第十四章其他儀器分析法簡(jiǎn)介

第十四章其他儀器分析法簡(jiǎn)介◆學(xué)習(xí)目的⊙◆知識(shí)要求⊙◆能力要求⊙◆進(jìn)入章節(jié)學(xué)習(xí)請(qǐng)點(diǎn)這里第1節(jié)第2節(jié)第3節(jié)第4節(jié)1◆學(xué)習(xí)目的通過(guò)學(xué)習(xí)毛細(xì)管電泳分離分析法、熒光分光光度法、核磁共振波譜和質(zhì)譜產(chǎn)生的原理和條件等有關(guān)知識(shí)，了解毛細(xì)管電泳儀、熒光分光光度計(jì)、核磁共振波譜儀和質(zhì)譜儀的主要部件、功能和在藥物分析、藥物分離檢測(cè)中的用途。

2◆知識(shí)要求1．熟悉毛細(xì)管電泳分離分析法、熒光分光光度法、核磁共振波譜法和質(zhì)譜法的各自特點(diǎn)和用途。2．了解毛細(xì)管電泳分離分析法、熒光分光光度法、核磁共振波譜和質(zhì)譜產(chǎn)生的原理。3◆能力要求學(xué)會(huì)毛細(xì)管電泳儀、熒光分光光度計(jì)、核磁共振波譜儀和質(zhì)譜儀的一般使用方法。4第一節(jié)毛細(xì)管電泳分離分析法簡(jiǎn)介第一節(jié)毛細(xì)管電泳分離分析法簡(jiǎn)介毛細(xì)管電泳（capillaryelectrophoresis，CE）是一類(lèi)以毛細(xì)管為分離通道、以高壓直流電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力的新型液相分離分析技術(shù)。5第一節(jié)毛細(xì)管電泳分離分析法簡(jiǎn)介一、基本原理（一）電泳和離子在電場(chǎng)中的遷移在半導(dǎo)電流體中，荷電粒子在外電場(chǎng)作用下的泳動(dòng)現(xiàn)象叫電泳。不同粒子在電場(chǎng)中的遷移速度是不同的，這正是毛細(xì)管電泳分離的理論基礎(chǔ)。6第一節(jié)毛細(xì)管電泳分離分析法簡(jiǎn)介（二）毛細(xì)管電泳中的電滲現(xiàn)象和電滲流１．電滲在液體兩端施加一定的電壓時(shí)，就會(huì)發(fā)生液體相對(duì)于固體表面的移動(dòng)現(xiàn)象，這種現(xiàn)象就叫做電滲現(xiàn)象。２．電滲流在電滲力驅(qū)動(dòng)下毛細(xì)管中整個(gè)液體的流動(dòng)，叫做毛細(xì)管電泳中的電滲現(xiàn)象（EOF），其大小常用電滲流速度υeo表示。7第一節(jié)毛細(xì)管電泳分離分析法簡(jiǎn)介(三)毛細(xì)管電泳的分離原理當(dāng)待測(cè)樣品位于兩端加上高壓電場(chǎng)的毛細(xì)管的正極端時(shí)，正離子的電泳方向與電滲流方向一致，最先到達(dá)毛細(xì)管的負(fù)極端；中性粒子的電泳速為“零”，故其遷移速度相當(dāng)于電滲流速度；而負(fù)離子的電泳方向則與電滲流方向相反，但因電滲流速度一般都大于電泳速度，故負(fù)離子將在中性粒子之后到達(dá)毛細(xì)管的負(fù)極端。

