抑制昆蟲(chóng)取食殺蟲(chóng)效果緩慢課件

一、毒力回歸方程統(tǒng)計(jì)學(xué)基礎(chǔ)及存在總是一、毒力回歸方程統(tǒng)計(jì)學(xué)基礎(chǔ)及存在總是1死亡率，抑制率等LD50LC50KT50EC50死亡率，抑制率等2LD50統(tǒng)計(jì)分析方法濃度與死亡率的關(guān)系

濃度對(duì)數(shù)與死亡率之間的關(guān)系

濃度對(duì)數(shù)與機(jī)率值的關(guān)系LD50統(tǒng)計(jì)分析方法濃度與死亡率的關(guān)系濃度3以蜜蜂毒性試驗(yàn)為例說(shuō)明：(1)

試驗(yàn)濃度設(shè)計(jì)預(yù)備試驗(yàn)：公比5～10正式試驗(yàn)：公比2以蜜蜂毒性試驗(yàn)為例說(shuō)明：(1)試驗(yàn)濃度設(shè)計(jì)4(2)試驗(yàn)操作(2)試驗(yàn)操作5抑制昆蟲(chóng)取食殺蟲(chóng)效果緩慢課件6二、農(nóng)藥混配及其存在的問(wèn)題分析二、農(nóng)藥混配及其存在的問(wèn)題分析71、農(nóng)藥混配的目的與原因擴(kuò)大防治譜降低生產(chǎn)成本降低毒性降低農(nóng)藥殘留提高使用安全性提高藥效？1、農(nóng)藥混配的目的與原因擴(kuò)大防治譜？8深層原因：研發(fā)機(jī)構(gòu)實(shí)力：高校、企業(yè)、研究所資金投入：我國(guó)5000萬(wàn)元/年，十一五攻關(guān)計(jì)劃拜耳：1998年，2.86億元孟山都：1998年，3.91億元企業(yè)：不求品牌，快速積累資金風(fēng)險(xiǎn)：成功率低，周期長(zhǎng)8~10年，8000萬(wàn)~1.5億元成功率：70，1/12000；80，1/2000；1996，1/80000深層原因：9過(guò)期專利農(nóng)藥：

世界農(nóng)藥銷售額：71%，275億美元中國(guó)農(nóng)藥市場(chǎng)：>70%韓國(guó)：>50%臺(tái)灣：>40%阿根延、西班牙、意大利：>20%法國(guó)和英國(guó)：>15%德國(guó)：>10%美國(guó)和加拿大：<10%日本：<5%過(guò)期專利農(nóng)藥：102、我國(guó)農(nóng)藥混配現(xiàn)狀瑞德豐：2002年，93個(gè)農(nóng)藥，73個(gè)混劑惠陽(yáng)中訊：2002年，48個(gè)農(nóng)藥，32個(gè)混劑中山凱達(dá)：2002年，38個(gè)農(nóng)藥，10個(gè)原藥，11個(gè)混劑江門農(nóng)藥廠：2002年，55個(gè)農(nóng)藥，6個(gè)原藥，12個(gè)混劑2、我國(guó)農(nóng)藥混配現(xiàn)狀瑞德豐：2002年，93個(gè)農(nóng)藥，73個(gè)混11國(guó)外在我國(guó)登記農(nóng)藥(2002)：農(nóng)藥：636個(gè)原藥：83個(gè)混劑：38個(gè)殺蟲(chóng)劑混劑：11個(gè)國(guó)外在我國(guó)登記農(nóng)藥(2002)：122、混配制劑的藥液配制問(wèn)題千坂英雄(1973)等效線相加作用線六等分點(diǎn)設(shè)置5個(gè)配比：

5?

1、2?

1、1?

1、1?

2、1?

