六藥物分析資料

六藥物分析藥物分析是藥學(xué)中的一門分支學(xué)科,它是藥學(xué)和分析科學(xué)的交叉學(xué)科,其內(nèi)容包括藥物(原料,制劑,制藥原料及中間體等)的檢驗(yàn),藥物穩(wěn)定性,生物利用皮,藥物臨床監(jiān)測(cè)以及中草藥(動(dòng)物,植物,礦物類)檢定等諸多方面的有關(guān)定性定量分析工作.其目的是確保藥物的質(zhì)量,保證病人用藥的安全有效.此外,像毒物分析,運(yùn)動(dòng)員的興奮劑檢測(cè),成瘤藥物檢查等也屬于藥物分析的范疇.藥物分析使用化學(xué),物理,生物,數(shù)學(xué),計(jì)算機(jī)及自動(dòng)化等許多學(xué)科的手段,并隨著這些學(xué)科的發(fā)展而發(fā)展.在這些學(xué)科中,與藥物分析關(guān)系最密切的還是化學(xué),尤其是分析化學(xué)的手段在藥物的研究與開發(fā)中應(yīng)用得最為廣泛.本章將就分析化學(xué)在藥物研究與開發(fā)中的應(yīng)用及藥物分析的前景進(jìn)行討論.一,藥典與分析方法為保證藥品的質(zhì)量,很多國(guó)家都有自己的國(guó)家藥妙"2J,它是記載藥品標(biāo)推和規(guī)格的國(guó)家法典.是國(guó)家管理藥品生產(chǎn),供應(yīng),使用與檢驗(yàn)的依據(jù),通常都由專門的藥典委員會(huì)組織編寫,由政府頒布施行.凡屆藥典收載的藥品,其質(zhì)量在出廠前均需經(jīng)過檢驗(yàn),并符合藥典規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)和要求,否則不得出廣,銷售和使用.藥典中列出許多分析方法,分別用于不同藥物的檢驗(yàn).從這些方法可以看出該國(guó)的藥物分析水平,但是有一個(gè)規(guī)定,就是所提出的方法必須是很成熟的方法,同時(shí)也是容易推廣和掌握的方法.因此盡管可能已經(jīng)報(bào)道有很先進(jìn)的或者用很新技術(shù)或儀器的方法,在沒有經(jīng)過更多的考驗(yàn)之前,還是不能收載在藥典中.換句話說,就是藥典中給出的方法并不是越新,越高級(jí)越好.這一點(diǎn),分析工作者有時(shí)不夠理解,常以為方法越新越好.還有一點(diǎn)需要指出的是,藥典中所規(guī)定的指標(biāo)都是該藥物應(yīng)達(dá)到的最低標(biāo)準(zhǔn),各生產(chǎn)廠可制定出自己的高于這些指標(biāo)的標(biāo)推,以生產(chǎn)出更高質(zhì)量的藥物.此外,藥廠也完全可以便用自己認(rèn)為合適的分析方法進(jìn)行藥品的質(zhì)量控制,但是如果一旦產(chǎn)品質(zhì)量出現(xiàn)問題,需要進(jìn)行仲裁時(shí),則要以藥典收載的方法為準(zhǔn).藥典中對(duì)每一個(gè)藥品及其制劑都單獨(dú)列為一個(gè)項(xiàng)目容:(1)性狀記載該藥品的各種物理化學(xué)性質(zhì).一般包括外觀,.(2)鑒別色澤,溶解度,晶型,熔點(diǎn),比重,疥光率,紫外吸收系數(shù)等.這些都是藥品的特性,是否為該檢品根據(jù)這些性質(zhì)可以幫助初步判斷龜或產(chǎn)物,有時(shí)可結(jié)合紫外吸收與紅外光譜,幫助鑒別撿品是否與品名相符.(3)槍查系指雜質(zhì)的檢查.需要檢查的雜質(zhì)項(xiàng)目,主要是根據(jù)生產(chǎn)該藥品所用的原料.制備方法,貯存容器與貯存過程可能發(fā)生的變化等情況.考慮可能存在的雜質(zhì),再聯(lián)系這些雜質(zhì)的毒性,經(jīng)綜合考慮而提出的.一般情況下,對(duì)雜質(zhì)規(guī)定有一定限量,不能超過這個(gè)限量,否則即不合格(4)含量測(cè)定主要確定藥品中有效成分的含量范圍,測(cè)定方法力求簡(jiǎn)便快速,易于推廣和拿握.