當(dāng)歸對(duì)X線(xiàn)輻射損傷小鼠造血功能恢復(fù)的影響

當(dāng)歸對(duì)X線(xiàn)輻射損傷小鼠造血功能恢復(fù)的影響【摘要】目的觀察當(dāng)歸對(duì)Χ線(xiàn)輻射損傷小鼠造血功能恢復(fù)的影響。方法用100%當(dāng)歸浸出液定期給小鼠灌胃，5d后，用Χ線(xiàn)照射CGY，1次/d，共照射5次，檢測(cè)小鼠骨髓細(xì)胞增殖和抗體的產(chǎn)生。結(jié)果用藥組小鼠骨髓細(xì)胞增殖和抗體產(chǎn)生有顯著增強(qiáng)作用，與照射組相比均有非常顯著性差異。結(jié)論當(dāng)歸有明顯抗X線(xiàn)輻射、促進(jìn)小鼠骨髓細(xì)胞增殖和抗體產(chǎn)生的作用。

【關(guān)鍵詞】當(dāng)歸骨髓細(xì)胞增殖抗體小鼠

AbstractObjectiveToresearchtheeffectofAngelicasinensisDiels,(ASD)onhemopoieticrehabilitationofradiatedmice.MethodsFilledthestomachesofthemicewith100%waterextractofASDregularlyfor5days.ThemicewereradiatedwithX-radiationwithadoseofonceeachdayfor5days.Proliferationofbonemarrowcellandtheproductionofantibodyweretested.ResultsTheproliferationofbonemarrowcellandtheproductionofantibodyincreasedsignificantlyinASDgroupcomparedwithcontrolgroup().ConclusionASDcanresistX-radiationobviouslyandenhancebonemarrowcellproliferationandtheproductionofantibody.

KeywordsAngelicasinensisDiels(ASD)；Bonemarrowcellproliferation；Antibody；Mice

當(dāng)歸，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為中品，歷代本草均有收藏。當(dāng)歸使氣血各有所歸，故名。其為傘形科多年生草本植物當(dāng)歸AngelicasinensisDiels的根，主產(chǎn)于甘肅東南部岷縣、武都、漳縣、成縣等地以及陜西、四川、湖北、云南，其中以岷縣產(chǎn)量多，質(zhì)量亦佳，均為栽培。當(dāng)歸的主要功效有補(bǔ)血活血，調(diào)經(jīng)止痛，潤(rùn)腸通便。筆者主要研究了當(dāng)歸對(duì)Χ線(xiàn)輻射損傷小鼠造血功能恢復(fù)的影響，以期為臨床提供理論依據(jù)。

1材料與方法1試劑與儀器

當(dāng)歸200g加水2000ml，溫火煎煮2h，去渣濃縮為200ml備用。美國(guó)Multiskan產(chǎn)全自動(dòng)酶標(biāo)儀；CO2培養(yǎng)箱由美國(guó)Forma公司生產(chǎn)；美國(guó)產(chǎn)()冷凍離心機(jī)；超凈工作臺(tái)由蘇州凈化設(shè)備廠生產(chǎn)；日本東芝DGW-20ATOSHIBA500mA遙控胃腸機(jī)；輻射劑量測(cè)量用中國(guó)測(cè)試技術(shù)研究院產(chǎn)9206劑量?jī)x；LPS為美國(guó)Sigma產(chǎn)品；MTT為FLUKA公司產(chǎn)品；二甲基亞砜(DMSO)為蘇州化工研究所生產(chǎn)；RPMI-1640為美國(guó)GIBCO公司產(chǎn)品。2動(dòng)物分組與給藥

BALB/C小鼠36只，體重18～22g，雌雄兼有,購(gòu)于北京醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。將動(dòng)物隨機(jī)分3組，每組12只。Ⅰ組為生理鹽水對(duì)照正常組；Ⅱ組為鹽水加照射組；Ⅲ組為當(dāng)歸藥物加照射實(shí)驗(yàn)組。Ⅰ，Ⅱ組每天用生理鹽水灌胃，ml/次，1次/d；Ⅲ組每天用當(dāng)歸液灌胃，ml/次，1次/d；Ⅱ，Ⅲ組于第6天在灌胃后30min行全身暴露Χ射線(xiàn)照射，用等效方野18cm×18cm，焦點(diǎn)-鼠距80cm。每天照射，1次/d，共照射5次。3檢測(cè)指標(biāo)及方法骨髓細(xì)胞增殖反應(yīng)［1］