5

2、混配制劑的藥液配制問(wèn)題千坂英雄(1973)等效線相加作用13抑制昆蟲(chóng)取食殺蟲(chóng)效果緩慢課件14在活性未知的情況下：?jiǎn)蝿〢和單劑B怎么做？怎么配最快的配制藥液？在活性未知的情況下：15藥劑對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)致死毒力藥劑對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)致死毒力16魚(yú)藤酮與甲維鹽混配組合對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)共毒因子測(cè)定示范計(jì)算方法？魚(yú)藤酮與甲維鹽混配組合對(duì)黃曲條跳甲成蟲(chóng)共毒因子測(cè)定示范計(jì)算方17共毒系數(shù)示范及存在問(wèn)題分析共毒系數(shù)示范及存在問(wèn)題分析18藥劑A與藥劑B不同配比對(duì)小菜蛾3齡幼蟲(chóng)的增效作用注：a為藥劑A，b為藥劑B。藥劑A與藥劑B不同配比對(duì)小菜蛾3齡幼蟲(chóng)的增效作用注：a為藥劑19表2藥劑A和藥劑B不同配比防治小菜蛾3齡幼蟲(chóng)的成本比較注：成本數(shù)據(jù)均為同列比較；a為藥劑A，b為藥劑B；A為藥劑A成本；B為藥劑B成本。表2藥劑A和藥劑B不同配比防治小菜蛾3齡幼蟲(chóng)的成本比較注：20以致死中成本(LM50)統(tǒng)計(jì)共毒系數(shù)結(jié)果注：成本數(shù)據(jù)均為同列比較；a為藥劑A，b為藥劑B；A為藥劑A成本；B為藥劑B成本。以致死中成本(LM50)統(tǒng)計(jì)共毒系數(shù)結(jié)果注：成本數(shù)據(jù)均為同列21不同評(píng)價(jià)指標(biāo)在CTC中存在的問(wèn)題高效氯氰菊酯印楝素LC50AFC50CTC不同評(píng)價(jià)指標(biāo)在CTC中存在的問(wèn)題高效氯氰菊酯印楝素LC50A22抑制昆蟲(chóng)取食殺蟲(chóng)效果緩慢課件23抑制昆蟲(chóng)取食殺蟲(chóng)效果緩慢課件24抑制昆蟲(chóng)取食殺蟲(chóng)效果緩慢課件25抑制昆蟲(chóng)取食殺蟲(chóng)效果緩慢課件26抑制昆蟲(chóng)取食殺蟲(chóng)效果緩慢課件27抑制昆蟲(chóng)取食殺蟲(chóng)效果緩慢課件28抑制昆蟲(chóng)取食殺蟲(chóng)效果緩慢課件29不同量綱單位在CTC中存在的問(wèn)題BT的活性評(píng)價(jià)單：毒力效價(jià)如8000IU或1600IU或多少億芽孢/g不同量綱單位在CTC中存在的問(wèn)題BT的活性評(píng)價(jià)單：毒力效價(jià)30三、拒食活性測(cè)定及其存在的問(wèn)題三、拒食活性測(cè)定311拒食劑的定義與特點(diǎn)

昆蟲(chóng)取食過(guò)程：對(duì)寄主的識(shí)別和定位、首次咀嚼、吞咽和繼續(xù)取食。

1拒食劑的定義與特點(diǎn)昆蟲(chóng)取食過(guò)程：對(duì)寄主的32拒食劑：通常把能抑制昆蟲(chóng)取食過(guò)程的物質(zhì)稱為拒食劑？把通過(guò)外圍神經(jīng)系統(tǒng)改變昆蟲(chóng)的行為(直接作用于化學(xué)感受器)而引起取食過(guò)程受阻的物質(zhì)稱為拒食劑？將抑制昆蟲(chóng)取食過(guò)程中后三個(gè)步驟(首次咀嚼吞咽和繼續(xù)取食)的物質(zhì)稱為拒食劑,將影響昆蟲(chóng)取食過(guò)程第一步驟以及干擾昆蟲(chóng)在寄主上的定著、產(chǎn)卵和棲息(對(duì)寄主的識(shí)別和定位)的物質(zhì)統(tǒng)稱為忌避劑。拒食劑：通常把能抑制昆蟲(chóng)取食過(guò)程的物質(zhì)稱為拒食劑？33

