實驗復習全集

實驗復習專題實驗一用顯微鏡觀察多種多樣的細胞一、顯微鏡操作技能及相關知識總結1.注意事項(1)調(diào)節(jié)粗準焦螺旋使鏡筒下降時，兩眼要注視物鏡與蓋玻片之間的距離，到快接近時(距離約為0.5cm)停止下降。(2)首先用低倍鏡觀察，找到要放大觀察的物像，移到視野中央，然后換上高倍物鏡。(3)換上高倍物鏡后，不能再轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋，而只能用細準焦螺旋來調(diào)節(jié)。(4)觀察顏色深的材料，視野應適當調(diào)亮，反之則應適當調(diào)暗；若視野中出現(xiàn)一半亮一半暗，則可能是反光鏡的調(diào)節(jié)角度不對；若觀察花生切片標本材料一半清晰一半模糊不清，則可能是花生切片厚薄不均造成的。2．目鏡與物鏡的結構及其長短與放大倍數(shù)之間的關系(1)物鏡越長，放大倍數(shù)越大，距裝片距離越近，如H1；反之則放大倍數(shù)越小，距裝片距離越遠，如H2。(2)目鏡越長，放大倍數(shù)越??；反之則放大倍數(shù)越大。3．高倍鏡與低倍鏡的比較物像大小看到細胞數(shù)目視野亮度物鏡與載玻片的距離視野范圍高倍鏡大少暗近小低倍鏡小多亮遠大4.顯微鏡成像特點顯微鏡下所成的像是倒立的虛像，即上下、左右均是顛倒的。細胞在顯微鏡下的像偏右上方，實際在載玻片上是偏左下方，要將其移至視野中央，應將載玻片向右上方移動，即物像位于哪個方向，則應向哪個方向移動裝片，即“同向移動”原則。但研究細胞質(zhì)環(huán)流方向時，顯微鏡下觀察到的方向和實際環(huán)流方向一致。5．顯微鏡的放大倍數(shù)

(1)顯微鏡的放大倍數(shù)是指物體的長度或?qū)挾鹊姆糯蟊稊?shù)，而不是面積或體積。(2)總的放大倍數(shù)是目鏡放大倍數(shù)與物鏡放大倍數(shù)的乘積。6．判斷污物存在的位置(1)污物可能存在的位置是：物鏡、目鏡或裝片。(2)判斷方法：分別移動載玻片、物鏡和轉(zhuǎn)動目鏡，觀察污物是否移動，來判斷污物所處的位置。應用指南：視野中細胞數(shù)目的相關計算。若視野中細胞成單行，則計算時只考慮長度或?qū)挾龋筛鶕?jù)放大倍數(shù)與視野范圍成反比的規(guī)律計算。若視野中充滿細胞，計算時應考慮面積的變化，可根據(jù)看到的實物范圍與放大倍數(shù)的平方成反比的規(guī)律計算。二、顯微觀察類實驗總結用顯微鏡觀察的方式分為兩種：1．原色觀察：即觀察材料不用染色，直接用顯微鏡觀察即可。相關實驗有：使用高倍顯微鏡觀察幾種細胞、用高倍顯微鏡觀察葉綠體、觀察植物細胞的吸水和失水等。2．染色觀察：即觀察材料要經(jīng)染色劑染色后才可用顯微鏡觀察。相關實驗有：觀察DNA和RNA在細胞中的分布、用高倍顯微鏡觀察線粒體、觀察細胞的有絲分裂或減數(shù)分裂等。實驗二檢測生物組織中糖類、脂肪和蛋白質(zhì)一、實驗原理生物組織中某些有機化合物能與某些化學試劑產(chǎn)生特定的顏色反應。3．蛋白質(zhì)＋雙縮脲試劑―→紫色