同時(shí)還要考慮所用儀器是否容易獲得與使用情況我國(guó)藥典收載的常用方法也在隨著學(xué)科的發(fā)展而不斷有所增加與改進(jìn)N.如1953年版只有重量法,容量法(蘸堿滴定法,氧化還原法,銀量法),旋光法,比色及紫外線吸收系數(shù)測(cè)定法,1963年版就增加了絡(luò)合滴定法.非水溶液滴定法.費(fèi)休式水分測(cè)定法,分光光度法,極譜分析法(1977年版取消),其后出版的1977,1985,1990,1995年版的藥典又陸續(xù)增加了亞硝酸鈉重氮化滴定法.電位及水停灑定法.氧瓶燃燒法.原于吸收法,熒光分析法.紅外光譜沈,色譜法(柱色譜,紙色譜,薄層色譜,薄層掃描法,氣相色譜,高效液相色譜),電泳法(紙電泳,凝放電泳,酯蘸纖維素膜電泳)等方法,與國(guó)際上其它藥典所用的方法大致相同.二,藥物分析方法前面已經(jīng)提到一些藥物分析中常用的方法,藥典中使用的方法目前多趨向于色譜法,尤以高效液相色譜為普遍.當(dāng)然,分析化學(xué)中常用的分析方法仍都有應(yīng)用,如基于化學(xué)反應(yīng)的重量法和各種容量法;基于光學(xué)或譜學(xué)的紫外(UV),可見(Vis).紅外(IR),熒光(凡),拉曼[R刪),核磁共振(NhQ),各種計(jì)算分光光度法等;基于電化學(xué)的各種極譜法,伏安法,庫(kù)侖法,離子選擇電極及各種傳感器.利用電流和電位的各種滴定方法等;各種色譜方法,除上述的紙色譜(PC),薄層色譜(TLC),氣相色譜(GC),高效被相色譜(HPLC)外,離子色譜(Ic),排阻色譜(sEc),超臨界流體色譜(SFC)也都在發(fā)揮作用,新興的毛細(xì)管電泳(哪)和電色譜法(EC)正在引起分析工作者的極大興趣,在國(guó)內(nèi)外都是熱門課題,發(fā)表的文章每年都在增加.估計(jì)不久的將來.隨著儀器的普及,毛細(xì)管電泳法將會(huì)被藥典所收載.質(zhì)譜的發(fā)展也很迅速,除單獨(dú)使用外,與各種色譜儀的聯(lián)用也受到重視,氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用(Gc小賜)已很普遍,液相色譜—質(zhì)諾聯(lián)用(比刷S)由子幾種新接口的出現(xiàn)也已趨成熟,商品儀器己較普遍,國(guó)外有關(guān)液相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用的工作已有很多,甚至液相色譜—質(zhì)譜—質(zhì)譜聯(lián)用(LC朋S刷s)也被不少藥物研究和生產(chǎn)單位較廣泛地用于藥物代謝的研究在國(guó)內(nèi),則由于儀器需要進(jìn)口,且價(jià)格昂貴,工作還很少開展,有待今后加強(qiáng)努力.超臨界流體色譜和毛細(xì)管電泳與質(zhì)譜的聯(lián)用也已有不少報(bào)道化學(xué)計(jì)量學(xué)在分析中的應(yīng)用國(guó)內(nèi)己做了不少工作,尤其在分光光度法方面已有不少報(bào)道.在解決色譜重疊峰,選擇色譜流動(dòng)相及其它方面的工作也在進(jìn)行.三,藥物代謝研究中的分析工作藥物的代謝轉(zhuǎn)化是指藥物進(jìn)人人體后,在體內(nèi)進(jìn)行一些反應(yīng),發(fā)生結(jié)構(gòu)變化,使脂溶性的藥物獲得極性基團(tuán),增加水溶性,而利于從腎及膽道排泄的過程〔d.藥物在體內(nèi)的整個(gè)過程通常用四個(gè)英文字母表示,即A1)h吸.A表示吸收(ab印rption),為藥物被生物體的吸收;D為分布(dt姚nbutlon),為藥物在生物體內(nèi)的分布;M為代謝(限tab01i刪),即藥物在體內(nèi)的代謝轉(zhuǎn)化;E為排泄(exc肥tlon),即藥物及其代謝產(chǎn)物自體內(nèi)的排除藥物的代謝轉(zhuǎn)化一旅分為兩類反應(yīng):第一相反應(yīng)包括氧化,還原,水解,水合,脫硫乙?；?異構(gòu)化等;第二相反應(yīng)為結(jié)合反應(yīng),主要包括葡萄糖醛酸化,硫酸酯化,谷骯甘肋結(jié)合,乙?