拒食劑：作用于位于昆蟲(chóng)觸角、下鄂須或下唇須上的感覺(jué)器，干擾了這些感覺(jué)器將食物的特性轉(zhuǎn)化為電信號(hào)并傳入中樞神經(jīng)系統(tǒng)，而導(dǎo)致了拒食。特點(diǎn)：抑制昆蟲(chóng)取食殺蟲(chóng)效果緩慢(3~6天)低劑量下：少量多次取食高劑量下：僅取食出小刻點(diǎn)，試探性接觸葉片拒食劑：作用于位于昆蟲(chóng)觸角、下鄂須或下唇須上342拒食劑與其它藥劑的區(qū)別(1)拒食劑與胃毒劑的區(qū)別如BT、有機(jī)磷、氨基甲酸酯等中毒癥狀、取食行為、對(duì)植物的保護(hù)效果。2拒食劑與其它藥劑的區(qū)別(1)拒食劑與胃毒劑的區(qū)別如B35(2)拒食劑與忌避劑的差別產(chǎn)卵忌避劑告警信息素水蓼二醛：葉碟、蚜蟲(chóng)、除去觸角、錄像(2)拒食劑與忌避劑的差別產(chǎn)卵忌避劑36(3)拒食劑與觸殺劑和熏蒸劑的差別鬧花素-Ⅲ茶皂素混滅威擬除蟲(chóng)菊酯(3)拒食劑與觸殺劑和熏蒸劑的差別鬧花素-Ⅲ37(4)拒食劑與生長(zhǎng)發(fā)育調(diào)節(jié)劑的差別印楝素、川楝素幾丁質(zhì)合成抑制劑：定蟲(chóng)隆昆蟲(chóng)蛻皮加速劑：抑食肼、米滿(4)拒食劑與生長(zhǎng)發(fā)育調(diào)節(jié)劑的差別印楝素、川楝素383拒食劑生物活性測(cè)定方法(1)試蟲(chóng)均一性、齡期(特別如小菜蛾)饑餓處理5~10h一個(gè)培養(yǎng)皿1頭蟲(chóng)，重復(fù)10次以上斜紋夜蛾、小菜蛾、菜青蟲(chóng)、棉鈴蟲(chóng)注意操作處理時(shí)間3拒食劑生物活性測(cè)定方法(1)試蟲(chóng)均一性、齡期(特別如39抑制昆蟲(chóng)取食殺蟲(chóng)效果緩慢課件40(2)供試葉片或材料對(duì)植物材料的要求：潔凈、均一、臘質(zhì)、厚度葉碟：處理前保濕、處理后保濕、每皿幾片打孔器及其它設(shè)備(2)供試葉片或材料對(duì)植物材料的要求：潔凈、均一、臘質(zhì)、厚41(3)藥劑及試驗(yàn)方法藥液的配制，有機(jī)溶劑和水的比例藥液量、盛藥容器尖頭小鑷子浸葉時(shí)間及要求浸葉后處理方式保濕方式防逃逸方法(3)藥劑及試驗(yàn)方法藥液的配制，有機(jī)溶劑和水的比例42(4)處理后再處理方式及時(shí)換葉片和濾紙(每隔24g或48h)注意保濕(4)處理后再處理方式及時(shí)換葉片和濾紙(每隔24g或48h43(5)拒食活性結(jié)果調(diào)查坐標(biāo)紙法目測(cè)法：參照病情指數(shù)方法葉面積測(cè)定儀法數(shù)碼相機(jī)法(5)拒食活性結(jié)果調(diào)查坐標(biāo)紙法444拒食活性測(cè)定衍生可測(cè)指標(biāo)體重增長(zhǎng)率驅(qū)避率化蛹率及蛹重羽化率生長(zhǎng)發(fā)育抑制率血淋巴含量血細(xì)胞數(shù)量酶活性變化昆蟲(chóng)免疫力等注意處理時(shí)間處理劑量調(diào)查時(shí)間癥狀觀察行為觀察4拒食活性測(cè)定衍生可測(cè)指標(biāo)體重增長(zhǎng)率注意處理時(shí)間455

