醛酮類化合物檢測(cè)方法

醛酮類化合物檢測(cè)方法一高效能液相層析法中華民國(guó)89年8月29日(89)環(huán)署檢字第48966號(hào)公告自中華民國(guó)89年11月29日起實(shí)施NIEAR502.10C中華民國(guó)91年3月5日環(huán)署檢字第0910014627號(hào)公告修正為NIEAR502.11C一、 方法概要本方法用以檢測(cè)非氣體基質(zhì)中具游離醛酮基(freecarbonyl)化合物。固態(tài)樣品萃取液或水樣經(jīng)過(guò)濾后，在40°C下與2,4-二硝基苯胼(2,4-dinitrophenylhydrazine,DNPH)反應(yīng)，生成相對(duì)應(yīng)之DNPH衍生物，經(jīng)C18管柱萃取或二氯甲烷液相－液相萃取及濃縮后，取適當(dāng)體積注入高效液相層析儀(HPLC)。使用逆相層析管柱及梯度沖提分離出各種醛類與酮類之DNPH衍生物，用紫外光偵測(cè)器在360nm之波長(zhǎng)測(cè)其吸收強(qiáng)度，進(jìn)行目標(biāo)待測(cè)物的確認(rèn)與定量。二、 適用范圍本方法適用于水樣、土壤、廢棄物、及毒性化學(xué)物質(zhì)樣品檢測(cè)。各目標(biāo)待測(cè)物列出如下：方法偵測(cè)極限列在表一及表二。視樣品基質(zhì)干擾情形及步驟中所使用的樣品體積，各樣品的方法偵測(cè)極限，可能與表中所列之值不同。三、干擾(一)方法的干擾可能源自于溶劑、試劑、玻璃器皿和樣品處理用設(shè)備的污染，導(dǎo)致隨機(jī)干擾，或使層析圖譜的基線升高，因此必須使用相同的檢測(cè)條件設(shè)定，依七(四)節(jié)步驟執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室內(nèi)試劑及器皿之方法空白檢測(cè)，以確定無(wú)干擾物存在。待測(cè)物CASNo.a甲醛(Formaldehyde)50-00-0乙醛(Acetaldehyde)75-07-0丙醛(Propanal,Propionaldehyde)123-38-6巴豆醛(Crotonaldehyde)123-73-9丁醛(Butanal,Butyraldehyde)123-72-8環(huán)己酮(Cyclohexanone)108-94-1戊醛(Pentanal,Valeraldehyde)110-62-3己醛(Hexanal,Hexaldehyde)66-25-1庚醛(Heptanal)111-71-7辛醛(Octanal)124-13-0壬醛(Nonanal)124-19-6癸醛(Decanal)112-31-2注：a化學(xué)文摘社登記號(hào)碼。醛酮化合物檢測(cè)方法一高效能液相層析法(NIEAR502.11C)第1頁(yè)，共20頁(yè).tw/niea/REFUSE/R50211C.htm2008/10/6玻璃器皿必須絕對(duì)潔凈，使用后必須立即以最后所使用的溶劑沖洗，接著用清潔劑和熱水清洗，再用自來(lái)水和不含有機(jī)物的試劑水清洗，清洗完成后，晾并干燥之，使用前再于130°C烘箱中烘2-3小時(shí)。乙腈的沖洗步驟可以烘箱烘烤步驟取代，不可用甲醇或丙酮清洗玻璃器皿，因這些溶劑會(huì)與DNPH反應(yīng)而生成干擾物。于干燥并冷卻后，玻璃器皿應(yīng)保存于一潔凈區(qū)域，避免灰塵堆積或其它污染物的污染。使用高純度試劑和溶劑可減少干擾，并可使用全玻璃蒸餾系統(tǒng)蒸餾純化溶劑。當(dāng)執(zhí)行硅膠管處理步驟時(shí)，必須戴聚乙烯（PE）材質(zhì)的手套，以避免可能的污染。（二） 由于環(huán)境中自然存在甲醛，故常發(fā)生DNPH試劑被甲醛污染，所使用的DNPH試劑必須以HPLC級(jí)的乙腈進(jìn)行多次再結(jié)晶純化步驟，再結(jié)晶純化步驟系于40-60C慢慢將溶劑蒸發(fā)以得到最多的結(jié)晶，純化后的DNPH結(jié)晶保存于HPLC級(jí)的乙腈中。于執(zhí)行樣品檢測(cè)前應(yīng)先執(zhí)行DNPH中所含醛酮化合物不純物的檢測(cè)，不純物的量應(yīng)小于25mg/L。參見(jiàn)附錄之DNPH再結(jié)晶步驟。（三） 基質(zhì)干擾可能來(lái)自于與樣品共同被萃取出來(lái)的污染物，基質(zhì)干擾情形可分成樣品來(lái)源和基質(zhì)本身。若一系列樣品都有干擾問(wèn)題，則應(yīng)更換移動(dòng)相或進(jìn)行必要的清洗步驟。（四）若樣品中含有乙醇則于進(jìn)行衍生步驟時(shí)，會(huì)產(chǎn)生乙醛，此背景問(wèn)題，將無(wú)法檢測(cè)濃度低于0.5ppm（500ppb）的乙醛。四、設(shè)備（一）高效液相層析儀（組裝式）1.泵系統(tǒng)：可梯度沖提，固定流量控制可達(dá)1.5mL/min.。2■高壓注射閥，附20pL樣品回路。3■管柱：250mmx4.6mm內(nèi)徑，5-pm粒徑之C18填充劑（Zorbax）或同級(jí)品。