第四章 藥物的雜質(zhì)檢查

第三章電子稿第三章藥物的雜質(zhì)檢查掌握藥物中雜質(zhì)的來(lái)源和分類(lèi)、雜質(zhì)限量的定義和計(jì)算掌握一般雜質(zhì)檢查的原理和方法熟悉特殊雜質(zhì)檢查原理了解特殊雜質(zhì)檢查方法。學(xué)習(xí)目標(biāo)一、雜質(zhì)種類(lèi)及來(lái)源

雜質(zhì)是指藥物中存在的無(wú)治療作用或影響藥物的穩(wěn)定性和療效，甚至對(duì)人體健康有害的物質(zhì)。藥物中存在的雜質(zhì)不僅可以影響藥物的質(zhì)量，而且還可以反映出生產(chǎn)貯藏等過(guò)程中存在的問(wèn)題。因雜質(zhì)的多少反映藥物的純度高低，所以藥物的雜質(zhì)檢查又稱(chēng)為純度檢查。第一節(jié)藥物的雜質(zhì)及其來(lái)源

（一）雜質(zhì)的種類(lèi)

藥物中的雜質(zhì)按來(lái)源分為

一般雜質(zhì)：在自然界分布廣，容易引入藥物中的物質(zhì)。如氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬、砷鹽、酸、堿、水分、易炭化物、熾灼殘?jiān)?。其檢查方法收載在藥典的附錄中

2.特殊雜質(zhì)：指在有關(guān)藥物生產(chǎn)或貯藏過(guò)程中，因其生產(chǎn)工藝或藥物本身的性質(zhì)可能引入的雜質(zhì)。

隨藥物的品種而異，如：Aspirin中的游離水楊酸、甾體激素中的其他甾體檢查方法收載在藥典正文各藥品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中按性質(zhì)分為信號(hào)雜質(zhì)和有害雜質(zhì)

信號(hào)雜質(zhì)本身一般無(wú)害，但其含量的多少可反映出藥物的純度水平，如含量過(guò)高，表明藥物的純度差。如氯化物、硫酸鹽等屬于信號(hào)雜質(zhì)。有害雜質(zhì)如砷鹽、重金屬、氰化物對(duì)人體有害，在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中要嚴(yán)格控制。

（二）藥物中雜質(zhì)的來(lái)源1.生產(chǎn)過(guò)程中引入（1）原料、反應(yīng)中間體及副產(chǎn)物（2）試劑、溶劑、催化劑類(lèi)（3）生產(chǎn)中所用金屬器皿、裝置以及其他不耐酸、堿的金屬工具所帶來(lái)的雜質(zhì)(As\Pb\Fe)2貯藏過(guò)程中引入

(1)保管不善或貯存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(2)包裝不當(dāng)二、雜質(zhì)限量檢查及其計(jì)算（一）雜質(zhì)的限量檢查在不影響藥物療效、穩(wěn)定性及不發(fā)生毒性的前提下,藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量.

通常用百分之幾或百萬(wàn)分之幾（ppm）來(lái)表示雜質(zhì)量≤雜質(zhì)限量＜雜質(zhì)量藥品合格藥品不合格限量檢查方法有以下三種：

對(duì)照法靈敏度法比較法（二）雜質(zhì)限量的有關(guān)計(jì)算S式中L——雜質(zhì)限量，%（或mg/kg）；T——標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，mg/ml（或μg/ml）；V——標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，mL；S——供試品取樣量，g。第三節(jié)一般雜質(zhì)檢查第二節(jié)一般雜質(zhì)檢查

一、氯化物檢查法1.原理對(duì)照法

2.操作方法

取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25mL（溶液如顯堿性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸10mL；溶液如不澄清，應(yīng)濾過(guò)；置50mL納氏比色管中，加水使成約40mL，搖勻，即得供試液。另取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液，置50mL納氏比色管中，加稀硝酸10mL，加水使成40mL，搖勻，即得對(duì)照溶液。于供試溶液與對(duì)照溶液中，分別加入硝酸銀試液1.0mL，用水稀釋至50mL，搖勻，在暗處放置5min，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察，比較，即得。