拒食率統(tǒng)計(jì)5拒食率統(tǒng)計(jì)46抑制昆蟲(chóng)取食殺蟲(chóng)效果緩慢課件47(1)AFC50統(tǒng)計(jì)方法——目測(cè)法、最小二乘法和機(jī)率值法LD-P-lineLC50

ED50

EC50

KT50

TLmLD50AFC505

AFC50統(tǒng)計(jì)及其存在的問(wèn)題(1)AFC50統(tǒng)計(jì)方法——目測(cè)法、最小二乘法和機(jī)率值法L48機(jī)率值分析法機(jī)率值分析法49（2）生物學(xué)基礎(chǔ)濃度與死亡率的關(guān)系

濃度對(duì)數(shù)與死亡率之間的關(guān)系

濃度對(duì)數(shù)與機(jī)率值的關(guān)系

LD-P-line來(lái)源于劑量-死亡效應(yīng)關(guān)系（2）生物學(xué)基礎(chǔ)濃度與死亡率的關(guān)系濃度對(duì)數(shù)與死亡率之間50正態(tài)分布函數(shù)死亡率機(jī)率值=離方差+5正態(tài)分布函數(shù)死亡率機(jī)率值=離方差+551(3)死亡效應(yīng)的特點(diǎn)試蟲(chóng)之間相互獨(dú)立，死亡的試蟲(chóng)不對(duì)未死亡的試蟲(chóng)產(chǎn)生影響；重復(fù)間相互平行，均代表整體；

試蟲(chóng)死亡具有不可逆性，只存在死和活兩種反應(yīng)，必須先活后死；每重復(fù)的死亡率是群體的死亡率，該群體代表整體；

劑量有累積作用，試蟲(chóng)的反應(yīng)有積累效應(yīng)。(3)死亡效應(yīng)的特點(diǎn)試蟲(chóng)之間相互獨(dú)立，死52抑制昆蟲(chóng)取食殺蟲(chóng)效果緩慢課件53(4)拒食效應(yīng)的特點(diǎn)

供試生物一直是活體試蟲(chóng)；在某濃度下，t時(shí)間的拒食率對(duì)t+

t時(shí)間的拒食率有影響；每重復(fù)1頭試蟲(chóng)，該重復(fù)不代表整體，重復(fù)間拒食率分布頻率呈正態(tài)分布；群體的拒食率是由個(gè)體來(lái)反應(yīng)；試蟲(chóng)有適應(yīng)反應(yīng)；由于饑餓，試蟲(chóng)的取食量可能增大——效應(yīng)可逆性。(4)拒食效應(yīng)的特點(diǎn)供試生物一直是活體試54劑量不積累效應(yīng)不積累？劑量不積累效應(yīng)不積累？55(5)劑量—拒食效應(yīng)逆反實(shí)例

印楝素對(duì)斜紋夜蛾3齡幼蟲(chóng)的拒食活性1)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)和劑量的提高，拒食率降低(5)劑量—拒食效應(yīng)逆反實(shí)例印楝素對(duì)斜紋夜蛾3齡幼蟲(chóng)的拒56印楝素對(duì)斜紋夜蛾3齡幼蟲(chóng)的拒食中濃度

