中醫(yī)證候動(dòng)物模型研究進(jìn)展

中醫(yī)證候動(dòng)物模型研究進(jìn)展

中醫(yī)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)最初是為了將動(dòng)物解釋知識(shí)應(yīng)用于人體。其次，對(duì)動(dòng)物疾病本質(zhì)的觀察和對(duì)動(dòng)物添加適當(dāng)?shù)娜祟愐蛩氐挠^察。中獸醫(yī)則一直在家畜體上實(shí)踐中醫(yī)的證候理論。在現(xiàn)代則首先開(kāi)始于中藥藥理研究,針灸經(jīng)絡(luò)上的運(yùn)用則是其繼起者。作為當(dāng)代中醫(yī)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)重點(diǎn)的證候模型,1960年開(kāi)始有散在研究,1977年后發(fā)展較迅速。中醫(yī)證候動(dòng)物模型研究的意義首先在于避免人體實(shí)驗(yàn)而且動(dòng)物實(shí)驗(yàn)更易于實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo);其次,對(duì)中醫(yī)而言,中醫(yī)動(dòng)物模型研究還有建立基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)學(xué)科,引進(jìn)實(shí)證方法論和理性生物觀,引進(jìn)實(shí)驗(yàn)方法等意義;第三,對(duì)現(xiàn)代中醫(yī)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的各方面均可能促進(jìn)其完善。證候模型的制備在證型確定、動(dòng)物選擇、造模因素確定、模型診斷與評(píng)價(jià)、實(shí)驗(yàn)指標(biāo)選擇、癥病結(jié)合模型設(shè)計(jì)等方面有其自身規(guī)律。在1980年代,證候模型主要應(yīng)用于中醫(yī)基礎(chǔ)理論研究領(lǐng)域,1990年代以來(lái)在中藥藥理研究方面也有較多應(yīng)用。1.腎衰竭的生物模型腎虛證為素體虧虛、年高腎虧、房勞過(guò)度、久病及腎、或服藥過(guò)當(dāng)、情志內(nèi)傷等所致。(1)質(zhì)激素小鼠腎功能變化及證證病結(jié)合的基本認(rèn)識(shí)1960年易寧育從復(fù)方治療結(jié)果區(qū)分出實(shí)驗(yàn)性腎上腺再生型高血壓和腎血管型高血壓分屬陽(yáng)虛證和陰虛證;1963年鄺安坤發(fā)現(xiàn)過(guò)量使用腎上腺皮質(zhì)激素小鼠有腎虛表現(xiàn);至今已有下丘腦損傷、腎上腺皮質(zhì)功能改變、甲狀腺功能改變、性腺功能改變、DNA合成抑制、衰老、腎臟功能損害、恐傷腎、膀胱排尿無(wú)力、胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩、骨髓造血機(jī)能障礙、外傷及腎、鎖陽(yáng)應(yīng)用、缺鐵等各類腎虛證模型,以及多種腎虛證證病結(jié)合模型。腎上腺皮質(zhì)激素模型主要從應(yīng)用時(shí)間、激素的長(zhǎng)效與短效、以及是否停藥區(qū)別腎陰虛證與腎陽(yáng)虛證。臨床腎虛證有DNA合成抑制的改變。