毛細(xì)管電泳法分離化妝品中氫苯酚、山梨酸和苯甲酸

毛細(xì)管電泳法分離化妝品中氫苯酚、山梨酸和苯甲酸

磺酰胺通常用于日常生活。它可以保護(hù)皮膚、美和傷口。氫醌、苯酚作為消毒防腐藥用于治療皮膚病,同時(shí)具有一定的美白作用,常添加于美白祛斑類化妝品中;山梨酸和苯甲酸作為化妝品中常用防腐劑可以有效抑制細(xì)菌的生長繁殖,但它們都有一定程度的刺激性和毒性,長期接觸能對(duì)身體造成一定的危害。由于氫醌和苯酚對(duì)人體的危害極大,我國的化妝品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)將其列為禁用物質(zhì),衛(wèi)生部《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》對(duì)各種防腐劑也限定了用量。因此有必要建立一個(gè)快速、簡便的同時(shí)測定這4種物質(zhì)的方法。目前它們的檢測方法有分光光度法、氣相色譜法,液相色譜法,凝膠電泳法等。為了完善原有的測定方法,本文采用毛細(xì)管電泳法建立了化妝品中氫醌、苯酚和防腐劑的同時(shí)測定方法,獲得了比較滿意的結(jié)果。1實(shí)驗(yàn)部分1.1超聲清洗器BeckmanP/ACETMMDQ型毛細(xì)管電泳儀(Beckman儀器公司,美國),配有二極管陣列檢測器(PDA)及32Karat色譜工作站,未涂層石英毛細(xì)管(60cm×75μm,有效長度50cm);KQ-300E型超聲波清洗器;超純水器;電子天平;離子計(jì)。氫醌,苯酚,山梨酸,苯甲酸;甲醇(色譜級(jí));硼砂、NaH2PO4和K2HPO4均為分析純;NaOH為HPCE級(jí);實(shí)驗(yàn)采用石英二次蒸餾水。1.2標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的配制精確稱取氫醌、苯酚、山梨酸、苯甲酸4種標(biāo)準(zhǔn)品各0.1g分別放入100mL容量瓶中,用5%甲醇水溶液溶解定容配制成濃度為1g/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,4℃暗處保存?；旌蠘?biāo)準(zhǔn)溶液的配制:分別精確量取適量的4種物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,用二次水定容,逐級(jí)稀釋為100,50,10,1,0.5mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。1.3毛細(xì)管的沖洗運(yùn)行緩沖液:15mmol/L硼砂溶液(pH9.2)為電泳緩沖液;壓力進(jìn)樣:3.45kPa;進(jìn)樣時(shí)間:10s;分離電壓:20kV;毛細(xì)管柱溫:25℃;檢測波長:240nm;毛細(xì)管每日使用前依次用0.1mol/LNaOH溶液沖洗7min,蒸餾水沖洗5min,運(yùn)行緩沖液沖洗15min,運(yùn)行緩沖液平衡30min;兩次運(yùn)行之間毛細(xì)管依次用0.1mol/LNaOH溶液沖洗3min,運(yùn)行緩沖液沖洗3min。為了保證重現(xiàn)性,進(jìn)樣5次后,更換同樣濃度的新鮮運(yùn)行緩沖液。1.4樣品溶液的制備準(zhǔn)確稱取試樣1.00g左右,置于10mL比色管中,用5%甲醇水溶液定容至刻度,充分振蕩,于超聲波清洗器中超聲30min,以3000r/min離心機(jī)離心20min,棄去上層混濁部分,再離心10min,幫助分層,棄去上層混濁部分,剩下清液用0.45μm濾膜過濾,作為樣品溶液。2結(jié)果與討論2.1檢測波長的確定波長的選擇對(duì)提高檢測的靈敏度非常重要,利用二極管陣列檢測器多波長檢測功能,對(duì)各分析組分進(jìn)行全波長掃描(190~300nm),最終選擇測定波長為240nm。在該波長下,氫醌的峰形較好且各待測物質(zhì)響應(yīng)值都很大。2.2ph對(duì)分離度的影響溶液pH值的大小影響石英毛細(xì)管的表面特性及柱壁與溶質(zhì)的電荷差異,從而改變其間的相互作用,影響其分離度。在離子濃度為30mmol/LKH2PO4-30mmol/LNa2HPO4緩沖液條件下,考察了pH為6.0,7.5,8.0,8.5,9.0對(duì)4組份分離度的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明,隨著緩沖溶液pH值的降低,氫醌、苯酚分離度也隨著降低,遷移時(shí)間都相應(yīng)延長,山梨酸和苯甲酸峰形發(fā)生拖尾現(xiàn)象,因此最佳的緩沖溶液的pH值在9.0以上。2.3硼砂緩沖體系比較了幾種pH范圍在9.0以上的不同緩沖體系(KH2PO4-Na2HPO4緩沖體系、硼砂緩沖體系、硼砂-甲醇混合溶液、Tris-HCl緩沖體系),結(jié)果表明Tri-HCl體系背景噪音較大,硼砂-甲醇混合體系推遲出峰時(shí)間,影響氫醌和苯酚分離度,硼砂緩沖體系峰形較好,噪音小,因此選用硼砂緩沖體系。2.4濃度對(duì)分離的影響在一定范圍內(nèi)增加緩沖液離子強(qiáng)度可以改善柱效,提高分離度。本實(shí)驗(yàn)考察了硼砂濃度為5,10,15,20和30mmol/L時(shí)對(duì)分離的影響。發(fā)現(xiàn)隨著硼砂濃度的提高,各物質(zhì)分離度明顯改善,但分離時(shí)間相應(yīng)增長,在節(jié)省分離時(shí)間的條件下,綜合分離效果,本實(shí)驗(yàn)選擇緩沖溶液的最佳濃度為15mmol/L。2.5標(biāo)準(zhǔn)光譜設(shè)計(jì)選擇各主要影響因素的優(yōu)化條件進(jìn)行實(shí)驗(yàn),可得到標(biāo)準(zhǔn)混合物的分離譜圖(圖1),從圖中看出4種組分在10min內(nèi)可達(dá)到基線分離。2.6線性范圍、線性方程及相關(guān)系數(shù)取1.2項(xiàng)下的混合標(biāo)準(zhǔn)系列進(jìn)樣分析,以組分濃度(ρ)為橫坐標(biāo),峰面積(Y)為縱坐標(biāo),進(jìn)行回歸處理,4種組分呈良好的線性關(guān)系,線性范圍、線性方程及相關(guān)系數(shù)見表1。以3倍噪音計(jì)算出氫醌、苯酚、山梨酸和苯甲酸的檢出限如表1所示。2.7方法回收率和色譜圖制備添加4種物質(zhì)濃度為1、10、50μg/g的美白化妝品樣品,按照1.4前處理方法處理后上機(jī)測定,該方法回收率見表2。將10mg/L標(biāo)準(zhǔn)溶液重復(fù)進(jìn)樣5次,計(jì)算得遷移時(shí)間和峰面積的精密度,結(jié)果