凡納濱對(duì)蝦標(biāo)準(zhǔn)化人工繁育技術(shù)

凡納濱對(duì)蝦標(biāo)準(zhǔn)化人工繁育技術(shù)

例如，凡納沿海蝦、凡納蝦和萬納蝦，通常被稱為白蝦和白蝦。具有繁殖時(shí)間長、生長快、抗逆性強(qiáng)、鹽源大、口感美、肉率高等特生品種的特點(diǎn)。深受家庭歡迎。世界各地大規(guī)模養(yǎng)殖凡納濱對(duì)蝦已延續(xù)多年,我國也不例外,從海南到新疆均有養(yǎng)殖。近些年許多學(xué)者針對(duì)于凡納濱對(duì)蝦促熟培育、人工繁育技術(shù)、苗種培育過程中的關(guān)鍵技術(shù)(親蝦、餌料選擇、水質(zhì)處理、育苗設(shè)施等)[7,8,9,10,11,12,13]、養(yǎng)殖技術(shù)等各方面進(jìn)行了研究。但是,目前為止,完整的人工繁育規(guī)范化操作以及人工繁育標(biāo)準(zhǔn)化設(shè)施均未見報(bào)道。據(jù)我國農(nóng)業(yè)部統(tǒng)計(jì),中國對(duì)蝦養(yǎng)殖產(chǎn)量約為世界的1/3,位居世界第一,蝦苗年需求量約為5000億尾,凡納濱對(duì)蝦是我國養(yǎng)殖面積最大的對(duì)蝦品種,蝦苗年需求量約為4400億尾。自1992年以來,各種病毒病、細(xì)菌病對(duì)世界對(duì)蝦產(chǎn)業(yè)的發(fā)展帶來嚴(yán)重影響。對(duì)蝦繁育是對(duì)蝦養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)發(fā)展的基礎(chǔ),苗種質(zhì)量是關(guān)鍵。要想從根本上解決苗種質(zhì)量問題就要從苗種繁育過程的標(biāo)準(zhǔn)化抓起。標(biāo)準(zhǔn)化配套設(shè)施是實(shí)現(xiàn)凡納濱對(duì)蝦苗種標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)的前提,標(biāo)準(zhǔn)化操作是實(shí)現(xiàn)苗種標(biāo)準(zhǔn)化的保障。本文較全面地介紹了凡納濱對(duì)蝦標(biāo)準(zhǔn)化人工繁育設(shè)施和標(biāo)準(zhǔn)化育苗技術(shù),以期為真正實(shí)現(xiàn)并大范圍推廣凡納濱對(duì)蝦標(biāo)準(zhǔn)化繁育技術(shù)提供依據(jù)。1標(biāo)準(zhǔn)化人工繁殖設(shè)施1.1水質(zhì)、水質(zhì)種苗繁育場建在避風(fēng)內(nèi)灣山丘或高地上,場地的平均標(biāo)高與平均海平面落差10～20m,周圍水質(zhì)清凈,無工業(yè)及城市排污影響,水質(zhì)符合GB11607—1989《漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)》;海域海水鹽度不低于25,pH穩(wěn)定在8.0～8.2;電力充足,交通通信生活方便。1.2水的處理系統(tǒng)凡納濱對(duì)蝦的人工繁育離不開水,在目前養(yǎng)殖的水環(huán)境下,各項(xiàng)指標(biāo)合格的水質(zhì)是實(shí)現(xiàn)凡納濱對(duì)蝦人工繁育的首要條件。