醫(yī)學(xué)微生物學(xué)：第12章 厭氧性細(xì)菌

厭氧性細(xì)菌本章重點(diǎn)與難點(diǎn)厭氧芽胞梭菌（1）破傷風(fēng)梭菌生物學(xué)性狀、致病物質(zhì)、所致疾病和防治原則；（2）產(chǎn)氣莢膜梭菌生物學(xué)性狀、致病物質(zhì)、所致疾病、微生物學(xué)檢查和防治原則；（3）肉毒梭菌形態(tài)、致病物質(zhì)及所致疾病。無芽胞厭氧菌致病條件、感染特征及致病種類。概

述厭氧性細(xì)菌必須在無氧環(huán)境下才能生長繁殖。根據(jù)能否形成芽胞，可分為：厭氧芽胞梭菌屬無芽胞厭氧菌第一節(jié)厭氧芽胞梭菌屬

（Clostridium）概述大多為嚴(yán)格厭氧菌，G＋。芽胞直徑比菌體粗，使菌體膨大呈梭狀，對(duì)熱、干燥和消毒劑均有強(qiáng)大的抵抗力。均有周鞭毛，無莢膜，除產(chǎn)氣莢膜梭菌等極少數(shù)菌例外。一、破傷風(fēng)梭菌破傷風(fēng)（tetanus）的病原菌；發(fā)病后機(jī)體呈強(qiáng)直性痙攣、抽搐，可因窒息或呼吸衰竭死亡。形態(tài)與染色菌體細(xì)長，有周身鞭毛、無莢膜。形成芽胞后，使細(xì)菌呈鼓槌狀，屬于G＋。培養(yǎng)特性和生化反應(yīng)嚴(yán)格厭氧；血平板上，有β溶血；不發(fā)酵糖類，不分解蛋白質(zhì)。抵抗力芽胞抵抗力很強(qiáng);75～80℃10

min仍保持活力；100℃1小時(shí)可完全被破壞；在干燥的土壤和塵埃中可存活數(shù)年。

（一）生物學(xué)性狀破傷風(fēng)梭菌的芽胞（二）致病性與免疫性致病條件該菌無侵襲力，僅在局部繁殖。傷口需形成厭氧微環(huán)境：傷口窄而深（如刺傷）、有泥土或異物污染大面積創(chuàng)傷、燒傷，壞死組織多，局部組織缺血的同時(shí)有需氧菌或兼性厭氧菌混合感染的傷口。致病物質(zhì)對(duì)氧敏感的破傷風(fēng)溶血毒素（tetanolysin）質(zhì)粒編碼的破傷風(fēng)痙攣毒素（tetanospasmin）：屬神經(jīng)毒，毒性極強(qiáng)（小鼠LD50為0.015

ng，對(duì)人致死量<1

μg）；為蛋白質(zhì)，不耐熱；可被蛋白酶破壞。為主要致病物質(zhì)。破傷風(fēng)痙攣毒素

分子量約150kDa；B鏈（重鏈）是與神經(jīng)節(jié)苷脂結(jié)合的單位；A鏈（輕鏈）具有毒性作用。與神經(jīng)系統(tǒng)的結(jié)合：毒素對(duì)腦干神經(jīng)和脊髓前角神經(jīng)細(xì)胞有高度親和力，結(jié)合非常牢固，一旦結(jié)合，抗毒素便不能中和毒素。毒素重鏈識(shí)別神經(jīng)肌肉結(jié)點(diǎn)處運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元上的受體并與之結(jié)合，促使毒素進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)形成小泡。破傷風(fēng)痙攣毒素作用機(jī)制內(nèi)在化作用含有毒素的小泡從外周神經(jīng)末稍沿神經(jīng)軸突逆行向上，到達(dá)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元胞體，進(jìn)入傳入神經(jīng)末稍，最終毒素進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)。膜的轉(zhuǎn)位通過重鏈N端的介導(dǎo)產(chǎn)生膜的轉(zhuǎn)位，使輕鏈進(jìn)入胞質(zhì)溶膠。胞質(zhì)溶膠中作用靶的改變輕鏈發(fā)揮毒性作用，阻止抑制性神經(jīng)介質(zhì)γ-氨基丁酸的釋放，使肌肉活動(dòng)的興奮與抑制失調(diào)，造成強(qiáng)直性痙攣。所致疾病破傷風(fēng)潛伏期：幾天～幾周典型的癥狀：苦笑面容；角弓反張；其他。破傷風(fēng)免疫屬外毒素免疫，主要是抗毒素發(fā)揮中和作用；一般病后不會(huì)獲得牢固免疫力；獲得有效抗毒素的途徑是人工免疫。