；?甲基化,氨基酸結(jié)合,脂肪酸結(jié)合,以及縮合等.藥物的兩相轉(zhuǎn)化反應(yīng)均需要體內(nèi)多種酶的參與.經(jīng)過一相反應(yīng)后,藥物分子上形成羧基,經(jīng)基,醇基,胺基等,便于進(jìn)行第二相結(jié)合反應(yīng),形成極性更高,水溶性更大的代謝產(chǎn)物,有利于從腎及膽道排出體外.藥物經(jīng)過機(jī)體的轉(zhuǎn)化,可能發(fā)生相應(yīng)理化性質(zhì)的改變,從而改變其藥理和毒理活性,如代謝失活,代謝活化,藥理活性增強(qiáng)或減弱,以及形成毒物及致癌物等.因此研究藥物的代謝轉(zhuǎn)化過程,明確藥物的代謝轉(zhuǎn)化途徑,有助于理解藥物的藥理作用及毒副反應(yīng)的機(jī)理,指導(dǎo)臨床合理用藥.藥物代謝轉(zhuǎn)化的研究一般有兩種途徑.一種途徑為通過薄層色譜,高效液相色譜等手段從體內(nèi)體外代謝樣品中分離,檢測(cè),制備代謝物純品,然后利用紫外,紅外,核磁共振,質(zhì)譜等手段進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定;另一途徑是以質(zhì)譜為結(jié)構(gòu)鑒定基礎(chǔ)的色譜—質(zhì)譜聯(lián)用方法,井輔以同位京標(biāo)記,衍生化反應(yīng)以及純品對(duì)照等手段,對(duì)代謝產(chǎn)物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定.后者尤其適合于生物體液中藥物及其代謝產(chǎn)物的定性,定量測(cè)定與藥物代謝動(dòng)力學(xué)方面的研究.1.以TLC,HPLC等分離制各為基礎(chǔ)的分析方法這一類方法主要包括代謝物的分離,檢測(cè),純品制備與結(jié)構(gòu)鑒定幾方面的工作.藥物的分離檢測(cè),主要方法有柱色譜,TLL,Gc與叩凹叩比常用于藥物及其代謝產(chǎn)物的同時(shí)分離與檢測(cè).根據(jù)藥物代謝的一般規(guī)律,代謝物的極性較原藥大,所以在反相叩比系統(tǒng)中代謝物一般先于原藥被洗脫出來,特別有利于代謝產(chǎn)物的識(shí)別.與BP—叩陽(yáng)臺(tái)的檢測(cè)方法主要有電化學(xué)方法(EC),熒光檢測(cè)(四),紫外吸收檢測(cè)(W)與放射性檢測(cè)(肌).二極管陣列檢測(cè)器(則)由于能同時(shí)進(jìn)行多波長(zhǎng)檢測(cè),并問步記錄色譜峰的吸收光譜,檢測(cè)峰純度,與叩U配合,已成為快速分離檢測(cè)未知代謝產(chǎn)物的有力工具,適合于體外代謝研究的代謝條件的優(yōu)化,以及體液中未知代謝產(chǎn)物的分離檢測(cè)柱色譜,TIj,制各HN—L由于樣品容量大,操作條件靈活,適合于代謝產(chǎn)物的制備與純化對(duì)體外,體內(nèi)代謝進(jìn)行色譜分離前,需要對(duì)樣品先進(jìn)行提取分離,必要時(shí)先做去蛋白處理.常用的提取方法合液液提取與灑固提取.液液提取中常用的溶劑有乙酸乙酯,::氯甲烷,氯仿,乙醚等.根據(jù)藥物及其可能形成的代謝產(chǎn)物的性質(zhì),可能需要調(diào)節(jié)溶液的PH值,或加入離子對(duì)試劑等.以盡可能全囚地提取出主要代謝產(chǎn)物.液固提取由于需要的溶劑量相對(duì)較少,提取時(shí)沒有乳化現(xiàn)象,提取的代謝物極性范圍較廣等優(yōu)點(diǎn),而R益受到重視.常用的因相提取材料合5ep—PaLCl8柱,XAI)2,比ndE1叭校等而M(;K(3rniHg爭(zhēng)"介紹的鹽—溶劑對(duì)提取法,適合廠多種生物體灑中弱酸件,中性,堿性代謝物的提取,并且問收率高.分離制備得到的代謝物純品的結(jié)構(gòu)鑒定主要借助于紫外,紅外,核磁共振,質(zhì)譜等手段.由于代謝物的結(jié)構(gòu)與原藥