揮發(fā)油的鑒定及含量測定

揮發(fā)油的鑒定及含量測定玫瑰花玫瑰花樟樹揮發(fā)油的鑒定及含量測定一、功能基的鑒定二、色譜檢識三、含量測定一、功能基的鑒定1.酸堿性酸性——游離的酸或酚類化合物堿性——含堿性化合物（揮發(fā)性的生物堿）2.酚類藍色、藍紫色或綠色揮發(fā)油乙醇FeCl3酚性成分一、功能基的鑒定3.羰基化合物銀鏡反應(yīng)：醛類、其他還原性物質(zhì)揮發(fā)油的乙醇溶液與2，4-二硝基苯肼、氨基脲、羥胺等試機反應(yīng)：產(chǎn)生結(jié)晶——醛或酮4.不飽和化合物揮發(fā)油的氯仿溶液中加5%溴的氯仿溶液，如紅色褪去，表示有不飽和化合物。揮發(fā)油的鑒定及含量測定一、功能基的鑒定二、色譜檢識三、含量測定二、色譜檢識成分展開劑極性小的烴類化合物石油醚、正己烷極性大的含氧萜類衍生物石油醚：乙酸乙酯（85：15）顯色劑種類方法1%香草醛-濃硫酸試劑，或香草酸—濃硫酸試劑105℃加熱，揮發(fā)油中各成分顯不同顏色揮發(fā)油類各功能及顯色劑與功能基檢識相關(guān)表:揮發(fā)油各類功能基顯色劑

編號

顯色劑名稱斑點顏色適合官能團12％高錳酸鉀水溶液在粉紅色背景上產(chǎn)生黃色斑點不飽和化合物2三氯化鐵試劑綠色或藍色酚性成分3碘化鉀一冰醋酸一淀粉試劑藍色氧化物44—氨基安替比林一鐵氰化鉀試劑橙紅色至深紅色酚性成分5異羥肟酸鐵試劑淡紅色酯或內(nèi)酯62，4—二硝基苯肼試劑黃色斑點醛或酮類化合物70.3％鄰聯(lián)二茴香胺一冰乙酸溶液黃色斑點醛類8熒光素一溴試劑在波長365nm紫外燈下觀察，黃色熒光乙烯基化合物9對二甲氨基苯甲醛試劑深藍色薁類10硝酸鈰銨試劑黃色背景上顯棕色斑點醇類揮發(fā)油的鑒定及含量測定一、功能基的鑒定二、色譜檢識三、含量測定三、含量測定測定原理測定方法測定原理水蒸汽蒸餾極性測定方法測定項目儀器裝置測定方法密度小于1分水器略密度大于1分水器中先加1.0mL的甲苯略應(yīng)用實例薄荷油的提取分離丁香揮發(fā)油的提取分離八角茴香油的提取

任務(wù)一

薄荷中揮發(fā)油的提取分離技術(shù)

學(xué)習(xí)目標一二薄荷中揮發(fā)油的提取分離技術(shù)三必備知識四課堂互動五知識拓展六實訓(xùn)二薄荷中揮發(fā)油類化合物的提取分離及鑒定學(xué)習(xí)目標1掌握薄荷中揮發(fā)油的提取分離原理及操作技術(shù)。

知識要求2掌握薄荷中揮發(fā)油的提取、分離及鑒定技術(shù)。熟悉青薄荷中揮發(fā)油的結(jié)構(gòu)及性質(zhì)。了解薄荷中揮發(fā)油的存在及生物活性。能力要求3熟練進行薄荷中揮發(fā)油的提取、分離及鑒定操作。學(xué)會薄荷中揮發(fā)油的點滴反應(yīng)和色譜鑒定技術(shù)。一學(xué)習(xí)目標二薄荷中揮發(fā)油的提取分離技術(shù)薄荷系唇形科植物薄荷屬植物Mentha

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Briq的干燥地上部分。具有宣散風(fēng)熱、清頭目、透疹等功效，用于風(fēng)熱感冒、風(fēng)濕初起、頭痛、目赤、喉痹、口瘡、風(fēng)疹等癥的治療。用水蒸氣蒸餾法提取薄荷中的揮發(fā)油，以結(jié)晶法加以分離純化。工藝流程如下：工藝流程：

知識鏈接蒸餾法只適用于具有揮發(fā)性，能隨水蒸氣餾出而不被破壞，與水不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)而又不溶或難溶于水的天然化合物的提取。如揮發(fā)油、小分子揮發(fā)性成分麻黃堿、丹皮酚、藍雪醌的提取。蒸餾法是最常用的方法,又可分為共水蒸餾和水蒸氣蒸餾法.水蒸氣蒸餾法共水蒸餾