3.注意事項(xiàng)

標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液配制：稱(chēng)取氯化鈉0.165g，置1000mL量瓶中，加水適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，精密量取貯備液10mL，置100mL量瓶中，加水稀釋到刻度，搖勻，即得（第1mL相當(dāng)于10ug的Cl)。3.注意事項(xiàng)

①使用的標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液每1mL相當(dāng)于10μg的Cl-。測(cè)定條件下，氯化物濃度以50mL中含50～80μg的Cl-為宜，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液5～8mL。此范圍內(nèi)氯化物所顯渾濁度明顯，便于比較。應(yīng)以此計(jì)算供試品取樣量范圍。3.注意事項(xiàng)

②加硝酸可避免弱酸銀鹽如碳酸銀、磷酸銀及氧化銀沉淀的干擾，且可加速氯化銀沉淀的生成并產(chǎn)生較好的乳濁。酸度以50mL供試溶液中含稀硝酸10mL為宜。③供試品溶液如不澄明，可用含硝酸的蒸餾水洗凈濾紙中氯化物后再濾過(guò)。3.注意事項(xiàng)

④供試品如帶顏色，常采用內(nèi)消色法處理，即取供試品溶液兩份，分置50mL納氏比色管中，一份加硝酸銀試液1.0mL，搖勻，放置10min，如顯渾濁，可反復(fù)過(guò)濾，至濾液完全澄清，再加規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液與水適量使成50mL，搖勻，在暗處放置5min，作為對(duì)照溶液；另一份加硝酸銀試液1.0mL與水適量使成50mL，搖勻，在暗處放置5min，對(duì)兩管進(jìn)行比濁。此外，也可采用外消色法，即加入某種試劑，使供試液褪色后再檢查。⑤操作時(shí)的溫度一般控制在30～40℃，以產(chǎn)生最大的渾濁度，結(jié)果也較恒定；若在20℃以下，生成氯化銀渾濁的速度較慢，也不恒定。⑥檢查氯化物時(shí)，應(yīng)按規(guī)定操作程序進(jìn)行，先制成約40mL水溶液后，再加硝酸銀試液，以免在較大濃度的氯化物存在時(shí)產(chǎn)生沉淀，影響比濁結(jié)果。加入硝酸銀試液后，宜緩慢地混勻，如過(guò)快則生成的渾濁減少。另外，標(biāo)準(zhǔn)管與供試管必須平行進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，如加入試劑的程序及放置時(shí)間應(yīng)一致，所用納氏比色管的規(guī)格一致，比濁時(shí)同置于黑色襯底上自上而下觀察。二、硫酸鹽檢查法（一）原理對(duì)照法2．操作方法

取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成約40mL（溶液如顯堿性，可滴加鹽酸使成中性）；溶液如不澄清，應(yīng)濾過(guò)；置50mL納氏比色管中，加稀鹽酸2mL，搖勻，即得供試液。另取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液，置50mL納氏比色管中，加水使成約40mL，加稀鹽酸2mL，搖勻，即得對(duì)照溶液。于供試溶液與對(duì)照溶液中，分別加入25%氯化鋇溶液5mL，用水稀釋成50mL，充分搖勻，放置10min，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察，比較，即得。3．注意事項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液的制備：稱(chēng)取硫酸鉀0.181g，置1000mL量瓶中，加水適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得（每1mL相當(dāng)于100ug的SO42-）。3．注意事項(xiàng)

