足癬的感染現(xiàn)狀及防治措施

足癬的感染現(xiàn)狀及防治措施

足虱是一種常見的臨床皮膚感染疾病，由皮膚上的絲狀細(xì)菌引起。該病的真菌主要累及皮膚、甲殼素和毛發(fā)。臨床上主要的致菌病有紅色毛癬菌、石膏樣小孢子菌和須癬毛癬菌,近年來白色念珠菌及其他酵母菌感染有增多趨勢。學(xué)生多是集體生活加之體育活動較多使其成為真菌尤其是淺部真菌感染的一個特殊群體。本課題從多方面對足癬進(jìn)行研究,以期為足癬病原菌的分離、培養(yǎng)、鑒定提供指導(dǎo)并為足癬的診斷、治療及藥物選擇提供參考。1材料和方法1.1來自本地格式的資源于2008年9月份,取本校在校生足癬癥狀典型者皮屑標(biāo)本60例。1.2抗菌藥物及試劑沙氏葡萄糖蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基(SDA)、MH培養(yǎng)基、乳酸酚棉蘭染液、Rosco藥敏紙片:酮康唑(KTC)、氟康唑(FTC)、二性霉素B(AMB)、制霉菌素(NYS)、甲氧芐啶(TMP)均購自杭州微生物試劑有限公司;革蘭染色染液(珠海貝素生物技術(shù)有限公司);真菌培養(yǎng)箱(上海博迅實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠)。1.3方法1.3.1玻片溶液的溶解取皮屑于載玻片上,加10%KOH2~3滴,蓋上蓋玻片,在酒精燈火焰上稍加熱往返數(shù)次,以加速角質(zhì)溶解。放置10min后鏡檢。鏡下形態(tài)疑似白色念珠菌者,分離培養(yǎng)后革蘭染色進(jìn)一步鏡檢鑒定。1.3.2等間距1.3.2.1.傾斜培養(yǎng)基培養(yǎng)1.3.3藥物過敏試驗1.3.3.1.懸掛式細(xì)菌懸浮液的制備1.3.3.2洛可可晶體傳播法2結(jié)果2.1koh消化后的顯微鏡檢查結(jié)果KOH消化后鏡檢47例陽性,可見典型菌絲或孢子,真菌培養(yǎng)54例陽性,可見典型菌落,見圖1~2。2.2識別細(xì)菌根據(jù)菌落的形態(tài)、顏色及鏡下特點(diǎn)可鑒定出的菌種有:紅色毛癬菌,白色念珠菌,須癬毛癬菌,石膏樣小孢子菌,孢子絲菌,見表1,圖3~4。2.3細(xì)菌耐藥試驗藥敏結(jié)果顯示:紅色毛癬菌對FTC最敏感,對NYS完全耐藥;白色念珠菌和須癬毛癬菌均對KTC最敏感,前者對FTC、AMB、NYS均表現(xiàn)出敏感,后者表現(xiàn)出不同程度的耐藥;孢子絲菌同樣對KTC最敏感,卻表現(xiàn)出對FTC完全耐藥。此外,實驗同時還顯示各種真菌對抗細(xì)菌藥TMP完全耐藥。具體見表2。3koh的消化后及安全性評價真菌性足癬病是常見臨床皮膚病之一,也是大學(xué)生常見的傳染性皮膚病。青島大學(xué)地處東部沿海城市青島,其潮濕的氣候使學(xué)生的足癬患病情況較為嚴(yán)重,而防治的前提則需全面了解該地區(qū)致病真菌的流行病學(xué)特點(diǎn),包括發(fā)病率、致病菌種類及分布等。由于足癬病原真菌感染性強(qiáng),采集標(biāo)本時為防止操作者被感染,應(yīng)用鑷子采取皮屑,嚴(yán)禁用手直接拿取。鑒定足癬病原菌的方法主要有KOH消化后鏡檢法和病原菌分離培養(yǎng)法。本實驗中,KOH消化直接鏡檢檢出陽性標(biāo)本47例,分離培養(yǎng)法檢出陽性標(biāo)本54例,兩者結(jié)果一致性較好。