是將藥材切碎后,加水浸泡,采用直接加熱，將揮發(fā)性成分和水蒸氣一起蒸出。此法簡單,但受熱時間長和溫度較高,可能使揮發(fā)性成分中的某些成分分解和中藥焦化,影響揮發(fā)性成分質(zhì)量。

可避免上述缺點，其方法是將藥材粗粉置蒸餾瓶中，加適量水充分潤濕，體積為蒸餾瓶容量的1／3為宜。加熱水蒸氣發(fā)生器產(chǎn)生水蒸氣，通入蒸餾瓶中，將藥材中揮發(fā)性成分共同蒸餾出來，經(jīng)冷凝管，收集于接受瓶中。水蒸氣蒸餾法的原理是基于水和與水不相溶的液體共存時，混合體系的總蒸氣壓為兩組分蒸氣壓之和。實驗室用的水蒸氣蒸餾裝置見圖（二）薄荷中揮發(fā)油的提取、分離（一）薄荷中主要有效成分的結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)三必備知識（一）薄荷中主要有效成分的結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)

薄荷中含揮發(fā)油組成復(fù)雜，主要是單萜類及其含氧衍生物，其中薄荷醇含量最高，占揮發(fā)油的75～85%，薄荷酮占10～20%，醋酸薄荷酯占1～6%，此外，還含檸檬烯、異薄荷酮、桉油精等。薄荷醇的結(jié)晶又稱薄荷腦，是薄荷的有效成分，具有驅(qū)風(fēng)、消炎、局部止痛等作用。薄荷油為無色或淡黃色透明油狀液體，具有揮發(fā)性和薄荷香氣，可溶于乙醇、氯仿、乙醚等有機溶劑，薄荷油中的薄荷醇低溫放置可析出“薄荷腦”。薄荷醇薄荷酮醋酸薄荷酯

（二）薄荷中揮發(fā)油的提取分離鑒定

從薄荷中提取純化分離揮發(fā)油是根據(jù)薄荷中的揮發(fā)油具有揮發(fā)性，可隨水蒸氣蒸餾的性質(zhì)而被提出的原理。再利用薄荷油中薄荷醇含量高，且低溫放置可析出“薄荷腦”的性質(zhì)分出薄荷醇，用點滴反應(yīng)和雙向薄層色譜鑒定。四課堂互動1.利用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油的優(yōu)點？還可用哪些方法提取揮發(fā)油？2.結(jié)晶法分離純化揮發(fā)油的優(yōu)缺點？

五知識拓展1.從薄荷中提取分離揮發(fā)油還可采用下列方法

知識拓展1微波提取法又稱微波協(xié)助萃取技術(shù)，是在傳統(tǒng)的有機溶劑萃取技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新型萃取技術(shù)，這種技術(shù)應(yīng)用于天然藥物中有效成分的提取，可以克服傳統(tǒng)的萃取方法本身固有的種種缺陷，表現(xiàn)出良好的發(fā)展前景和巨大潛力。微波提取法具有快速、高效、高選擇性、經(jīng)濟（能源、人力、溶劑等方面）、改善環(huán)境和產(chǎn)品質(zhì)量、受熱易分解成分也可使用等特點。2.微波提取法微波提取法的操作方法是將切碎的物料，與適宜溶劑混合，置于微波設(shè)備中，接受輻射10s～100s。然后，將藥渣除去，提取液再經(jīng)進一步處理即得目的物。例如：將粉碎的薄荷葉與正丁烷混合置于容器中，經(jīng)波短時間處理后，顯微鏡下觀察其葉面上的腺體和脈管破裂，說明微波處理具有一定的選擇性，而且，與傳統(tǒng)的乙醇浸提相比，微波處理得到的薄荷油幾乎不含葉綠素和薄荷酮。

實訓(xùn)一薄荷中揮發(fā)油類化合物的提取分離及鑒定

【實訓(xùn)目的】能夠運用水蒸氣蒸餾法、結(jié)晶法對薄荷中揮發(fā)油進行提取和精制。會用點滴反應(yīng)、薄層色譜法進行揮發(fā)油的檢識。

【化學(xué)成分概述】薄荷系唇形科植物薄荷屬植物Mentha

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Briq的干燥地上部分。所含揮發(fā)油組成復(fù)雜，主要是單萜類及其含氧衍生物，其中薄荷醇含量最高，占75～85%，此外，還含有薄荷酮、醋酸薄荷酯、檸檬烯、異薄荷酮、桉油精等。薄荷醇的結(jié)晶又稱薄荷腦，是薄荷的有效成分，具有驅(qū)風(fēng)、消炎、局部止痛等作用。

