應(yīng)用環(huán)糊精包合技術(shù)提高酮康唑的熱穩(wěn)定性

應(yīng)用環(huán)糊精包合技術(shù)提高酮康唑的熱穩(wěn)定性

酮康唑（kcz）是第一個(gè)口服咪唑類(lèi)抗真菌藥物，對(duì)各種類(lèi)型的細(xì)菌、皮膚細(xì)菌、酵母菌和其他致病性細(xì)菌都有很強(qiáng)的抑制作用。但由于其不溶于水且結(jié)構(gòu)中有酰胺基和醚基,極易氧化變色,化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)用不同方法考察,探索出制備酮康唑β-環(huán)糊精(β-CD)包合物的方法,以提高酮康唑的溶解度,增加其穩(wěn)定性。經(jīng)薄層色譜、紫外光譜、差熱分析及X-射線(xiàn)衍射等方法證實(shí)包合物形成,并對(duì)包合物的溶解度及其軟膏劑的穩(wěn)定性進(jìn)行了對(duì)照實(shí)驗(yàn)。1差熱效應(yīng)的測(cè)定紫外分光光度計(jì)(UV-940瑞士);LCT-1差熱天平(北京光學(xué)儀器廠);D/MAX-RCX光粉晶衍射儀(日本)。酮康唑(南京第二制藥廠);β-環(huán)糊精(廣東郁南環(huán)糊精廠),其余試劑均為分析純。2方法2.1包組分制備條件的確定2.1.1子間碰撞的濃度酮康唑溶于熱乙醇,β-環(huán)糊精溶于水,為增加分子間的碰撞,應(yīng)盡量提高溶液的濃度,而兩種溶液混合不應(yīng)產(chǎn)生沉淀。實(shí)驗(yàn)證明,當(dāng)乙醇和水的體積比為2∶3時(shí),兩者可以完全溶解,不產(chǎn)生沉淀。2.1.2攪拌時(shí)間的選擇實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了3～8h,在各包合時(shí)間測(cè)定包合率,確定攪拌5h包合率最高且重現(xiàn)性好,見(jiàn)表1。2.1.3摩爾比投料制備包合物酮康唑與β-CD按1∶0,1∶1,1∶2,2∶1,1∶3摩爾比投料,制備包合物測(cè)定包合率,結(jié)果表明主客分子比為1∶1時(shí)包合率最高,見(jiàn)表2。2.2酮康唑和-cd的制備精密稱(chēng)定酮康唑531.44mg,溶于20mL無(wú)水乙醇中,于恒溫磁力加熱攪拌器上50℃攪拌至全溶,將1135.00mgβ-CD溶于30mL蒸餾水中,同溫?cái)嚢枞芙夂?分兩次緩緩滴入酮康唑醇溶液中,每次約15mL,兩次間隔15～20min,加蓋攪拌3h,再取蓋攪拌2h,揮散乙醇,使溶液濃縮至約30mL,置冰箱中過(guò)夜,得白色混懸液,抽濾,沉淀物依次用50mL無(wú)水乙醇和蒸餾水快速洗去未包合的酮康唑和β-CD后,低溫避光干燥即得,收集乙醇洗滌液待測(cè)定回收率。2.3包合物的制備以逆向混合攪拌法,主客分子比1∶1,50℃,攪拌5h,制備6批包合物。經(jīng)測(cè)定包合率在71.59%～73.63%之間,RSD為1.08%,平均回收率為96.03%,RSD為1.26%。2.4包組分的含量是由包組分的含量決定的2.4.1測(cè)量波長(zhǎng)的選擇取酮康唑用無(wú)水乙醇稀釋成0.1mg·mL-1的溶液,在紫外區(qū)掃描,在295nm處有最大吸收,而β-CD無(wú)吸收。2.4.2標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)c精密稱(chēng)定已恒定的酮康唑150mg,置100mL量瓶中,用無(wú)水乙醇溶解并稀釋至刻度,分別吸取上述溶液1.0,1.5,2.0,2.5,3.0,3.5mL,置25mL量瓶中,用無(wú)水乙醇稀釋至刻度,以無(wú)水乙醇為空白,在295nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度,得回歸方程為C=283.6A+1.0(r=0.9999)。