衰老則屬生理性腎虛證。(2)加強(qiáng)腎生理研究各模型的生物學(xué)特征與模型制備有關(guān)。腎虛證模型已廣泛用于腎虛證和衰老的病理研究、以及海龍蛤蚧精、豬苓多糖、川附子提取物、還精煎、固真沖劑等中藥的藥理研究。王米渠對(duì)驚恐傷腎腎虛證大鼠進(jìn)行心理遺傳學(xué)研究;施玉華應(yīng)用10種腎虛證動(dòng)物模型對(duì)腎虛證理論進(jìn)行系統(tǒng)的形態(tài)學(xué)研究;楊梅香用腎陰虛模型比較龜上下甲的藥效。2.脾虛證的動(dòng)物模型脾虛證由飲食失調(diào)、勞倦損傷、吐瀉太過(guò)、肝氣乘脾、過(guò)服寒涼食物、久病體弱、稟賦不足等所致。(1)主要有各類有機(jī)溶劑模型的藥物1977年北京中醫(yī)學(xué)院建立限量飲食脾氣虛模型;1979年北京師范大學(xué)生物系消化生理科研組、北京中醫(yī)研究所病理生理研究室創(chuàng)立大黃苦寒瀉下脾虛證模型;至今已形成苦寒或(苦寒)瀉下、限量營(yíng)養(yǎng)、限量營(yíng)養(yǎng)加邪侵、副交感神經(jīng)功能亢進(jìn)、飲食失節(jié)、耗氣破氣、味過(guò)于酸、潰瘍性結(jié)腸炎、膽汁氫氧化鈉、環(huán)磷酰胺、熟地、氣候法傷濕、秋水仙堿、復(fù)合因素等各類脾虛證模型,以及多種脾虛證證病結(jié)合模型。造模要素有苦寒瀉下、耗氣破氣、限量營(yíng)養(yǎng)、勞倦過(guò)度、利血平等五大類,以大黃苦寒瀉下模型使用率最高。復(fù)合模型制備應(yīng)用較多。與其他虛證模型一樣,脾虛證模型不僅要求慢性形成,更要強(qiáng)調(diào)慢性恢復(fù)。脾虛模型無(wú)“限量營(yíng)養(yǎng)”之名的各造模要素中,也多在本質(zhì)上有明顯強(qiáng)制性營(yíng)養(yǎng)不良作用。蔣渝比較了不同動(dòng)物對(duì)脾虛證造模的敏感性差異。(2)對(duì)腸液的促進(jìn)作用對(duì)不同模型制備的脾虛證模型間的病理差異進(jìn)行比較研究已成新的趨勢(shì),如大黃與利血平脾虛證模型在腸液分泌量上有明顯不同。脾虛證模型已被用于健脾靈、四理湯、絞股藍(lán)總皂甙等70余種中藥新藥的藥理研究。厲蘭娜利用偏食酸加饑飽失常加應(yīng)激加冷刺激脾虛證模型克服幽門(mén)螺桿菌感染的困難。黃煦等以脾虛證模型進(jìn)行藥證動(dòng)力學(xué)研究。在脾虛證模型的研究報(bào)告中約45%的篇幅是病理形態(tài)學(xué)內(nèi)容。3.肝臟綜合征的動(dòng)物模型肝臟證候以實(shí)證為主,由情志郁結(jié),郁怒傷肝,或肝郁化火;生血不足,失血太多;肝腎陰虛,不能制約肝陽(yáng);感受濕熱之邪等所致。(1)肝郁證病結(jié)合模型1971年日本有地滋建立局部藥物及針刺應(yīng)用胸脅苦滿模型;1979年湖南醫(yī)學(xué)院建立艾葉注射肝郁證模型;至今已有埋針、CCl4注射法胸脅苦滿模型,艾葉注射、急性激怒、慢性激怒、模具、束縛法等肝郁證模型,CCl4急性和慢性損傷、饑飽失常加逃避訓(xùn)練法肝郁脾虛模型,CCl4損傷加甲狀腺素和利血平肝腎陽(yáng)虛模型,大腸肝菌內(nèi)毒素注射法肝火證模型,電刺激“怒吼中樞”、破壞膈區(qū)法怒傷肝模型,雌性動(dòng)物雌激素注射乳痞模型,以及多種肝臟證候證病結(jié)合模型。李德新等認(rèn)為中醫(yī)學(xué)主要把怒分為郁怒和暴怒兩種。