沉降菌檢測標準操作規(guī)程ok范文

年4月19日沉降菌檢測標準操作規(guī)程ok文檔僅供參考沉降菌檢驗標準操作規(guī)程目的本文件規(guī)定了潔凈室（區(qū)）中沉降菌檢驗的操作方法，保證檢驗人員操作規(guī)范化、標準化，確保潔凈室潔凈度。范圍標準規(guī)定了醫(yī)藥工業(yè)潔凈區(qū)中沉降菌的測試條件、測試方法。本標準適用于醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)），無菌室（區(qū)）（包括潔凈工作臺）的沉降菌測定。本公司規(guī)定對萬級凈化實驗室沉降菌檢測項目進行一星期/次的檢驗。3．職責(zé)QC操作人員、QC管理人員嚴格按照此規(guī)程執(zhí)行；相關(guān)使用人員做好潔凈室清潔維護工作。4.內(nèi)容4.1.定義4.1.1.潔凈室（區(qū)）對塵埃及微生物污染規(guī)定需進行環(huán)境控制的房間或區(qū)域。其建筑結(jié)構(gòu)、裝備及其使用均具有減少對區(qū)域內(nèi)污染源的介入、產(chǎn)生和滯留的功能。4.1.2.潔凈工作臺一種工作臺或者與之類似的一個封閉圍檔工作區(qū)。其特點是自身能夠供給經(jīng)過過濾的空氣或氣體，垂直層流罩、水平層流罩、垂直層流潔凈工作、水平層流潔凈工作臺、自凈器等。4.1.3.潔凈度潔凈環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中含大于或等于某一粒徑的懸浮粒子的允許統(tǒng)計數(shù)。4.1.4.菌落細菌培養(yǎng)后，由一個或幾個細菌系列而形成的一細菌集落，簡稱CFU。一般見個數(shù)表示。4.1.5.沉降菌用本標準提及的方法收集到的活微生物粒子，經(jīng)過專用的培養(yǎng)基，在適宜的生長條件下繁殖到可見菌落數(shù)。4.1.6.靜態(tài)測試潔凈室（區(qū)）凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)已處于正常運行狀態(tài)，工藝設(shè)備已安裝，潔凈室（區(qū)）內(nèi)沒有生產(chǎn)人員的情況下進行的測試。4.1.7.動態(tài)測試潔凈室（區(qū)）已處于正常狀態(tài)下進行的測試。4.2.測試方法4.2.1.方法概述采用沉降法，即經(jīng)過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)若干時間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落進行計數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)，并以此來評定潔凈室（區(qū)）的潔凈度。4.2.2.測試儀器和設(shè)備高壓蒸汽滅菌鍋、恒溫培養(yǎng)箱、培養(yǎng)皿。4.2.3.培養(yǎng)基營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：培養(yǎng)基的準備及滅菌依照培養(yǎng)基配制及靈敏度測試標準操作規(guī)程準備。4.2.4.測試步驟4.2.4.1.采樣將已制備好的培養(yǎng)皿按5.3.4.1.3的要求放置，打開培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露于空氣中0.5h，再將培養(yǎng)皿蓋蓋上后倒置。4.2.4.2.培養(yǎng)全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于在30～35℃生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h。每批培養(yǎng)基應(yīng)有對照試驗，檢驗培養(yǎng)基本身是否污染?？擅颗x定3只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。4.2.4.3.菌落計數(shù)4.2.4.3.1用肉眼直接計數(shù)，標記或在菌落計數(shù)器上點計，然后用5-10倍放大鏡檢查有否遺漏。4.2.4.3.2若培養(yǎng)皿上有2個或2個以上的菌落重疊，可分辨時仍以2個或2個以上菌落計數(shù)。4.2.5.注意事項4.2.5.1.測試用具要作滅菌處理，以確保測試的可靠性、正確性。4.2.5.2.采樣前應(yīng)仔細檢查每個培養(yǎng)皿的質(zhì)量，如發(fā)現(xiàn)變質(zhì)、破損或污染的應(yīng)剔除。4.2.5.3.采取一切措施防止人為對樣本的污染。4.2.5.4.對培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其它參數(shù)作詳細的記錄。5.2.5.5.由于細菌種類繁多，差別甚大，計數(shù)時一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細觀察，不要漏計培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落，并須注意細菌菌落與培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別。4.3.測試規(guī)則4.3.1.測試狀態(tài)4.3.1.1.沉降菌測試前，被測試潔凈室（區(qū)）的溫濕度、靜壓差、換氣次數(shù)等應(yīng)符合規(guī)定。4.3.1.2.沉降菌測試前，被測試潔凈室（區(qū)）已經(jīng)過消毒。4.3.1.3.測試狀態(tài)有靜態(tài)和動態(tài)兩種。4.3.2.測試人員4.3.2.1.測試人員必須穿戴符合環(huán)境潔凈度級別的工作服。4.3.2.2.靜態(tài)測試時，室內(nèi)測試人員一人。4.3.3.測試時間4.3.3.1.對單向流，如100級凈化房間及層流工作臺，測試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運行不少于10min后開始。4.3.3.2.對非單向流，如10000級、100000級以上的凈化房間，測試應(yīng)在凈化空調(diào)正常運行不少于30min后開始。4.3.4.沉降菌計數(shù)4.3.4.1.采樣點數(shù)目及布置4.3.4.1.1最少采樣點數(shù)目表1：沉降法的最少采樣點數(shù)面積（m2）潔凈度級別10010000100000≤102～322≥10～＜20422≥20～＜40822≥40～＜1001642≥100～＜200 40103≥200～＜40080206注：表中的面積，對于單向流潔凈室送風(fēng)面積，對非單向流潔凈室指向房間面積。在滿足最少測點數(shù)的同時，還宜滿足最少培養(yǎng)皿數(shù)，見下表：表2：最少培養(yǎng)皿數(shù)潔凈度級別培養(yǎng)皿數(shù)1001410000210000025.3.4.1.2.采樣點的布置a.工作區(qū)采樣點的位置離地0.8m～1.5m左右（略高于工作面）。b.可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動范圍處增加采樣點。5.3.4.1.3.采樣點布置圖示注：·為采樣點。4.3.5.計算4.3.5.1.用計數(shù)方法得出各個培養(yǎng)皿M的菌落數(shù)。4.3.5.2.平均菌落數(shù)的計算M1＋M2＋…＋Mn平均菌落數(shù)：M＝n式中：——平均菌落數(shù)；M1——1號培養(yǎng)皿菌落數(shù)；M2——2號培養(yǎng)皿菌落數(shù)；Mn——n號培養(yǎng)皿菌落數(shù)；n——培養(yǎng)皿總數(shù)。4.3.6.判定標準用平均菌落數(shù)判斷潔凈室（區(qū)）空氣中的微生物。4.3.5.1.潔凈室（區(qū)）內(nèi)的平均菌落數(shù)必須低于所選定的評定標準。4.3.5.2.若某潔凈室（區(qū)）內(nèi)的平均菌落數(shù)超過評定標準，則必須對此區(qū)域先進行消毒，然后重新采樣兩次，測試結(jié)果均須合格。4.3.7.標準要求潔凈度級別個/（φ90mm·0.5h）1