牛結(jié)核防控技術(shù)及研究進(jìn)展課件

牛結(jié)核防控技術(shù)及研究進(jìn)展牛結(jié)核防控技術(shù)及研究進(jìn)展內(nèi)容提要結(jié)核病流行現(xiàn)狀牛結(jié)核病診斷方法及研究進(jìn)展牛結(jié)核病預(yù)防與治療牛尾靜脈采血介紹記錄內(nèi)容提要結(jié)核病流行現(xiàn)狀一、結(jié)核病流行現(xiàn)狀一、結(jié)核病流行現(xiàn)狀結(jié)核病概述結(jié)核分枝桿菌引起慢性消耗性人畜共患病OIE：強(qiáng)制報(bào)告疫病結(jié)核性肉芽腫（結(jié)節(jié)）干酪樣壞死或鈣化結(jié)核病概述結(jié)核分枝桿菌引起牛結(jié)核病危害奶牛牛奶-人結(jié)核病傳染源產(chǎn)奶量下降、牛奶品質(zhì)降低肉牛-時(shí)間短飼料報(bào)酬低役牛勞動(dòng)力減弱牛結(jié)核病危害奶牛人型菌牛型菌禽型菌人犬貓牛馬羊豬雞病原-致病性結(jié)核分枝桿菌屬

人型菌&牛型菌基因水平上99.95%同源感染譜相互交叉10%結(jié)核病人感染牛型菌人型菌可感染牛

(Chen,2009)人型菌牛型菌禽型菌人犬貓牛馬羊豬雞病原-致病性結(jié)核分枝桿菌屬結(jié)核病防治的新挑戰(zhàn)？人-牛人型與牛型結(jié)核菌結(jié)核菌在人與牛之間的傳播除非撲滅牛結(jié)核病，否則人類結(jié)核病的控制是不會(huì)成功的。

——世界衛(wèi)生組織第七次專家委員會(huì)報(bào)告結(jié)核病防治的新挑戰(zhàn)？人-牛人型與牛型結(jié)核菌結(jié)核菌在人與牛之二、牛結(jié)核病診斷方法及研究進(jìn)展二、牛結(jié)核病診斷方法及研究進(jìn)展結(jié)核菌的細(xì)胞免疫與體液免疫規(guī)律病程發(fā)展免疫反應(yīng)細(xì)胞免疫體液免疫90%結(jié)核菌感染者不發(fā)病細(xì)胞免疫和體液免疫分離早期發(fā)生細(xì)胞免疫病程后期體液免疫增加結(jié)核菌的細(xì)胞免疫與體液免疫規(guī)律病程發(fā)展免疫反應(yīng)細(xì)胞免疫體液免癥狀潛伏期活動(dòng)期16-45d長(zhǎng)者達(dá)數(shù)月，甚至數(shù)年、終生無明顯癥狀不發(fā)病肺結(jié)核肺外結(jié)核癥狀潛伏期活動(dòng)期16-45d無明顯癥狀肺結(jié)核肺外結(jié)核癥狀咳嗽虛弱消瘦呼吸困難咳嗽加重鼻孔干酪樣鼻汁胸部干性或濕性啰音、偶爾摩擦音體表淋巴結(jié)腫大癥狀咳嗽虛弱消瘦呼吸困難鼻孔干酪樣鼻汁胸部干性或濕性啰音、偶牛結(jié)核防控技術(shù)及研究進(jìn)展課件結(jié)核病診斷膠體金γ-干擾素ELISAPPD皮試免疫學(xué)診斷分子生物學(xué)體液免疫細(xì)菌學(xué)診斷細(xì)胞免疫結(jié)核病診斷膠體金γ-干擾素ELISAPPD皮試免疫學(xué)診斷分子PPD皮試操作流程剃毛頸側(cè)中部上三分之一測(cè)量皮皺厚,記錄,標(biāo)記皮內(nèi)注射結(jié)核菌素PPD稀釋成2萬(wàn)單位/ml,注射2000單位/0.1ml測(cè)量皮皺厚,記錄,標(biāo)記72小時(shí)75%酒精消毒術(shù)部;左手捏起皮膚，右手持針管;將針頭與皮膚成30-45°角刺入表皮與真皮之間，緩慢注入藥液;以局部形成丘疹狀隆起為準(zhǔn)。PPD皮試操作流程剃毛頸側(cè)中部上三分之一測(cè)量皮皺厚,記錄,標(biāo)皮試工具皮試工具判定標(biāo)準(zhǔn)中國(guó)GB/T18645-2002OIE皮內(nèi)注射0.1ml(2000IU)牛結(jié)核菌素,72h后觀察皮厚,96與120h再觀察一次牛結(jié)核菌素單用,或牛與禽結(jié)核菌素聯(lián)用,不少于2000IU,72h后觀察陽(yáng)性:皮厚差大于4mm陰性:皮厚差小于2mm可疑:皮厚差2-4mm疑似牛立即在另一側(cè)用同一批PPD第二次皮試,72h后觀察陽(yáng)性:皮厚差大于4mm陰性:皮厚差小于2mm可疑牛42天后重作皮試牛與禽結(jié)核菌素聯(lián)用時(shí),牛結(jié)核菌素皮厚差大于禽結(jié)核菌素皮厚差4mm為陽(yáng)性,1-4mm為可疑,小于或等于禽結(jié)核菌素皮厚差為陰性判定標(biāo)準(zhǔn)中國(guó)GB/T18645-2002OIE皮內(nèi)注射0.1結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)的特點(diǎn)世界動(dòng)物衛(wèi)生組織OIE迄今為止唯一推薦的牛結(jié)核病的診斷方法非特異性反應(yīng)重癥牛敏感性低操作復(fù)雜煩瑣結(jié)果判斷主觀性大結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)的特點(diǎn)世界動(dòng)物衛(wèi)生組織OIE迄今為止唯一IFN-檢測(cè)方法檢測(cè)OD值并確定IFN-g水平抽取全血ESAT-6CFP-10有絲分裂原對(duì)照將全血轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)孔中,加入抗原培養(yǎng)過夜吸取上層血漿進(jìn)行夾心ELISA檢測(cè),溫育60分鐘洗滌,加底物,作用30分鐘后終止反應(yīng)TMB顯色I(xiàn)FN-gIU/mlOD450nm標(biāo)準(zhǔn)曲線步驟1全血培養(yǎng)步驟2IFN-gammaELISA陰性對(duì)照IFN-檢測(cè)方法檢測(cè)OD值并確定IFN-g水平抽取全血IFN-釋放檢測(cè)特點(diǎn)