吸光偵測(cè)器：360nm。與偵測(cè)器聯(lián)通的記錄器：最好用數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)以量測(cè)尖峰面積及滯留時(shí)間。氦氣：供移動(dòng)相溶劑除氣。移動(dòng)相盛裝容器和抽氣過(guò)濾裝置：供盛裝和過(guò)濾HPLC移動(dòng)相之用，過(guò)濾裝置必須全為玻璃和鐵氟龍材質(zhì)，并使用0.22pm聚酯濾膜。樣品注射針：將樣品注入HPLC樣品回路中，至少需承裝樣品回路體積之四倍的容量。（二）衍生反應(yīng)設(shè)備反應(yīng)瓶：250mL平底長(zhǎng)頸圓燒瓶。分液漏斗：250mL附鐵氟龍栓塞。K-D裝置：參見(jiàn)「分液漏斗液相一液相萃取法（NIEAR106.00C）」或其它萃取方法系列的適當(dāng)方法。（若其它濃縮裝置經(jīng)實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證，具同等功能者亦可使用）。4.沸石：以二氯甲烷溶劑萃取潔凈處理過(guò)，約為10/40mesh（碳化硅或同級(jí)品）。5.pH計(jì)：能量測(cè)精確至0.01單位。6■玻璃纖維濾紙：孔徑1.2|jm（FisherG4級(jí)或同級(jí)品）。醛酮化合物檢測(cè)方法一高效能液相層析法（NIEAR502.11C）第2頁(yè)，共20頁(yè).tw/niea/REFUSE/R50211C.htm2008/10/6固相吸附管：內(nèi)部充填2gC18（Baker或同級(jí)品）。真空固相萃取裝置：能同時(shí)萃取12個(gè)樣品（Supelco或同級(jí)品）。樣品容器：容量為60mL（Supelco或同級(jí)品）。微量吸管：能精確轉(zhuǎn)置0.10mL的溶液。水浴槽：加熱用，附同心圓蓋，可控制溫度（精確至土2°C），需在抽氣柜中操作。樣品震蕩器：回轉(zhuǎn)震蕩式及附溫度控制烘箱（精確至±2C）（Lab-LineOrbitEnviron-ShakerModel3527或同級(jí)品）。注射針：5mL、500jL、100jL，（附旋轉(zhuǎn)密合接頭或同級(jí)品）。針筒過(guò)濾片：0.45jm濾片匣，（GelmanAcrodisc4438或同級(jí)品）。（三） 量瓶：5mL、10mL及250mL或500mL。（四） 樣品瓶：10或25mL玻璃瓶，附鐵氟龍內(nèi)襯螺旋蓋或加壓密合蓋。（五） 天平：分析天平，精確至0.0001g。（六）玻璃漏斗。（七） 聚乙烯（PE）手套：用來(lái)處理硅膠吸附管。（八） 固體樣品萃取設(shè)備旋轉(zhuǎn)裝置：此裝置必須能以每分鐘30±2次之頻率旋轉(zhuǎn)萃取容器。萃取容器：500mL含鐵氟龍墊片旋轉(zhuǎn)式蓋或壓合式蓋。過(guò)濾器附玻璃纖維濾紙。五、試劑（一）所有檢測(cè)所需的無(wú)機(jī)試藥皆需使用試藥級(jí)。若需使用其它等級(jí)試藥，則在使用前必須確認(rèn)該試藥的純度足夠高，使檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度不致降低。（二）不含有機(jī)物的試劑水：所使用的試劑水中干擾物的濃度，應(yīng)小于目標(biāo)待測(cè)物方法偵測(cè)極限值。（三） 甲醛溶液：濃度為37.6%（w/w）,將甲醛溶于不含有機(jī)物的試劑水中。依下述步驟執(zhí)行甲醛儲(chǔ)備溶液的正確濃度確認(rèn)。（四） 醛類和酮類標(biāo)準(zhǔn)品：分析級(jí),用來(lái)制備除甲醛外之其它目標(biāo)待測(cè)物的DNPH衍生標(biāo)準(zhǔn)品,參見(jiàn)目標(biāo)待測(cè)物表。市售已衍生化標(biāo)準(zhǔn)品亦可使用（參照「水中甲醛乙醛和丙醛檢測(cè)方法－液相層析儀/紫外光偵測(cè)器法」NIEAW782.50B五（六）、節(jié)）。（五） 使用之試劑二氯甲烷,CH2Cl2：HPLC級(jí)或同級(jí)品。乙腈,CH3CN：HPLC級(jí)或同級(jí)品。氫氧化鈉,NaOH：1.0N和5N。4■氯化鈉飽和溶液，NaCI:于不含有機(jī)物的試劑水中加入過(guò)量的試藥級(jí)的氯化鈉固體。5■亞硫酸鈉溶液，Na2SO3：0.1M。硫酸鈉，Na2SO4：粒狀，無(wú)水。醛酮化合物檢測(cè)方法一高效能液相層析法(NIEAR502.11C)第3頁(yè)，共20頁(yè).tw/niea/REFUSE/R50211C.htm2008/10/6檸檬酸，C8H8O7：1.0M溶液。檸檬酸鈉，C6H5Na3O72H2O：1.0M含二個(gè)結(jié)晶水的三鈉鹽。冰醋酸，CH3CO2H。醋酸鈉，CH3CO2Na。鹽酸，HCl：0.1N。檸檬酸鹽緩沖液，1M，pH=3：將80mL之1M檸檬酸溶液加入于20mL之1M檸檬酸鈉溶液中，混合均勻，視需要使用NaOH或HCl調(diào)整pH值。