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實(shí)驗(yàn)三霉菌與放線菌形態(tài)觀察姓名:李昳昕年級(jí)專業(yè):08藥學(xué)節(jié)次:周一90節(jié)組數(shù):第五組一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、掌握觀察霉菌形態(tài)的基本方法,并觀察其形態(tài)特征2、掌握觀察放線菌形態(tài)的基本方法,并觀察放線菌的形態(tài)特征二、實(shí)驗(yàn)原理1、霉菌的原理:霉菌菌絲較粗大,細(xì)胞易收縮變形,而且孢子很容易飛散,所以制標(biāo)本時(shí)常用乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液。此染色液制成的霉菌標(biāo)本片其特點(diǎn)是(a)細(xì)胞不變形;(b)具有殺菌防腐作用,且不易干燥,能保持較長(zhǎng)時(shí)間;(c)溶液本身呈藍(lán)色,有一定染色效果。霉菌的菌絲、分生孢子梗和分生孢子的形態(tài)常作為分類的重要依據(jù)。2、放線菌的原理:放線菌在固體培養(yǎng)基上呈輻射狀生長(zhǎng)而得名。放線菌是由不同長(zhǎng)短的纖細(xì)的菌絲所形成的單細(xì)胞菌絲體。菌絲體分為兩部分,即潛入培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)菌絲(或稱基內(nèi)菌絲)和生長(zhǎng)在培養(yǎng)基表面的氣生菌絲。有些氣生菌絲分化成各種孢子絲,呈螺旋形、波浪形或分枝狀等。孢子常呈圓形、橢圓形或桿形。氣生菌絲及孢子的形狀和顏色常作為分類的重要依據(jù)。三、實(shí)驗(yàn)器材1、菌種:培養(yǎng)48-72h的曲霉(Aspergillussp.),青霉(Penicilliumsp.),根霉(Rhizopussp.),培養(yǎng)72-120h的5406放線菌(細(xì)黃鏈霉菌).2、染色液和試劑:乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液,生理鹽水,石炭酸復(fù)紅染液,呂氏堿性美藍(lán)染液.3、器材:土豆培養(yǎng)基平板或查氏培養(yǎng)基平板,高氏1號(hào)培養(yǎng)基平板,接種環(huán),載玻片,蓋玻片,鑷子,酒精燈等。四、實(shí)驗(yàn)方法(一)霉菌觀察:1、直接觀察:將培養(yǎng)3—4天的霉菌培養(yǎng)皿打開,放在顯微鏡低倍鏡下尋找菌落的邊緣,直接觀察菌絲,分生孢子梗和分生孢子。2、染色觀察:于潔凈載玻片上,滴一滴乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液,用鑷子從霉菌菌落的邊緣外取少量帶有孢子的菌絲置染色液中,再細(xì)心地將菌絲挑散開,然后小心地蓋上蓋玻片,注意不要產(chǎn)生氣泡。置顯微鏡下先用低倍鏡觀察,必要時(shí)再換高倍鏡。(二)放線菌觀察:1、放線菌自然生長(zhǎng)狀態(tài)的觀察將培養(yǎng)3—4天的放線菌培養(yǎng)皿打開,放在顯微鏡低倍鏡下尋找菌落的邊緣,直接觀察菌絲,孢子絲和孢子。2、染色觀察(1)用接種鏟或鑷子連同培養(yǎng)基挑取放線菌菌苔置載玻片中央。(2)用另一載玻片將其壓碎,棄去培養(yǎng)基,制成涂片,干燥、固定。(3)用呂氏堿性美藍(lán)染液或石炭酸復(fù)紅染液染0.5—1分鐘,水洗。(4)干燥后,用油鏡觀察營(yíng)養(yǎng)菌絲,孢子絲及孢子的形態(tài)。五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果1、繪圖說明你所觀察到的霉菌形態(tài)特征。(根霉)2、繪圖說明你所觀察到的放線菌形態(tài)特征。六、思考題1、霉菌對(duì)人類生活和生產(chǎn)能產(chǎn)生哪些積極作用和消極作用?霉菌在自然界分布極為廣泛。它們存在于土壤、空氣、水體和生物體內(nèi)外等處,與人類關(guān)系極為密切。積極作用:1.應(yīng)用于檸檬酸、葡萄糖酸等多種有機(jī)酸,淀粉酶、蛋白酶和纖維素酶等多種酶制劑,青霉素和頭孢霉素等抗生素,核黃素等維生素,麥角堿等生物堿,真菌多糖和植物生長(zhǎng)刺激素(赤霉素)等產(chǎn)品的生產(chǎn);2.利用某些霉菌對(duì)甾族化合物的生物轉(zhuǎn)化生產(chǎn)甾體激素類藥物;3.食品釀造:釀酒、制醬及醬油等;4.基礎(chǔ)理論研究:如對(duì)粗糙脈孢菌(Neurosporacrassa)的研究為生化遺傳學(xué)建立提供了大量資料。消極作用:霉菌能引起糧食、水果、蔬菜等農(nóng)副產(chǎn)品及各種工業(yè)原料、產(chǎn)品、電器和光學(xué)設(shè)備的發(fā)霉或變質(zhì),也能引起植物和動(dòng)物疾病,如馬鈴薯晚疫病、小麥銹病、稻瘟病和皮膚癬癥等。2、在自然界和實(shí)際應(yīng)用中放線菌有什么作用?放線菌廣泛分布于含水量較低、有機(jī)物較豐富、微堿性土壤中。放線菌與人類的關(guān)系極為密切:1.放線菌主要能促使土壤中的動(dòng)物和植物遺骸腐爛。2.放線菌中也有致病菌,如牛放線菌,在口頰、齒齦等部位發(fā)生損傷時(shí)能侵入組織內(nèi),引起放線菌病。最主要的致病放線菌是結(jié)核分枝桿菌和麻風(fēng)分枝桿菌,可導(dǎo)致人類的結(jié)核病和麻風(fēng)病。3.放線菌最重要的作用是可以產(chǎn)生、提煉抗菌素,目前世界上已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的2000多中抗菌素中,大約有56%是由放線菌(主要是放線菌屬)產(chǎn)生的,如鏈霉素、土霉素、四環(huán)素、慶大霉素等都是由放線
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