呼吸道病毒微生物學(xué)教材課件

Department

of

Microbiology,

HMUMedical

Microbiology第三篇

醫(yī)學(xué)相關(guān)病毒第32章呼吸道病毒微生物學(xué)教研室張鳳民教學(xué)大綱掌握內(nèi)容常見(jiàn)呼吸道感染的病毒及引起疾病；流感病毒主要生物學(xué)性狀，包括形態(tài)結(jié)構(gòu)、分型與變異；微生物學(xué)檢查法。麻疹病毒形態(tài)結(jié)構(gòu)、培養(yǎng)特性、致病性及其與SSPE的關(guān)系熟悉內(nèi)容流感病毒的致病性與免疫性；流感的防治原則；腮腺炎病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒的致病性；風(fēng)疹病毒致病特點(diǎn)了解內(nèi)容鼻病毒、冠狀病毒、呼腸病毒的致病性問(wèn)題

流感病毒有哪些型別？分型和分亞型的依據(jù)是什么？甲型流感病毒為什么易引起世界性大流性？副粘病毒有哪些？引起什么疾病？麻疹病毒引起什么疾病？如何預(yù)防？簡(jiǎn)述風(fēng)疹病毒與優(yōu)生優(yōu)育的關(guān)系普通冠狀病毒與SARS冠狀病毒有何異同？腺病毒的生物學(xué)性狀與致病性呼吸道病毒種類正粘病毒流感病毒A,B,C型副粘病毒副流感病毒腮腺炎病毒麻疹病毒呼吸道合胞病毒風(fēng)疹病毒腺病毒鼻病毒冠狀病毒因?yàn)榘び醒兀℉A），能凝聚多種動(dòng)物紅細(xì)胞（如雞紅細(xì)胞），對(duì)流感病毒的主要中和抗原可在雞胚尿囊腔中增殖，是流感病毒的分離和增殖培養(yǎng)的主要方法在猴腎細(xì)胞中增殖，受染細(xì)胞表現(xiàn)為血凝現(xiàn)象被胰蛋白酶消化成二個(gè)多肽：HA1、HA2HA1是與紅細(xì)胞、宿主細(xì)胞結(jié)合的部位

HA2具有膜融合作用，使HA與病毒包膜結(jié)合被胰蛋白酶消化成二個(gè)多肽：HA1、HA2HA的主要功能凝聚紅細(xì)胞吸附宿主細(xì)胞主要中和抗原HA抗原結(jié)構(gòu)易發(fā)生變異血凝素（Hemagglutinin,HA）參與病毒釋放：NA可水解受染細(xì)胞表面的糖蛋白末端的N-乙酰神經(jīng)氨酸，使病毒自細(xì)胞膜出芽釋放促進(jìn)病毒擴(kuò)散：破壞細(xì)胞表面的粘液，有利于病毒擴(kuò)散能水解紅細(xì)胞表面的神經(jīng)氨分子。是弱中和抗原功能參與病毒釋放促進(jìn)病毒擴(kuò)散神經(jīng)氨酸酶（Neuraminidase,NA）抗抗原原漂漂移移（（Antigen

drift）：病毒抗原部分改變，原因是血凝素蛋白氨基酸序列由于基因突變而發(fā)生小改變，分子基本不變抗抗原原轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)變變（（Antigen

shift）：血凝素分子完全改變，因朱是基因發(fā)生重組。是導(dǎo)致流感暴發(fā)流行的原因抗原變異機(jī)制抗原漂移（Antigen

drift）抗原轉(zhuǎn)變（Antigen

shift）Influenza

pandemicsassociated

with

antigenic

shift致病性有季節(jié)性、地區(qū)性甲型易變異，曾多次引起世界性大流行乙型常造成局部爆發(fā)流行丙型只侵犯嬰幼兒，很少流行Influenza

pathogenesisTransmissionAerosolesInfectionEpithelial

cellsReplication

cycle4

–6

hCell

deathNecrosis,apoptosisIncubation18

–

72

hPBMCNon-productive傳播途徑：飛沫傳播傳染源：患者、隱性感染者、被感染動(dòng)物機(jī)理在呼吸道柱狀上皮增殖，不引起病毒血癥NA可降低細(xì)胞表面粘度，使細(xì)胞表面受體暴露，便于病毒侵襲致病特點(diǎn)是發(fā)病率高，死亡率低，死亡通常是合并細(xì)菌感染傳播途徑：飛沫傳播傳染源：患者、隱性感染者、被感染動(dòng)物機(jī)理在呼吸道柱狀上皮增殖，不引起病毒血癥NA可降低細(xì)胞表面粘度，使細(xì)胞表面受體暴露，便于病毒侵襲致病特點(diǎn)是發(fā)病率高，死亡率低。Influenza