醋酸鹽緩沖液，5M，pH=5(分析甲醛時(shí)使用)：將40mL之5M醋酸溶液加入于60mL之5M醋酸鈉溶液中，混合均勻，視需要使用NaOH或HCl調(diào)整pH值。14.2,4-二硝基苯胼，[2,4-(O2N)2C6H3]NHNH2(DNPH)，70%(w/w)于不含有機(jī)物的試劑水中：將428.7mg之70%(w/w)DNPH溶液溶于100mL乙腈中，即制備成濃度為3.00mg/mL之溶液。15.萃取液：將64.3mL之1.0NNaOH和5.7mL之冰醋酸加入于900mL不含有機(jī)物的試劑水中，再以不含有機(jī)物的試劑水稀釋至1L，pH應(yīng)為4.93±0.02。（六）儲(chǔ)備標(biāo)準(zhǔn)溶液1■甲醛儲(chǔ)備標(biāo)準(zhǔn)溶液，約1000mg/L：取適當(dāng)量之甲醛確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)品，或甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液（約265ML于不含有機(jī)物的試劑水中稀釋。若無(wú)法取得甲醛確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)品,或甲醛確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)量無(wú)法確定時(shí)，需依下述步驟執(zhí)行進(jìn)行溶液的標(biāo)定。甲醛儲(chǔ)備溶液標(biāo)定：取25mL之0.1MNa2SO3溶液置于燒杯中并記錄pH值，加入25.0mL之甲醛儲(chǔ)備溶液，記錄pH值，以0.1NHCI滴定此混合溶液，使pH回復(fù)至原pH值。依下式計(jì)算甲醛的濃度：式中：NHCI=所使用HCI溶液之當(dāng)量濃度，[毫當(dāng)量（meq）/mL]（1mmoIeHCI=1meqHCI）mLHCI=標(biāo)定所使用之HCI溶液體積30.03=甲醛之分子量，mg/mmoIe醛類及酮類儲(chǔ)備標(biāo)準(zhǔn)溶液：取適當(dāng)量之標(biāo)準(zhǔn)品加入于90mL之乙腈中，稀釋至100mL，濃度即為1000mg/L。（七）標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)存：所有標(biāo)準(zhǔn)溶液需儲(chǔ)存于附鐵氟龍內(nèi)襯螺旋蓋的玻璃瓶中，應(yīng)盡量充滿，使瓶端空間盡量小，于4°C暗處保存，標(biāo)準(zhǔn)品可穩(wěn)定保存6周。應(yīng)經(jīng)常檢查儲(chǔ)備標(biāo)準(zhǔn)溶液是否有裂解或蒸發(fā)現(xiàn)象，尤其是制備校正標(biāo)準(zhǔn)品前應(yīng)作檢查。（八）校正標(biāo)準(zhǔn)品取儲(chǔ)備標(biāo)準(zhǔn)溶液，于不含有機(jī)物的試劑水中，配制至少五種不同濃度之包含每一目標(biāo)待測(cè)物的校正標(biāo)準(zhǔn)溶液，每一目標(biāo)待測(cè)物的低濃度，應(yīng)恰好或稍高于表一或表二中所列之方法偵測(cè)極限，其它校正標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，則可配合預(yù)期之真實(shí)樣品的濃度范圍作適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。醛酮化合物檢測(cè)方法一高效能液相層析法（NIEAR502.11C）第4頁(yè)，共20頁(yè).tw/niea/REFUSE/R50211C.htm2008/10/6六、采樣與保存（一） 參見(jiàn)「事業(yè)廢棄物采樣方法NIEAR118.00B」有關(guān)有機(jī)待測(cè)物相關(guān)之采樣與保存規(guī)范。（二） 采樣后之樣品需于4°C以下冷藏，但毒性化學(xué)物質(zhì)不在此限。水溶液樣品必須采樣后三天內(nèi)進(jìn)行衍生反應(yīng)及萃取步驟。固體萃取液樣品應(yīng)盡早檢測(cè)。所有衍生反應(yīng)后的樣品萃取液應(yīng)于制備后三天內(nèi)完成檢測(cè)。七、步驟（一）樣品萃取處理含固體及水溶液兩相樣品萃取法若樣品中包含固體，及水溶液樣品中所含固體物大于百分之一，則應(yīng)將水相與固相分離，依六、(二)節(jié)步驟分別保存，供日后檢測(cè)之用。若有需要，應(yīng)將廢棄物中固體顆粒磨碎減小顆粒之體積，以相當(dāng)于20倍固體樣品重的溶劑進(jìn)行萃取。萃取完成后，萃取液需以孔徑為0.6至0.8“m之玻璃纖維濾紙過(guò)濾。若樣品水相與萃取液互溶(混合后未顯示多層相)，則樣品中的水相直接加入于萃取液中，一并進(jìn)行分析；若樣品水相與萃取液不互溶，將水相與萃取液分別分析，檢測(cè)結(jié)果為按體積比例計(jì)算之平均濃度。若只檢測(cè)甲醛，則水樣及/或固體樣品萃取液需調(diào)整pH至5.0，以避免甲醛干擾物的形成。