組織學(xué)與胚胎學(xué)-緒論

緒論組織學(xué)與胚胎學(xué)histologyandembryology一、組織學(xué)與胚胎學(xué)的研究?jī)?nèi)容組織學(xué)（histology）與胚胎學(xué)（Embryology）是醫(yī)學(xué)課程中一門基礎(chǔ)學(xué)科。組織學(xué)概念：著重于研究人體的微細(xì)結(jié)構(gòu)及其相關(guān)功能的關(guān)系。胚胎學(xué)概念：著重于研究個(gè)體發(fā)生與生長(zhǎng)發(fā)育及其發(fā)育機(jī)制的律。組織學(xué)

(histology)定義：組織學(xué)是借助于顯微鏡觀察人體微細(xì)結(jié)構(gòu)及其相關(guān)功能的科學(xué)。研究?jī)?nèi)容：人體的組織是由細(xì)胞和細(xì)胞間質(zhì)發(fā)育分化形成的，而器官系統(tǒng)則又是由幾種不同組織發(fā)育分化而成。因此組織學(xué)的研究?jī)?nèi)容包括：細(xì)胞、組織和器官系統(tǒng)三部分。細(xì)胞(cell)定義：是人體結(jié)構(gòu)和功能的基本單位，是一切生物體新陳代謝、生長(zhǎng)發(fā)育、繁殖分化的形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)。形態(tài)各異、大小不等：人體中有許多形態(tài)各異、大小不同的細(xì)胞，參與機(jī)體的各種機(jī)能活動(dòng)。相互調(diào)節(jié)、相互協(xié)同：各種細(xì)胞在機(jī)體內(nèi)相互調(diào)節(jié)、相互協(xié)同，以維持整體的生命活動(dòng)。組織(tissue)形成：是在胚胎發(fā)育時(shí)期形成的。組成：由一些形態(tài)相似、功能相近的細(xì)胞和細(xì)胞間質(zhì)所組成。分類：由于細(xì)胞的特性不同，機(jī)體內(nèi)的組織也相應(yīng)分為：上皮組織、結(jié)締組織、肌組織、神經(jīng)組織。器官和系統(tǒng)

(organandsystem)形成：是在胚胎發(fā)育的早期由幾種不同的組織發(fā)育、分化和互相結(jié)合所形成。組織特征：成體的各器官、系統(tǒng)分別具有其微細(xì)結(jié)構(gòu)的組織特征，執(zhí)行著特定的功能。組織學(xué)研究?jī)?nèi)容：細(xì)胞(cell)細(xì)胞間質(zhì)(intercellularsubstance)組織(tissue)上皮組織結(jié)締組織肌肉組織神經(jīng)組織器官和系統(tǒng)人體胚胎學(xué)研究?jī)?nèi)容：受精卵胚胎兒（前8周）（9~38周）胚胎早期發(fā)生胚胎學(xué)

(embryology)在醫(yī)學(xué)中稱人體胚胎學(xué)(humanembryology)定義：是研究人體發(fā)生、生長(zhǎng)發(fā)育及其發(fā)育機(jī)制的科學(xué)。研究?jī)?nèi)容：生殖細(xì)胞形成、受精、卵裂、植入、三胚層形成與分化、胎膜與胎盤、先天性畸形等。二、組織學(xué)與胚胎學(xué)在醫(yī)學(xué)中的地位是醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)課程

與解剖學(xué)、病理學(xué)、生理學(xué)、生物化學(xué)、免疫學(xué)有密切的聯(lián)系。

為婦產(chǎn)科學(xué)、男性學(xué)、生殖工程學(xué)、兒科學(xué)等臨床學(xué)科提供了必要的基礎(chǔ)。

近代生物學(xué)和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的迅速發(fā)展，各學(xué)科的內(nèi)容互相滲透、互相推動(dòng)、緊密相關(guān)。三、組織學(xué)與胚胎學(xué)的研究方法組織學(xué)與胚胎學(xué)的研究主要涉及到兩個(gè)方面：即顯微鏡和標(biāo)本。顯微鏡包括：光學(xué)顯微鏡(lightmicroscopy,LM)：電子顯微鏡(electronmicroscopy,EM)：光學(xué)顯微鏡：