①每1mL標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液相當(dāng)于100μg的SO42-。②供試品溶液加入鹽酸使成酸性，可防止碳酸鋇或磷酸鋇等沉淀生成，影響比濁。但酸度過(guò)大可使硫酸鋇溶解，降低檢查靈敏度，以50mL供試中含2mL稀鹽酸為宜。③供試溶液如需濾過(guò)，應(yīng)先用鹽酸使成酸性的蒸溜水洗凈濾紙中硫酸鹽。④供試品如有色，采用內(nèi)消色法處理，即取供試品溶液兩份，分置50mL納氏比色管中，一份加25%氯化鋇溶液5mL，搖勻，放置10min，如顯渾濁，可反復(fù)過(guò)濾，至濾液完全澄清，再加規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液與水適量使成50mL，搖勻，放置10min，作為對(duì)照溶液；另一份加25%氯化鋇溶液5mL與水適量使成50mL，搖勻，放置10min，按上述方法對(duì)照溶液比較，即得。⑤溫度對(duì)渾濁有影響，操作溫度一般控制在25～30℃，若溫度太低，產(chǎn)生的白色渾濁既慢又少，且不穩(wěn)定。故室溫低于10℃時(shí)應(yīng)將比色管在25～30℃水浴中放置10min，再進(jìn)行比較。⑥采用25%氯化鋇溶液，呈現(xiàn)的渾濁度較穩(wěn)定，使用時(shí)不必新配。三、鐵鹽檢查法（一）硫氰酸鹽法1.原理2.檢查方法

藥典附錄

除另有規(guī)定外，取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品：過(guò)硫酸銨50mg25ml稀HCl4mL30%硫氰酸銨H2O50mlH2O

供試品標(biāo)準(zhǔn)溶液3mlHNO3與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液一定量制成的對(duì)照溶液（取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液，置50ml納氏比色管中，加水使成25ml，加稀鹽酸4ml與（NH4）2S2O850mg，用水稀釋使成35ml后，加30%NH4SCN溶液3ml，再加水適量稀釋成50ml，搖勻）

比較，即得。3、注意事項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液的制備：稱(chēng)取硫酸鐵銨0.863g，置1000mL量瓶中，加水溶解后，加硫酸2.5mL，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，精密量取貯備液10mL，置100mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得（每1mL相當(dāng)于10ug的Fe)。3、注意事項(xiàng)（1）適宜的比濁濃度為10-50ugFe3+/50mL。（2）測(cè)定法中，加入氧化劑過(guò)硫酸銨將供試品中Fe2+氧化成Fe3+，同時(shí)可防止硫氰酸鐵因光照還原或分解褪色。（3）有些藥物如葡萄糖、糊精、硫酸氫鈉和硫酸鎂等在檢查過(guò)程中加硝酸處理，則不再加過(guò)硫酸銨，但必須加熱煮沸除去一氧化氮，因硝酸中可能含亞硝酸，能與硫氰酸根離子作用，生成紅色亞硝酰氰化物，影響比色。3、注意事項(xiàng)（4）鐵鹽與硫氰酸根離子的反應(yīng)為可逆反應(yīng)，加入過(guò)量的硫氰酸銨可增加產(chǎn)物配離子穩(wěn)定性，提高反應(yīng)靈敏度，還能消除氯化物等干擾。（5）消色方法：用正丁醇或異戊醇外消色法。四、重金屬檢查法以鉛為代表，共有3種檢查方法系指在實(shí)驗(yàn)條件下，能與CH3CSNH2或Na2S作用顯色的金屬雜質(zhì)。如銀、鉛、汞、銅、鎘、鉍、錫、砷、銻、鎳、鈷、鋅等第一法硫代乙酰胺法