固體樣品萃取法(1)所有固體樣品應(yīng)充分?jǐn)嚢枋钩示鶆驙睿瑢?shù)枝、樹(shù)葉及石塊等異質(zhì)物丟棄不用。若樣品潮濕，則需取具有代表性的樣品，進(jìn)行樣品干重測(cè)定。固體樣品粒子若固體每克之表面積大于或等于3.1cm2或最窄處小于1cm，即可通過(guò)9.5mm之標(biāo)準(zhǔn)篩網(wǎng)，則不需減小顆粒尺寸，否則應(yīng)先壓碎、切割或磨細(xì)，使能通過(guò)9.5mm之標(biāo)準(zhǔn)篩網(wǎng)。壓碎、切割或磨細(xì)的方法不可產(chǎn)生熱，且樣品應(yīng)避免曝露于空氣，最好先將樣品及工具冷卻至4°C再用。①樣品干重測(cè)定：在某些狀況，樣品測(cè)試結(jié)果需以干重為計(jì)算依據(jù)，若需此種數(shù)據(jù)，則于秤取樣品進(jìn)行檢測(cè)的同時(shí)，另外秤一份樣品作為干重測(cè)定之用。需注意干燥烘箱應(yīng)放置在抽氣柜內(nèi)或附排氣裝置，高度污染的有害廢棄物樣品的干燥步驟可能導(dǎo)致嚴(yán)重的實(shí)驗(yàn)室污染。②秤取樣品作萃取之用后，立即秤取5至10g樣品于已在天平上歸零之坩堝內(nèi)，于105°C烘箱內(nèi)隔夜干燥，測(cè)定其干重百分比，于干燥瓶?jī)?nèi)冷卻后，秤重：（2）秤量25g固體樣品于一附鐵氟龍內(nèi)襯密封螺旋蓋或加壓密封蓋的500mL樣品瓶中，加入500mL萃取液（參見(jiàn)五、（五）15.節(jié)），以30rpm轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)18小時(shí)，進(jìn)行固體樣品萃取，再將萃取液用玻璃纖維濾紙過(guò)濾后，密封于樣品瓶?jī)?nèi)于4C儲(chǔ)存。每mL萃取液相當(dāng)于0.050g固體樣品。較小的樣品量可使用較小體積的萃取液，一般依固體重：萃取液體積=1：20的比例調(diào)整。毒性化學(xué)物質(zhì)樣品萃取法醛酮化合物檢測(cè)方法一高效能液相層析法（NIEAR502.11C）第5頁(yè)，共20頁(yè).tw/niea/REFUSE/R50211C.htm2008/10/6配合毒性化學(xué)物質(zhì)管制項(xiàng)目包括甲醛、乙醛、丁醛及巴豆醛，取適量樣品，依據(jù)其為固相或液相參照七（一）、1.或2.節(jié)步驟執(zhí)行萃取。水溶液樣品直接進(jìn)行下述步驟。（二）凈化和分離對(duì)基質(zhì)單純的樣品不一定需執(zhí)行樣品凈化步驟。本凈化步驟適用于各種樣品基質(zhì)型式，若因樣品基質(zhì)特殊而需使用特殊的凈化步驟，檢測(cè)人員必須確定流洗程序，并進(jìn)行甲醛添加樣品測(cè)定，其添加回收率應(yīng)大于85%，若樣品呈泡沫狀乳液時(shí)之回收率會(huì)較低。2.若樣品不是澄清液或不知樣品基質(zhì)的復(fù)雜性，則需將樣品于2500rpm離心10分鐘，倒出上清液，以玻璃纖維濾紙過(guò)濾收集于密封的容器中。（三）衍生反應(yīng)水樣：先預(yù)估水樣的取用量，使目標(biāo)待測(cè)物的預(yù)估濃度能落在校正濃度范圍內(nèi)（一般為100mL），將適當(dāng)量的樣品置入反應(yīng)瓶中（參見(jiàn)四、（二）節(jié)）。2.固體樣品：一般約需1至10mL萃取液（參見(jiàn)七、（一）節(jié)），若是較特殊的樣品，則取用量需由預(yù)備試驗(yàn)的結(jié)果決定之。若所使用的樣品或萃取液體積小于100mL,則應(yīng)使用不含有機(jī)物的試劑水將總液體之體積調(diào)整為100mL,稀釋前應(yīng)記錄樣品的原始體積。目標(biāo)待測(cè)物的衍生反應(yīng)和萃取,可依下述4.或5.節(jié)步驟執(zhí)行。液相-固相衍生反應(yīng)和萃取步驟（1）于除檢測(cè)甲醛外之目標(biāo)待測(cè)物樣品中,加入4mL檸檬酸鹽緩沖液,并以6M鹽酸或6M氫氧化鈉調(diào)整pH至3.0±0.1，再加入6mL之DNPH試劑,密封此樣品容器，放入以預(yù)先加熱至40°C之回轉(zhuǎn)振蕩器（參見(jiàn)四、（二）12.節(jié)）中一小時(shí)。調(diào)整振蕩器旋鈕，使反應(yīng)容器內(nèi)之液體和緩回轉(zhuǎn)搖晃。（2） 若只檢測(cè)甲醛，則加入4mL醋酸鹽緩沖液，并以6M鹽酸或6M氫氧化鈉調(diào)整pH至5.0±0.1，再加入6mL之DNPH試劑，密封此樣品容器，放入以預(yù)先加熱至40C之回轉(zhuǎn)振蕩器（參見(jiàn)四、（二）12.節(jié)）中一小時(shí)。調(diào)整振蕩器旋鈕，使反應(yīng)容器內(nèi)之液體和緩回轉(zhuǎn)搖晃。（3） 組裝連接至水壓吸氣器或真空泵上的固相萃取裝置，將內(nèi)部已填裝2g吸附劑之吸附管接到真空歧管上，于每一吸附管各以10mL之稀釋檸檬酸鹽緩沖液（10mL之1M檸檬酸鹽緩沖液溶于250mL不含有機(jī)物之試劑水中）流洗，進(jìn)行吸附管調(diào)整。