分辨率為0.2μm，放大倍數(shù)約為1000倍；電子顯微鏡：分辨率為0.2nm，比光鏡高1000倍，電鏡觀察的結(jié)構(gòu)，通常稱超微結(jié)構(gòu)。計(jì)量單位：毫米（mm）、微米（μm）和納米（nm）。(一)一般光學(xué)顯微鏡技術(shù)

光學(xué)顯微鏡觀察組織標(biāo)本(切片)是最常用的組織學(xué)研究方法。1、標(biāo)本的制作：

組織學(xué)的標(biāo)本制作比較復(fù)雜，基本有以下步驟：取材、固定、脫水、包埋、切片、染色等。取材、固定：取材迅速，并及時(shí)用固定液(fixative)固定(fixation)。常用固定液為甲醛、乙醇等，它們可以使蛋白質(zhì)迅速凝固，防止其分解和變性。脫水、包埋、切片：材料需經(jīng)乙醇或丙酮脫水；包埋在石蠟或火棉膠內(nèi)；切片厚約5-10μm。染色：染色后可在顯微鏡下觀察。2、蘇木精、伊紅染色常規(guī)染色－蘇木精(hematoxylin)、伊紅(eosin)染色（簡(jiǎn)稱H.E染色）技術(shù)：蘇木精：是藍(lán)色的堿性染料，可將細(xì)胞核和細(xì)胞內(nèi)的某些物質(zhì)染成藍(lán)紫色；伊紅：是紅色的酸性染料，可將細(xì)胞質(zhì)染成粉紅色。對(duì)堿性染料親和力強(qiáng)的稱為嗜堿性(basophilia)對(duì)酸性染料親和力強(qiáng)的稱為嗜酸性(acidophilia)對(duì)兩種染料親和力都不強(qiáng)稱中性(neutrophilia)一般光學(xué)顯微鏡（lightmicroscope,LM）技術(shù)HE染色：蘇木精（Hematoxylin）伊紅（Eosin）染色堿性染料將嗜堿性物質(zhì)（本身酸性）染成藍(lán)色酸性染料將嗜酸性物質(zhì)（本身堿性）染成紅色細(xì)胞核中的DNA、RNA,細(xì)胞質(zhì)中的RNA細(xì)胞質(zhì)、膜性結(jié)構(gòu)（線粒體、溶酶體、滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)）SamplingfixedembeddedstainingH.E染色標(biāo)本甲苯胺藍(lán)（toluidine）染色技術(shù)甲苯胺藍(lán)：是藍(lán)色的堿性染料。將細(xì)胞內(nèi)、外的某些物質(zhì)染成紫紅色。這種染色現(xiàn)象稱異染性(metachromasia)。銀染標(biāo)本3、硝酸銀、氯化金染色技術(shù)硝酸銀、氯化金顆?？筛街诩?xì)胞結(jié)構(gòu)的表面而呈棕黑色或黃色4、冷凍切片技術(shù)

(frozensectionmethod)為避免細(xì)胞、組織內(nèi)的某些物質(zhì)不被固定液所破壞，又要使組織變硬，便于將其切成薄片，同時(shí)又要快速得到切片，可將獲取的新鮮組織立即投入液氮(-196℃)內(nèi)快速凍結(jié)，然后用恒冷箱切片機(jī)(cryostat)制成冷凍切片(frozensection)

。這種方法制片迅速，細(xì)胞內(nèi)酶活性保存較好，常用于酶組織化學(xué)染色。冷凍切片機(jī)除切片外，還有其他處理組織的方法：鋪片(Wholemount)用于很薄的組織，如腸系膜磨片(Groundsection)用于很堅(jiān)硬的組織，如骨和牙涂片(Smear)用于液態(tài)組織，如血液，精液和唾液其他技術(shù)（二）電子顯微鏡技術(shù)透射電子顯微鏡掃描電子顯微鏡1、透射電子顯微鏡

(transmissionelectronmicroscope)

透射電鏡觀察的組織須用戍二醛或鋨酸固定，樹脂包埋，切厚50～80nm的超薄切片，再經(jīng)鉛鹽等重金屬鹽染色后鏡下觀察。電鏡下所見結(jié)構(gòu)稱超微結(jié)構(gòu)(ultrastructure)，超微結(jié)構(gòu)被金屬所染部位在熒光屏上顯得暗，圖象較黑，稱為電子密度高；反之則稱為電子密度低。2、掃描電子顯微鏡技術(shù)

