血細(xì)胞分析儀復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)的探討

血細(xì)胞分析儀復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)的探討血細(xì)胞分析儀的工作原理三分群血細(xì)胞分析儀

當(dāng)細(xì)胞快速流經(jīng)小孔時，由于細(xì)胞是不良導(dǎo)體，小孔電阻R加大，相當(dāng)于小孔的橫截面積a減少，在電流恒定的情況下，出現(xiàn)瞬間的電壓變化而產(chǎn)生一個電脈沖，電脈沖的數(shù)量就是流經(jīng)小孔的細(xì)胞數(shù)；電脈沖的大小與細(xì)胞大小成正比，因此能進(jìn)行細(xì)胞分類。血細(xì)胞分析儀的工作原理五分類血細(xì)胞分析儀在三分類血細(xì)胞計數(shù)儀的基礎(chǔ)上，結(jié)合組織化學(xué)和免疫組化，高頻傳導(dǎo)、激光散射技術(shù)，推出了一系列的五分類現(xiàn)代多參數(shù)血細(xì)胞分析系統(tǒng)。從直方圖到散點圖；從無數(shù)據(jù)儲存到宏大的數(shù)據(jù)庫；從無質(zhì)控文件到有多個質(zhì)控文件，實現(xiàn)了真實意義的全自動。血細(xì)胞分析儀的優(yōu)勢：重復(fù)性好，干擾因素少，排除了人為主觀因素影響，結(jié)果判斷客觀準(zhǔn)確?？膳繕悠窚y定和眾多項目測定同時進(jìn)行。避免標(biāo)本之間的污染以及標(biāo)本對人的“污染”。便于進(jìn)行室內(nèi)及室間質(zhì)量控制血細(xì)胞分析儀的不足血細(xì)胞分析儀測定原理雖有不同，但它的各種項目的閾值是人設(shè)定的，而且是固定的，可是病人血細(xì)胞變化是千姿百態(tài)，有部分細(xì)胞難以識別或認(rèn)錯干擾其它細(xì)胞計數(shù)，如有核紅細(xì)胞可影響白細(xì)胞計數(shù)；細(xì)胞碎片、血小板聚集可影響血小板計數(shù)等。有了全自動血細(xì)胞分析儀血常規(guī)檢測就可高枕無憂了嗎？三分類血細(xì)胞分析儀器白細(xì)胞的直方圖正常是“兩峰一谷”。如果白細(xì)胞直方圖失態(tài)，則提示白細(xì)胞形態(tài)學(xué)異常或隱含白血病。五分類血細(xì)胞分析儀由于采用了多種復(fù)合技術(shù)，它們顯示的不是細(xì)胞體積的直方圖，而是二維或三維散點圖及染色后的直方圖。正常的血細(xì)胞在散點圖上有其固定的位置和形態(tài)，如果散點圖異常，也是異常細(xì)胞提示。

直方圖或散點圖的實質(zhì)——篩選實驗血細(xì)胞分析儀的白細(xì)胞分類雖已達(dá)到了相當(dāng)“完善”的程度，但血涂片染色分類仍能提供更多其它重要信息，特別是各種異常血細(xì)胞及血液寄生蟲的形態(tài)學(xué)識別，這是儀器分類不能代替的。直方圖或散點圖的實質(zhì)——篩選實驗?zāi)壳肮J(rèn)，血細(xì)胞分析儀在形態(tài)學(xué)識別上還是一種過篩檢查，特別在某些病理條件下，對于紅細(xì)胞系直方圖的非正態(tài)分布、雙峰、多峰，白細(xì)胞系直方圖的高峰、缺峰，血小板直方圖異常等，顯微鏡檢查可解釋異常圖形和異常報警提示，而對儀器無法辨別形態(tài)的細(xì)胞，也只能通過鏡檢來確認(rèn)。直方圖或散點圖的實質(zhì)——篩選實驗尤其是白細(xì)胞形態(tài)學(xué)分類與血細(xì)胞分析儀的白細(xì)胞分類有本質(zhì)上的不同，三分群僅僅是根據(jù)細(xì)胞大小來分而己，即使先進(jìn)的五分類也與形態(tài)學(xué)也有很大差異，又如中性粒細(xì)胞毒性病變、變異淋巴細(xì)胞、瘧原蟲等臨床需要的指標(biāo)無法顯示；有的幼稚細(xì)胞、有核紅細(xì)胞也不能區(qū)分；各參數(shù)之間有時還存在互相干擾。總之，血細(xì)胞分析儀的結(jié)果僅僅是屬于過篩而己，不能完全代替人工鏡檢。

直方圖或散點圖的實質(zhì)——篩選實驗復(fù)檢不僅能補(bǔ)充儀器形態(tài)學(xué)鑒別能力的不足，而且還可以直觀地評估和驗證血液學(xué)分析儀所報告結(jié)果的可靠性。憑借血片中細(xì)胞的分布比例，估計儀器給出的白細(xì)胞、血小板計數(shù)、血紅蛋白及白細(xì)胞分類結(jié)果是否大致相符，從而糾正某些由于儀器識別能力的限制造成的誤判。復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)儀器的檔次、病人的情況、臨床醫(yī)生的要求和檢驗人員的經(jīng)驗都影響復(fù)檢率。復(fù)檢率差別很大，從5%~40%參考依據(jù)不一致復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)主張各血液學(xué)實驗室根據(jù)機(jī)身的具體情況，制定本實驗室的標(biāo)準(zhǔn)復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)2005年全國血液體液學(xué)質(zhì)量保證學(xué)術(shù)會議上朱忠勇教授提出下列幾個應(yīng)考慮復(fù)檢的條件：1、儀器出現(xiàn)警示符號2、直方圖或散點圖出現(xiàn)異常3、儀器給出的結(jié)果相互之間出現(xiàn)矛盾4、儀器給出的結(jié)果與臨床初診或提示明顯不符5、臨床初診或提示有白血病等血液病6、臨床醫(yī)生指定要鏡檢復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)2005年國際室間質(zhì)評指導(dǎo)委員會在LaboratoryHematology11期由Barnes執(zhí)筆發(fā)表文章，他們在2002年春季邀請了20位專家開會討論了血細(xì)胞分析儀復(fù)檢問題，在會上一致通過了大會擬定的復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)83條。復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)會后這個標(biāo)準(zhǔn)在6個國家15所不同性質(zhì)的綜合醫(yī)院、腫瘤醫(yī)院、兒童醫(yī)院、社區(qū)醫(yī)院、私人診所等臨床實驗室進(jìn)行實踐，他們擁有BayerADVIA120、BeckmanCoulterGenS和LH750、SysmexSE-9000AN和XE-2100血細(xì)胞分析儀，共進(jìn)行了13,298例驗證，經(jīng)過對數(shù)據(jù)詳細(xì)的分析后這些標(biāo)準(zhǔn)被精煉、整理后形成復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)41條。