王霞靈等報(bào)道女性肝郁患者血清E2濃度均高于對(duì)照組。王希浩發(fā)現(xiàn)肝郁型月經(jīng)病血清泌乳素水平升高。(2)生物學(xué)的特點(diǎn)和應(yīng)用肝郁證病理改變中,怒與郁的平衡需加以掌握。應(yīng)用CCl4建立的肝郁脾虛證模型用于豬苓多糖、柴芪注射液和強(qiáng)肝軟堅(jiān)湯的藥理研究。4.心虛證的動(dòng)物模型心虛證由久病、暴病傷陽(yáng)耗氣、年高臟氣衰弱、或血之化源不足、失血、熱病傷陰等所致。與心血瘀阻病機(jī)關(guān)系密切。(1)急性心肌缺血模型1987年孫福立建立睡眠剝奪法心虛證模型;1989年金雁建立高膽固醇性免疫損傷加慢性放血心虛證模型;1995年程偉建立急性心肌缺血法心虛證模型;同年孫蓉建立睡眠剝奪法心氣陰兩虛心律失常證病結(jié)合模型以及高膽固醇性免疫損傷加慢性放血心氣虛心律失常證病結(jié)合模型。(2)生物學(xué)的特點(diǎn)和應(yīng)用目前的模型尚不能表現(xiàn)心神方面之心虛證。心虛證模型已用于參葛膠囊、舒心寶等中藥新藥研究。5.肺腸綜合征的動(dòng)物模型肺臟證候?yàn)閯趽p,感受外邪,久喘久咳傷肺所致。(1)儲(chǔ)機(jī)病理機(jī)構(gòu)模型1976年山西中醫(yī)研究所內(nèi)科呼吸組建立早狀腺功能低下或腎上腺皮質(zhì)功能低下SO2熏法肺虛寒證模型;及甲狀腺功能亢進(jìn)加SO2熏法肺陰虛證模型;1981年天津市和平醫(yī)院病理科建立刨花煙熏法肺氣虛證模型;及氫化可的松、利血平和甲狀腺素應(yīng)用加刨花煙熏法肺陰陽(yáng)兩虛證模型;至今已有慢性支氣管炎肺虛(痰阻)證、急性呼吸窘迫綜合征肺虛證、內(nèi)分泌功能改變加慢性支氣管炎肺虛證、稟賦不足加/或后天失調(diào)法肺脾兩虛易感體質(zhì)、氣候因素加慢性支氣管炎肺虛證、風(fēng)寒犯肺證、“形寒寒飲則傷肺”證候、肺失通調(diào)水道、肺失與大腸相表里、衛(wèi)氣虛證、肺陽(yáng)虛證、哮喘“痰瘀伏肺”等各類肺臟證候模型。(2)間以使炎證為主，注意太過(guò)以慢性支氣管炎法建立肺虛證模型應(yīng)有足夠造模時(shí)間以使炎證轉(zhuǎn)為慢性,但也要注意太過(guò)則可能出現(xiàn)從肺氣虛—脾陽(yáng)虛—腎陽(yáng)虛的發(fā)展過(guò)程。肺臟證候模型已用于補(bǔ)肺止咳方、養(yǎng)陰止咳湯等中藥研究。6.氣虛血虛的動(dòng)物模型氣虛證由久病、年老體弱、飲食失調(diào)、用藥不當(dāng)?shù)人隆Ｑ撟C由失血過(guò)多,或脾胃虛弱生化不足,或七情過(guò)度暗耗陰血,或用藥不當(dāng)所致。(1)血虛證模型的建立1964年上海醫(yī)學(xué)院附屬?gòu)V慈醫(yī)院舌象研究小組建立慢性失血?dú)馓撟C模型;1977年上海中醫(yī)研究所建立失血加限量營(yíng)養(yǎng)血虛證模型;同年賁長(zhǎng)恩,葉百寬建立乙?；诫氯苎载氀撟C模型;至今已有慢性失血法、嗎啡成癮法、低壓缺氧法、過(guò)勞法、小劑量γ射線照射氣虛證,禁食加寒冷虛損,膠體碳粒封閉機(jī)體網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)“正氣虛”,溶血性貧血、失血性貧血、失血性貧血加營(yíng)養(yǎng)不良、失血性貧血加饑飽失常、再生障礙性貧血血虛證等各類氣血虛證模型。