HR800共焦拉曼儀操作指南

HR-800共焦拉曼儀操作指南儀器構(gòu)造Laser：HeNe20mW，波長632.817nm；Externallaser：Ar+，波長514.532nmNotchfilter：作用濾去激發(fā)線，stocks邊為120cm-1Confocalhole：0-1000μmMicroscope：10×，50×，100×，50×（longworkdistance）,液體鏡頭LaserentranceSpectroghraph：800mm焦距光譜儀，兩個(gè)可轉(zhuǎn)動(dòng)的光柵（600l/m和1800l/mm），正弦臂CCDdetector：空氣冷卻（26毫米1024×256像素）Computer：Labspec5軟件Separatedelectronicbox：激光電源，共焦孔、狹縫、光柵、擋板和掃描的驅(qū)動(dòng)電源MotorizedXYmicroscopestage：辨別率0.1μm，反復(fù)性1μm，范圍(100X100)mmHR-800共焦拉曼儀圖示HR-800共焦拉曼儀圖示操作規(guī)程開機(jī)圖1設(shè)置CCD溫度穩(wěn)壓電源→接線板電源（3個(gè)）→機(jī)箱電源→XY控制平臺(tái)電源→電腦→啟動(dòng)Labspec5程序→設(shè)置CCD溫度為-70°C(點(diǎn)擊菜單欄“Acquisition”選中“Detector”，見圖1)等待實(shí)際溫度到達(dá)-70°圖1設(shè)置CCD溫度注：①激光和白光在正式測樣時(shí)打開。②514.5nm啟動(dòng)需先打開散熱風(fēng)扇，再開514.5nm激光的開關(guān)、鑰匙和撥鈕。③白光在不開camera時(shí)調(diào)成最暗。上樣固體樣品：首先保證樣品表面不能有液體。如實(shí)在要測濕的樣品，可以將鏡頭用保鮮膜包好，或者用石英片將樣品蓋好。樣品放置要平穩(wěn)，用camera檢查一下樣品與否抖動(dòng)。檢查放置樣品的襯底大小與否合適，移動(dòng)操作桿看平臺(tái)移動(dòng)與否受阻。假如是透明樣品，要保證襯底沒有強(qiáng)拉曼信號(hào)。液體樣品：選擇與其他顯微鏡不相鄰的位置安裝液體鏡頭，樣品池為1cm石英比色皿，樣品量需≥1mL。校正圖2設(shè)置光柵位置校正零點(diǎn)：圖2設(shè)置光柵位置①“Spectrometer”點(diǎn)左箭頭使光柵位置回到零點(diǎn)。（見圖2）②將平臺(tái)上方的stem上提順時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)固定。③點(diǎn)擊工具欄中實(shí)時(shí)測量得到零點(diǎn)峰，按“Stop”停止采譜。④若零值較小，則將菜單欄中“Setup”,“InstrumentCalibration”中“Zero”值改小（改最終兩位）。反之則改大。校正硅峰：①“Spectrometer”在空白處輸入520.7cm-1(硅的一級(jí)峰原則位置)。（見圖2）②將硅片置于顯微鏡正下方，將stem稍稍提起逆時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)后放下。白光打開后，點(diǎn)擊得到動(dòng)態(tài)camera圖像。轉(zhuǎn)動(dòng)操縱桿使得camera圖像最清晰即到達(dá)最佳焦距，此時(shí)調(diào)暗白光打開激光，camera圖像展現(xiàn)出最小光斑。③點(diǎn)擊工具欄中實(shí)時(shí)測量得到硅峰。④若硅峰有偏差，按校零措施校正。測樣圖3光譜范圍設(shè)置鏡頭的選擇根據(jù)樣品來定，樣品若比較平整信號(hào)又較弱可以選用50×或100×，若樣品信號(hào)較強(qiáng)可選用10×，若樣品既不平整信號(hào)又很弱可以采用50×長焦鏡頭。圖3光譜范圍設(shè)置上樣和聚焦措施同校正時(shí)同樣。光譜范圍設(shè)置：在“Acquisition”中“MultiWindow”設(shè)置。（見圖3）Time(%)為相對(duì)曝光時(shí)間，根據(jù)各個(gè)光譜段信號(hào)強(qiáng)度而設(shè)定。Minoverlap(pix)設(shè)定兩段相鄰光譜段重疊的像素，一般50即可。SubPixel一般設(shè)置為>1。Usemultiwindow為多段采譜模式。Autooverlap為自動(dòng)重疊。