《天然藥物化學(xué)》課程實(shí)踐教學(xué)大綱

《天然藥物化學(xué)》課程實(shí)踐教學(xué)大綱NaturalProductChemistry課程編號(hào)：131301012課程類(lèi)別：非獨(dú)立開(kāi)設(shè)實(shí)驗(yàn)課程學(xué)時(shí)：48學(xué)時(shí)適用對(duì)象：修完本課程的藥學(xué)、藥劑等專(zhuān)業(yè)學(xué)生先修課程：無(wú)機(jī)化學(xué)、有機(jī)化學(xué)、波譜解析等一、課程的性質(zhì)與任務(wù)該課程可以支撐能力要求第（1）條以及素質(zhì)要求第（3）條的達(dá)成。天然藥物化學(xué)是—門(mén)中化學(xué)成分的一門(mén)學(xué)科，內(nèi)容包括各類(lèi)天然產(chǎn)物的分或藥效成分)的結(jié)構(gòu)類(lèi)型，物主要類(lèi)型化學(xué)成分的鑒定和生物合成途徑等。運(yùn)用現(xiàn)代化學(xué)科學(xué)理論與方法研究天然藥物化學(xué)成分(主要是生理活性成理化學(xué)性質(zhì)、提取分離方法，以及其目的是探索安全高效的天然產(chǎn)物及衍生的新化擴(kuò)大藥用資源，發(fā)掘新的有效成分，研究有效成分在植物體中隨生長(zhǎng)季節(jié)的變化規(guī)律，提高中藥質(zhì)量的方法。天然藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)課則是要求通過(guò)本門(mén)課程的學(xué)習(xí)，使學(xué)生掌握天然產(chǎn)物的提取分離、純化、預(yù)試實(shí)驗(yàn)等基本技能。合物。并根據(jù)已闡明結(jié)構(gòu)的成分，按植物的親緣關(guān)系在生物界探尋同類(lèi)成分，以二、教學(xué)的目的與要求本課程目標(biāo)是使學(xué)生化性質(zhì)、提取分離與鑒別的基本理論與基本技能，熟悉天然藥物量、臨床療效的密切關(guān)系，了解活性成分提取的一些新技術(shù)及其在實(shí)課程基本要求如下：1．理解天然藥物中有效成分的主要結(jié)構(gòu)類(lèi)型及2．理解天然藥物中主要有效成分的理化性質(zhì)。3．理解天然藥物中主要有效成分的一般提取分離方法。4．理解天然藥物鑒別和色譜鑒別方法。通過(guò)本課程的學(xué)習(xí)，掌握中藥或天然藥物中有效成分的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、理分提取與中藥制劑質(zhì)現(xiàn)代化中的作用。中活性成現(xiàn)中藥特點(diǎn)。中主要有效成分的理化三、考核方式及辦法：實(shí)驗(yàn)與筆試相結(jié)合四、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱(chēng)與學(xué)時(shí)分配：天然藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)安排一覽表學(xué)時(shí)必開(kāi)或?qū)嶒?yàn)分組分配選開(kāi)類(lèi)型人數(shù)序號(hào)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱(chēng)5768888123蘆丁的提取、精制蘆丁的水解、鑒定蘆丁的UV鑒定必開(kāi)必開(kāi)必開(kāi)3-53-53-5漢防已甲素乙素的提取、精制4必開(kāi)3-5885漢防已甲素乙素的分離6漢防已甲素乙素的鑒定必開(kāi)必開(kāi)3-53-5五、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的具體內(nèi)容：實(shí)驗(yàn)一、槐花米中蘆丁的提取分離與鑒定第一次實(shí)驗(yàn)蘆丁的提取（粗提）1．本次實(shí)驗(yàn)的目的和要求通過(guò)蘆丁的粗提掌握堿-酸法提取黃酮類(lèi)化合物的原理及操作2．實(shí)踐內(nèi)容或原理蘆丁的結(jié)構(gòu)中含有酚羥基與堿成鹽溶于水中，向該鹽溶液中加入酸，調(diào)節(jié)溶液的pH值，則蘆丁有重新游離析出，從而獲得粗制蘆丁。