適用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物

1.原理懸濁液2.操作方法除另有規(guī)定外，取25ml納氏比色管三支，甲管中加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量與醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml后，加水或各品種項(xiàng)下規(guī)定的溶劑稀釋成25ml，乙管中加入按各品種項(xiàng)下規(guī)定的方法制成的供試液25ml，丙管中加入與甲管相同量的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液后，再加入與乙管相同量的按各品種項(xiàng)下規(guī)定的方法制成的供試液，加水或各品種項(xiàng)下規(guī)定的溶劑使成25ml；若供試液帶顏色，可在甲管與丙管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他無(wú)干擾的有色溶液，使之均與乙管一致；再在甲乙丙三管中分別加硫代乙酰胺試液各2ml，搖勻，放置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視，當(dāng)丙管中顯出的顏色不淺于甲管時(shí)，乙管中顯出的顏色與甲管比較，不得更深。如丙管中顯出的顏色淺于甲管，應(yīng)取樣按第二法重新檢查。第二法

適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不溶于水、稀酸、乙醇及堿的有機(jī)藥物。1.原理：500～600℃熾灼，使有機(jī)結(jié)合的重金屬游離，經(jīng)處理后，依第一法檢查。2.操作方法H2SO4進(jìn)一步消化溶解（三）第三法硫化鈉法適用于溶于堿而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥物。如磺胺類(lèi)、巴比妥類(lèi)。1.原理

對(duì)照法懸濁液2.方法取供試品適量，加氫氧化鈉試液5mL與水20mL溶解后，置納氏比色管中，加硫化鈉試液5滴，搖勻，與一定量的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液同樣處理后的顏色比較，不得更深。3.注意事項(xiàng)硝酸鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備：稱(chēng)取硝酸鉛0.1599g，置1000mL量瓶中，加硝酸5mL與水50mL溶解后，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。精密量取貯備液10mL，置100mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得（每1mL相當(dāng)于10ug的Pb)，本液僅供當(dāng)日使用。3.注意事項(xiàng)（1）適宜的比濁質(zhì)量濃度為10-30ug/27mL。（2）反應(yīng)的PH值是3.5，故配制醋酸鹽緩沖液時(shí)要用PH計(jì)測(cè)定，調(diào)至PH=3.5，此酸度下PbS沉淀較完全。（3）必須蒸干除去氧化氮，否則亞硝酸可氧化硫化氫析出硫，影響比色檢查。3.注意事項(xiàng)（4）溫度愈高，重金屬損失愈多，熾灼溫度為500-600℃最合適。（5）某些供試品熾灼時(shí)能腐蝕瓷坩堝而帶入較多的重金屬，應(yīng)改用石英坩堝或鉑坩堝操作。五、砷鹽檢查法

（一）古蔡法

As有毒——須嚴(yán)格控制，常有2種方法1.原理遇HgBr2試紙生成黃色～棕色的砷斑，與2ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液在相同條件下生成的砷斑比較古蔡法2.操作方法（1）標(biāo)準(zhǔn)砷斑用2ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液制備（2）供試品需經(jīng)有機(jī)破壞，則標(biāo)準(zhǔn)砷溶液應(yīng)平行操作古蔡法黃色棕色

古蔡法檢砷裝置A-砷化氫發(fā)生瓶；B-中空磨口塞；C-導(dǎo)氣管；D-具孔的有機(jī)玻璃旋塞；E-具孔的有機(jī)玻璃旋塞蓋3.注意事項(xiàng)