一般不進(jìn)行微生物學(xué)檢查；典型的癥狀和病史即可作出診斷。（三）微生物學(xué)檢查法正確處理創(chuàng)口及清創(chuàng)、擴(kuò)創(chuàng)；注射白百破三聯(lián)疫苗進(jìn)行人工主動(dòng)免疫；對(duì)可疑患者立即注射破傷風(fēng)抗毒素（tetanusantitoxin,TAT）進(jìn)行緊急預(yù)防；發(fā)病早期可足量使用抗毒素進(jìn)行特異性治療；抗生素（青霉素）的使用。（四）防治原則（一）生物學(xué)性狀形態(tài)與染色兩端幾乎平切的G＋粗大桿菌，芽胞位于次極端，呈橢圓形，不大于菌體。無鞭毛，在體內(nèi)有明顯的莢膜。二、產(chǎn)氣莢膜梭菌(C．perfringens)培養(yǎng)特性厭氧，繁殖周期為8分鐘；血瓊脂平板上，雙層溶血環(huán)；蛋黃瓊脂平板上，有Nagler反應(yīng)；代謝活躍，分解多種糖類，產(chǎn)酸產(chǎn)氣。在牛奶培養(yǎng)基中分解乳糖，大量產(chǎn)氣，出現(xiàn)所謂“洶涌發(fā)酵”（stormyfermentation）。Nagler反應(yīng)雙層溶血環(huán)洶涌發(fā)酵現(xiàn)象分型根據(jù)4種主要毒素（α、β、ε、ι）的產(chǎn)生情況，可分為5個(gè)血清型（或毒素型）；對(duì)人致病的主要為A型。致病物質(zhì)

產(chǎn)氣莢膜梭菌能產(chǎn)生10余種外毒素，有些外毒素即為胞外酶,具體詳見下頁表12-1。

（二）致病性與免疫性表12-1產(chǎn)氣莢膜梭菌主要和次要毒素及其分型α毒素以A型產(chǎn)生量最多；作用機(jī)制：分解細(xì)胞膜上磷脂和蛋白形成的復(fù)合物，造成細(xì)胞溶解，引起血管通透性增加伴大量溶血、組織壞死、肝臟、心功能受損。腸毒素（二）致病性與免疫性2.所致疾病氣性壞疽戰(zhàn)傷、工傷、車禍；氣性壞疽潛伏期短，發(fā)展迅速，病情險(xiǎn)惡；氣腫（捻發(fā)音）及組織壞死，致毒血癥、休克。由腸毒素引起，其為不耐熱的蛋白質(zhì)，100℃瞬時(shí)即被破壞；作用機(jī)制是整段肽鏈嵌入細(xì)胞膜，破壞膜離子運(yùn)輸功能,改變膜的通透性,進(jìn)而引起腹瀉。食物中毒（一）直接涂片鏡檢深部創(chuàng)口取材涂片；G＋大桿菌，大莢膜；白細(xì)胞甚少且形態(tài)不典型；伴其他雜菌。（二）分離培養(yǎng)及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)血平板，鏡檢及生化反應(yīng)；動(dòng)物實(shí)驗(yàn)；本菌引起的食物中毒在發(fā)病后1日內(nèi)，檢出大于105病菌/克食品或106病菌/克糞便，即可確診。（三）微生物學(xué)檢查法（一）預(yù)防及時(shí)處理傷口，去除和改善厭氧微環(huán)境；預(yù)防性的使用抗生素。（二）治療局部擴(kuò)創(chuàng)，清創(chuàng)；α抗毒素；抗生素；

高壓氧艙法。（四）防治原則（一）生物學(xué)性狀G＋粗短桿菌；芽胞呈橢圓形，使細(xì)胞呈湯匙狀或網(wǎng)球拍狀。厭氧；肉毒毒素不耐熱，煮沸1分鐘即可被破壞。三、肉毒梭菌（C．botulinum）1.致病性肉毒毒素（對(duì)人致死量為0.1μg）。肉毒毒素致病機(jī)制：作用于外周膽堿能神經(jīng)，抑制神經(jīng)肌肉接點(diǎn)處神經(jīng)介質(zhì)乙酰膽堿的釋放，導(dǎo)致弛緩性麻痹。

