分析物的濃度或活性時(shí)，除參與反應(yīng)的物質(zhì)外，還有許多復(fù)雜成分通過直接參與反應(yīng)、抑制反應(yīng)或激動(dòng)反應(yīng)等方式對(duì)反應(yīng)過程進(jìn)行干擾，從而使檢測結(jié)果出現(xiàn)偏差。例如葡萄糖氧化酶反應(yīng)測量葡萄糖，其中產(chǎn)物過氧化氫可能與尿酸起反應(yīng)，干擾可能是輕微的。因此，臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)影響實(shí)驗(yàn)的干擾物質(zhì)進(jìn)行評(píng)價(jià)，了解干擾物質(zhì)的種類及干擾特性，對(duì)檢測結(jié)果做出評(píng)價(jià)。干擾實(shí)驗(yàn)

干擾實(shí)驗(yàn)是評(píng)價(jià)被分析樣本中其他物質(zhì)引起實(shí)驗(yàn)方法的系干擾物分內(nèi)源性（標(biāo)本中存在的）和外源性（加入標(biāo)本中的）兩大類。常見的內(nèi)源性干擾物除血清中固有的物質(zhì)外，還有病理情況下生成的一些代謝產(chǎn)物、藥物、標(biāo)本采集不當(dāng)或飲食造成的一些干擾物如溶血、黃疸、脂血，血液中酒精、咖啡因等。常見的外源性干擾物有抗凝劑、防腐劑、穩(wěn)定劑以及采集和處理標(biāo)本過程中的一些污染物質(zhì)，如標(biāo)本容器、塞子、皮膚消毒劑、玻璃洗滌清潔劑等。由于干擾物質(zhì)的種類很多，影響因素非常復(fù)雜，到目前為止，實(shí)驗(yàn)室只能對(duì)極少數(shù)的干擾物做出評(píng)價(jià)。干擾物分內(nèi)源性（標(biāo)本中存在的）和外源性（加入標(biāo)本中的）兩大類可報(bào)告范圍評(píng)價(jià)分析測量范圍指對(duì)沒有進(jìn)行任何預(yù)處理(稀釋、濃縮等)的標(biāo)本，分析方法能夠直接測定出的待測物的范圍。也就是系統(tǒng)最終的輸出量（活性或濃度）與被分析物的活性或濃度成線性比例的范圍，它反映整個(gè)系統(tǒng)的輸出特性。常用線性試驗(yàn)來評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)方法的分析測量范圍

臨床可報(bào)告范圍是方法可采用標(biāo)本的稀釋、濃縮或其他預(yù)處理用于延長直接的分析測量范圍下的分析物值的范圍。一種比較好的實(shí)驗(yàn)方法或一個(gè)比較好的檢測系統(tǒng)應(yīng)該有一個(gè)較寬的線性范圍，但由于任何方法的線性范圍都是有限的，對(duì)一個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)目而言，其線性范圍起碼應(yīng)該覆蓋本項(xiàng)目的醫(yī)學(xué)決定水平和常見疾病的檢測值。可報(bào)告范圍評(píng)價(jià)分析測量范圍指對(duì)沒有進(jìn)行任何預(yù)處理(稀釋、濃生物參考區(qū)間的驗(yàn)證生物參考區(qū)間是指某項(xiàng)檢查結(jié)果在正常人群中的分布范圍，是解釋檢驗(yàn)結(jié)果、分析檢驗(yàn)信息的一個(gè)基本尺度和依據(jù)。臨床實(shí)驗(yàn)室無論開展什么項(xiàng)目都必須首先制定合理的生物參考區(qū)間。使臨床對(duì)健康普查者的檢驗(yàn)結(jié)果作出判斷，對(duì)病人檢驗(yàn)結(jié)果有大致的了解，發(fā)揮檢驗(yàn)報(bào)告的作用。因此獲得檢驗(yàn)項(xiàng)目可靠的參考區(qū)間是實(shí)驗(yàn)室的重要任務(wù)生物參考區(qū)間的驗(yàn)證生物參考區(qū)間是指某項(xiàng)檢查結(jié)果在正常人群中的定義：精密度是指同一標(biāo)本在一定條件下多次重復(fù)測定得到的一系列單次測定值之間的接近程度。是表示測定結(jié)果中隨機(jī)誤差大小程度的指標(biāo)評(píng)價(jià)方法-重復(fù)性試驗(yàn)精密度評(píng)價(jià)定義：精密度是指同一標(biāo)本在一定條件下多次重復(fù)測定得到的一系列精密度是指同一標(biāo)本在一定條件下多次重復(fù)測定（通常由同一材料至少分析20次）得到的一系列單次測定值之間的接近程度。精密度評(píng)價(jià)是性能評(píng)價(jià)中最重要的指標(biāo)之一，通常用標(biāo)準(zhǔn)差(S)和（或）變異系數(shù)(CV)的大小來表示，標(biāo)準(zhǔn)差和（或）變異系數(shù)愈大，說明檢測結(jié)果之間離散度愈大，重復(fù)性愈差；標(biāo)準(zhǔn)差