第七章xin 生物樣品內(nèi)中藥制劑化學(xué)成分的測定2

第七章

生物樣品內(nèi)

中藥制劑化學(xué)成分的測定pyh第一節(jié)概述一、生物樣品內(nèi)藥物分析的性質(zhì)、意義和任務(wù)

生物樣品內(nèi)藥物分析：（體液藥物分析、生物藥物分析）

通過各種分析手段，了解藥物在生物樣品內(nèi)的數(shù)量和質(zhì)量變化，獲得藥物代謝動力學(xué)的各種參數(shù)、藥物在生物樣品內(nèi)的生物轉(zhuǎn)化、代謝的方式和途徑等信息，為藥品生產(chǎn)、臨床醫(yī)療、實驗研究等方面對藥物的研究作出估計與評價

意義：新藥評價和新藥開發(fā)臨床合理用藥興奮劑、法醫(yī)毒物分析微量藥物及其代謝物的分離分析

任務(wù)：1、分析方法學(xué)的研究2、生物樣品內(nèi)中藥成分研究3、生物樣品內(nèi)內(nèi)源性物質(zhì)的測定和研究二、生物樣品內(nèi)藥物分析的對象與特點

生物樣品內(nèi)藥物分析的對象

（動物體、人體）血液（血漿、血清、全血）尿液唾液淚液乳汁膽汁組織樣本生物樣品內(nèi)藥物分析的特點干擾雜質(zhì)多樣品復(fù)雜

樣品量少被測物濃度低不能重復(fù)取樣快速、靈敏、專屬

第二節(jié)藥物在生物體內(nèi)的存在狀態(tài)與生物轉(zhuǎn)化存在狀態(tài)：1.藥物在與生物大分子蛋白質(zhì)結(jié)合2.化學(xué)成分間的相互作用藥物代謝：1、氧化、還原和水解反應(yīng)2、結(jié)合反應(yīng)（葡萄糖醛酸、硫酸鹽等）第三節(jié)生物樣品的制備一、樣品的采集和保存血液（血漿、血清、全血）（藥動、生物利用度、藥濃監(jiān)測）尿液（藥物劑量回收、腎清除率、代謝類型等）唾液（藥濃監(jiān)測及藥代動力學(xué)）組織

要求根據(jù)實驗?zāi)康倪x取樣品類型樣品具有代表性取樣后最好立即進(jìn)行分析血樣貯存冰箱尿樣貯存冰箱冷藏或加防腐劑（氯仿、甲苯）組織性樣品－20℃速凍避免污染四、樣品的預(yù)處理（一）蛋白質(zhì)的去除脫水沉淀中性鹽

（硫酸銨、硫酸鈉）加入與水混溶的有機(jī)溶劑（乙腈、甲醇、乙醇、丙酮）形成不溶性鹽沉淀酸（三氯醋酸、高氯酸、磷酸）重金屬離子（銅鹽、汞鹽）酶水解、加熱使沉淀或超濾、透析除蛋白

（二）凈化與富集1.液-液萃取法2.固相萃取法3.固相微萃取法

（三）結(jié)合物或綴合物水解

使待測成分從結(jié)合物或綴合物中游離出來待測成分以葡萄糖醛酸苷或硫酸酯類結(jié)合或代謝產(chǎn)物

酸水解：無機(jī)酸

酶水解：枯草溶菌蛋白酶蛋白綴合Β－葡萄糖醛酸酶芳基硫酸酯酶溶劑解：主要是硫酸酯，隨加入的萃取溶劑分解（三）冷凍干燥第四節(jié)生物樣品藥物分析方法分析方法的設(shè)計：

了解藥物的性質(zhì)與生物樣品內(nèi)狀況分析方法的建立：

純品

線型范圍、測定濃度、靈敏度、最適條件

空白溶劑靈敏度、專屬性

空白生物基質(zhì)

考察內(nèi)源性物質(zhì)干擾

模擬生物基質(zhì)

線性、范圍、提取回收率、最低監(jiān)測

濃度（靈敏度）、精密度、準(zhǔn)確度

實際生物樣品

驗證可行性方法評價：精密度高、中、低三個濃度每個測5－7次RSD≤±15％準(zhǔn)確度高、中、低三個濃度每個測5次提取回收率50%-80%方法回收率≤±15％靈敏度LODLOQ專屬性（選擇性）代謝物、內(nèi)源性物質(zhì)、共存藥物6個個體空白樣可測濃度范圍r≥0.99穩(wěn)定性長期、短期、冷凍－解凍、儲備液提取回收率質(zhì)量控制五、測定方法光譜法：紫外－可見分光光度法熒光分光光