natural

course并發(fā)癥：多見(jiàn)于嬰幼兒、老人、慢性病患者（心血管、慢性氣管炎、糖尿病）原發(fā)性病毒性肺炎繼發(fā)細(xì)胞性肺炎：肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、嗜血流感桿菌等Seye’s綜合癥：兒童的流感并發(fā)癥，常發(fā)生于2-16歲，主要表現(xiàn)為急性腦病和肝脂肪變性。死亡率高達(dá)10%—40%。發(fā)病機(jī)理不清，可能與服用水楊酸類藥物有關(guān)，故流感期間不宜服用阿斯匹林等水楊酸類藥物降溫并發(fā)癥：多見(jiàn)于嬰幼兒、老人、慢性病患者原發(fā)性病毒性肺炎繼發(fā)細(xì)胞性肺炎Seye’s綜合癥：Primary

influenza

pneumonia微生物學(xué)診斷血清學(xué)診斷補(bǔ)體結(jié)合實(shí)驗(yàn)查病毒可溶性抗原病毒分離標(biāo)本：口腔含漱液培養(yǎng)：猴腎細(xì)胞和雞胚尿囊腔結(jié)果：紅細(xì)胞凝集、血凝抑制試驗(yàn)分型快速診斷間接免疫熒光檢查鼻咽分泌物Influenza

-

diagnosisSpecimens:

throat

swabs,

NPS,

nasal

aspirates,

sputumCulture:

conventional,

rapidDirect

detection

(EIA,

IF,

PCR)Serologic

response:

4-fold

or

greater rise

in

IgG

titers預(yù)防滅活病毒疫苗，定期注射病毒亞單位疫苗：血凝素對(duì)癥治療，防止細(xì)菌性并發(fā)癥Treatment:

Amantadinebind

M2

protein,

inhibit

uncoatingselective

–

influenza

Areduce

symptom

scoreDisadvantages

:side

effects

–

CNSdrug-resistance

zanamivir,oseltamivir■Sialicacidanalogues,Inhibitinfluenza

A,B

Highlyeffective

ifstarted

early,effective

inprophylaxisNA

Inhibitor副粘病毒（Paramyxoviruses）副流感病毒腮腺炎病毒麻疹病毒呼吸道合胞病毒副粘病毒共同性狀150-300nm，比正粘病毒要大-ssRNA核酸不分節(jié)段，沒(méi)有感染性在猴腎細(xì)胞增殖，并有血凝現(xiàn)象病毒表面有兩種蛋白突起血凝素（HA）或HN蛋白溶血素（HL）或F蛋白（融合蛋白）麻疹病毒（Measles

Virus）兒童最常見(jiàn)的急性發(fā)熱性呼吸道傳染病通常癥狀輕微，預(yù)后良好但并發(fā)癥常見(jiàn)60年代使用疫苗后發(fā)病顯著下降仍是發(fā)展中國(guó)家兒童死亡的主要原因120-250nm，-ssRNA，不分節(jié)段包膜有HA和HL兩種糖蛋白突起HA只凝集猴RBC，是與細(xì)胞吸附的蛋白HL使細(xì)胞發(fā)生融合，形成多核巨細(xì)胞病毒抗原穩(wěn)定，只有一個(gè)血清型唯一自然儲(chǔ)存宿主是人是WHO計(jì)劃消滅的病毒病毒抵抗力弱，一般消毒即可滅活傳染源急性期患者。出疹前6天和出疹后3天都有傳染性。傳播途徑飛沫傳播，也可通過(guò)玩具傳播臨床表現(xiàn)少見(jiàn)但嚴(yán)重。呈慢性進(jìn)行性，主要是少年或青年。原因可能是麻疹病毒持續(xù)感染。SSPE患者既往都有麻疹感染病史，在SSPE患者CSF中麻疹病毒抗體滴度高，尸檢可在腦部檢出大量核內(nèi)包含體。疾病進(jìn)行性發(fā)展到肌肉強(qiáng)直、陣攣，隨著退行性改變進(jìn)程，患者最終昏迷死亡呼吸道并發(fā)癥氣管炎、咳嗽，支氣管肺炎，最常見(jiàn)（4%）神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥：腦炎SSPE免疫性中和保護(hù)作用HA和HL蛋白抗體好發(fā)于6個(gè)月到5歲兒童6個(gè)月內(nèi)從母體得到抗體麻疹發(fā)病期間免疫系統(tǒng)受到抑制終生免疫病毒分離：復(fù)雜費(fèi)時(shí)，臨床不用。早期血液、口腔含漱液、咽拭子，接種人胚腎、猴腎、人羊膜細(xì)胞培養(yǎng)，增殖慢，7—10天出現(xiàn)典型的多核巨細(xì)胞、胞內(nèi)、核內(nèi)嗜酸性包涵體等CPE表現(xiàn)。血清學(xué)診斷雙份血清，做血凝抑制試驗(yàn)、補(bǔ)結(jié)試驗(yàn)或中和試驗(yàn)。由于補(bǔ)結(jié)試驗(yàn)敏感性不，通常做HI試驗(yàn)。免疫熒光檢測(cè)病毒特異性IgM?？焖僭\斷：免疫熒光檢測(cè)病毒抗原微生物學(xué)診斷病毒分離：復(fù)雜費(fèi)時(shí)，臨床不用。血清學(xué)診斷快速診斷：免疫熒光檢測(cè)病毒抗原隔離患者人工自動(dòng)免疫滅活疫苗：在組織培養(yǎng)或雞胚纖維母細(xì)胞傳代制備6個(gè)月以后的兒童皮下注射一次免疫效果好，能持3—5年被動(dòng)免疫丙種球蛋白，種接觸過(guò)麻疹患者的新生兒或易感成人預(yù)防隔離患者人工自動(dòng)免疫被動(dòng)免疫副流感病毒球形，120－250nm，不分節(jié)段-ssRNA核蛋白呈螺旋對(duì)稱包膜糖蛋白突起HN蛋白有血凝素和神經(jīng)氨酸酶活性F糖蛋白（融合蛋白使細(xì)胞融合和溶解紅細(xì)胞屬副粘病毒科副粘病毒屬5個(gè)血清型飛沫傳播或直接接觸傳播僅在呼吸道上皮細(xì)胞增殖，不入血上呼吸道感染、嬰幼兒嚴(yán)重哮喘、支氣管肺炎和肺炎診斷病毒分離和免疫熒光查抗原呼吸道合胞病毒Respiratory

