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醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)設(shè)計(jì)型實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞核的分離和鑒定組員：實(shí)驗(yàn)原理細(xì)胞內(nèi)各種結(jié)構(gòu)的比重和大小等都不相同，在同一離心場(chǎng)內(nèi)其沉降速度也不同，所以利用各細(xì)胞器在一定介質(zhì)中的沉降速度的差異，可采取離心的方法，將細(xì)胞器分離出來(lái)。細(xì)胞器沉降先后順序先后是細(xì)胞核、線(xiàn)粒體、溶酶體和其他微細(xì)胞核糖體和大分子。細(xì)胞核的比重和大小與其他組分不同，可將組織制成勻漿，在均勻的懸浮介質(zhì)用特定的離心、分離，然后進(jìn)一步分析鑒定。勻漿：是指在低溫下，將組織塊放入勻漿器，加入等滲勻漿介質(zhì)進(jìn)行研磨，破碎細(xì)胞，使之成為各種細(xì)胞器及其包含物的勻漿液。甲苯胺藍(lán)：堿性染料，甲苯胺藍(lán)中的陽(yáng)離子有染色作用，可使細(xì)胞核呈藍(lán)色。操作流程斷頭處死小白鼠，手提尾部使腹內(nèi)血液盡量流出勻漿、過(guò)濾離心；2500r/min離心15min取材迅速開(kāi)腹取肝，在盛有生理鹽水的小燒杯中洗滌，稱(chēng)取約1g的肝組織放入燒杯加入8ml預(yù)冷的0.25mol/L蔗糖-0.003mol/L氯化鈣溶液與燒杯中，將剪碎的肝組織倒入玻璃勻漿器，勻漿。用8層紗布過(guò)濾勻漿液與離心管中。涂片染色洗滌鏡檢取上清液制一張（標(biāo)記1）。將原離心管中剩余上清液吹打沉淀成懸液，另制一張涂片（標(biāo)記2）分別在涂片1、2上滴加甲苯胺

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