復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)一、國際血液學(xué)復(fù)檢專家組推薦的41條自動CBC和DC復(fù)檢規(guī)則：1.新生兒：（1）復(fù)檢條件：首次檢測標(biāo)本；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。2.WBC、RBC、Hb、PLT、網(wǎng)織紅細(xì)胞（Ret）：（1）復(fù)檢條件：超出線性范圍；（2）復(fù)檢要求：稀釋標(biāo)本后重新測定。3.WBC、PLT：（1）復(fù)檢條件：低于實驗室確認(rèn)的儀器線性范圍；（2）復(fù)檢要求：按實驗室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）進(jìn)行。復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)4.WBC、RBC、Hb、PLT：（1）復(fù)檢條件：無結(jié)果；（2）復(fù)檢要求：①檢查標(biāo)本是否有凝塊，②重測標(biāo)本，③如果維持不變，用替代方法計數(shù)。5.WBC：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果<4.0x10e9/L或>30.0x10e9/L；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。6.WBC：（1）復(fù)檢條件：3天內(nèi)Delta值超限，并<4.0x10e9/L或>30.0x10e9/L；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)7.PLT：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果<100x10e9/L或>1000.0x10e9/L；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。8.PLT：（1）復(fù)檢條件：Delta值超限的任何結(jié)果；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。9.Hb：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果<70g/L或>其年齡和性別參考范圍上限20g/L；（2）復(fù)檢要求：①涂片鏡檢，②確認(rèn)標(biāo)本是否符合要求。復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)10.平均紅細(xì)胞體積（MCV）：（1）復(fù)檢條件：24h內(nèi)標(biāo)本的首次結(jié)果<75fl或>105fl（成人）；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。11.MCV：（1）復(fù)檢條件：24小時以上的成人標(biāo)本>105fl；（2）復(fù)檢要求：①涂片鏡檢觀察大紅細(xì)胞相關(guān)變化，②如無大紅細(xì)胞相關(guān)變化，要求重送新鮮血標(biāo)本，③如無新鮮血標(biāo)本，報告中注明。12.MCV：（1）復(fù)檢條件：24h內(nèi)標(biāo)本的Delta值超限的任何結(jié)果；（2）復(fù)檢要求：確認(rèn)標(biāo)本是否符合要求。復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)13.平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC）：（1）復(fù)檢條件：≥參考范圍上限20g/L；（2）復(fù)檢要求：檢查標(biāo)本是否有脂血、溶血、RBC凝集及球形紅細(xì)胞。14.MCHC：（1）復(fù)檢條件：<300g/L，同時，MCV正常或增高；（2）復(fù)檢要求：尋找可能因靜脈輸液污染或其他標(biāo)本原因。15.RDW：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果>22%；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)16～22條為白細(xì)胞分類的復(fù)檢規(guī)則：16.無白細(xì)胞分類計數(shù)（DC）結(jié)果或DC結(jié)果不全：（1）復(fù)檢條件：無條件復(fù)檢；（2）復(fù)檢要求：人工分類和涂片鏡檢。17.中性粒細(xì)胞絕對計數(shù)（Neut＃）：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果<1.0x10e9/L或>20.0x10e9/L；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。18.淋巴細(xì)胞絕對計數(shù)（Lym＃）：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果>5.0x10e9/L（成人）或>7.0x10e9/L（<12歲）；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)19.單核細(xì)胞絕對計數(shù)（Mono＃）：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果>1.5x10e9/L（成人）或>3.0x10e9/L（<12歲）；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。20.嗜酸粒細(xì)胞絕對計數(shù)（Eos＃）：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果>2.0x10e9/L；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。21.