二、實驗流程圖示先根據(jù)選材預測實驗結果，然后再實驗驗證，因此本實驗屬驗證性實驗。1．還原糖的檢測和觀察結論：還原糖與斐林試劑在加熱的過程中生成磚紅色沉淀，說明組織樣液中有還原糖。注：溶液顏色的變化過程為淺藍色―→棕色―→磚紅色2．脂肪的檢測和觀察方法一：花生種子勻漿＋3滴蘇丹Ⅲ染液→橘黃色方法二：3．蛋白質(zhì)的檢測和觀察選材與制備：鮮肝提取液或黃豆?jié){濾液結論：說明組織樣液中存在蛋白質(zhì)4．淀粉的檢測和觀察實驗注意問題1．實驗材料的選擇(1)還原糖的鑒定實驗中，最理想的實驗材料是含糖量較高的生物組織(或器官)，而且組織的顏色較淺，易于觀察。可選用蘋果、梨、白色甘藍葉、白蘿卜等，但不能選用甜菜、甘蔗，因為它們所含的蔗糖是一種非還原糖；馬鈴薯因含淀粉較多也不能做實驗材料；不能選西瓜、血液(含葡萄糖)、含還原糖的綠色葉片等做實驗材料，以避免顏色的干擾。(2)脂肪的鑒定實驗中，實驗材料最好選富含脂肪的花生種子。(3)蛋白質(zhì)的鑒定實驗中，最好選用富含蛋白質(zhì)的生物組織，植物材料常用的是大豆，動物材料常用的是雞蛋的蛋清。2．做鑒定蛋白質(zhì)的實驗時，在鑒定之前，可以留出一部分樣液，以便與鑒定時樣液的顏色變化作對照，這樣可以增強說服力。3．蛋白質(zhì)要稀釋主要是防止蛋白質(zhì)與雙縮脲反應后黏固在試管內(nèi)壁上，使反應不徹底，也不易刷洗試管。比較項目斐林試劑雙縮脲試劑不同點使用方法甲液和乙液混合均勻后方可使用，且現(xiàn)配現(xiàn)用使用時先加A液再加B液呈色反應條件需水浴加熱不需加熱即可反應反應原理還原糖中的醛基被Cu(OH)2氧化，Cu(OH)2被還原為Cu2O具有兩個以上肽鍵的化合物在堿性條件下與Cu2＋反應生成絡合物顏色磚紅色紫色濃度乙液CuSO4溶液濃度為0.05g/mLB液CuSO4溶液濃度為0.01g/mL相同點都含有NaOH溶液、CuSO4溶液兩種成分，且所用NaOH溶液濃度都是0.1g/mL【辨析比較】斐林試劑與雙縮脲試劑的比較分析雙縮脲是一種物質(zhì)，其結構式為：因其結構含有肽鍵，所以在堿性環(huán)境中與Cu2＋反應生成紫色絡合物。因此把與其反應的NaOH溶液和CuSO4溶液稱為雙縮脲試劑。應用指南：該實驗原理、方法、步驟可用于對生物組織、消化液(如唾液)、食品(如奶粉)進行某種成分的檢測或鑒定，也可用于醫(yī)學上某些疾病的診斷，如糖尿病、腎炎等。實驗三觀察DNA和RNA在細胞中的分布(2)鹽酸可改變細胞膜的通透性，加速染色劑進入細胞，同時使染色質(zhì)中的DNA與蛋白質(zhì)分離。2．實驗流程沖洗涂片：用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片10s3．實驗現(xiàn)象及相關結論現(xiàn)象結論綠色明顯集中且接近細胞中央DNA主要分布于細胞核中

綠色周圍的紅色范圍較廣RNA廣泛分布于細胞質(zhì)中比較歸納教材中鑒定類實驗1．本實驗的注意事項(1)幾種液體在實驗中的作用①0.9%的NaCl溶液：保持口腔上皮細胞正常形態(tài)②8%的鹽酸： a.改變細胞膜的通透性

b．使染色體中DNA與蛋白質(zhì)分離③蒸餾水：a.配制染色劑；b.沖洗載玻片(2)關于甲基綠和吡羅紅溶液的配制：甲基綠吡羅紅染色液包括A液和B液，使用時現(xiàn)用現(xiàn)配。(3)由于綠色植物葉肉細胞含葉綠體，為避免色素的干擾，該實驗不宜選用綠色植物的葉肉細胞。(4)DNA和RNA在細胞核和細胞質(zhì)中都有分布，只是量的多少不同。2．某些特定化學物質(zhì)的檢測方法驗證鑒定類實驗常用的試劑或指示物作用現(xiàn)象碘液檢測、鑒定淀粉淀粉遇碘變藍Ca(OH)2溶液檢測、鑒定CO2CO2使Ca(OH)2溶液變渾濁斐林試劑