8第一節(jié)毛細(xì)管電泳分離分析法簡(jiǎn)介二、毛細(xì)管電泳分離的裝置毛細(xì)管電泳分離的裝置包括高壓電源、一根毛細(xì)管、兩個(gè)供毛細(xì)管兩端插入而又可和高壓電源相連的緩沖溶液貯液瓶、檢測(cè)器及一臺(tái)控制電泳儀和收集處理數(shù)據(jù)的計(jì)算機(jī)。9第二節(jié)熒光分光光度法簡(jiǎn)介第二節(jié)熒光分光光度法簡(jiǎn)介某些物質(zhì)吸收紫外-可見(jiàn)光后，可以發(fā)射其波長(zhǎng)比吸收光更長(zhǎng)的光，并且隨照射光的消失而消失，這種發(fā)射光稱(chēng)為熒光（fluorescence）。熒光分光光度法（fluorometry）是利用某些物質(zhì)發(fā)射熒光的特性進(jìn)行定性、定量分析的光學(xué)分析方法，又稱(chēng)熒光光譜法。10第二節(jié)熒光分光光度法簡(jiǎn)介一、基本原理（一）熒光的產(chǎn)生物質(zhì)的基態(tài)分子吸收照射光的能量從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)，生成激發(fā)態(tài)分子。激發(fā)態(tài)分子能量較高，在與其他分子碰撞時(shí)，以放熱的形式損失部分能量，而從激發(fā)態(tài)的較高振動(dòng)能級(jí)回到同一電子能級(jí)的最低振動(dòng)能級(jí)，這一過(guò)程叫振動(dòng)弛豫。在振動(dòng)弛豫后，熒光物質(zhì)則以發(fā)射光量子形式回到第一激發(fā)態(tài)最低振動(dòng)能態(tài)，由此躍遷、回到基態(tài)的各振動(dòng)能級(jí)而產(chǎn)生的電磁輻射叫熒光

。11第二節(jié)熒光分光光度法簡(jiǎn)介12第二節(jié)熒光分光光度法簡(jiǎn)介（二）激發(fā)光譜和熒光光譜熒光物質(zhì)都具有激發(fā)光譜和熒光光譜（也叫發(fā)射光譜）

。熒光波長(zhǎng)一定時(shí)，熒光強(qiáng)度隨激發(fā)光波長(zhǎng)而變化的關(guān)系曲線稱(chēng)為激發(fā)光譜；激發(fā)光波長(zhǎng)和強(qiáng)度一定時(shí)，熒光強(qiáng)度隨熒光波長(zhǎng)而變化的關(guān)系曲線稱(chēng)為熒光光譜。13第二節(jié)熒光分光光度法簡(jiǎn)介二、熒光分光光度計(jì)基本結(jié)構(gòu)熒光分光光度計(jì)的主要部件由光源、單色器、樣品池和檢測(cè)器四個(gè)部分組成。14第二節(jié)熒光分光光度法簡(jiǎn)介15課堂互動(dòng)1．熒光光譜屬于（）A．吸收光譜B．發(fā)射光譜C．紅外光譜D．質(zhì)譜2．熒光波長(zhǎng)與相應(yīng)激發(fā)光波長(zhǎng)相比（）A．前者較長(zhǎng)B．后者較長(zhǎng)C．二者相等D．關(guān)系不確定

第二節(jié)熒光分光光度法簡(jiǎn)介16第三節(jié)核磁共振波譜法簡(jiǎn)介第三節(jié)核磁共振波譜法簡(jiǎn)介核磁共振（nuclearmagneticresonance,NMR）指原子核放入磁場(chǎng)中，用適宜頻率的電磁波照射，它們會(huì)吸收能量，發(fā)生原子核能級(jí)的躍遷的現(xiàn)象。核磁共振光譜（NMRspectrum）是核磁共振信號(hào)的強(qiáng)度隨照射波頻率或外磁場(chǎng)磁感強(qiáng)度而改變的曲線。

17第三節(jié)核磁共振波譜法簡(jiǎn)介一、基本原理（一）原子核的自旋原子核為帶電粒子，原子核自旋的特征用自旋量子數(shù)I來(lái)描述。（二）原子核的進(jìn)動(dòng)與核磁共振當(dāng)原子核進(jìn)動(dòng)頻率等于所吸收的照射波的頻率時(shí)，原子核從低能級(jí)躍遷至高能級(jí)，從而產(chǎn)生核磁共振吸收