2.4.3包合物含量測(cè)定精密稱(chēng)定包合物100mg,用50mL無(wú)水乙醇溶解,過(guò)濾,吸取續(xù)濾液2mL于25mL量瓶中,用無(wú)水乙醇稀釋至刻度,于295nm處測(cè)其吸光度,由回歸方程計(jì)算,得包合物的含量及包合率。同法亦可得酮康唑的回收率。2.5包組分的物相鑒定2.5.1白包合物、藥物分別按“2.2”項(xiàng)方法制備含藥包合物、空白包合物、藥物,可見(jiàn)含藥包合物為白色疏松粉末;而空白包合物(即β-CD)為四方塊狀結(jié)晶,有熒光;藥物為細(xì)粉末狀,顏色微暗。2.5.2包合物的紫外掃描分別將β-CD,酮康唑和包合物用無(wú)水乙醇配成溶液,進(jìn)行紫外光譜掃描,結(jié)果β-CD無(wú)紫外吸收,酮康唑和包合物的紫外掃描圖譜一致,說(shuō)明包合物無(wú)化學(xué)鍵,僅為物理包合作用。再將一定量β-CD,酮康唑和包合物用水溶解后,過(guò)濾,取續(xù)濾液于紫外區(qū)掃描。β-CD水溶液在紫外區(qū)無(wú)吸收,酮康唑不溶于水,紫外區(qū)無(wú)吸收,而包合物溶于水,紫外區(qū)有明顯吸收峰。2.5.3物理混合物測(cè)試X-射線(xiàn)衍射常用于鑒定晶體化合物各晶體物質(zhì)在相同的角度處具有的不同晶面間距,從而顯示不同的衍射峰。對(duì)酮康唑、β-CD及二者的物理混合物和包合物4種物質(zhì)進(jìn)行測(cè)試,測(cè)試條件:高壓50kV,管流80mA。結(jié)果可見(jiàn),混合物的衍射峰為酮康唑和β-CD衍射峰的疊加,表明混合物為酮康唑和β-CD的機(jī)械混合,而包合物的衍射圖譜某些峰明顯消失、減弱或位移,表明晶型改變,包合物呈一新的物相,從而判斷包合成功。2.5.4紙速、標(biāo)準(zhǔn)條件工作條件:天平50mg,差熱50μV,溫度20mV均為滿(mǎn)刻度;升溫速度:5℃·min-1,紙速2mm·min-1。結(jié)果上述4種物質(zhì)的熱分析曲線(xiàn)各不相同,但物理混合物是酮康唑和β-CD兩組熱分析曲線(xiàn)的疊加,而包合物呈一新的熱分析圖,酮康唑在353℃的吸熱峰消失,表明酮康唑和β-CD形成了包合物。2.5.5醇溶液的展開(kāi)結(jié)果硅膠G-CMC板,展開(kāi)劑:甲醇-磷酸鹽緩沖液(pH7.4)=4∶1,展距為10cm,碘化鉍鉀為顯色劑,噴霧顯色,結(jié)果:酮康唑和包合物醇溶液的展開(kāi)斑點(diǎn)相同,Rf=0.74,說(shuō)明包合物中的酮康唑與未經(jīng)包合的酮康唑一致,成分未見(jiàn)變化;酮康唑水溶液沒(méi)有展開(kāi)斑點(diǎn),而包合物水溶液有展開(kāi)斑點(diǎn),Rf=0.79,說(shuō)明酮康唑不溶于水,而包合后酮康唑在水中溶解度增加。3結(jié)果3.1溶解度、包合物的測(cè)定分別取過(guò)量的酮康唑和包合物放入10mL量瓶中,加蒸餾水至刻度,37℃振蕩2h,過(guò)濾,取續(xù)濾液4mL于25mL量瓶中,加無(wú)水乙醇至刻度于295nm處測(cè)吸光度A,計(jì)算二者的溶解度,得酮康唑?yàn)?.0μg·mL-1,包合物為119μg·mL-1,溶解度增大了約40倍。3.2酮康唑唇膏包合物的變色采用莊志銓等設(shè)計(jì)的O/W型軟膏基質(zhì)制成軟膏,在相同包裝和室溫條件下放置,未包合的酮康唑軟膏1周后上層即有粉紅色斑點(diǎn),1月后酮康唑軟膏完全變?yōu)榉奂t色,而包合物軟膏顏色一直無(wú)變化。說(shuō)明包合物軟膏穩(wěn)定性明顯好于未包合的酮康唑軟膏。4熱乙醇溶解法4.1酮康唑不溶于水,溶于酸性溶液和乙醇。據(jù)文獻(xiàn)方法酮康唑溶于酸性溶液中與β-CD包合,但酮康唑在酸性溶液中加熱攪拌極不穩(wěn)定,溶液很快呈黃色,而采用熱乙醇溶解則較穩(wěn)定。實(shí)驗(yàn)中用常規(guī)方法把酮康唑的醇溶液加入β-CD的水溶液中,當(dāng)加入到一定量,即析出酮