人教選修3《動物細胞培養(yǎng)和核移植技術》課件

2.2動物細胞工程2.2.1動物細胞培養(yǎng)和核移植技術一、動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)（animalcellculture）就是從動物機體中取出相關的組織，將它分散成單個細胞，然后，放在適宜的培養(yǎng)基中讓這些細胞生長和增值。那么，動物細胞培養(yǎng)的過程是怎樣的呢？培養(yǎng)時又需要哪些條件呢？一、動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)的過程取組織塊剪碎組織用酶，處理組織細胞懸浮液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)胰蛋白酶或膠原蛋白酶，使之分散成單個細胞用培養(yǎng)液稀釋制成細胞懸浮液一、動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)的過程取樣組織剪碎組織酶處理組織制成懸浮液原代培養(yǎng)定義：動物組織經(jīng)酶解消化后的初次培養(yǎng)。細胞貼壁：懸液中分散的細胞貼附在瓶壁上。接觸抑制：當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象……一、動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)的過程取樣組織剪碎組織酶處理組織制成懸浮液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)貼壁細胞重新用胰蛋白酶處理，然后分瓶培養(yǎng)，讓細胞繼續(xù)增殖。一般傳至10代后就不易傳下去了。一般來說，10-50代時增殖逐漸減慢，以至于完全停止，這部分細胞核型可能會發(fā)生變化。目前使用的或冷凍保存的正常細胞通常為10代以內(nèi)，以保持細胞正常的二倍體核型。如若繼續(xù)傳代培養(yǎng)，少數(shù)細胞由于發(fā)生突變獲得不死性，朝著癌細胞的方向發(fā)展。一、動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)的條件無菌無毒的環(huán)境營養(yǎng)溫度和pH氣體環(huán)境一、動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)的條件無菌無毒的環(huán)境首先，保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境，即對培養(yǎng)液、培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，防止污染。此外，定期更換培養(yǎng)液，清除代謝產(chǎn)物，防止有害代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害。一、動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)的條件無菌無毒的環(huán)境營養(yǎng)細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同合成培養(yǎng)基（糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等）按所需種類和數(shù)量嚴格配置，并加血清、血漿等天然成分。一、動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)的條件無菌無毒的環(huán)境營養(yǎng)溫度和pH一般與動物體溫相近36.5±0.5℃為宜多數(shù)細胞生存的pH為7.2-7.4一、動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)的條件無菌無毒的環(huán)境營養(yǎng)溫度和pH氣體環(huán)境O2和CO2，維持細胞代謝和pH混合氣體培養(yǎng)箱95%空氣加5%CO2一、動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)技術的應用提取免疫活性物質(zhì)，病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等基因工程的受體細胞檢測有毒物質(zhì)，判斷某物質(zhì)的毒性培養(yǎng)正常細胞或病變細胞，用于生理、病理、藥理研究二、動物體細胞核移植技術和克隆動物植物細胞動物細胞植物細胞全能性組織培養(yǎng)植物體？？？？？二、動物體細胞核移植技術和克隆動物體細胞核移植（nucleartransfer）是將動物的一個細胞的細胞核，移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。哺乳動物核移植胚胎細胞核移植（容易）體細胞核移植（較難）二、動物體細胞核移植技術和克隆動物體細胞核移植的過程詳見教材48頁圖2-21體細胞核移植過程流程圖1、為何要對MⅡ中期的次級卵母細胞去核？2、為何將供體細胞而不是供體細胞的核注入去核卵母細胞？3、誘導兩細胞融合的方法是什么？4、激活受體細胞的方法是什么？二、動物體細胞核移植技術和克隆動物體細胞核移植技術的應用前景畜牧業(yè)醫(yī)藥衛(wèi)生其他領域二、動物體細胞核移植技術和克隆動物體細胞核移植技術的應用前景畜牧業(yè)加速家畜遺傳改良，促進優(yōu)良畜群繁育保護瀕危物種，增加瀕危物種存活數(shù)量二、動物體細胞核移植技術和克隆動物體細胞核移植技術的應用前景畜牧業(yè)醫(yī)藥衛(wèi)生轉(zhuǎn)基因克隆動物可作為生物反應器，生產(chǎn)要用蛋白；轉(zhuǎn)基因克隆動物細胞、組織、器官可作為異種移植的供體；人的核移植胚胎干細胞經(jīng)誘導分化，形成相應的組織、器官，用于組織器官移植二、動物體細胞核移植技術和克隆動物體細胞核移植技術的應用前景畜牧業(yè)醫(yī)藥衛(wèi)生其他領域克隆動物和克隆細胞，可使人類更深入地了解胚胎發(fā)育及衰老過程；用克隆動物做疾病模型，能使人們更好的追蹤研究疾病的發(fā)展過程和治療疾病。二、動物體細胞核移植技術和克隆動物體細胞核移植技術存在的問題成功率低產(chǎn)下的克隆動物占移植克隆胚胎的比率平均不到10%。二、動物體細胞核移植技術和克隆動物體細胞核移植技術存在的問題成功率低技術環(huán)節(jié)有待改進健康問題二、動物體細胞核移植技術和克隆動物體細胞核移植技術存在的問題成功率低技術環(huán)節(jié)有待改進健康問題