足癬的感染現(xiàn)狀及防治措施

足癬的感染現(xiàn)狀及防治措施

足虱是一種常見(jiàn)的臨床皮膚感染疾病，由皮膚上的絲狀細(xì)菌引起。該病的真菌主要累及皮膚、甲殼素和毛發(fā)。臨床上主要的致菌病有紅色毛癬菌、石膏樣小孢子菌和須癬毛癬菌,近年來(lái)白色念珠菌及其他酵母菌感染有增多趨勢(shì)。學(xué)生多是集體生活加之體育活動(dòng)較多使其成為真菌尤其是淺部真菌感染的一個(gè)特殊群體。本課題從多方面對(duì)足癬進(jìn)行研究,以期為足癬病原菌的分離、培養(yǎng)、鑒定提供指導(dǎo)并為足癬的診斷、治療及藥物選擇提供參考。1材料和方法1.1來(lái)自本地格式的資源于2008年9月份,取本校在校生足癬癥狀典型者皮屑標(biāo)本60例。1.2抗菌藥物及試劑沙氏葡萄糖蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基(SDA)、MH培養(yǎng)基、乳酸酚棉蘭染液、Rosco藥敏紙片:酮康唑(KTC)、氟康唑(FTC)、二性霉素B(AMB)、制霉菌素(NYS)、甲氧芐啶(TMP)均購(gòu)自杭州微生物試劑有限公司;革蘭染色染液(珠海貝素生物技術(shù)有限公司);真菌培養(yǎng)箱(上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠)。1.3方法1.3.1玻片溶液的溶解取皮屑于載玻片上,加10%KOH2~3滴,蓋上蓋玻片,在酒精燈火焰上稍加熱往返數(shù)次,以加速角質(zhì)溶解。放置10min后鏡檢。鏡下形態(tài)疑似白色念珠菌者,分離培養(yǎng)后革蘭染色進(jìn)一步鏡檢鑒定。1.3.2等間距1.3.2.1.傾斜培養(yǎng)基培養(yǎng)1.3.3藥物過(guò)敏試驗(yàn)1.3.3.1.懸掛式細(xì)菌懸浮液的制備1.3.3.2洛可可晶體傳播法2結(jié)果2.1koh消化后的顯微鏡檢查結(jié)果KOH消化后鏡檢47例陽(yáng)性,可見(jiàn)典型菌絲或孢子,真菌培養(yǎng)54例陽(yáng)性,可見(jiàn)典型菌落,見(jiàn)圖1~2。2.2識(shí)別細(xì)菌根據(jù)菌落的形態(tài)、顏色及鏡下特點(diǎn)可鑒定出的菌種有:紅色毛癬菌,白色念珠菌,須癬毛癬菌,石膏樣小孢子菌,孢子絲菌,見(jiàn)表1,圖3~4。2.3細(xì)菌耐藥試驗(yàn)藥敏結(jié)果顯示:紅色毛癬菌對(duì)FTC最敏感,對(duì)NYS完全耐藥;白色念珠菌和須癬毛癬菌均對(duì)KTC最敏感,前者對(duì)FTC、AMB、NYS均表現(xiàn)出敏感,后者表現(xiàn)出不同程度的耐藥;孢子絲菌同樣對(duì)KTC最敏感,卻表現(xiàn)出對(duì)FTC完全耐藥。此外,實(shí)驗(yàn)同時(shí)還顯示各種真菌對(duì)抗細(xì)菌藥TMP完全耐藥。具體見(jiàn)表2。3koh的消化后及安全性評(píng)價(jià)真菌性足癬病是常見(jiàn)臨床皮膚病之一,也是大學(xué)生常見(jiàn)的傳染性皮膚病。青島大學(xué)地處東部沿海城市青島,其潮濕的氣候使學(xué)生的足癬患病情況較為嚴(yán)重,而防治的前提則需全面了解該地區(qū)致病真菌的流行病學(xué)特點(diǎn),包括發(fā)病率、致病菌種類(lèi)及分布等。由于足癬病原真菌感染性強(qiáng),采集標(biāo)本時(shí)為防止操作者被感染,應(yīng)用鑷子采取皮屑,嚴(yán)禁用手直接拿取。鑒定足癬病原菌的方法主要有KOH消化后鏡檢法和病原菌分離培養(yǎng)法。本實(shí)驗(yàn)中,KOH消化直接鏡檢檢出陽(yáng)性標(biāo)本47例,分離培養(yǎng)法檢出陽(yáng)性標(biāo)本54例,兩者結(jié)果一致性較好。