檢測、鑒定還原糖磚紅色沉淀重鉻酸鉀鑒定酒精變?yōu)榛揖G色雙縮脲試劑檢測、鑒定蛋白質(zhì)

紫色蘇丹Ⅲ/Ⅳ染液檢測、鑒定脂肪

橘黃色/紅色在“觀察DNA和RNA在細胞中分布”的實驗中，下列說法正確的是(

)A.染色時先用甲基綠染液，再用吡羅紅染液B.用8%的鹽酸目的之一是使DNA與蛋白質(zhì)分離，使DNA水解C.酒精燈烘干載玻片，可迅速殺死細胞，防止細胞死亡時溶酶體對核酸的破壞D.用高倍顯微鏡可以比較清楚地看到呈綠色的染色體和呈紅色的RNA分子實驗四觀察葉綠體和線粒體1.實驗原理(1)葉肉細胞中的葉綠體，呈綠色、扁平的橢球形或球形，散布于細胞質(zhì)中，可以在高倍顯微鏡下觀察它的形態(tài)。(2)線粒體普遍存在于動物細胞和植物細胞中，健那綠染液能使活細胞中的線粒體呈現(xiàn)藍綠色。通過染色，可以在高倍顯微鏡下觀察到處于生活狀態(tài)的線粒體的形態(tài)有短棒狀、圓球狀、線形、啞鈴形等。2．實驗過程(1)觀察葉綠體制作黑藻葉片臨時裝片→低倍鏡下找到葉片細胞→高倍鏡下觀察。(2)觀察線粒體取材→染色→制片→低倍鏡下找到口腔上皮細胞→高倍鏡下觀察。1.材料選擇普通光學顯微鏡能夠觀察的材料，必須是薄的、近乎透明的。觀察葉綠體時選擇黑藻，是因為葉片是綠色的單層細胞，不需加工即可進行觀察。2．制作裝片和鏡檢臨時裝片中的材料要隨時保持有水狀態(tài)，以保證細胞器的正常形態(tài)并能懸浮在細胞質(zhì)基質(zhì)中，否則，細胞失水收縮，將影響細胞器形態(tài)的觀察。規(guī)律總結：葉綠體的形態(tài)、運動、分布與功能的關系(1)葉綠體呈扁平的橢球形，利于運動。(2)葉綠體的運動使其在不同光照強度下改變方向，在強光下，以其側(cè)面朝向光源，避免被強光灼傷；在弱光下，以其正面朝向光源，以接受充足的光照。(3)葉綠體在細胞中的分布不均勻，葉肉細胞柵欄組織中的葉綠體比海綿組織中的多，可以接受更多的光照。實驗五觀察植物細胞的質(zhì)壁分離及復原1.實驗原理：成熟的植物細胞構成滲透系統(tǒng)可發(fā)生滲透作用。2．質(zhì)壁分離與復原實驗流程3．質(zhì)壁分離的原因(1)外因：外界溶液濃度>細胞液濃度(1)在實驗中，當質(zhì)壁分離現(xiàn)象出現(xiàn)后，觀察時間不宜過長，以免細胞因長期處于失水狀態(tài)而死亡，影響質(zhì)壁分離復原現(xiàn)象的觀察。(2)不選動物細胞做實驗材料是因為動物細胞無細胞壁，不會在失水時發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象。(3)本實驗所用的方法為引流法，采用了自身對照(前測和后測)。(4)當以可吸收的物質(zhì)做溶質(zhì)時(如甘油、尿素、KNO3、乙二醇等)，可出現(xiàn)質(zhì)壁分離和自動復原現(xiàn)象。(5)質(zhì)壁分離時，原生質(zhì)層的外界面是細胞膜。質(zhì)壁分離實驗的拓展應用及方法1．判斷細胞的死活5．