3．需用的儀器、試劑或材料等試劑：槐花米，石灰乳液，硼砂，雙蒸水，濃鹽酸，鎂粉，1%三氯化鋁溶液，3%三氯化鐵溶液，10%α-萘酚醇溶液，濃硫酸，乙醇。儀器：分析天平，燒杯，研缽，pH試紙，電爐，布氏漏，斗稠濾瓶，濾紙，剪刀，石棉網(wǎng)，玻璃棒，試管。4．實(shí)踐步驟或環(huán)節(jié)預(yù)試：稱(chēng)槐花米1g，研碎，于試管中加乙醇10mL，在70oC水浴中浸漬20min。量取乙醇提取液2mL，加入少量鎂粉，滴加濃鹽酸4-5滴。溶液變紅色。滴1滴提取液于濾紙上，在其旁滴一滴1%三氯化鋁溶液，在兩溶液融合處，呈現(xiàn)黃色。滴一滴提取液于濾紙上，在其旁邊滴一滴3%三氯化鐵，兩溶液交匯處呈現(xiàn)棕色。④取乙醇提取液1mL，加10%α-萘酚醇溶液1-2滴，揺勻。再沿管壁緩緩加入濃H2SO4，不振揺，兩液界面間出現(xiàn)紫色環(huán)。粗提：稱(chēng)取槐花米15g，研碎，置500mL燒杯中，加入硼砂（四硼酸鈉，Na2B4O7）1g，加入沸水250mL，攪拌，加石灰乳調(diào)pH=8-9，保持微沸30min，不斷補(bǔ)充蒸發(fā)掉的水分，趁熱過(guò)濾，殘?jiān)?倍體積的水再煎一次，趁熱過(guò)濾，合并兩次濾液，在60-70oC下，用濃鹽酸調(diào)pH=4-5577靜置。5．教學(xué)方式板書(shū)和演示相結(jié)合6．考核要求實(shí)驗(yàn)報(bào)告與操作表現(xiàn)綜合考慮7．實(shí)踐教學(xué)報(bào)告要求硼砂能與蘆丁結(jié)合，既保護(hù)鄰二酚羥基不被氧化破壞，又能調(diào)節(jié)堿水溶液的pH，實(shí)驗(yàn)證明提取時(shí)加入硼砂產(chǎn)品質(zhì)量較好。加入石灰乳既可達(dá)堿溶液提取蘆丁的目的，還可以除去槐花米中大量的黏液質(zhì)和酸性樹(shù)脂，但pH不能過(guò)高和長(zhǎng)時(shí)間煮沸，因其可導(dǎo)致蘆丁降解。pH過(guò)低會(huì)使蘆丁形成佯鹽而降低收率。第二次實(shí)驗(yàn)蘆丁的精制1．本次實(shí)驗(yàn)的目的和要求通過(guò)蘆丁的精制掌握蘆丁重結(jié)晶的原理及操作。2．實(shí)踐內(nèi)容或原理利用蘆丁在冷、熱水中溶解度差（冷水1:10000，熱水1:200）來(lái)達(dá)到重結(jié)晶的目的。3．需用的儀器、試劑或材料等試劑：蘆丁粗品，雙蒸水。儀器：電爐，燒杯，布氏漏斗，抽濾瓶，玻棒，濾紙，循環(huán)水真空泵，水浴箱。4．實(shí)踐步驟或環(huán)節(jié)操作：水提酸沉法TLC鋪板：硅膠G（H）-CMC板薄層板的制備：濕法鋪板：用硅膠1.5g或2g和0.3%-0.5%CMC水溶液1:3-4的比例調(diào)成均勻狀，倒于5cm×15cm的玻板上或載玻片商，鋪均，放于水平處，在空氣中晾干后105oC-110oC活化30min或1h活化板置于干燥器保存?zhèn)溆?。若有氣泡，可?-2滴乙醇約研1min后倒于玻板上，硅膠板5g硅膠1塊。5．教學(xué)方式板書(shū)和演示相結(jié)合6．考核要求578

實(shí)驗(yàn)報(bào)告與操作表現(xiàn)綜合考慮7．實(shí)踐教學(xué)報(bào)告要求預(yù)熱布氏漏斗，溶解后的粗品趁熱過(guò)濾。析晶時(shí)，靜置勿攪動(dòng)。第三次實(shí)驗(yàn)甙的水解、分離，甙元和糖的鑒定1．本次實(shí)驗(yàn)的目的和要求通過(guò)蘆丁結(jié)構(gòu)的檢識(shí)，了解苷類(lèi)結(jié)構(gòu)研究的一般程序和方法。2．實(shí)踐內(nèi)容或原理云香甙的甙鍵為半縮醛結(jié)構(gòu)，對(duì)酸不穩(wěn)定，對(duì)堿較穩(wěn)定，易被酸催化水解，并且云香甙鍵是一個(gè)酚甙鍵，由于p-π共軛作用，酚甙的甙元在甙鍵原子質(zhì)子化時(shí)芳環(huán)對(duì)甙鍵原子有一定的供電子作用，更易水解。3．需用的儀器、試劑或材料等試劑：蘆丁，2%硫酸，乙醇，BaCO3細(xì)粉，葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品乙醇液，鼠李糖標(biāo)準(zhǔn)品乙醇液，-鄰苯二甲酸試劑，鎂粉，酸，ZrOCl2，2%檸檬酸甲醇液，甲醇，10%α-萘酚醇溶液，1%三氯化鐵水溶液，1%鐵氰化鉀水溶液。