免疫學(xué)檢驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)操作程序

廣州中醫(yī)藥大學(xué)附屬南海婦產(chǎn)兒童醫(yī)院廣東省佛山市南海區(qū)婦幼保健院文件編號(hào)NHFY-MI-JY-SH-001版本A/0檢驗(yàn)操作管理手冊(cè)頁(yè)碼2/5免疫學(xué)檢驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)量控制的標(biāo)準(zhǔn)操作程序生效日期2005-6-11.0目的：室內(nèi)質(zhì)量控制（IQC）是由實(shí)驗(yàn)室的工作人員采用一系列的方法，連續(xù)的評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室工作的可靠程度，確立報(bào)告能否發(fā)出。旨在檢測(cè)、控制本室常規(guī)工作的精密度，并檢測(cè)其準(zhǔn)確度的改變，提高本室常規(guī)工作中批間、批內(nèi)標(biāo)本檢測(cè)的一致性。2.0分析前質(zhì)控:2.1人員培訓(xùn):實(shí)驗(yàn)是人操作的，因此檢驗(yàn)人員需經(jīng)過培訓(xùn)，熟練掌握本專業(yè)如下幾方面的技術(shù)知識(shí)：2.1.1檢驗(yàn)項(xiàng)目的基本原理（ELISA原理）；2.1.2臨床意義；2.1.3熟悉檢測(cè)技巧，了解易出差錯(cuò)的環(huán)節(jié)及難點(diǎn)；2.1.4熟悉檢測(cè)試劑性能（包括試劑盒組成，包被片段及其組成）；2.1.5熟悉檢測(cè)儀器的原理及性能；掌握數(shù)據(jù)處理的能力和質(zhì)量控制知識(shí)。2.1.6某些特殊項(xiàng)目的檢測(cè)如抗HIV等需經(jīng)有關(guān)部門組織的專門培訓(xùn)班，考試合格后持證上崗。2.2室內(nèi)質(zhì)控血清：采用衛(wèi)生部或省臨床檢驗(yàn)中心制備的質(zhì)控血清2.3試劑盒選擇衛(wèi)生部規(guī)定乙肝試劑，丙肝試劑，艾滋病試劑，梅毒試劑及血型試劑必須使用經(jīng)衛(wèi)生部生物制品檢定所檢定合格，并貼有防偽標(biāo)簽的產(chǎn)品。2.4試劑盒評(píng)價(jià):試劑評(píng)價(jià)需要有權(quán)威的血清考核盤（Panel）進(jìn)行檢測(cè)，價(jià)格昂貴，操作繁瑣，一般實(shí)驗(yàn)室不易開展，可以通過以下信息，了解試劑質(zhì)量。2.4.1根據(jù)該試劑生物制品鑒定所的批批檢定報(bào)告，了解其質(zhì)量水平，按照質(zhì)量計(jì)劃選擇靈敏度高的或特異性高的試劑；2.4.2通過詢問試劑包被物的組成，如原料來(lái)源（基因工程或合成多肽），片段的組合（按比例混合或化學(xué)合成），片段的長(zhǎng)短等判斷試劑的優(yōu)劣；2.4.3參考室間質(zhì)評(píng)報(bào)告中對(duì)試劑的評(píng)價(jià)結(jié)果，了解不同試劑的質(zhì)控成績(jī)。2.4.4根據(jù)權(quán)威部門發(fā)布的試劑評(píng)價(jià)結(jié)果，了解市場(chǎng)上試劑的質(zhì)量?jī)?yōu)劣。2.5儀器質(zhì)控:2.5.1移液器：ELISA加樣量?。?-100ｕl），其準(zhǔn)確性直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，利用稱重法檢查：吸取刻度指示量的水，萬(wàn)分之一天平稱重后計(jì)算吸量是否準(zhǔn)確，一般應(yīng)在±10%以內(nèi)；2.5.2水浴箱：經(jīng)常檢查水浴箱溫度計(jì)所示的溫度和水中（或溫箱內(nèi)）實(shí)測(cè)溫度是否一致，允許有±1℃的誤差；2.5.3洗板機(jī)：每個(gè)廠家設(shè)置洗板后的殘留液有各自的規(guī)定一般不超過2ul，人工扣板時(shí)，墊紙不濕，定期檢查管孔是否堵塞；2.5.4酶標(biāo)儀：經(jīng)常維護(hù)其光學(xué)部分，防止濾光片霉變，定期檢測(cè)校正，使其保持良好的工作性能。酶標(biāo)質(zhì)控血清的來(lái)源及測(cè)定值并注明是否在控；簽上實(shí)驗(yàn)者姓名及審核者姓名。4.2.2如試驗(yàn)結(jié)果對(duì)臨床診斷有決定意義，其樣本應(yīng)保留，至少與病歷保存期一致4.3定性試驗(yàn)ELISA定性試驗(yàn)的臨床意義在于是否檢出病原體，與檢出量無(wú)關(guān)，因此QC要保證試驗(yàn)的靈敏度和特異性。生化的質(zhì)控圖方法僅能觀察靈敏度而無(wú)法監(jiān)控特異性。建議使用臨界值血清界定法：將試劑盒所設(shè)的陰陽(yáng)性對(duì)照作為內(nèi)對(duì)照指示反應(yīng)；另設(shè)臨界值、高值質(zhì)控血清，正常人血清作為外對(duì)照，與標(biāo)本同時(shí)檢測(cè)，臨界值S/C.O≥1，高值質(zhì)控血清S/C.O≥10，正常人血清A值在0.05~0.07之間。陽(yáng)性質(zhì)控血清失控（臨界值為靈敏度，高值為"HOOK"效應(yīng)監(jiān)控）應(yīng)重做陰性標(biāo)本；陰性對(duì)照失控應(yīng)重做陽(yáng)性標(biāo)本。以表格式記錄每塊板的外對(duì)照實(shí)驗(yàn)結(jié)果，作為QC資料存檔。4.4定量試驗(yàn)ELISA定量試驗(yàn)常見于腫瘤因子（如AFP，CEA，CA系列），激素類，免疫球蛋白類，這些物質(zhì)在體內(nèi)有一定的量（正常范圍），超出這個(gè)量才呈病理情況，故需定量測(cè)定。定量試驗(yàn)的質(zhì)控方法可參考生化方式。4.5"即刻性"質(zhì)控在開始進(jìn)行質(zhì)控時(shí)，只需要有3個(gè)質(zhì)控血清測(cè)定值即可進(jìn)行質(zhì)控。當(dāng)這組數(shù)據(jù)擴(kuò)大到20次有效值時(shí)就可以計(jì)算RCV的X，s。方法：4.5.1先將測(cè)定值從小到大排列，X1最小，Xn最大；4.5.2計(jì)算X和s；4.5.3計(jì)算SI上限值和下限值。SI上=（X最