真菌培養(yǎng)法用時(shí)較長(zhǎng),步驟繁瑣,KOH消化后鏡檢快速簡(jiǎn)單,是目前臨床常用的方法,而培養(yǎng)法方便進(jìn)行藥敏試驗(yàn),指導(dǎo)用藥,具有顯著臨床意義,所以真菌培養(yǎng)法依然無(wú)法取代。KOH消化后鏡檢以組織細(xì)胞為背景,可清楚地觀察到真菌的菌絲及孢子。若觀察到假菌絲為白色念珠菌的鑒定依據(jù)。消化的時(shí)間應(yīng)控制在10min左右,時(shí)間過(guò)短組織消化不完全,時(shí)間過(guò)久組織會(huì)被破壞,這樣都會(huì)破壞鏡檢觀察背景,影響檢出結(jié)果。目前,抗真菌藥物有限,且耐藥趨勢(shì)有所增長(zhǎng),因此,加強(qiáng)真菌感染的控制及耐藥監(jiān)測(cè),有效防治真菌感染及提高治愈率已成為目前醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一個(gè)重要問(wèn)題。治療足癬常用的抗真菌藥物包括:唑類(lèi)、丙烯胺類(lèi)、硫脲類(lèi)、嗎啉類(lèi)、吡酮類(lèi)等,其中丙烯胺類(lèi)和唑類(lèi)藥物臨床應(yīng)用最廣。為了更好地結(jié)合臨床,筆者選用了皮膚科臨床常用的制霉菌素、酮康唑、氟康唑、傳統(tǒng)抗真菌藥二性霉素B,此外,本實(shí)驗(yàn)特選取了抗細(xì)菌性藥物甲氧芐啶做比較。從表2可以看出白色念珠菌對(duì)二性霉素B、制霉菌素、氟康唑、酮康唑都敏感,而其他4種菌對(duì)這幾種抗真菌藥的敏感程度不一:紅色毛癬菌對(duì)酮康唑、氟康唑、二性霉素B敏感,而對(duì)制霉菌素耐藥;須癬毛癬菌則主要對(duì)酮康唑敏感;石膏樣小孢子菌除對(duì)酮康唑表現(xiàn)中介外,其余均耐藥;孢子絲菌對(duì)酮康唑、制霉菌素敏感,對(duì)二性霉素B中介,而對(duì)其他均顯示耐藥。亦可見(jiàn)酮康唑?qū)@5種菌均有較好的抑制作用,而其他幾種藥對(duì)各菌的抑制程度差異較大;而抗細(xì)菌性藥物甲氧芐啶的藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示各種真菌對(duì)甲氧芐啶均耐藥。需要指出的是:體外藥物敏感試驗(yàn)的結(jié)果可以為臨床上選擇用藥提供參考,但是由于藥物的抗菌活性還會(huì)受到體內(nèi)多種因素的影響,如藥物吸收代謝的個(gè)體差異等,因此體外藥物敏感試驗(yàn)的結(jié)果有時(shí)并不能夠完全反映體內(nèi)的真實(shí)抗菌情況。因此還需要加大樣本量及更多地結(jié)合臨床療效進(jìn)行分析研究。用取菌針取皮屑少許,接種于沙氏葡萄糖蛋白胨瓊脂斜面培養(yǎng)基上,用取菌針尖端稍向下穿刺,將皮屑帶入培養(yǎng)基內(nèi)部,置于25℃孵箱培養(yǎng),于10d后觀察菌落。1.3.2.2普通平板分離和培養(yǎng)將斜面培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落轉(zhuǎn)種于沙氏平板培養(yǎng)基上,于25℃孵箱中培養(yǎng)4d后,觀察菌落特點(diǎn),并對(duì)培養(yǎng)基正反面拍照,初步確定真菌菌種。1.3.2.菌株的制備和鑒定制作小培養(yǎng)基,挑取普通平板上的菌穿刺接種于小培養(yǎng)基上,于25℃孵箱中培養(yǎng)4d后,直接鏡檢,觀察菌絲與孢子的特點(diǎn),典型者用乳酸酚棉蘭染色后鏡檢,進(jìn)一步觀察其特點(diǎn),確定菌種。挑取SDA斜面或平板上菌落置于0.9%NaCl溶液中,反復(fù)吹吸混勻,用0.9%NaCl溶液將菌液濃度比濁調(diào)至5×105/ml(生長(zhǎng)旺盛的菌落用研缽或無(wú)菌玻璃珠研細(xì))。用無(wú)菌棉簽蘸取菌懸液從3個(gè)不同的方向均勻涂布于MH瓊脂平板培養(yǎng)基,5~10min后貼上藥敏紙片,25℃孵育4d后測(cè)其抑菌環(huán)。FTC、NYS參考NC-CLS認(rèn)可的紙片擴(kuò)散法判定標(biāo)