印楝素對(duì)斜紋夜蛾3齡幼蟲(chóng)的拒食中濃度57

1%紫莖澤蘭花石油醚提取物對(duì)菜粉蝶4齡幼蟲(chóng)處理后24h、48h和72h的AFC50值分別為1909.5mg/L、2497mg/L、2234.9mg/L，在3750mg/L的濃度下，菜粉蝶幼蟲(chóng)處理后24h和48h的取食面積分別為174.4mm2(CK的為463.8mm2)和274.5mm2(CK的為659.0mm2)，而拒食率分別為62.45%和58.3%。1%紫莖澤蘭花石油醚提取物對(duì)菜粉蝶4齡幼蟲(chóng)處理后2458100mg/l的鬧羊花素-III處理菜粉蝶4齡幼蟲(chóng)，處理后24h和48h，拒食率分別為82.53%和59.55%。

唐古特瑞香乙酸乙酯提取物處理菜粉蝶5齡幼蟲(chóng),處理后24h和48h的拒食率分別為90.37%和87.17%，12號(hào)茼蒿素類似物對(duì)小菜蛾3齡幼蟲(chóng)處理后24h和48h的選擇性AFC50分別為97.15mg/l和192.74mg/l。

茶皂素對(duì)菜粉蝶3齡幼蟲(chóng)處理后12h和24h的非選擇性AFC50值分別為130.36mg/l和218.40mg/l。100mg/l的鬧羊花素-III處理菜粉蝶459

1%金腰箭葉甲醇提取物處理小菜蛾3齡幼蟲(chóng)，處理后24h和48h，拒食率分別為75.7%和73.8%。

1%金腰箭氯仿提取物處理菜粉蝶5齡幼蟲(chóng)，處理后24h和48h，取食面積分別為1.01cm2和6.10cm2，拒食率卻分別為79.2%和54.2%。1%金腰箭葉甲醇提取物處理小菜蛾3齡幼蟲(chóng)，處602)在同一處理時(shí)間下，隨著劑量的提高，拒食率降低

用30mg/l印楝素A浸漬處理甘藍(lán)葉，菜粉蝶幼蟲(chóng)的取食量近于零并且饑餓而死，而用0.2mg/l印楝素A處理，菜粉蝶幼蟲(chóng)卻有較大量的取食，雖然前者印楝素含量較高，但后者作用于蟲(chóng)體的劑量更大。

用1000mg/l和100mg/l的鬧羊花素-III處理菜粉蝶4齡幼蟲(chóng)，處理后24h，平均取食面積分別為0.06cm2和0.76cm2，后者作用于蟲(chóng)體的劑量高于前者(0.76

100>0.06

1000)，但前者的拒食率高于后者，前者的為98.62%，而后者的為82.53%。

2)在同一處理時(shí)間下，隨著劑量的提高，拒食率降低61(6)劑量—拒食效應(yīng)逆反原因分析

劑量的不累積性

觸殺劑、胃毒劑或熏蒸劑等常規(guī)農(nóng)藥作用于試蟲(chóng)體內(nèi)的某個(gè)組織和器官，如神經(jīng)系統(tǒng)，藥劑進(jìn)入蟲(chóng)體后在蟲(chóng)體內(nèi)累積，隨著劑量的提高，對(duì)靶標(biāo)的攻擊概率就越大，表現(xiàn)出的生物活性也越強(qiáng)，因此，在毒殺活性測(cè)定中，藥劑具有累積作用。(6)劑量—拒食效應(yīng)逆反原因分析劑量的不累積性62

拒食劑主要作用于試蟲(chóng)的味覺(jué)感受器，影響的是試蟲(chóng)的口感，藥劑通過(guò)口器或接觸口器時(shí)對(duì)試蟲(chóng)有拒食活性，而藥劑進(jìn)入試蟲(chóng)體內(nèi)就不再對(duì)味覺(jué)感受器有影響，藥劑在蟲(chóng)體內(nèi)積累了，但失去了起拒食作用的靶標(biāo)，也就失去了它們應(yīng)有的拒食作用。

拒食劑主要作用于試蟲(chóng)的味覺(jué)感受器，影響的是試63

如果是拒食效應(yīng)，處理后24h，試蟲(chóng)體內(nèi)積累了50

g藥劑，試蟲(chóng)的口器正在接觸2g藥劑，起拒食作用的是試蟲(chóng)正在接觸的2g藥劑，而不是總共的52g藥劑；如果是死亡效應(yīng)，起毒殺作用的是積累在蟲(chóng)體內(nèi)的50g藥劑。