Mergedata將不一樣光譜段的數(shù)據(jù)合并。Adjustintensity自動(dòng)調(diào)整兩段相鄰光譜段的強(qiáng)度。注：如無特殊需要一般只采用一段光譜。其他參數(shù)設(shè)置：激光波長、激光功率、共焦孔、狹縫、文獻(xiàn)命名、實(shí)時(shí)測量曝光時(shí)間、正式測量曝光時(shí)間和掃描次數(shù)均在控制面板中進(jìn)行設(shè)置。（見圖4）Laser：有632.8和514.5nm兩個(gè)波長，更換激光時(shí)打開光譜儀頂蓋更換激光通道，更換不一樣激光配置的濾鏡（2個(gè)），光柵回零，重新校零和硅片。Filter：分6檔，根據(jù)樣品的信號(hào)強(qiáng)度以及光解或碳化程度而選擇。[...]=noattenuation(P0)[D0.3]=P0/2[D0.6]=P0/4[D1]=P0/10[D2]=P0/100[D3]=P0/1000[D4]=P0/10000Hole和Slit一般分別放在400和100，調(diào)大后樣品信號(hào)強(qiáng)度增強(qiáng)但辨別率減少。Spectro實(shí)時(shí)測量時(shí)可以設(shè)定為樣品也許出現(xiàn)最強(qiáng)峰的位置，正式測量則不需設(shè)置。光柵可選1800或600，選用1800時(shí)辨別率較高但強(qiáng)度較弱。切換光柵后Spectro要回零，并需重新校零和硅片。鏡頭有10×，50×，100×，50×（longworkdistance）,液體鏡頭可選。文獻(xiàn)命名可根據(jù)需要在開始測樣之前設(shè)定。實(shí)時(shí)測量曝光時(shí)間一般為1s,正式測量曝光時(shí)間由樣品實(shí)時(shí)測量強(qiáng)度而定，但必須保證實(shí)時(shí)測量強(qiáng)度×曝光時(shí)間<65000。掃描次數(shù)一般設(shè)為1.圖4其他參數(shù)設(shè)置圖4其他參數(shù)設(shè)置圖5數(shù)據(jù)管理工具圖5數(shù)據(jù)管理工具點(diǎn)擊工具欄中可進(jìn)行采譜。數(shù)據(jù)處理圖6圖6數(shù)據(jù)顯示和信息數(shù)據(jù)顯示和信息：從左到右依次為使窗口尺寸適合于目前圖譜、強(qiáng)度上適合于目前圖譜、標(biāo)出目前窗口的中心位置、數(shù)據(jù)尺寸（顯示并可修改目前圖譜在XY兩個(gè)方向上的極限位置）以及圖譜參數(shù)。（見圖6）圖7基本數(shù)據(jù)處理基本數(shù)據(jù)處理：從左到右依次為基線校正、數(shù)據(jù)校正、數(shù)據(jù)平滑、傅立葉轉(zhuǎn)換、數(shù)據(jù)數(shù)學(xué)處理、峰的操作和外形描述。（見圖7）圖7基本數(shù)據(jù)處理67圖8基線校正次序圖基線校正：選擇類型Lines或者Polynomial→假如設(shè)為后者選擇Degree；在左邊工具欄選擇鼠標(biāo)變?yōu)槭执藭r(shí)在活動(dòng)窗口可以添加或清除點(diǎn)，Attach選Yes表達(dá)要緊貼譜線添加，選No表達(dá)可以在任意位置添加→Style可選擇基線的樣式→點(diǎn)Sub扣除基線→Clear清除基線→Close完畢。67圖8基線校正次序圖左邊工具欄簡介（見圖9）圖9左邊工具欄活動(dòng)指針：查看窗口內(nèi)任意位置坐標(biāo)圖9左邊工具欄積分：計(jì)算譜峰積分面積添加和清除基線對(duì)目前譜峰乘以一種常數(shù)對(duì)目前譜峰加上一種常數(shù)清除鬼峰修正譜峰的形狀標(biāo)定某個(gè)峰的位置，調(diào)整峰的形狀，清除標(biāo)定水平或垂直移動(dòng)整個(gè)圖譜放大譜峰強(qiáng)度上適合目前圖譜變化坐標(biāo)軸在活動(dòng)窗口中的位置關(guān)機(jī)關(guān)白光、激光→設(shè)置CCD溫度為室溫，等待實(shí)際溫度到達(dá)室溫→關(guān)閉Labspec5程序→電腦→XY控制平臺(tái)電源→機(jī)箱電源→接線板電源（3個(gè)）→穩(wěn)壓電源注意事項(xiàng)更換鏡頭和濾鏡前要洗凈并擦干雙手，手指不能接觸鏡頭透鏡部分和濾光片，更換時(shí)需輕拿輕放。固態(tài)樣品不能有溶劑殘留，若樣品自身含液體需用石英片覆蓋或?qū)㈢R頭包膜。使用操縱桿調(diào)整焦距時(shí)幅度要小動(dòng)作要輕，防止鏡頭