①若供試品為硫化物、亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽等，在酸性溶液中生成硫化氫或二氧化硫氣體，與溴化汞作用生成黑色硫化汞或金屬汞，干擾比色。應(yīng)先加硝酸處理，使氧化成無(wú)干擾的硫酸鹽，過(guò)量的硝酸及產(chǎn)生的氮的氧化物應(yīng)蒸干除盡。②供試品若為鐵鹽，不僅消耗還原劑，影響測(cè)定條件，且能氧化砷化氫。應(yīng)先加酸性氯化亞錫試液，將Fe3+還原為Fe2+，再依法檢查。③供試品若為強(qiáng)氧化劑或在酸性溶液中能產(chǎn)生強(qiáng)氧化性物質(zhì)者，如亞硝酸鈉在酸性溶液中能產(chǎn)生亞硝酸和硝酸，不僅消耗鋅粒且產(chǎn)生氮的氧化物氧化新生態(tài)的氫，影響砷化氫的生成。因此，需加入硫酸先行分解后依法測(cè)定。④具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)藥物，因砷可能以共價(jià)鍵與其結(jié)合，需進(jìn)行有機(jī)破壞后再檢查，常用的有機(jī)破壞法有堿破壞法和酸破壞法。若供式品需經(jīng)有機(jī)破壞后再行檢砷，則制備標(biāo)準(zhǔn)砷斑時(shí)，應(yīng)取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2.0mL代替供試品，照各品種項(xiàng)下規(guī)定的方法同法處理后，依法制備標(biāo)準(zhǔn)砷斑。⑤砷斑遇光、熱及濕氣則褪色。如需保存，可將砷斑在石蠟飽和的石油醚溶液中浸過(guò)晾干或避光置于干燥器內(nèi)，也可將砷斑用濾紙包好夾在記錄本中保存。（二）二乙基二硫代氨基甲酸銀法（

Ag-DDC法）

原理：對(duì)照法砷化氫與Ag-DDC溶液作用，還原Ag—DDC為紅色膠態(tài)銀，直接比色或于510nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，進(jìn)行比較。

a靈敏度高0.5

gAs/30mlb可儀器測(cè)定,還可定量cSb干擾小

Ag-DDC法檢砷裝置A-砷化氫發(fā)生瓶；B-中空磨口塞；C-導(dǎo)氣管；D-平底玻璃管用有機(jī)堿吸收反應(yīng)產(chǎn)生的HDDC有利于反應(yīng)的進(jìn)行。本法適用于含Sb量小于500

g的供試品。六、硫化物檢查法

硫化物為有毒物質(zhì)。原理：硫化物與鹽酸作用產(chǎn)生硫化氫氣體，遇醋酸鉛試紙產(chǎn)生棕色的硫化鉛“硫斑”，與一定量標(biāo)準(zhǔn)硫化鈉溶液在相同條件下生成的硫斑比較，判斷供試品中硫化物是否符合限量規(guī)定。儀器裝置同古蔡法檢砷裝置，但導(dǎo)氣管中不裝醋酸鉛棉花，溴化汞試紙改用醋酸鉛試紙。反應(yīng)溫度為80～90℃水浴中加熱10min。七、硒鹽檢查法

藥物中混入的微量硒主要來(lái)自生產(chǎn)中使用的試劑。元素狀態(tài)的硒無(wú)毒，但硒化物（二氧化物）有劇毒，因此對(duì)有可能引入硒的藥物要對(duì)殘留硒進(jìn)行限量檢查。檢查時(shí)先將有機(jī)藥物用氧瓶燃燒法進(jìn)行有機(jī)破壞，使硒成為高價(jià)氧化物(SeO3)，被硝酸溶液吸收，再用鹽酸羥胺將Se6+還原為Se4+，在pH＝2.0±2的條件下，加二氨基萘試液反應(yīng)100min，生成4,5-苯并苯硒二唑，用環(huán)己烷提取后在378nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，結(jié)果應(yīng)不大于對(duì)照液的吸收度。

檢查不含金屬的有機(jī)藥物或揮發(fā)性無(wú)機(jī)藥物中混入的無(wú)機(jī)雜質(zhì)(金屬氧化物或無(wú)機(jī)鹽類(lèi))。1.原理