（4） 于一小時(shí)反應(yīng)時(shí)間到達(dá)后，立即將樣品反應(yīng)容器自振蕩器上取出，并加入10mL飽和NaCl溶液。（5） 將反應(yīng)溶液全量轉(zhuǎn)置入吸附管，不能漏失，并以真空系統(tǒng)進(jìn)行抽氣，使溶液以3-5mL/min流量通過(guò)吸附管，當(dāng)所有液體皆通過(guò)吸附管后，再持續(xù)抽氣約1分鐘。（6） 以9mL乙腈加入吸附管系列進(jìn)行流洗步驟，并直接收集于10mL量瓶中，以乙腈稀釋至標(biāo)線，混合均勻后，轉(zhuǎn)置入樣品中并密封保存之，以備檢測(cè)。（因本步驟使用過(guò)量的DNPH,于完成流洗步驟后，吸附管的顏色仍是黃色，并不表示待測(cè)物的衍生物有殘留在管柱中）。液相-液相衍生反應(yīng)和萃取步驟(1)于除甲醛外之目標(biāo)待測(cè)物樣品中，加入4mL檸檬酸鹽緩沖液，并以6M鹽酸或6M氫氧化鈉調(diào)整pH至3.0±0.1，再加入6mL之DNPH試劑，密封此樣品容器，放入已預(yù)先加熱至40°C之回轉(zhuǎn)振蕩器中一小時(shí)。調(diào)整振蕩器旋鈕，使反應(yīng)容器內(nèi)之液體和緩回轉(zhuǎn)搖晃。醛酮化合物檢測(cè)方法一高效能液相層析法(NIEAR502.11C)第6頁(yè)，共20頁(yè).tw/niea/REFUSE/R50211C.htm2008/10/6若只檢測(cè)甲醛，則加入4mL醋酸鹽緩沖液，并以6M鹽酸或6M氫氧化鈉調(diào)整pH至5.0±0.1，再加入6mL之DNPH試劑，密封此樣品容器，放入已預(yù)先加熱至40C之回轉(zhuǎn)振蕩器中一小時(shí)。調(diào)整振蕩器旋鈕，使反應(yīng)容器內(nèi)之液體和緩回轉(zhuǎn)搖晃。于250mL分液漏斗中，每次以20mL二氯甲烷進(jìn)行樣品溶液萃取，連續(xù)執(zhí)行三次。若于萃取過(guò)程中形成泡沫狀乳液情況，則于2000rpm離心機(jī)離心10分鐘，將二層液分離，將泡沫乳液移除，再進(jìn)行下列萃取步驟。將所有二氯甲烷萃取液一同倒入125mL內(nèi)含5.0g無(wú)水硫酸鈉之三角錐瓶中，旋轉(zhuǎn)搖晃內(nèi)容物進(jìn)行溶液去除水份之干燥程序。將10mL濃縮管裝在500mL蒸發(fā)瓶上，組裝K-D濃縮裝置，參見(jiàn)分液漏斗液相一液相萃取法(NIEAR106.00C)方法之四、設(shè)備。將萃取液小心倒入蒸發(fā)瓶中，需注意不要將硫酸鈉固體倒入，以30mL二氯甲烷清洗三角錐瓶，并將此洗液一同倒入蒸發(fā)瓶中，不能有任何樣品漏失。(5)依分液漏斗液相－液相萃取法之K-D濃縮步驟，進(jìn)行萃取液濃縮，使最終體積為5mL,于進(jìn)行檢測(cè)前，將溶劑置換成乙腈。建議之層析檢測(cè)條件驗(yàn)證適用于水樣，土壤或廢棄物樣品。管柱：C-18, 4.6mmx250mm內(nèi)徑，5|jm粒徑移動(dòng)相梯度：70/30乙腈/水(v/v)，維持20分鐘由70/30乙腈/水改成100%乙腈，于15分鐘內(nèi)完成100%乙腈，維持15分鐘流率：1.2mL/分偵測(cè)器：紫外光，360nm樣品注射體積：20jL依下述步驟進(jìn)行移動(dòng)相的過(guò)濾，并去除其中溶解之氣體：于抽氣過(guò)濾裝置中，將每一種溶劑(水和乙腈)，以0.22jm之聚酯薄膜濾紙進(jìn)行過(guò)濾。于已過(guò)濾之溶劑中，通入流量為100mL/min氦氣10至15分鐘進(jìn)行除氣；或?qū)⒁堰^(guò)濾之溶劑置于三角錐瓶中，瓶口蓋上表玻璃，加熱至60°C,持續(xù)5至10分鐘，進(jìn)行除氣。于偵測(cè)器之后應(yīng)連接一固定背壓控制閥(350kPa)或0.25mm內(nèi)徑，15-30cm長(zhǎng)之鐵氟龍管，以避免移動(dòng)相發(fā)生漏氣現(xiàn)象。（3）將各移動(dòng)相裝入固定使用的容器中，依七、（四）1.節(jié)所列的分析條件，設(shè)定溶劑梯度更改的程序，將系統(tǒng)之高壓泵于起始溶劑混合比例（70%/30%之乙腈/水）以1.2mL/min流速，運(yùn)轉(zhuǎn)20至30分鐘，打開(kāi)偵測(cè)器，將偵測(cè)結(jié)果列印在記錄器的記錄紙上或似的輸出訊號(hào)記錄器上，以建立一穩(wěn)定的基線。（五）校正1.建立液相層析操作條件，使進(jìn)行液相-固相衍生反應(yīng)和萃取所得之各待測(cè)物滯留時(shí)間與表一中所列之值相近；或進(jìn)行液相-液相衍生反應(yīng)和萃取所得之各待測(cè)物滯留時(shí)間與表二中所列之值相近。各待測(cè)物滯留時(shí)間窗口的測(cè)定，參見(jiàn)「層析檢測(cè)方法總則」NIEAM102.01C之七、（五）節(jié)。建議之層析分析條件列于本方法七、（四）、1.節(jié)中。