【實訓(xùn)原理】1.利用揮發(fā)油的揮發(fā)性，采用水蒸氣蒸餾法提取薄荷中揮發(fā)油，然后將被蒸出的水與油放置分層后，將油分出。2.利用薄荷油中薄荷醇含量高，且低溫放置可析出“薄荷腦”的性質(zhì)分出薄荷醇。

【操作步驟】

1.提取分離稱取薄荷適量置于蒸餾瓶內(nèi)，加水適量浸泡，安裝蒸餾器，加熱，通水蒸汽進行蒸餾，收集餾出液，至餾出液不渾濁或無薄荷油芳香味時，停止蒸餾。將蒸餾液收集于一下口瓶中，加入飽和食鹽水或精制食鹽，使食鹽量達約2～3%，混合均勻，密蓋瓶塞靜止過夜，待薄荷油全部聚集于液面，放出水層，收集薄荷油。再將薄荷油-10℃冷凍放置，析出腦，經(jīng)過濾得薄荷腦粗品和脫腦油?！驹O(shè)備、儀器及藥品】1.實驗藥材：薄荷2.實驗儀器及設(shè)備：揮發(fā)油提取裝置燒杯錐形瓶硅膠G-CMC板溫度計層析缸點滴板下口瓶3.實驗藥品：食鹽石油醚乙酸乙酯乙醇三氯化鐵試液溴酚藍試液氨性硝酸銀試液2.4-二硝基苯肼試液香草醛-濃硫酸試液堿性高錳酸鉀試液

2.薄荷油的鑒定（1）點滴反應(yīng)：取硅膠-CMC-Na薄層板一塊，按表6-5用鉛筆在薄層板上打出小格子，點樣用的薄荷油，用乙醇稀釋成5～10倍的溶液，再用細玻璃棒蘸取薄荷油乙醇溶液，點在每個小方格內(nèi)，控制樣點的大小不要超格，再用毛細管吸取不同的試劑點在每個小格內(nèi)，控制斑點的大小不要超格，空白對照格也隨同各豎排點相同的試劑，立即觀察每一方格內(nèi)顏色的變化，并初步推測該揮發(fā)油可能含有成分的類型。檢測試劑：（1）三氯化鐵試液（2）溴酚藍試液（3）氨性硝酸銀試液（4）2.4-二硝基苯肼試液（5）香草醛-濃硫酸試液（6）堿性高錳酸鉀試液（2）薄層色譜檢識吸附劑：硅膠-CMC-Na薄層板樣品：薄荷油乙醇液展開劑：石油醚-乙酸乙酯（85∶15）；石油醚（90℃～120℃）

顯色劑：1%香草醛/濃硫酸溶液雙向?qū)游觯喝」枘z-CMC-Na薄層板（10cm╳10m）一塊，沿起始線的右側(cè)1.5cm處點上薄荷油，先在石油醚中作第一次展開，當展至終端時取出薄層板，揮盡溶劑，再將薄層板調(diào)轉(zhuǎn)90o角。置于石油醚-乙酸乙酯（85∶15）展開劑作第二方向展開至終端，取出薄層板，揮去溶劑，用1%香草醛/濃硫酸溶液顯色，仔細觀察各個斑點的位置，推測薄荷油的組成成分類型。實驗結(jié)果記錄：觀察斑點顏色，記錄圖譜并計算Rf值【實訓(xùn)說明及體會】雙向?qū)游鳇c樣，一次只能點一種樣品，如果同時點兩種樣品，經(jīng)過雙向?qū)游龊惋@色之后，往往因出現(xiàn)斑點太多，沒有規(guī)律性比移值，結(jié)果難以判斷各個斑點的歸屬。

任務(wù)二丁香中揮發(fā)油的提取分離技術(shù)

學(xué)習(xí)目標一二丁香中揮發(fā)油的提取分離技術(shù)三必備知識四相關(guān)知識鏈接及拓展五課堂互動六實訓(xùn)三丁香中揮發(fā)油類化合物的提取分離及鑒定學(xué)習(xí)目標1掌握丁香中揮發(fā)油的提取分離原理及操作技術(shù)。

知識要求2掌握丁香中揮發(fā)油的提取、分離及鑒定技術(shù)。熟悉丁香中揮發(fā)油的結(jié)構(gòu)及性質(zhì)。了解丁香中揮發(fā)油的存在及生物活性。能力要求3熟練進行丁香中揮發(fā)油的提取、分離及鑒定操作。學(xué)會丁香中揮發(fā)油色譜鑒定技術(shù)。一學(xué)習(xí)目標二丁香中揮發(fā)油的提取分離技術(shù)