鑒別不同種類的溶液(如KNO3和蔗糖溶液)實驗六探究影響酶活性的條件1.溫度對酶活性的影響(1)實驗原理②溫度影響酶的活性，從而影響淀粉的水解，滴加碘液，根據(jù)是否出現(xiàn)藍色及藍色的深淺來判斷酶的活性。(2)實驗設計思路(3)實驗設計程序本實驗應注意：①不宜選用斐林試劑，因為斐林試劑與還原糖只有在加熱的條件下才有磚紅色沉淀生成，而該實驗需嚴格控制不同的溫度；②也不宜選用過氧化氫酶催化H2O2分解，因為過氧化氫酶催化的底物過氧化氫在加熱的條件下分解也會加快。(2)實驗程序序號實驗操作內(nèi)容試管1試管2試管31注入等量過氧化氫酶溶液2滴2滴2滴2注入等量不同pH的溶液1mL蒸餾水1mL鹽酸1mLNaOH3注入等量的H2O2溶液2mL2mL2mL4觀察現(xiàn)象有大量氣泡產(chǎn)生無氣泡產(chǎn)生無氣泡產(chǎn)生關于酶的實驗設計或評價的題目1．需要嚴格按照實驗設計的原則如單一變量原則、等量原則等進行設計：根據(jù)實驗的單一變量原則，探究某一因子對實驗的影響時，其他無關變量要保證相同且為最佳條件，否則就不能得出正確的實驗結果。2．注意排除酶的特性本身的影響，例如專一性的影響，酶是否能夠催化底物反應；例如高效性可導致酶在短時間內(nèi)催化底物反應完成，而影響實驗結果，因此應將酶和底物先達到反應條件一段時間，使相應條件下酶的活性影響到一定程度后，再混合繼續(xù)實驗。實驗七探究酵母菌細胞的呼吸方式1.實驗原理(1)酵母菌在有氧和無氧的條件下都能生存，屬于兼性厭氧菌。酵母菌進行有氧呼吸能產(chǎn)生大量的CO2，在進行無氧呼吸時能產(chǎn)生酒精和CO2。(2)CO2可使澄清的石灰水變混濁，也可使溴麝香草酚藍水溶液由藍變綠再變黃。根據(jù)石灰水混濁程度或溴麝香草酚藍水溶液變成黃色的時間長短，可以檢測酵母菌培養(yǎng)液中CO2的產(chǎn)生情況。(3)橙色的重鉻酸鉀溶液，在酸性條件下可與乙醇發(fā)生化學反應，變成灰綠色。2．實驗流程實驗中的關鍵步驟(1)通入A瓶的空氣中不能含有CO2，以保證使第三個錐形瓶中的澄清石灰水變混濁的是由酵母菌有氧呼吸產(chǎn)生的CO2所致。(2)B瓶應封口放置一段時間，待酵母菌將B瓶中的氧氣消耗完后，再連通盛有澄清石灰水的錐形瓶，確保是無氧呼吸產(chǎn)生的CO2通入澄清的石灰水中。該實驗為對比實驗，有氧和無氧條件下的實驗都為實驗組。實驗八綠葉中色素的提取和分離1.實驗原理(1)葉綠體中的色素能溶解在有機溶劑無水乙醇(或丙酮)中，所以用無水乙醇可提取葉綠體中的色素。(2)色素在層析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子隨層析液在濾紙條上擴散得快，溶解度低的色素分子隨層析液在濾紙條上擴散得慢，因而可用層析液將不同色素進行分離。2．實驗流程基本技術要求(1)實驗成功的關鍵①葉片要新鮮、顏色要深綠。②濾液收集后，要及時用棉塞將試管口塞緊，以免濾液揮發(fā)。③濾液細線不僅要細、直，而且要含有比較多的色素。④濾紙上的濾液細線不能沒入層析液中。