頸椎脫臼處死小鼠，無(wú)菌操作取小鼠雙股骨骨髓細(xì)胞，調(diào)細(xì)胞濃度至5×106/ml，取100μl加入96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，設(shè)5個(gè)復(fù)孔，置37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h，終止前5h，摻入MTT10μl/孔，終止培養(yǎng)時(shí)離心棄上清，每孔加入100μlDMSO溶解MTT還原產(chǎn)物甲臜溶解緩沖液，充分震蕩10min，全自動(dòng)酶標(biāo)儀用560nm波長(zhǎng)測(cè)OD值，以O(shè)D值代表骨髓細(xì)胞活性。

定量溶血分光光度測(cè)定法(QHS)［2］

本法體外B細(xì)胞產(chǎn)生分泌抗體裂解紅細(xì)胞所釋放的血紅蛋白量，其結(jié)果可反應(yīng)機(jī)體體液免疫功能。實(shí)驗(yàn)第5天分別將5%的綿羊紅細(xì)胞ml注入各組小鼠腹腔內(nèi)，第11天眼球放血，頸椎脫臼致死，常規(guī)取脾臟，然后進(jìn)行脾細(xì)胞計(jì)數(shù)，調(diào)細(xì)胞濃度至1×107/ml，取脾細(xì)胞1ml，1∶10新鮮豚鼠血清1ml，%綿羊紅細(xì)胞1ml，混勻，37℃水浴1h，1500r/m離心10min，取上清液用96孔細(xì)胞培養(yǎng)板于全自動(dòng)酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)處測(cè)A值，作為QHS反應(yīng)值。4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用組間均數(shù)差異t檢驗(yàn)的方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2結(jié)果

當(dāng)歸對(duì)小鼠骨髓細(xì)胞增殖、抗體產(chǎn)生的影響見(jiàn)表1。表1當(dāng)歸對(duì)小鼠骨髓細(xì)胞增殖、抗體產(chǎn)生的影響(略)

3討論

當(dāng)歸是臨床上常用的中藥，現(xiàn)代研究［3］證實(shí)，當(dāng)歸有明顯的抗輻射損傷作用。用當(dāng)歸對(duì)輻射損傷的家兔進(jìn)行腹腔注射，引起家兔染色體畸形變率明顯下降，連續(xù)注射9d，家兔染色體畸變率完全恢復(fù)正常，體外用藥實(shí)驗(yàn)結(jié)果與體內(nèi)注射結(jié)果相同。對(duì)Co-γ射線(xiàn)輻射損傷后的小鼠通過(guò)腹腔給予當(dāng)歸注射液，連續(xù)給藥80d后發(fā)現(xiàn)，受輻射損傷后的卵巢于照射后第15天開(kāi)始進(jìn)入恢復(fù)期，比未給當(dāng)歸的對(duì)照組顯著提前。當(dāng)歸多糖對(duì)受照小鼠的造血細(xì)胞亦有輻射防護(hù)作用，照射前注射當(dāng)歸多糖能促進(jìn)照射小鼠脾臟內(nèi)源性造血灶形成，提高受照小鼠骨髓有核細(xì)胞計(jì)數(shù)，當(dāng)歸多糖對(duì)CFV-C和CFV-S的放射敏感性影響較少，但能防止照射后效應(yīng)，能顯著促進(jìn)小鼠CFV-C和CFV-S的恢復(fù)，這可能是其抗輻射作用原理之一。水浸液灌飼小鼠，能顯著促進(jìn)血紅蛋白及紅細(xì)胞的生成，其抗貧血作用可能與所含的維生素B12、煙酸、葉酸、亞葉酸等有關(guān)。從上述實(shí)驗(yàn)中可以看出，當(dāng)歸可刺激小鼠抗體的產(chǎn)生，使抗體分泌量增加，與照射組相比有非常顯著性差異()。當(dāng)歸對(duì)骨髓細(xì)胞增殖有明顯促進(jìn)作用，與照射組相比有非常顯著性差異()。骨髓細(xì)胞增殖歸之于集落刺激因子(CSF)的存在［4］，CSF是一組在體內(nèi)外均能強(qiáng)烈刺激造血祖細(xì)胞增殖，分泌并形成細(xì)胞集落的低分子細(xì)胞因子。本研究結(jié)果表明，當(dāng)歸有明顯抗輻射的作用，調(diào)節(jié)骨髓造血和促進(jìn)抗體產(chǎn)生的作用?？诜?dāng)歸液可作為Χ線(xiàn)檢查病人或接觸Χ線(xiàn)者的保健飲品，有利于減輕Χ線(xiàn)接觸者免疫造血功能下降的弊端，提高療效。本文為當(dāng)歸的臨床應(yīng)用提供了科學(xué)依據(jù)。

【參考文獻(xiàn)】

［1］高學(xué)敏.中藥學(xué)，下冊(cè)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版