真菌培養(yǎng)法用時較長,步驟繁瑣,KOH消化后鏡檢快速簡單,是目前臨床常用的方法,而培養(yǎng)法方便進(jìn)行藥敏試驗,指導(dǎo)用藥,具有顯著臨床意義,所以真菌培養(yǎng)法依然無法取代。KOH消化后鏡檢以組織細(xì)胞為背景,可清楚地觀察到真菌的菌絲及孢子。若觀察到假菌絲為白色念珠菌的鑒定依據(jù)。消化的時間應(yīng)控制在10min左右,時間過短組織消化不完全,時間過久組織會被破壞,這樣都會破壞鏡檢觀察背景,影響檢出結(jié)果。目前,抗真菌藥物有限,且耐藥趨勢有所增長,因此,加強(qiáng)真菌感染的控制及耐藥監(jiān)測,有效防治真菌感染及提高治愈率已成為目前醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一個重要問題。治療足癬常用的抗真菌藥物包括:唑類、丙烯胺類、硫脲類、嗎啉類、吡酮類等,其中丙烯胺類和唑類藥物臨床應(yīng)用最廣。為了更好地結(jié)合臨床,筆者選用了皮膚科臨床常用的制霉菌素、酮康唑、氟康唑、傳統(tǒng)抗真菌藥二性霉素B,此外,本實驗特選取了抗細(xì)菌性藥物甲氧芐啶做比較。從表2可以看出白色念珠菌對二性霉素B、制霉菌素、氟康唑、酮康唑都敏感,而其他4種菌對這幾種抗真菌藥的敏感程度不一:紅色毛癬菌對酮康唑、氟康唑、二性霉素B敏感,而對制霉菌素耐藥;須癬毛癬菌則主要對酮康唑敏感;石膏樣小孢子菌除對酮康唑表現(xiàn)中介外,其余均耐藥;孢子絲菌對酮康唑、制霉菌素敏感,對二性霉素B中介,而對其他均顯示耐藥。亦可見酮康唑?qū)@5種菌均有較好的抑制作用,而其他幾種藥對各菌的抑制程度差異較大;而抗細(xì)菌性藥物甲氧芐啶的藥敏試驗結(jié)果顯示各種真菌對甲氧芐啶均耐藥。需要指出的是:體外藥物敏感試驗的結(jié)果可以為臨床上選擇用藥提供參考,但是由于藥物的抗菌活性還會受到體內(nèi)多種因素的影響,如藥物吸收代謝的個體差異等,因此體外藥物敏感試驗的結(jié)果有時并不能夠完全反映體內(nèi)的真實抗菌情況。因此還需要加大樣本量及更多地結(jié)合臨床療效進(jìn)行分析研究。用取菌針取皮屑少許,接種于沙氏葡萄糖蛋白胨瓊脂斜面培養(yǎng)基上,用取菌針尖端稍向下穿刺,將皮屑帶入培養(yǎng)基內(nèi)部,置于25℃孵箱培養(yǎng),于10d后觀察菌落。1.3.2.2普通平板分離和培養(yǎng)將斜面培養(yǎng)基上生長的菌落轉(zhuǎn)種于沙氏平板培養(yǎng)基上,于25℃孵箱中培養(yǎng)4d后,觀察菌落特點(diǎn),并對培養(yǎng)基正反面拍照,初步確定真菌菌種。1.3.2.菌株的制備和鑒定制作小培養(yǎng)基,挑取普通平板上的菌穿刺接種于小培養(yǎng)基上,于25℃孵箱中培養(yǎng)4d后,直接鏡檢,觀察菌絲與孢子的特點(diǎn),典型者用乳酸酚棉蘭染色后鏡檢,進(jìn)一步觀察其特點(diǎn),確定菌種。挑取SDA斜面或平板上菌落置于0.9%NaCl溶液中,反復(fù)吹吸混勻,用0.9%NaCl溶液將菌液濃度比濁調(diào)至5×105/ml(生長旺盛的菌落用研缽或無菌玻璃珠研細(xì))。用無菌棉簽蘸取菌懸液從3個不同的方向均勻涂布于MH瓊脂平板培養(yǎng)基,5~10min后貼上藥敏紙片,25℃孵育4d后測其抑菌環(huán)。FTC、NYS參考NC-CLS認(rèn)可的紙片擴(kuò)散法判定標(biāo)