臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)：腎功能實(shí)驗(yàn)之尿酸尿素肌酐實(shí)驗(yàn)

腎功能實(shí)驗(yàn)臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)-實(shí)驗(yàn)課程腎功能檢測(cè)腎小球功能檢測(cè)腎小球?yàn)V過功能檢測(cè)如：內(nèi)生肌酐清除率肌酐、尿素、尿酸、胱抑素C腎小球屏障功能檢測(cè)如：尿液白蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、IgG腎小管功能檢測(cè)腎小管排泌功能檢測(cè)如：對(duì)氨基馬尿酸、酚紅排泄試驗(yàn)?zāi)I小管重吸收功能檢測(cè)如：葡萄糖、尿酶、α1微球蛋白、β2微球蛋白理論回顧實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆眨耗蛩?、肌酐和尿酸的測(cè)定原理熟悉：操作過程和注意事項(xiàng)了解：臨床意義

實(shí)驗(yàn)安排尿酸：手工比色法檢測(cè)尿素和肌酐：半自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)1尿酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)2尿素檢測(cè)實(shí)驗(yàn)3肌酐檢測(cè)實(shí)驗(yàn)一：尿酸測(cè)定（終點(diǎn)法）尿酸酶尿囊素+CO2+H2O2尿酸4-AAP+TOOSPOD

醌亞胺+H2O546nm波長(zhǎng)處檢測(cè)吸光度，顏色深淺與尿酸的濃度成正比。TOOS：N-乙基-N-（2-羥基-3-磺丙基）-3-甲基苯胺尿酸試劑準(zhǔn)備R1（粉）：尿酸酶、POD、4-AAP、TOOSR2（液）：磷酸緩沖液R1+R2=R

尿酸標(biāo)準(zhǔn)液（UA）：301μmol/LS：R=1:503ml體系操作步驟空白管標(biāo)準(zhǔn)管樣品管蒸餾水60μl標(biāo)準(zhǔn)品60μl待測(cè)血清60μl工作液3ml3ml3ml混勻，37℃保溫10min，以空白管校零后，在546nm波長(zhǎng)下讀取標(biāo)準(zhǔn)管及樣本管吸光度A標(biāo)、A測(cè)。數(shù)據(jù)處理參考區(qū)間

健康成年男性：208-428μmol/L

健康成年女性：155-357μmol/LA標(biāo)–C標(biāo)A測(cè)C測(cè)=實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)1尿酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)2尿素檢測(cè)實(shí)驗(yàn)3肌酐檢測(cè)實(shí)驗(yàn)二：尿素測(cè)定（兩點(diǎn)法）

脲酶尿素+H2O2NH3+CO2

GLDHNH3

+α-酮戊二酸+NADH+H+谷氨酸+NAD++H2O340nm波長(zhǎng)下吸光度下降的速率與尿素的量成正比尿素試劑準(zhǔn)備R1（粉）：脲酶、谷氨酸脫氫酶（GLDH）、NADHR2（液）：緩沖液、α-酮戊二酸R1+R2=R尿素標(biāo)準(zhǔn)液（Urea）：7.1mmol/LS：R=1:100(1ml體系)操作步驟空白管標(biāo)準(zhǔn)管待測(cè)管蒸餾水1ml標(biāo)準(zhǔn)品10μl待測(cè)血清10μl工作液1ml1mlUrea=BUN（BloodUreaNitrogen）操作步驟

反應(yīng)30秒和60秒兩點(diǎn)檢測(cè)吸光度，半自動(dòng)檢測(cè)

波長(zhǎng)=340nm

參考區(qū)間：

2.9-8.2mmol/L尿素檢測(cè)注意事項(xiàng)1、先準(zhǔn)備好試劑，一加樣立即混勻并檢測(cè)2、防止氨離子的污染3、血氨升高可使尿素測(cè)定結(jié)果偏高，兩點(diǎn)速率法能較好地消除內(nèi)源性氨的干擾4、用蒸餾水空白調(diào)零即可實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)1尿酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)2尿素檢測(cè)實(shí)驗(yàn)3肌酐檢測(cè)實(shí)驗(yàn)三：肌酐測(cè)定（兩點(diǎn)法）505nm波長(zhǎng)處檢測(cè)吸光度，顏色深淺與肌酐的量成正比肌酐+堿性苦味酸橘紅色的苦味酸肌酐復(fù)合物Jaffe反應(yīng)肌酐試劑準(zhǔn)備R1（液）：氫氧化鈉R2（液）：苦味酸R1+R2（1:1）=R肌酐標(biāo)準(zhǔn)液（CRE）：133μmol/LS:R=1:10（1ml體系）操作步驟

反應(yīng)20秒和60秒兩點(diǎn)檢測(cè)吸光度，在半自動(dòng)中檢測(cè)

波長(zhǎng)=505nm血肌酐濃度參考區(qū)間：男性44-133μmol/L女性70-106μmol/L

fastreactioncreatininereactionslowreaction0s20s60s80sAcetoaceticacidTP,Glu,VitC操作步驟試劑空白管標(biāo)準(zhǔn)管待測(cè)管蒸餾水100μl標(biāo)準(zhǔn)品100μl待測(cè)血清100μl工作液1ml1ml1ml肌酐檢測(cè)注意事項(xiàng)1、標(biāo)本即加即檢2、不宜使用全血標(biāo)本，全血中假肌酐物質(zhì)較多3