（二）致病性與免疫性肉毒毒素作用機(jī)制

（二）所致疾病食物中毒進(jìn)食污染食物（多為罐頭、肉制品、豆制品）發(fā)生食物中毒---食入毒素臨床表現(xiàn)：少見胃腸道癥狀，主要為神經(jīng)末梢麻痹（松弛型）嬰兒肉毒病以6個(gè)月以內(nèi)的小嬰兒居多癥狀與肉毒食物中毒類似，便閉、吸乳啼哭無力（三）微生物學(xué)檢查法及防治原則1.微生物學(xué)檢查方法1）標(biāo)本：糞便，剩余食物分離病原菌；2）毒素檢查。2.防治原則1）加強(qiáng)食品衛(wèi)生管理和監(jiān)督，提高防范意識(shí)；2）盡早根據(jù)癥狀作出診斷，迅速注射A、B、E三型多價(jià)抗毒素。（一）生物學(xué)性狀人類腸道中正常菌群，可因長期使用抗生素引起的偽膜性結(jié)腸炎；G＋粗大桿菌，有鞭毛，有芽胞。四、艱難梭菌（

C．difficile）（二）致病性與免疫性

產(chǎn)生A、B兩種毒素，即腸毒素和細(xì)胞毒素；A毒素為腸毒素，能使腸壁出血壞死，液體積蓄。B毒素為細(xì)胞毒素，能直接損傷腸壁細(xì)胞，造成偽膜性結(jié)腸炎(pseudomembranouscolitis)。因長期使用抗生素導(dǎo)致菌群失調(diào)后可引起內(nèi)源性感染。第二節(jié)無芽胞厭氧菌屬人體內(nèi)的正常菌群，包括革蘭陽性和革蘭陰性的球菌和桿菌；在某些特定狀態(tài)下，這些厭氧菌作為條件致病菌可導(dǎo)致內(nèi)源性感染。概述表12-2.與人類疾病相關(guān)的主要無芽胞厭氧菌革蘭陰性厭氧桿菌一、生物學(xué)性狀脆弱類桿菌（B.fragilis）：臨床上最常見的無芽胞厭氧菌分離株；韋榮菌屬最重要，咽喉部主要厭氧菌，常為混合感染菌之一。脆弱類桿菌（革蘭染色；×1000）革蘭陽性厭氧球菌消化鏈球菌屬：在臨床厭氧菌分離株中僅次于脆弱類桿菌，主要寄居于陰道；丙酸桿菌：能發(fā)酵糖類產(chǎn)生丙酸；痤瘡丙酸桿菌（P.acnes）；雙歧桿菌屬：正常腸道菌群，在大腸中起重要的調(diào)節(jié)作用。二、致病性與免疫性（一）致病條件寄居部位改變；宿主免疫力下降；菌群失調(diào)；厭氧微環(huán)境。（二）感染特征

內(nèi)源性感染；呈慢性大多為化膿性感染；分泌物或膿液粘稠，有惡臭，使用氨基糖苷類抗生素長期無效；分泌物直接涂片可見細(xì)菌，但普通培養(yǎng)法無細(xì)菌生長。（三）所致疾病敗血癥中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染腦膿腫口腔與牙齦感染呼吸道感染腹部和會(huì)陰部感染女性生殖道感染標(biāo)本采取采取后立刻放入?yún)捬鯓?biāo)本瓶中，迅速送檢。直接涂片鏡檢分離培養(yǎng)與鑒定三、微生物學(xué)檢查法厭氧罐培養(yǎng)增強(qiáng)免疫力，減少誘發(fā)因素。

合理使用抗生素，常用甲硝唑、替硝唑或其他廣譜抗生素。四、防治原則復(fù)習(xí)思考題簡(jiǎn)述無芽胞厭氧菌的致病條件。簡(jiǎn)述無芽胞厭氧菌感染的特征。簡(jiǎn)述無芽胞厭氧菌與有芽胞厭氧菌致病性的主要區(qū)別。試比較破傷風(fēng)梭菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌的致病條件簡(jiǎn)述破傷風(fēng)和氣性壞疽的防治原則。中英文關(guān)鍵詞破傷風(fēng)-tetanus破傷風(fēng)痙攣毒素-tetanospasmin氣性壞疽-gasgangrene肉毒中毒-botulism食物中毒-foodpoisoning胃腸炎-gastroente