金雁認(rèn)為失血法模型中,血紅蛋白低與不低是鑒別氣虛與血虛的標(biāo)準(zhǔn)之一。張?jiān)缛A發(fā)現(xiàn)高原氣虛發(fā)病率隨海拔高度升高和移居高原年限延長(zhǎng)而遞增。(2)非血紅蛋白性血虛證模型氣虛證模型要注意與各臟腑氣虛證模型的關(guān)系。慢性失血法氣虛證模型體溫稍高,耳根稍熱,與臨床吻合。應(yīng)探討非貧血性血虛證模型的研制。血虛證模型已用于氣血注射液、痛經(jīng)Ⅰ號(hào)等中藥藥理研究。7.血液瘀積受病血瘀證為氣虛、氣滯、熱毒、血寒等原因,使血液運(yùn)行受阻,瘀積于經(jīng)脈或器官之內(nèi);或各種原因使離經(jīng)血液,不能及時(shí)排出消散而瘀滯于某一處所致。(1)建立適應(yīng)病理生理的各類血脂證模型1974年山西醫(yī)學(xué)院建立家兔腹腔內(nèi)自身血凝塊血瘀模型;1975年山西省中醫(yī)研究所報(bào)道異丙腎上腺素所致心肌梗死血瘀模型;同年上海第一醫(yī)學(xué)院病理生理教研室建立高分子右旋糖酐靜脈注射致微循環(huán)障礙血瘀模型;至今已有全身性血液循環(huán)系統(tǒng)改變、腹腔血凝塊、血栓形成、局部血液循環(huán)障礙、高脂性疾病、骨折及外傷、器官移植、衰老、胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩、輻射骨髓損傷、心肌缺血性改變、腦血管疾病、肺臟疾病、腎臟疾病、腎血管性高血壓、腸粘連、肝硬變、盆腔靜脈系瘀血、子宮內(nèi)膜異位、慢性腎功能衰竭等各類血瘀證模型,以及血瘀證病證結(jié)合模型。近年來(lái)血瘀證模型有回歸復(fù)合模型的趨勢(shì)。(2)不同品種藥物效血藥濃度證模型的結(jié)果對(duì)不同模型制備建立的血瘀證模型的病理認(rèn)識(shí)均要強(qiáng)調(diào)區(qū)別和比較。有研究發(fā)現(xiàn),大腸桿菌內(nèi)毒素法血瘀證模型為低凝高粘模型,金黃色葡萄球菌血瘀證模型為高凝高粘模型,地塞米松加大腸桿菌內(nèi)毒素法血瘀證模型為高凝模型。血瘀證模型已用于冠心Ⅱ號(hào)、宮外孕Ⅱ號(hào)、川芎注射液、丹參注射液、水蛭等多種中藥藥理研究,以及宮外孕、動(dòng)脈粥樣硬化、顱內(nèi)血腫等疾病的治療研究。8.陰寒之邪,或組病陰邪寒熱是辨證疾病性質(zhì)的兩個(gè)綱領(lǐng)。寒證多由外感陰寒之邪,或內(nèi)傷久病,陽(yáng)氣耗傷,陰邪內(nèi)盛所致。熱證多由外感火熱之邪,或七情化火,或飲食不節(jié),積蓄為熱,或陰虛陽(yáng)亢所致。(1)寒證、熱證的制備1970年代有實(shí)驗(yàn)表明,動(dòng)物服用溫補(bǔ)藥組成的痰飲丸后,在較冷的環(huán)境和較熱的環(huán)境中死亡率不同;1979年北京中醫(yī)研究所用熱性中藥喂飼動(dòng)物建立陰虛模型;1982年梁月華用寒涼藥、溫?zé)崴幗⒑C、熱證動(dòng)物模型,并在以后對(duì)造型方藥不斷簡(jiǎn)化、改進(jìn)[28~30];至今已有寒性和熱性方藥法虛寒證、虛熱證,溫度控制肝細(xì)胞培養(yǎng)法寒證、熱證,自然體質(zhì)法寒證、熱證,補(bǔ)氣法實(shí)熱證,氣候法寒證、熱證,辛溫燥熱食物法虛熱證、先天性陰虛證,熱體加五三粉法內(nèi)燥、寒體加蜂蜜豬油法內(nèi)濕,饑餓和寒冷虛寒證模型,利血平、可樂(lè)亭、二乙基二巰基氨甲