丁香系桃金娘科植物丁香(Eugeniacaryophyllata

Thunb)的干燥花蕾,具有溫中降逆,補腎助陽作用,主要用于脾胃虛寒、呃逆嘔吐、食少吐瀉、心腹冷痛、腎虛陽痿。通常采用水蒸氣蒸餾法提取丁香中的揮發(fā)油，根據(jù)丁香酚具有酸性，可溶于堿水對丁香酚加以分離純化。工藝流程如下：

知識鏈接揮發(fā)油系統(tǒng)分離工藝

（二）丁香中揮發(fā)油的提取、分離（一）丁香中主要有效成分的結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)三必備知識（一）丁香中主要有效成分的結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)丁香中揮發(fā)油含量高達14～21%，其中丁香酚揮發(fā)油的78～98%，此外，還有丁香酚乙酸酯、石竹烯、甲基戊基甲酮等。丁香酚是中藥丁香的有效成分，具有局麻、止痛、抗菌消炎、驅(qū)蟲等作用。丁香油為無色油狀液體，比水重。丁香酚又稱丁香油酚，幾乎不溶于水，易溶于乙醇、氯仿、乙醚等有機溶劑，溶于冰醋酸。

丁香酚乙酸酯丁香酚石竹烯

（二）丁香中揮發(fā)油的提取分離鑒定

根據(jù)丁香中的揮發(fā)油具有揮發(fā)性，可隨水蒸氣蒸餾的性質(zhì)，從丁香中提取純化分離揮發(fā)油，又因為丁香酚具有酸性，通過酸堿法對丁香酚加以分離純化用點滴反應(yīng)和雙向薄層色譜鑒定。四課堂互動1.從丁香油中純化分離丁香酚的主要依據(jù)是什么？2.利用點滴反應(yīng)檢識揮發(fā)油的組成有何意義？五知識拓展從丁香中提取分離揮發(fā)油還可采用下列方法工藝一：工藝二：

將藥材粉碎成粗粉，裝入超臨界萃取罐中，以壓力10MPa，溫度40℃，流量為22L/h的條件萃取4h；以壓力7.0MPa，溫度45℃進行解析，萃取出淡黃色半透明的油狀物，提取得率約為9～12%。此方法為常規(guī)水蒸氣蒸餾法提取得率的3倍。

實訓(xùn)二丁香中揮發(fā)油類化合物的提取分離及鑒定【實訓(xùn)目的】能夠運用水蒸氣蒸餾法、萃取法對丁香中揮發(fā)油進行提取和精制。會用點滴反應(yīng)、薄層色譜法進行揮發(fā)油的檢識?！净瘜W(xué)成分概述】丁香系桃金娘科植物丁香(Eugeniacaryophyllata

Thunb)的干燥花蕾,丁香中揮發(fā)油含量高達14～21%，其中丁香酚揮發(fā)油的78～98%，此外，還有丁香酚乙酸酯、石竹烯、甲基戊基甲酮等。丁香酚是中藥丁香的有效成分，具有局麻、止痛、抗菌消炎、驅(qū)蟲等作用?！緦嵱?xùn)原理】1.利用揮發(fā)油的揮發(fā)性，采用水蒸氣蒸餾法提取丁香中揮發(fā)油。2.利用丁香油中丁香酚具有酸性，可與堿作用生成鹽而溶于水的性質(zhì)分出丁香酚。

【操作步驟】

1.提取分離稱取丁香適量置于蒸餾瓶內(nèi)，加水適量浸泡，安裝蒸餾器，加熱，通水蒸汽進行蒸餾，收集餾出液，至餾出液不渾濁或無丁香油芳香味時，停止蒸餾。將蒸餾液收集于一下口瓶中，加入飽和食鹽水或精制食鹽，使食鹽量達約2～3%，混合均勻，密蓋瓶塞靜止過夜，待丁香油全部聚集于下層時，收集丁香油。取適量丁香油溶于5%氫氧化鉀的稀醇溶液中，乙醚萃取，堿水層酸化后乙醚萃取，蒸去乙醚即是丁香酚?！驹O(shè)備、儀器及藥品】1.實驗藥材：丁香2.實驗儀器及設(shè)備：揮發(fā)油提取裝置燒杯錐形瓶硅膠G-CMC板溫度計層析缸點滴板分液漏斗下口瓶3.實驗藥品：乙醚石油醚乙酸乙酯乙醇三氯化鐵試液溴酚藍試液氨性硝酸銀試液2.4-二硝基苯肼試液香草醛-濃硫酸試液堿性高錳酸鉀試液鹽酸氫氧化鉀食鹽