正丁醇，醋酸，苯胺濃鹽儀器：圓底燒瓶開(kāi)缸，毛細(xì)管，新華牌中速層析濾4．實(shí)踐步驟或環(huán)（一）操作，研缽，電熱套，鐵架臺(tái)，鐵夾，冷凝管，抽濾瓶，布氏漏斗，玻棒，展紙。節(jié)稱(chēng)取甙純品0.5g研細(xì)，置于圓底燒瓶中，加2%H2SO450mL，加熱，微沸1h，稍冷后抽濾，濾紙取20mL，加入BaCO3（約10g），調(diào)pH值至中性，過(guò)濾，濾液濃縮后至2mL左右。抽濾所得沉淀用水洗至中性，用50%乙醇（約25mL）重結(jié)晶，得槲皮素。（二）把甙元重結(jié)晶物濾出，溶于無(wú)水乙醇Mg+HCl反應(yīng)：顯紅色ZrOCl2/H+反應(yīng)：不退色Molish反應(yīng)：兩液面交匯處無(wú)紫色環(huán)（三）甙與甙元的鑒別（四）甙元乙?；锏闹苽溥霸?.2g，置于1滴振揺使完全溶解，接空氣冷凝干燥圓底燒瓶中，加醋酐6mL和濃硫酸管，90oC水浴30min，放冷，攪拌下傾入100mL冰水中，攪拌至油滴消失，有灰白色粉末析出，579

過(guò)濾洗滌用95%乙醇重結(jié)晶，得無(wú)色針晶，測(cè)熔點(diǎn)，為192oC-194oC。稱(chēng)重，計(jì)算產(chǎn)率。5．教學(xué)方式板書(shū)和演示相結(jié)合6．考核要求實(shí)驗(yàn)報(bào)告與操作表現(xiàn)綜合考慮7．實(shí)踐教學(xué)報(bào)告要求漢防己中漢防己甲素、乙素的提取、分離和鑒定第一、二次實(shí)驗(yàn)漢防己中漢防己總堿的提取與親脂性叔胺生物堿的分離1．本次實(shí)驗(yàn)的目的和要求掌握生物堿的一般提取方法；掌握親脂性叔胺生物堿的分離。2．實(shí)踐內(nèi)容或原理3．需用的儀器、試劑或材料等儀器：圓底燒瓶，冷凝管，電熱套，鐵架臺(tái)，試管，蒸餾頭，真空彎接管，抽濾瓶，真空泵，蒸發(fā)皿，恒溫水浴箱，研缽，燒杯，天平，250mL分液漏斗，布氏漏斗，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，鐵圈。試劑：漢防己粗粉，95%乙醇，10%鹽酸，5%鹽酸，11%鹽酸，環(huán)己烷，乙酸乙酯，無(wú)水硫酸鈉，碘化鉍鉀，碘化汞鉀，碘化碘鉀，硅鎢酸，濃氨水。4．實(shí)踐步驟或環(huán)節(jié)1）預(yù)試：預(yù)試液的制備：取漢防己粗粉2g，加蒸餾水20mL，用10%鹽酸調(diào)pH<=3，60oC水浴加熱15min，冷卻過(guò)濾。碘化汞鉀：濾液1mL+2滴碘化汞鉀碘化鉍鉀：濾液1mL+2滴碘化鉍鉀碘化碘鉀：濾液1mL+2滴碘化碘鉀④硅鎢酸：濾液1mL+2滴硅鎢酸2）漢防己漢防己粗粉50g，置250mL圓底燒瓶中，用85%乙醇抽濾，減壓濃總提起物?？偵飰A的提取縮至小體積，得糖漿狀3）親脂性叔胺生物堿和水溶性胺生物堿的分離將乙醇提取物轉(zhuǎn)移至大燒杯中，加入80mL11%鹽酸溶解（分三次30mL，30mL，20mL加580

入使其充分溶解）50C水浴促溶，抽濾，除去樹(shù)脂，沉淀以11%鹽酸洗滌，沉淀?xiàng)墶合并濾液和洗滌液，用濃氨水（NH3·H2O）調(diào)pH=9-10，用環(huán)己烷并有機(jī)層減壓回收溶劑，得親脂性叔胺總堿。4）鋪板-乙酸乙酯萃取3次，合5．教學(xué)方式板書(shū)和演示相結(jié)合6．考核要求實(shí)驗(yàn)報(bào)告與操作表現(xiàn)綜合考慮7．實(shí)踐教學(xué)報(bào)告要求1、藥材的量為燒杯容量的1/3～1/2，再加溶劑使其浸過(guò)藥面1～2cm2、浴蒸餾液裝至燒瓶體積的1/2～2/3，應(yīng)加沸石。第三次實(shí)驗(yàn)漢防己甲素、乙素的分離1．本次實(shí)驗(yàn)的目的和要求漢防己甲素、乙素分離純化的原理和方法；復(fù)習(xí)鞏固結(jié)重晶的基本操作。2．實(shí)踐內(nèi)容或原理根據(jù)生物堿溶解度差異進(jìn)行分離。3．