樣品炭化后+H2SO4濕潤(rùn)→700～800℃熾灼至恒重→熾灼殘?jiān)蛩峄曳郑?/p>

八、熾灼殘?jiān)鼨z查法2.操作方法九、干燥失重測(cè)定法

干燥失重是指藥物在規(guī)定條件下經(jīng)干燥后所減失的重量，主要是水分，也包括其它揮發(fā)性物質(zhì)。（一）常壓恒溫干燥法

適用于受熱較穩(wěn)定的藥物。干燥溫度：105℃。取供試品，混合均勻（如為較大的結(jié)晶，應(yīng)先迅速搗碎使成2mm以下的小粒），取約1g或各品種項(xiàng)下規(guī)定的重量，置與供試品相同條件下干燥至恒重的扁形稱(chēng)量瓶中，精密稱(chēng)定，除另有規(guī)定外，在105℃干燥至恒重（兩次干燥后的重量差在0.3mg以下）。由減失的重量和取樣量計(jì)算供試品的干燥失重。（二）干燥劑干燥法

適用于受熱易分解、易揮發(fā)的供試品。將供試品置干燥器中，利用干燥器內(nèi)的干燥劑吸收水分至恒重。干燥劑應(yīng)保持在有效狀態(tài)。常用的干燥劑有硅膠、無(wú)水氯化鈣、硫酸和五氧化二磷。

（三）減壓干燥法適用于熔點(diǎn)低、受熱不穩(wěn)定及水分難去除的藥物。使用減壓干燥器或恒溫減壓干燥箱，控制壓力在2.67kPa(20mmHg)以下，使藥物中水分在減壓下以較低的干燥溫度和較短的干燥時(shí)間內(nèi)得以排除。十、水分測(cè)定法藥品中的水包括結(jié)晶水和吸附水。過(guò)多的水分不僅使藥物的有效成分含量降低，還易使藥物水解、霉變，影響其理化性狀和生理作用?！吨袊?guó)藥典》（2010）采用卡爾-費(fèi)休(KarlFischer、簡(jiǎn)稱(chēng)費(fèi)休)法和甲苯法測(cè)定。原理：

采用由碘、二氧化硫、吡啶和甲醇按一定比例組成的費(fèi)休氏試液作標(biāo)準(zhǔn)滴定液。利用碘氧化二氧化硫時(shí)，需一定量水分參加反應(yīng)。

I2＋SO2＋H2O2HI＋SO3

因上述反應(yīng)可逆，加無(wú)水吡啶和無(wú)水甲醇使反應(yīng)順利進(jìn)行?？偡磻?yīng)為

I2＋SO2＋3C5H5N+CH3OH+H2O→

2C5H5NHI＋C5H5NHSO4CH3

判斷滴定終點(diǎn)的方法：

①自身作指示劑，即利用碘的顏色指示終點(diǎn)，終點(diǎn)前溶液呈淺黃色，終點(diǎn)時(shí)為紅棕色（微過(guò)量的費(fèi)休試劑中碘的顏色）。

②永停滴定法：按永停滴定法操作，終點(diǎn)時(shí)電流計(jì)指針突然偏轉(zhuǎn)，并持續(xù)數(shù)分鐘不退回。十一、溶液顏色檢查法

不溶性雜質(zhì)的生產(chǎn)和貯存過(guò)程都會(huì)生成有色雜質(zhì)目視法、吸光度法和色差計(jì)法ChP(2010)采用三種方法檢查。標(biāo)準(zhǔn)比色液

（一）目視比色法與標(biāo)準(zhǔn)比色液比較黃色(0.800mg/mL)K2Cr2O7;

紅色(59.5mg/mLCoCl2.6H2O);

藍(lán)色(62.4mg/mLCuSO4.5H2O)標(biāo)準(zhǔn)比色液(二)分光光度法單一波長(zhǎng)定量

用分光光度法檢查有色雜質(zhì)，通過(guò)測(cè)定溶液的吸收度，反映溶液的顏色變化。測(cè)定時(shí)，取一定量供試品，加水溶解，必要時(shí)濾過(guò)，濾液照分光光度法于規(guī)定波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，不得超過(guò)規(guī)定值。

如維生素C易受外界條件影響而變色，規(guī)定取本品3.0g，加水15mL，振搖使溶解，溶液經(jīng)4號(hào)垂熔玻璃漏斗濾過(guò)，濾液于420nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，不得過(guò)0.03。(三)色差計(jì)法全波長(zhǎng)范圍定量