嗜堿粒細(xì)胞絕對計數(shù)（Baso＃）：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果>0.5x10e9/L；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)22.有核紅細(xì)胞絕對計數(shù)（NRBC＃）：（1）復(fù)檢條件：首次出現(xiàn)任何結(jié)果；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。23條為網(wǎng)織紅細(xì)胞的復(fù)檢規(guī)則：23.網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對計數(shù)（Ret＃）：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果>0.10x10e9/L；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)24～41條為可以提示的復(fù)檢規(guī)則：24.懷疑性報警[不成熟粒細(xì)胞(IG)/桿狀核中性粒細(xì)胞（Band）報警提示除外]：（1）復(fù)檢條件：首次成人結(jié)果出現(xiàn)陽性報警；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。25.懷疑性報警：（1）復(fù)檢條件：首次兒童結(jié)果出現(xiàn)陽性報警；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)26.WBC結(jié)果不可*報警：（1）復(fù)檢條件：陽性報警；（2）復(fù)檢要求：①確認(rèn)標(biāo)本是否符合要求并重測標(biāo)本，②如出現(xiàn)同樣報警提示，檢查儀器，③如需要，進(jìn)行人工分類。27.RBC碎片：（1）復(fù)檢條件：陽性報警；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。28.雙形RBC：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果出現(xiàn)陽性報警；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)29.難溶性RBC：（1）復(fù)檢條件：陽性報警；（2）復(fù)檢要求：①檢查WBC直方/散點圖，②根據(jù)實驗室SOP證實Ret計數(shù)是否正確，③涂片鏡檢是否有異常形態(tài)的紅細(xì)胞。30.PLT聚集報警：（1）復(fù)檢條件：任何計數(shù)結(jié)果；（2）復(fù)檢要求：①檢查標(biāo)本是否有凝塊，②涂片鏡檢估計PLT數(shù)，③如PLT仍聚集，按實驗室SOP進(jìn)行。31.PLT報警：（1）復(fù)檢條件：除PLT聚集外的PLT和MPV報警；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)32.IG報警：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果出現(xiàn)陽性報警；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。33.IG報警：（1）復(fù)檢條件：WBC的Detal值超上限，有以前確認(rèn)的陽性報警結(jié)果；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。34.左移報警：（1）復(fù)檢條件：陽性報警；（2）復(fù)檢要求：按實驗室SOP進(jìn)行。復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)35.不典型和（或）變異Lym：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果出現(xiàn)陽性報警；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。36.不典型和（或）變異Lym：（1）復(fù)檢條件：WBC的Detal值超上限，有以前確認(rèn)的陽性報警結(jié)果；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。37.原始細(xì)胞報警：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果出現(xiàn)陽性報警；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)38.原始細(xì)胞報警：（1）復(fù)檢條件：3～7天內(nèi)WBC的Detal值通過，有以前確認(rèn)的陽性報警結(jié)果；（2）復(fù)檢要求：按實驗室SOP進(jìn)行。39.原始細(xì)胞報警：（1）復(fù)檢條件：WBC的Detal值超上限，有以前確認(rèn)的陽性報警結(jié)果；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。40.NRBC報警：（1）復(fù)檢條件：陽性報警；（2）復(fù)檢要求：①涂片鏡檢，②如發(fā)現(xiàn)NRBC，計數(shù)NRBC，重新計算WBC結(jié)果。41.Ret：（1）復(fù)檢條件：散點/直方圖異常；（2）復(fù)檢要求：①檢查儀器狀態(tài)是否正常，②如吸樣有問題，重測標(biāo)本，③如結(jié)果維持不變，涂片鏡檢。復(fù)檢內(nèi)容1、對照、評估血液學(xué)分析儀所給出的血液學(xué)有關(guān)參數(shù)的可靠性，必要時加以糾正2、印證直方圖和散點圖上的發(fā)現(xiàn)3、血細(xì)胞的形態(tài)學(xué)觀察4、白細(xì)胞分類復(fù)檢內(nèi)容復(fù)檢的范圍應(yīng)該是全面的，并非單純顯微鏡下作白細(xì)胞分類計數(shù)。應(yīng)該把復(fù)檢作為全血細(xì)胞分析（CBC）一項很重要的質(zhì)量控制措施復(fù)檢的一般步驟1、檢查、了解儀器是否處于正常狀態(tài)，室內(nèi)質(zhì)控是否在允許范圍之內(nèi)。2、仔細(xì)閱讀儀器報告的各種參數(shù)和直方圖、散點圖和臨床提供的初診資料，根據(jù)本室制定的標(biāo)準(zhǔn)，確定是否需要復(fù)檢。復(fù)