需用的儀器、試劑或材料等燒杯，抽濾瓶，鐵架臺(tái)，鐵圈，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，錐型瓶，展開(kāi)缸，毛細(xì)管。試劑：1%鹽酸，濃氨水，氯仿，1%NaOH水溶液，無(wú)水硫酸鈉。4．實(shí)踐步驟或環(huán)節(jié)1）漢防己素的分離2）漢防己甲素、乙素的薄層鑒定將分離得到的晶體1，2與漢防己展開(kāi)劑：環(huán)己烷-乙酸乙酯-二乙胺（6:2:1）顯色劑：改良碘化鉍鉀試劑（在噴顯色劑之前應(yīng)在80oC）左右完全揮干展儀器：大甲素、乙樣品：甲素、乙素的標(biāo)準(zhǔn)品做對(duì)照。開(kāi)劑。5．教學(xué)方式板書(shū)和演示相結(jié)合6．考核要求實(shí)驗(yàn)報(bào)告與操作表現(xiàn)綜合考慮7．實(shí)踐教學(xué)報(bào)告要求581

六、實(shí)踐教學(xué)中應(yīng)注意的問(wèn)題1．組織管理的要求：（1）、實(shí)驗(yàn)進(jìn)程表由教務(wù)處編制下發(fā)，作為實(shí)施、檢查、考核的依據(jù)，若因客觀(guān)原因不能按實(shí)驗(yàn)進(jìn)程表規(guī)定的時(shí)間做實(shí)驗(yàn)，有關(guān)當(dāng)事人應(yīng)事前向教務(wù)處提出申請(qǐng)，經(jīng)與實(shí)驗(yàn)室協(xié)商后另定時(shí)間。（2）、實(shí)驗(yàn)授課計(jì)劃由任課教師根據(jù)實(shí)驗(yàn)教學(xué)大綱編制，與理論授課計(jì)劃同時(shí)完成，力爭(zhēng)開(kāi)出大綱規(guī)定的全部實(shí)驗(yàn)2．對(duì)教師的要求：（1）、實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)人員應(yīng)預(yù)先做實(shí)驗(yàn)，試做實(shí)驗(yàn)報(bào)告，并檢查學(xué)生實(shí)驗(yàn)所用之儀器、設(shè)備、藥品、試劑等準(zhǔn)備情況，以確保實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。（2）、實(shí)驗(yàn)時(shí)，指導(dǎo)人員不可擅離崗位，要認(rèn)真指導(dǎo)，但不可包辦代替。（3）、實(shí)驗(yàn)課與理論課一樣，必須備好課、好寫(xiě)教案，無(wú)教案不準(zhǔn)上實(shí)驗(yàn)課。（4）、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，要檢查儀器設(shè)備、工具等是否缺損，檢查學(xué)生實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)或結(jié)論是否合理、準(zhǔn)確。要指導(dǎo)學(xué)生做好整理工作。（5）、認(rèn)真批改實(shí)驗(yàn)報(bào)告3．對(duì)學(xué)生的要求：（1）、實(shí)驗(yàn)課前應(yīng)預(yù)習(xí)上課內(nèi)容，并做好實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)報(bào)告；（2）、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)按老師要求操作。如出現(xiàn)意外情況，需在帶教老師或?qū)嶒?yàn)員的指導(dǎo)下處理相應(yīng)事件，切勿盲目處理，以免造成更加嚴(yán)重的后果；（3）、實(shí)驗(yàn)完畢后，應(yīng)該主動(dòng)整理實(shí)驗(yàn)用具，清洗實(shí)驗(yàn)臺(tái)，打掃實(shí)驗(yàn)衛(wèi)生，經(jīng)過(guò)帶教老師或?qū)嶒?yàn)員的檢查后同意方能離開(kāi)；（4）、嚴(yán)禁將危險(xiǎn)品帶出實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地。4．對(duì)教學(xué)基地、實(shí)驗(yàn)室和實(shí)驗(yàn)員的要求：（1）、實(shí)驗(yàn)員