G試驗和GM試驗檢測侵襲性真菌

G試驗和GM試驗檢測侵襲性真菌侵襲性肺真菌病臨床表現不典型易被基礎疾病所掩蓋，確診通常需要侵入性的組織標本，而侵入性的操作過程常因患者的病情所限難以實施。因此有較高的漏診率。目前國內大多數醫(yī)院都在開展非侵襲性實驗室技術如G試驗和GM試驗，成為真菌感染的診斷標準之一，以提高真菌感染的陽性率。根據侵襲性肺真菌病診斷指南，真菌感染的診斷因素包括宿主因素、臨床特征、微生物學檢查、組織病理學。確診疾病必須依賴組織病理等有創(chuàng)檢查和操作，培養(yǎng)過程又需要一定時間，從而無形中增加了漏診率，而新的血清學診斷方法，包括G試驗、GM試驗以及對于真菌特異DNA的PCR技術，與臨床征象、微生物培養(yǎng)，尤其是CT掃描一起，為開始搶先治療、監(jiān)測疾病病程、評價治療反應提供了更多有參考價值的資料。其中G試驗、GM試驗連續(xù)2次陽性為有意義的檢查結果。G試驗人體的吞噬細胞吞噬真菌后，能持續(xù)釋放1,3-p-D葡聚糖，使血液及體液中含量增高。通過G試驗檢測1,3-p-D葡聚糖的含量能夠及時反映真菌感染情況。G試驗適用于除隱球菌和接合菌（毛霉菌）外的所有深部真菌感染的早期診斷，雖能測得包括曲霉和念珠菌在內的更多致病性真菌，且初步的臨床研究顯示有較好的敏感性和特異性，假陽性率較低，但它只能提示有無真菌侵襲性感染，并不能確定為何種真菌感染。G試驗檢測一般先于臨床癥狀平均4天，平均早于發(fā)熱5天，是早期檢測的重要手段。G試驗檢測值<70pg/ml定義為陰性，此時不建議抗真菌治療，當檢測值在70-95=""pg/ml時定義為灰區(qū)，此為觀察期，應連續(xù)監(jiān)測，當檢測值="">95pg/ml定義為陽性，建議結合臨床癥狀診斷治療。70>*薫1,3-B-D*薫1,3-B-D葡聚糖檢測（簡稱G試驗）原理：1,3-p-D葡聚糖可特異性激活鰲變形細胞裂解物中的G因子，引起裂解物凝固，故稱G試驗。診斷：侵襲性真菌感染?？稍\斷多種致病真菌感染：念珠菌、曲霉菌、肺孢子菌、鐮刀菌、地霉、組織胞漿菌、毛孢子菌等。不能用于檢測隱球菌和接合菌感染。檢測標本：血液、尿液、腦脊液、胸腔積液、腹水等標本采集：靜脈采血2ml（肝素抗凝）。mannoproteinshitin假陽性的情況PPLbilayermannoproteinshitin假陽性的情況PPLbilayer跖p1s3glucansynthase以下情況可出現假陽性：（1）使用纖維素膜進行血透，標本或患者暴露于紗布或其他含有葡聚糖的材料；（2）靜脈輸注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品；（3）鏈球菌血癥；（4）操作者處理標本時存在污染。另外，使用多糖類抗癌藥物、放化療造成的粘膜損傷導致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌經胃腸道進入血液等也可能造成假陽性，食用菌類，如蘑菇等食物可以導致假陽性。GM試驗GM試驗主要針對于侵襲性曲霉菌感染的早期診斷。半乳甘露聚糖（GM）是曲霉細胞壁的一種成分，GM從薄弱的菌絲頂端釋放，曲霉菌感染的患者血液內存在GM.曲霉菌不入血，主要是侵襲血管壁，沿血管壁進行侵襲，進入血液。曲霉菌感染部位主要集中在肺部，從而引起肺部侵襲性曲霉，診斷曲霉菌在肺部是定植還是侵襲性生長，關鍵在于其是否合成GM.如果痰液或肺泡灌洗液標本培養(yǎng)到曲霉菌且GM試驗檢測結果為陽性，即可診斷為曲霉菌侵襲性感染。GM試驗?？稍诨颊吲R床癥狀出現前5-8d獲得陽性結果和影像學出現異常之前7.2天出現，并可對血清、腦脊液、肺泡或支氣管灌洗液進行檢測，因而往往可以使診斷提前。GM釋放量與菌量呈正比，可以反映感染的程度，若兩次檢測陽性即可以診斷侵襲性曲霉菌感染，GM試驗也可作為療效判斷的重要指標。GM實驗檢測值<0.65ug/l定義為陰性，此時不建議抗真菌治療。當檢測值在0.65-0.85二""ug/l時定義為灰區(qū)，此為觀察期，應連續(xù)監(jiān)測，當檢測值="">0.85ug/l時定義為陽性，建議結合臨床癥狀診斷治療。0.65>所以GM試驗是診斷侵襲性曲霉感染的微生物檢查證據之一，通過檢測GM值也可以作為治療效果的參考指標之一。半乳糖甘露醇聚糖抗原檢測（簡稱GM試驗）原理：是一種微孔板雙抗體夾心法。采用小鼠單克隆抗體EBA-2，檢測人血清中的曲霉菌半乳甘露聚糖。半乳甘露聚糖是一種對熱穩(wěn)定的水溶性的物質，是廣泛存在于曲霉和青霉細胞壁中的一類多糖。診斷：侵襲性曲霉菌感染（IPA）標本采集：（分離膠管或普通管）標本采集：血清標本假陽性的情況（1）使用使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦；（2）新生兒和兒童；（3）血液透析；（4）自身免疫性肝炎等；（5）食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物和污染的大米等。以下情況可出現假陰性：（1）釋放入血循環(huán)中的曲霉GM（包括甘露聚糖）并不持續(xù)存在而是會很快清除；（2）以前使用了抗真菌藥物；（3）病情不嚴重；（4）非粒細胞缺乏的患者。G試驗和GM試驗聯合檢測的優(yōu)勢根據于書嫻等[2]關于G試驗和GM試驗對侵襲性真菌病診斷價值的Meta分析研究，聯合試驗靈敏度可以達到0．88，特異度可達到0.81。G試驗的敏感性優(yōu)于GM試驗，特異性相似。并聯（一者為陽性結果為陽性）的敏感性優(yōu)于串聯（二者均為陽性結果為陽性），串聯的特異性優(yōu)于并聯。單獨檢測時，G試驗和GM試驗診斷效果相似；聯合檢測比單獨檢測有較高的診斷效果，且串聯時診斷效果最好。并且據任麗娜等[3]研究中顯示，在臨床抗真菌治療過程中，根據血清GM含量的變化進行療效監(jiān)測，調整治療方案及判斷預后，對提高疾病的治愈率、降低病死率有重要的參考價值。參考文獻：于書嫻、崔學范等，G試驗