(2)注意事項①制備定性濾紙條時，注意雙手盡量不要接觸紙面，以免手上的油脂或其他臟物污染濾紙。②根據(jù)燒杯的高度制備濾紙條，讓濾紙條長度高出燒杯1cm，高出的部分做直角彎折。③畫濾液細線時，用力要均勻，速度要適中。④研磨要迅速、充分。a.因為無水乙醇容易揮發(fā)；b.為了使葉綠體完全破裂，從而能提取較多的色素；c.葉綠素極不穩(wěn)定，能被活細胞中的葉綠素酶水解而破壞。⑤制備濾紙條時，要將濾紙條的一端剪去兩角，這樣可以使色素在濾紙條上擴散均勻，便于觀察實驗結果。(1)從色素帶的寬度可推知色素含量的多少；(2)從色素帶的位置可推知色素在層析液中溶解度大小；(3)在濾紙上距離最近的兩條色素帶是葉綠素a與葉綠素b，距離最遠的兩條色素帶是胡蘿卜素與葉黃素。實驗九觀察植物細胞的有絲分裂一、實驗原理1．植物的分生組織細胞有絲分裂較為旺盛。2．有絲分裂各個時期細胞內(nèi)染色體行為變化不同，根據(jù)各個時期內(nèi)染色體的變化情況，識別該細胞處于有絲分裂的哪個時期。3．細胞核內(nèi)的染色體(質(zhì))易被堿性染料著色。二、實驗流程圖示洋蔥根尖培養(yǎng)：實驗前3～4d，待根長到5cm1.實驗成功的關鍵(1)剪取生長旺盛、帶有分生區(qū)的根尖，同時注意剪取的時間，一般在上午10點至下午2點左右，此時分生區(qū)細胞分裂旺盛。(2)解離充分，使細胞分離開，是實驗成功的必備條件。(3)染色液的濃度和染色時間必須掌握好，應注意染色不能過深，否則鏡下一片紫色，無法觀察。(4)壓片時用力必須恰當，過重會將組織壓爛，過輕則細胞未分散，二者都將影響觀察。2．本實驗的注意事項(1)解離完一定要漂洗，目的是洗去多余的鹽酸，防止解離過度和影響染色。(2)將染色質(zhì)和染色體染色，時間不要太長，3～5min。(3)加蓋玻片時，注意防止產(chǎn)生氣泡。(4)用顯微鏡觀察裝片時，要遵循“先低后高”的原則。(5)觀察時應先找到呈正方形的分生區(qū)細胞，觀察時，要注意邊觀察邊移動裝片，觀察有絲分裂各個時期。(6)在觀察裝片時，裝片的移動方向與物像的移動方向相反。實驗十觀察蝗蟲精母細胞減數(shù)分裂固定裝片1.實驗原理蝗蟲的精母細胞進行減數(shù)分裂形成精細胞，再形成精子。此過程要經(jīng)過兩次連續(xù)的細胞分裂：減數(shù)第一次分裂和減數(shù)第二次分裂。在此過程中，細胞中的染色體形態(tài)、位置和數(shù)目都在不斷地發(fā)生變化，因而可據(jù)此識別減數(shù)分裂的各個時期。2．實驗流程1.判斷各期細胞的依據(jù)是減數(shù)分裂過程中各個時期染色體變化的特點。2．可通過觀察多個精原細胞的減數(shù)分裂，推測出一個精原細胞減數(shù)分裂過程中染色體的連續(xù)變化。原因是：

(1)同一生物的細胞所含遺傳物質(zhì)相同，增殖過程相同。

(2)同一時刻不同細胞可能處于不同細胞周期的不同階段。3．先用低倍鏡觀察找到各期細胞，再用高倍鏡仔細觀察染色體的形態(tài)、位置和數(shù)目。小鼠常被用作研究