依與樣品制備相同之步驟，執(zhí)行校正標(biāo)準(zhǔn)溶液之衍生反應(yīng)及萃取步驟（參見(jiàn)本方法七、（三）4.或5.節(jié)）。如使用已衍生化標(biāo)準(zhǔn)品則依照「水中甲醛、乙醛和丙醛檢測(cè)方法－液相層析儀/紫外光偵測(cè)器法」五（六）、及七（一）、節(jié)標(biāo)準(zhǔn)溶醛酮化合物檢測(cè)方法一高效能液相層析法（NIEAR502.11C）第7頁(yè)，共20頁(yè).tw/niea/REFUSE/R50211C.htm2008/10/6液及檢量線制備規(guī)定執(zhí)行。執(zhí)行溶劑空白檢測(cè)以確保系統(tǒng)潔凈無(wú)污染。（檢測(cè)前，必需將樣品及標(biāo)準(zhǔn)品先回溫至室溫）。依本方法七、（四）節(jié)所建議之層析分析條件進(jìn)行經(jīng)樣品前處理之校正標(biāo)準(zhǔn)品之檢測(cè)，并將尖峰面積與校正標(biāo)準(zhǔn)溶液之濃度（單位為ug/L制表。將尖峰面積與對(duì)應(yīng)之注入儀器中之校正標(biāo)準(zhǔn)溶液之濃度制表，以計(jì)算各待測(cè)物于每一濃度之校正因子（參見(jiàn)八、（一）節(jié)計(jì)算公式），校正標(biāo)準(zhǔn)品之平均校正因子的百分相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（%RSD）應(yīng)20%，否則，即應(yīng)進(jìn)行系統(tǒng)檢查。若經(jīng)進(jìn)行系統(tǒng)檢查后，校正標(biāo)準(zhǔn)品查核仍無(wú)法符合規(guī)范需求，系統(tǒng)即應(yīng)進(jìn)行重新校正。若經(jīng)重新校正后仍無(wú)法符合規(guī)范需求，即應(yīng)重新制備校正標(biāo)準(zhǔn)品。每日于進(jìn)行樣品檢測(cè)前及檢測(cè)后，必須以一個(gè)或數(shù)個(gè)校正標(biāo)準(zhǔn)品，進(jìn)行校正曲線的確認(rèn)，確認(rèn)所得之校正因子必須落在最初建立之校正因子的±15%之內(nèi)，否則，即應(yīng)進(jìn)行系統(tǒng)檢查。若經(jīng)進(jìn)行系統(tǒng)檢查后，校正標(biāo)準(zhǔn)品查核仍無(wú)法符規(guī)范需求，系統(tǒng)即應(yīng)進(jìn)行重新校正。每檢測(cè)10個(gè)樣品或每批少于10個(gè)樣品時(shí)，必須進(jìn)行一個(gè)校正標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)，以確認(rèn)DNPH衍生物校正因子仍然落在最初校正因子的±15%之內(nèi)。（六）樣品檢測(cè)以高效能液相層析儀依本方法七、（四）節(jié)之條件進(jìn)行樣品檢測(cè)，表一及表二所列之滯留時(shí)間和方法偵測(cè)極限，即是依七、（四）節(jié)之條件針對(duì)待測(cè)物檢測(cè)而得。若尖峰面積超出校正曲線之線性范圍，則應(yīng)注入較小體積的樣品量；或者以乙腈稀釋此處理完成的樣品溶液，再重新檢測(cè)。于目標(biāo)待測(cè)物皆沖提出來(lái)，依八、（二）節(jié)中公式計(jì)算樣品中待測(cè)物的濃度，或是使用檢測(cè)方法中適當(dāng)?shù)挠?jì)算步驟。若因明顯的干擾因素而妨礙尖峰面積的計(jì)算，則需進(jìn)行樣品的再凈化步驟。八、結(jié)果處理（一）校正因子、平均校正因子、標(biāo)準(zhǔn)偏差、和百分相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差計(jì)算：式中：=由五個(gè)不同校正濃度所得之平均校正因子CFi=每一校正標(biāo)準(zhǔn)品之校正因子i（i=1-5）RSD=校正因子之相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差n=校正標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)醛酮化合物檢測(cè)方法一高效能液相層析法（NIEAR502.11C）第8頁(yè)，共20頁(yè).tw/niea/REFUSE/R50211C.htm2008/10/6（二） 依下式計(jì)算液體樣品之濃度式中：=待測(cè)物之平均校正因子Vs=樣品之mL數(shù)（無(wú)單位）（三） 依下式計(jì)算固體樣品之濃度式中：=待測(cè)物之平均校正因子Vex=樣品萃取液之mL數(shù)（無(wú)單位）九、質(zhì)量管理（一） 參考有機(jī)物萃取及樣品制備法中的質(zhì)量管理步驟，及「層析檢測(cè)方法總則」方法中的質(zhì)量管理規(guī)范。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立質(zhì)量保證計(jì)劃書(shū)，并據(jù)以執(zhí)行，并應(yīng)將所有數(shù)據(jù)及記錄建檔保存。