如果是拒食效應(yīng)，處理后24h，試蟲(chóng)體內(nèi)積累了642)拒食效應(yīng)的不累積性

拒食劑對(duì)味覺(jué)感受器上靶標(biāo)的攻擊結(jié)合是可逆的，試蟲(chóng)在停止取食一段時(shí)間后，拒食劑脫離靶標(biāo)部位，試蟲(chóng)口器從不適感中恢復(fù)過(guò)來(lái)，又再次取食，由于前次取食的拒食劑離開(kāi)了作用靶標(biāo)，后一次取食的拒食劑造成的拒食反應(yīng)不能與前次效應(yīng)累加。這與人對(duì)甜味劑或苦味劑的口感相似，人取食黃蓮后一段時(shí)間，苦味將消失，再次取食的時(shí)候，不會(huì)覺(jué)得比上次取食更苦。

2)拒食效應(yīng)的不累積性拒食劑對(duì)味覺(jué)感受651)拒食率分布頻率不是正態(tài)分布函數(shù)

死亡率分布頻率是正態(tài)分布函數(shù)，是指增加單位劑量導(dǎo)致死亡率的增加量。死亡率是整體效應(yīng)。不同試蟲(chóng)對(duì)拒食劑的耐藥性呈正態(tài)分布，然而，拒食率測(cè)定的是活蟲(chóng)的拒食反應(yīng)，在測(cè)定中，所有試蟲(chóng)均起反應(yīng)，拒食率的增加不是由抗性試蟲(chóng)的反應(yīng)引起的，而是由被拒食劑攻擊的靶標(biāo)數(shù)增加引起的。在個(gè)體試蟲(chóng)內(nèi)，不同靶標(biāo)位點(diǎn)與拒食劑的結(jié)合能力呈正態(tài)分布。以單位劑量攻擊的靶標(biāo)位點(diǎn)數(shù)為一個(gè)靶標(biāo)單位，一個(gè)靶標(biāo)單位含有眾多靶標(biāo)位點(diǎn)，從生物統(tǒng)計(jì)學(xué)上看，各靶標(biāo)單位之間的性質(zhì)是均一的，即各靶標(biāo)單位對(duì)拒食劑的反應(yīng)是一樣的。增加單位劑量引起單位靶標(biāo)位點(diǎn)數(shù)起反應(yīng)，既然各靶標(biāo)單位與拒食劑的結(jié)合能力沒(méi)有差異，那么拒食率分布頻率不呈正態(tài)分布。(7)拒食率與劑量之間的關(guān)系討論1)拒食率分布頻率不是正態(tài)分布函數(shù)死亡率662)藥劑濃度與試蟲(chóng)反應(yīng)(或靶標(biāo)反應(yīng))線性相關(guān)性

與測(cè)定拒食活性相似，測(cè)定藥劑對(duì)試蟲(chóng)靶標(biāo)的影響時(shí)，試蟲(chóng)在調(diào)查結(jié)果前一直是活體試蟲(chóng)，因此，藥劑對(duì)試蟲(chóng)體內(nèi)靶標(biāo)(如酶、蛋白質(zhì)、血糖等)的影響與拒食劑對(duì)感受器靶標(biāo)的影響的性質(zhì)相似。2)藥劑濃度與試蟲(chóng)反應(yīng)(或靶標(biāo)反應(yīng))線性相關(guān)性67

10

g/頭、5g/頭、3g/頭和1g/頭的鬧羊花素-III處理菜粉蝶齡幼蟲(chóng)，處理后24h，試蟲(chóng)血淋巴降低率為58.77%、48.62%、43.53%和39.57%，藥劑濃度與血淋巴降低率的線性相關(guān)系數(shù)為0.