2.丁香油的鑒定（1）點滴反應(yīng)：取硅膠-CMC-Na薄層板一塊，按表6-6用鉛筆在薄層板上打出小格子，點樣用的丁香油，用乙醇稀釋成5～10倍的溶液，再用細玻璃棒蘸取丁香油乙醇溶液，點在每個小方格內(nèi)，控制樣點的大小不要超格，再用毛細管吸取不同的試劑點在每個小格內(nèi)，控制斑點的大小不要超格，空白對照格也隨同各豎排點相同的試劑，立即觀察每一方格內(nèi)顏色的變化，并初步推測該揮發(fā)油可能含有成分的類型。檢測試劑：①三氯化鐵試液②溴酚藍試液③氨性硝酸銀試液④2.4-二硝基苯肼試液⑤香草醛-濃硫酸試液⑥堿性高錳酸鉀試液（2）三氯化鐵反應(yīng)取丁香酚少許，滴加5%三氯化鐵醇溶液，觀察現(xiàn)象。（3）薄層色譜檢識吸附劑：硅膠-CMC-Na薄層板樣品：丁香油乙醇液丁香酚乙醇液展開劑：環(huán)己烷-乙酸乙酯（3∶1）；環(huán)己烷-三氯甲烷-無水乙醇（7∶3∶1）顯色劑：噴以鹽酸酸化的5%三氯化鐵醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點顯色清晰實驗結(jié)果記錄：觀察斑點顏色，記錄圖譜并計算Rf值。【實訓(xùn)說明及體會】雙向?qū)游鳇c樣，丁香經(jīng)水蒸氣蒸餾所得的丁香油與水混合物，丁香油比重略重于水，有時二者不能很好分層，餾出液呈乳白色，因此，必須通過鹽析使其分層或用有機溶劑萃取分出丁香油。任務(wù)三八角茴香油的提取/bj365/html/test/1.htm學(xué)習(xí)小結(jié)（一）學(xué)習(xí)內(nèi)容提取分離提取、分離色譜測定理化性質(zhì)性狀、溶解性、揮發(fā)性、穩(wěn)定性、結(jié)晶性化學(xué)組成單萜及倍半萜、芳香族、脂肪族等應(yīng)用實例化學(xué)法、薄層法薄荷、當歸、丁香揮發(fā)油類化合物理化性質(zhì)性狀、溶解性、加成、氧化、脫氫反應(yīng)結(jié)構(gòu)類型單萜及倍半萜、二萜、三萜、多萜應(yīng)用實例黃花蒿萜類化合物（二）學(xué)習(xí)方法與體會

1.萜類的學(xué)習(xí)重點是結(jié)構(gòu)類型，特別是對卓酚酮、環(huán)烯醚萜和薁類的結(jié)構(gòu)的認識，為學(xué)習(xí)揮發(fā)油奠定基礎(chǔ)。2.揮發(fā)油的學(xué)習(xí)應(yīng)在了解其組成的基礎(chǔ)上，分析和總結(jié)出該類成分的理化性質(zhì)，進而分析和提出其提取分離方法。目標檢測一、選擇題1.開鏈萜烯的分子組成符合下列那些通式：A、（CnHn）nB、（C4H8）nC、CnHnD、（C5H8）nE、n（C5H8）2.在含氧單萜中，沸點隨功能基極性增加而升高，常見功能基沸點的排列順序為：A、醚<醛<酮<醇<酸B、醚<酮<醛<醇<酸C、醇<醛<酮<醚<酸D、酮<醛<醚<醇<酸E、酸<醇<醛<酮<醚3.區(qū)別油脂與揮發(fā)油可利用下述哪項性質(zhì)較為可靠：A、氣味B、折光率C、相對密度D、不飽和度E、油斑試驗4.揮發(fā)油中的芳香化合物多為（）的衍生物。A、苯酚B、苯甲醇C、苯甲醛D、苯丙素E、苯甲酸5.薁類屬于：A、半萜B、單萜C、倍半萜D、二萜E、三萜6.揮發(fā)油是廣泛存在于植物體內(nèi)的一類多成分的：A、堿性成分B、酸性成分C、萜類D、油狀混合物E、芳香成分7.揮發(fā)油在低溫下析出的結(jié)晶，一般稱為：A、胨B、腙C、腦D、復(fù)合物E、絡(luò)合物

8、亞硫酸鈉法可用于分離：A、堿性成分B、酸性成分C、含羰基成分D、醇類成分E、奧類成分9、揮發(fā)油中具有顏色的成分是：

A、單萜酸B、單萜烯C單萜醛