（二） 依「層析檢測(cè)方法總則」方法中，七、步驟進(jìn)行必要的質(zhì)量管理程序，以執(zhí)行HPLC操作系統(tǒng)查核，如滯留時(shí)間窗口、校正確認(rèn)、樣品的層析檢測(cè)等的查核。（三） 起始績(jī)效查核：每一實(shí)驗(yàn)室應(yīng)針對(duì)樣品制備及后續(xù)配合的檢測(cè)方法，于潔凈的基質(zhì)中進(jìn)行目標(biāo)待測(cè)物的檢測(cè)，所得數(shù)據(jù)準(zhǔn)確度和精密度必須符合實(shí)驗(yàn)室的品保規(guī)范。若執(zhí)行新進(jìn)人員訓(xùn)練時(shí)或儀器功能改變時(shí)，必須持續(xù)執(zhí)行績(jī)效查核。參見(jiàn)「層析檢測(cè)方法總則」之九、節(jié)中的相關(guān)規(guī)定。（四）樣品制備及檢測(cè)之質(zhì)量管理：實(shí)驗(yàn)室必須針對(duì)樣品基質(zhì)影響，建立方法績(jī)效檢查（精密度、準(zhǔn)確度和偵測(cè)極限）之書(shū)面資料檔，對(duì)每十個(gè)或每一批次檢測(cè)樣品，至少需包含方法空白、基質(zhì)添加、重復(fù)樣品、實(shí)驗(yàn)室品管樣品等質(zhì)量管理樣品檢測(cè)數(shù)據(jù)資料。1.樣品基質(zhì)影響之績(jī)效檢查的書(shū)面資料檔，應(yīng)包含至少一個(gè)基質(zhì)添加和一對(duì)未添加的重復(fù)樣品；或者，一對(duì)基質(zhì)添加/基質(zhì)添加之重復(fù)樣品的檢測(cè)。需依據(jù)批次樣品基質(zhì)的基本背景資料，才能決定該制備及檢測(cè)重復(fù)樣品或基質(zhì)添加/基質(zhì)添加重復(fù)樣品。若預(yù)期樣品中含有目標(biāo)待測(cè)物，則實(shí)驗(yàn)室必須執(zhí)行一個(gè)基質(zhì)添加和一對(duì)未添加的重復(fù)樣品檢測(cè)；若預(yù)期樣品中不含目標(biāo)待測(cè)物，則實(shí)驗(yàn)室必須執(zhí)行一對(duì)基質(zhì)添加/基質(zhì)添加之重復(fù)樣品檢測(cè)。2.每十個(gè)或每一批次樣品檢測(cè)時(shí)，必須伴同實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理樣品之檢測(cè)，此質(zhì)量管制樣品之基質(zhì)，必須為與真實(shí)樣品基質(zhì)似之潔凈（管制）基質(zhì)，取用于檢測(cè)之體積或重量與真實(shí)樣品相同。于實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理樣品中添加與基質(zhì)添加樣品中相同之待測(cè)物及相同之濃度。當(dāng)基質(zhì)添加樣品檢測(cè)結(jié)果顯示有樣品基質(zhì)本身的干擾問(wèn)題時(shí)，則實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理樣品的檢測(cè)結(jié)果，可用來(lái)證明實(shí)驗(yàn)室于潔凈基質(zhì)樣品的檢測(cè)結(jié)果符合質(zhì)量規(guī)范。依本方法所執(zhí)行之多間實(shí)驗(yàn)室方法驗(yàn)證，所得之質(zhì)量管理規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)，參見(jiàn)表醛酮化合物檢測(cè)方法一高效能液相層析法（NIEAR502.11C）第9頁(yè)，共20頁(yè).tw/niea/REFUSE/R50211C.htm2008/10/6三。參見(jiàn)「層析檢測(cè)方法總則」之九、節(jié)中，對(duì)樣品制備和檢測(cè)的質(zhì)量管理步驟。（五）建議實(shí)驗(yàn)室針對(duì)本檢測(cè)方法，可采用特定的質(zhì)量保證規(guī)范，此規(guī)范應(yīng)符合實(shí)驗(yàn)室及樣品特性的需求，若有可能，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)參考樣品的檢測(cè)，并參加相關(guān)的績(jī)效評(píng)估能力比試計(jì)劃。十、精密度與準(zhǔn)確度（一）表一中所列為使用液相－固相萃取步驟而得之各待測(cè)物的方法偵測(cè)極限，系以不含有機(jī)物的試劑水為基質(zhì)，使用液相-固相萃取步驟而得。表二中所列為使用二氯甲烷液相－液相萃取步驟而得之各待測(cè)物的方法偵測(cè)極限，亦以不含有機(jī)物的試劑水為基質(zhì)，使用二氯甲烷萃取步驟而得。表一及表二中用來(lái)進(jìn)行添加的試劑水總體積為100mL,若使用較大的試劑水總體積，可得到較低的方法偵測(cè)極限值。本方法針對(duì)回收率的線性關(guān)系測(cè)試，系于不含有機(jī)物的試劑水中進(jìn)行添加，適用的濃度范圍為50-1000pg/L。