Syncytial

Virus，RSV屬副粘病毒科肺病毒屬球形不能在雞胚培養(yǎng)，但可在組織培養(yǎng)增殖胞漿嗜酸性包涵體一個(gè)血清型流行于冬季、早春，傳染性強(qiáng)，是醫(yī)院感染的主要病原之一潛伏期4—5天，排毒可持續(xù)1—3周引起嬰幼兒的嚴(yán)重呼吸道感染：細(xì)支氣管炎和肺炎腮腺炎病毒（Mumps

virus）屬副粘病毒科副粘病毒屬雞胚羊膜腔增殖能在猴腎細(xì)胞增殖，導(dǎo)致細(xì)胞融合、多核巨細(xì)胞等CPE一個(gè)血清型人是唯一自然儲(chǔ)存宿主飛沫傳播引起流行性腮腺炎病后免疫力持久可用減毒活疫苗風(fēng)疹病毒（Ruella

virus）披膜病毒科（Togaviridae）風(fēng)疹病毒屬一個(gè)血清型人是唯一宿主致病性兒童是主要易感者呼吸道傳播局部淋巴節(jié)增殖后經(jīng)病毒血癥散播全身可垂直傳播導(dǎo)致胎兒先天性感染預(yù)防及免疫自然感染后可獲持久免疫力母親抗體可保護(hù)胎兒接種風(fēng)疹減毒活疫苗三聯(lián)疫苗（MMR）冠狀病毒Coronavirus，CoV

冠狀病毒科（Coronaviridae）冠狀病毒屬

呈多形性，80nm～160nm，+ssRNA，不分節(jié)段核衣殼呈螺旋狀。包膜表面有多形性花瓣?duì)钔黄穑稳缁ü诙妹匕Y急性呼吸綜合癥冠狀病毒

SARS

Coronavirus,SARS

CoVSARS

2002年底在佛山首次報(bào)道SARS癥狀空氣飛沫或密切接觸傳播潛伏期：2~12天，通常4~5天呈顯著家庭和醫(yī)院集聚現(xiàn)象生物學(xué)性狀

60-130nm，包膜表面有明顯突起■+ssRNA，29.7KB，有

14個(gè)ORF，主要是RNA聚合酶、S、E、M、N結(jié)構(gòu)蛋白

在Vero細(xì)胞上有明顯

CPE

感染靈長(zhǎng)類動(dòng)物，出現(xiàn)典型的SARS癥狀SARS

GenomeSARS傳播和流行中國(guó)的SARS流行診斷主要依靠臨床和流行病學(xué)資料病原學(xué)病毒分離RT-PCR免疫熒光、ELISA實(shí)驗(yàn)室要求嚴(yán)格生物安全資格（P3）病原學(xué)診斷尚不成熟預(yù)防

SARS

CoV比普通CoV抵抗力強(qiáng)，室溫下痰、糞便、尿中可穩(wěn)定存活1~2天

對(duì)溫度敏感，37oC存活4天，56oC存活90分鐘，75oC30分鐘對(duì)含氯消毒劑、過(guò)氧乙酸及UV均敏感，WHO推薦中效以上的消毒劑，如過(guò)氧乙酸Summary:

Respiratory

InfectedVirusesOrthomyxovirusesInfluenza

viruseParaomyxovirusesMeasles

virusParainfluenza

virusRespiratorysyncytial

virusMumps

virusRubella

virus

Coronavirus

andSARS

CoronavirusAdenovirusesInfluenza

VirusesOrthomyxoviruses:

Influenza

Viruses

A

middle-sized

enveloped

virus

withfragmented

RNA

genomeVariation

There

two

surface

proteins

in

the

surfaceof

the

envelope.

HA

is

the

mainneutralizing

antigenHemagglutininneuaminidase

Since

the

highly

variation

of

the

genome,Influenza

happens

frequently

due

topeople

have

no

immunity

to

the

mutatedviruses