診斷潛伏感染及活動(dòng)性結(jié)核病高特異性，高敏感性外周血，24h出結(jié)果比TST更貴，采血后在12小時(shí)內(nèi)檢測(cè)Bovi

TBIFN-gammakit目前發(fā)達(dá)國(guó)家均以該方法輔助進(jìn)行結(jié)核病根除計(jì)劃IFN-釋放檢測(cè)特點(diǎn)診斷潛伏感染及活動(dòng)性結(jié)核病牛結(jié)核病特異抗體檢測(cè)方法ELISA方法膠體金方法Rv3872CFP10ESAT6MPB70MPB83牛結(jié)核病特異抗體檢測(cè)方法ELISA方法牛結(jié)核特異抗體檢測(cè)檢測(cè)針對(duì)特異抗原（單個(gè)或多個(gè)）的抗體抗體消長(zhǎng)規(guī)律復(fù)雜！總體而言抗體水平與病程發(fā)展成正比抗體針對(duì)的抗原，抗體類型，抗體水平因個(gè)體而異，因時(shí)而異方法敏感性低多抗原聯(lián)合使用及與TST聯(lián)合使用可顯著提高檢出率牛結(jié)核特異抗體檢測(cè)檢測(cè)針對(duì)特異抗原（單個(gè)或多個(gè)）的抗體三、牛結(jié)核病預(yù)防和治療三、牛結(jié)核病預(yù)防和治療預(yù)防檢疫分群隔離培育健康牛犢消毒5%來蘇兒或3%氫氧化鈉或0.1%-0.5%過氧乙酸消毒畜舍、飼養(yǎng)用具和運(yùn)動(dòng)場(chǎng)牛奶消毒后出場(chǎng)預(yù)防檢疫治療早期氨基水楊酸鈉、異煙肼難以根除價(jià)值不大控制根除計(jì)劃—撲殺治療早期控制根除計(jì)劃—撲殺四、牛尾靜脈采血介紹四、牛尾靜脈采血介紹尾靜脈采血優(yōu)點(diǎn)方便快速一般不需要保定減小應(yīng)激尾靜脈采血優(yōu)點(diǎn)方便快速尾靜脈采血方法牛尾靜脈位于尾椎腹側(cè)正中的脈管溝內(nèi)左手抓住尾巴垂直上舉,右手用鑷子取5%碘酒棉球在尾根1/2～1/3處(離尾根處7-15cm)進(jìn)行消毒手持9號(hào)采血器,順血管斜角刺入,見有血液回流,即可外拉針芯使血液流入采血器采血完畢,局部消毒適當(dāng)按壓尾靜脈采血方法牛尾靜脈位于尾椎腹側(cè)正中的脈管溝內(nèi)采血工具采血工具血液處理抗凝血真空采血管或其它容器內(nèi)抗凝劑。采集的血液立即與抗凝劑充分混合，防止凝固肝素：1%肝素0.1毫升可抗凝5-10毫升血EDT