（scanningelectronmicroscope）

掃描電子顯微鏡技術(shù)要觀察的組織不需制成切片。固定后的標(biāo)本，在其表面噴鍍金，在熒光屏上即可顯示細(xì)胞或組織表面的立體結(jié)構(gòu)，如細(xì)胞表面的突起、微絨毛、纖毛等。（三）一般組織化學(xué)組織化學(xué)（histochemistry)方法：

是利用化學(xué)試劑與組織細(xì)胞內(nèi)的某些物質(zhì)呈現(xiàn)化學(xué)反應(yīng)，在局部形成有色沉淀物，通過(guò)顯微鏡觀察而對(duì)組織細(xì)胞內(nèi)的化學(xué)成分進(jìn)行定位、定性和定量的研究。糖原，例如：過(guò)碘酸希夫反應(yīng)，簡(jiǎn)稱為

PAS反應(yīng)(periodacidSchiffreaction)。該方法是顯示細(xì)胞內(nèi)糖原或多糖的一種方法。肝臟的PAS染色（四）酶組織化學(xué)方法

酶組織化學(xué)方法也可顯示酶的活性，各種不同的酶有不同顯示方法。一般來(lái)說(shuō)，是將組織切片在某種酶底物中溫育，而后檢出反應(yīng)產(chǎn)物，即可知酶的存在。

（五）免疫細(xì)胞化學(xué)(Immunocytochemistry)染色法a.

待測(cè)結(jié)構(gòu)或化學(xué)物質(zhì)被看作抗原(Antigen)，通過(guò)非常敏感和專一的免疫反應(yīng)使抗原和被標(biāo)記的抗體(Antibody)結(jié)合，然后顯示標(biāo)記物，在原位產(chǎn)生不溶有色的反應(yīng)產(chǎn)物，最后用顯微鏡觀察。b.

2種基本染色法:直接法:第一抗體被標(biāo)記。間接法:第一抗體也被看作抗原，而第二抗體被標(biāo)記。因?yàn)樾盘?hào)被放大，因此更加敏感。免疫組化染色免疫熒光(六)放射自顯影(Autoradiography)

給細(xì)胞所要代謝的物質(zhì)分子上標(biāo)記放射性物質(zhì)如I125等，間隔照相，從而追蹤該物質(zhì)代謝途徑。(七)細(xì)胞或組織培養(yǎng)技術(shù)

(cellortissueculture)將人體或動(dòng)物的活細(xì)胞、活組織在體外培養(yǎng)，稱細(xì)胞或組織培養(yǎng)(cellortissueculture)

。細(xì)胞在體外生存，必需具備適宜的條件，包括營(yíng)養(yǎng)、O2和CO2比例、滲透壓、pH值、溫度和濕度。體外培養(yǎng)細(xì)胞，可人為的給以各種不同條件，研究它們對(duì)細(xì)胞的分裂、分化、結(jié)構(gòu)和功能等的影響，并可用顯微電影等記錄細(xì)胞的動(dòng)態(tài)變化。細(xì)胞培養(yǎng)四、組織學(xué)與胚胎學(xué)學(xué)習(xí)方法

組織學(xué)與胚胎學(xué)是一門以形態(tài)結(jié)構(gòu)為主的學(xué)科，許多結(jié)構(gòu)不要死記硬背，而是在掌握學(xué)習(xí)方法的基礎(chǔ)上通過(guò)觀察、分析、比較，然后再記憶。這種聯(lián)系既不會(huì)感到枯燥而又能認(rèn)識(shí)深刻。形態(tài)與機(jī)能的結(jié)合形態(tài)結(jié)構(gòu)總是與一定的機(jī)能密切相關(guān)。神經(jīng)細(xì)胞有細(xì)長(zhǎng)突起的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，以傳遞神經(jīng)沖動(dòng)；紅細(xì)胞含豐富的血紅蛋白，則具有結(jié)合和攜帶氧的功能；腺細(xì)胞具有豐富的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體，能合成分泌物。總之，結(jié)構(gòu)與功能有著密切的聯(lián)系。斷面和立體的關(guān)系在顯微鏡下看到的組織切片，所見到的形態(tài)都是結(jié)構(gòu)斷面的形態(tài)。一個(gè)細(xì)胞由于所切的部位不同，在有的斷面可見細(xì)胞核，在有的斷面沒(méi)有細(xì)胞核。又如身體內(nèi)許多管狀的器