本節(jié)之方法偵測(cè)極限和精密度及準(zhǔn)確度數(shù)據(jù)結(jié)果，系將待測(cè)物分成A和B二組，分別進(jìn)行添加，分別使用液相-固相和液相-液相萃取之層析圖譜，如圖一、二及圖三、四。（二）12家實(shí)驗(yàn)室曾用本方法，分別于不含有機(jī)物的試劑水、地下水二種基質(zhì)中，添加濃度范圍為30至2200pg/L的六種不同濃度的樣品，進(jìn)行測(cè)試，結(jié)果顯示，方法的準(zhǔn)確度和精密度，和待測(cè)物之濃度有直接相關(guān)，但和樣品的基質(zhì)無(wú)關(guān)。以添加濃度為變數(shù)，計(jì)算所得之平均回收率線性回歸方程式，及以平均回收率為變數(shù)，計(jì)算所得之總精密度和單一檢測(cè)精密度回歸方程式，列于表四。這些方程式可用來(lái)評(píng)估于檢測(cè)濃度范圍內(nèi)的任何濃度的平均回收率和精密度。十一、參考資料（一）U.S.EPA,DeterminationofCarbonylCompoundsbyHighPerformanceLiquidChromatography(HPLC),TestMethodsforEvaluatingSolidWaste,Method8315A,1996.U.S.OSHA,OSHASafetyandHealthStandards,GeneralIndustry(29CFR1910).OccupationalSafetyandHealthAdministration(OSHS),1976行政院環(huán)境保護(hù)署環(huán)境檢驗(yàn)所，廢棄物檢測(cè)方法，事業(yè)廢棄物采樣方法，NIEAR108.00B，1996。行政院環(huán)境保護(hù)署環(huán)境檢驗(yàn)所，廢棄物檢測(cè)方法，事業(yè)廢棄物檢測(cè)方法總則，NIEAR101.00C，1999。行政院環(huán)境保護(hù)署環(huán)境檢驗(yàn)所，廢棄物檢測(cè)方法，層析檢測(cè)方法總則，NIEAM102.01C，1999。(六)行政院環(huán)境保護(hù)署環(huán)境檢驗(yàn)所，廢棄物檢測(cè)方法，分液漏斗液相－液相萃取法，NIEAR106.00C，1996。(七)行政院環(huán)境保護(hù)署環(huán)境檢驗(yàn)所，水質(zhì)檢測(cè)方法，水中甲醛、乙醛和丙醛檢測(cè)方法－液相層析儀/紫外光偵測(cè)器法，NIEAW782.50B，1997。注：一、 參考資料中公告方法內(nèi)容及編碼以環(huán)保署最新公告為準(zhǔn)。醛酮類化合物檢測(cè)方法一高效能液相層析法(NIEAR502.11C)第10頁(yè)，共20頁(yè).tw/niea/REFUSE/R50211C.htm2008/10/6二、 廢液分類處理原則：檢測(cè)項(xiàng)目所產(chǎn)生之廢液，依照「非含氯有機(jī)溶劑」、「含氯有機(jī)溶劑」、「氰系廢液」及「一般重金屬?gòu)U液」處理原則辦理。三、安全事宜(一)本方法中所使用之每一試劑的毒性或致癌性，尚未確定；但每一化合物皆應(yīng)視為對(duì)健康有潛在危害的物質(zhì)，因此，應(yīng)以各種方式盡量減少對(duì)這些化合物的暴露。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具備有關(guān)法規(guī)中對(duì)本方法中所使用化合物的安全使用及處置方法的檔案，需提供物質(zhì)安全資料表，或其它有關(guān)實(shí)驗(yàn)室安全事宜給所有執(zhí)行本檢測(cè)方法的檢測(cè)人員。(二)甲醛暫時(shí)被認(rèn)定為已知或可疑的人類或哺乳類動(dòng)物致癌物。醛酮類化合物檢測(cè)方法一高效能液相層析法(NIEAR502.11C)第11頁(yè),共20頁(yè).tw/niea/REFUSE/R50211C.htm2008/10/6醛酮類化合物檢測(cè)方法一高效能液相層析法(NIEAR502.11C)第12頁(yè),共20頁(yè).tw/niea/REFUSE/R50211C.htm2008/10/6醛酮類化合物檢測(cè)方法一高效能液相層析法(NIEAR502.11C)第13頁(yè),共20頁(yè).tw/niea/REFUSE/R50211C.htm2008/10/6醛酮類化合物檢測(cè)方法一高效能液相層析法(NIEAR502.11C)第14頁(yè),共20頁(yè).tw/niea/REFUSE/R50211C.htm2008/10/6圖一液相-固相萃取A組標(biāo)準(zhǔn)品(濃度為625“g/L)之層析圖譜編號(hào)滯留時(shí)間(分)待測(cè)物之衍生物5.33甲醛11.68丙醛18.13丁醛427.93環(huán)己酮536.60庚醛642.99壬醛醛酮類化合物檢測(cè)方法一高效能液相層析法（NIEAR502.11C）第15頁(yè),共