通過(guò)色差計(jì)直接測(cè)定溶液的透視三刺激值，對(duì)其顏色進(jìn)行定量表述和分析的方法。

測(cè)定時(shí)除另有規(guī)定外，用水對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)。取按各品種項(xiàng)下規(guī)定的方法制得的供試品溶液和標(biāo)準(zhǔn)比色液，置儀器上進(jìn)行測(cè)定，供試品溶液與水的色差值應(yīng)不超過(guò)相應(yīng)色調(diào)的標(biāo)準(zhǔn)比色液與水的色差值。

也可以將預(yù)先測(cè)定好的各色調(diào)色號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)比色液對(duì)水的標(biāo)準(zhǔn)色差值輸入到儀器，然后直接測(cè)量供試品溶液對(duì)水的色差值；若，供試品溶液顏色合格，反之為不合格?！苁⒁滋炕餀z查法

檢查藥物中遇H2SO4易炭化或易被氧化呈色的有機(jī)雜質(zhì)。此類(lèi)雜質(zhì)多數(shù)結(jié)構(gòu)未知，用硫酸呈色的方法可以簡(jiǎn)便地控制此類(lèi)雜質(zhì)的總量。

檢查時(shí)取內(nèi)徑一致的比色管兩支；甲管中加放各品種項(xiàng)下規(guī)定的對(duì)照液5mL；乙管中加94.5%～95.5%（g/g）硫酸5mL后，分次緩緩加入規(guī)定量的供試品,振搖使溶解。除另有規(guī)定外，靜置15min后，將兩管同置白色背景前,平視觀察，乙管中所顯顏色不得較甲管更深。對(duì)照液：（1）“溶液顏色檢查”項(xiàng)下的標(biāo)準(zhǔn)比色液；（2）由比色用氯化鈷液，比色用重鉻酸鉀液，比色用硫酸銅液按規(guī)定方法配成的對(duì)照液；（3）高錳酸鉀液比色：同置白色背景前，平視觀察比較十三、溶液澄清度檢查法檢查藥品溶液中的微量不溶性雜質(zhì)，在一定程度上可反映藥品的質(zhì)量和生產(chǎn)工藝水平，對(duì)于注射用原料藥，檢查其溶液的澄清度尤為重要。標(biāo)準(zhǔn)比濁液：硫酸肼+烏洛托品白色渾濁的甲醛腙1.00％硫酸肼溶液與10％烏洛托品溶液等量混合配制濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液濁度標(biāo)準(zhǔn)原液濁度標(biāo)準(zhǔn)液（5個(gè)級(jí)號(hào)）澄清度標(biāo)準(zhǔn)溶液配制十四、酸堿度檢查法

酸度、堿度、酸堿度、水溶性酸、水溶性堿、游離堿和pH值都是衡量藥物中的酸堿性雜質(zhì)的。酸堿滴定法指示劑法pH值測(cè)定法具體方法1.酸堿滴定法

在規(guī)定的指示液條件下，用規(guī)定濃度的酸或堿滴定液滴定供試品溶液中堿性或酸性雜質(zhì)，以消耗酸或堿滴定液的毫升數(shù)作為限度指標(biāo)。

如檢查氯化鈉的酸堿度：取本品5.0g，加水50mL溶解后，加溴麝香草酚藍(lán)指示液2滴，如顯黃色（示為酸性），加氫氧化鈉滴定液(0.02mol/L)0.10mL，變?yōu)樗{(lán)色；如顯藍(lán)色或綠色（示為堿性），加鹽酸滴定液0.02mol/L)0.20mL，應(yīng)變?yōu)辄S色。表明本品100g中所含酸性雜質(zhì)的限量為0.04mmol；或所含堿性雜質(zhì)的限量為0.08mmol。2.指示液法