要想實(shí)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化人工繁育,需要配備一整套完善的現(xiàn)代化水處理設(shè)施,主要包括:砂濾缸、蛋白質(zhì)分離器(泡沫分離器)、精密過濾器、紫外線消毒器、升降溫系統(tǒng)等設(shè)備。這樣不僅避免育苗過程中藥物的使用,也使育苗成功率大大提高。水處理流程為:貯水池的水流經(jīng)砂濾缸經(jīng)過生物膜過濾、滲透過濾及接觸過濾過程,使水得到凈化;凈化后的水流經(jīng)水槽的過程是將臭氧發(fā)生器中產(chǎn)生的臭氧與水充分混合以殺滅水中的細(xì)菌等微生物,然后用活性炭將水中的臭氧合成物以及殘余的臭氧吸附掉;除掉細(xì)菌等微生物的水經(jīng)過蛋白質(zhì)分離器,以清除水中有機(jī)物顆粒、蛋白質(zhì)、有害金屬離子等,此步驟清除率達(dá)到80%以上;進(jìn)一步凈化的水流經(jīng)兩級(jí)精密過濾器之后,其內(nèi)徑>5μm的顆粒物將被過濾掉;再經(jīng)紫外線照射,水中的細(xì)菌、病毒被殺滅,殺滅率高達(dá)99.0%～99.7%。親蝦培養(yǎng)、育苗以及豐年蟲孵化可用經(jīng)紫外線消毒后的水;而受精卵孵化和藻類大量培養(yǎng)的水必須經(jīng)過1μm的濾筒過濾;藻種培養(yǎng)的水還必須再經(jīng)0.1μm的濾筒過濾后方可使用。整個(gè)水處理流程如圖1所示。1.3細(xì)菌檢測室室2需配備設(shè)施齊全的實(shí)驗(yàn)檢測室,水質(zhì)分析室需配有紫外分光光度計(jì)、pH計(jì)、鹽度計(jì)、超聲波清潔器、常溫冰箱等;細(xì)菌檢測室配有搖床、超凈工作臺(tái)、生化培養(yǎng)箱、常溫冰箱、常溫離心機(jī)、高壓滅菌鍋等;病毒檢測室配有定性、定量PCR儀、高速常溫/冷凍離心機(jī)、常溫以及超低溫冰箱、凝膠電泳系統(tǒng)、色譜分析儀、水浴鍋等;幼體蝦苗質(zhì)量檢測室配有普通電子顯微鏡、電腦成像電子顯微鏡等設(shè)備。2標(biāo)準(zhǔn)化人工繁殖技術(shù)2.1做好親蝦、卵及各期幼苗的質(zhì)量檢測首先,對(duì)所要選的親蝦取樣檢測白斑綜合癥病毒(WSSV)、桃拉病毒(TSV)、傳染性皮下組織壞死病毒(IHHNV)等特定病原和弧菌,若為陽性則不予使用,若為陰性則按照親蝦的質(zhì)量要求選擇,按雌雄比例促熟培養(yǎng)。在整個(gè)繁育發(fā)育過程中包括親蝦、卵及各期幼體變態(tài)后都要進(jìn)行相應(yīng)的質(zhì)量檢測。若病毒檢測為陽性即淘汰掉,若為陰性則繼續(xù)培養(yǎng);活體餌料在投喂前都要進(jìn)行細(xì)菌和病毒檢測,確定合格后才能投喂;卵和各期幼體除了要取樣進(jìn)行病毒細(xì)菌檢測外,還要取樣檢測其受精、發(fā)育、體態(tài)情況,如果不達(dá)標(biāo)也要淘汰;對(duì)達(dá)到出苗規(guī)格的仔蝦,要經(jīng)嚴(yán)格的質(zhì)量檢測合格后方能出售。操作流程如圖2。2.2母蝦繁殖技術(shù)2.2.1身體及體重(1)親蝦來源:從美國夏威夷引進(jìn)的達(dá)到性成熟的親蝦或者自行培育的親蝦。(2)親蝦質(zhì)量要求:所有親蝦體色為淡青色或青灰色,附肢完整,身體和腮要干凈,活力強(qiáng)。另外,雄蝦需達(dá)到10—12月齡,體重35～40g,體長>15cm,交接器發(fā)育完好且并在一起,精囊飽滿,精子有粘性,白色無雜質(zhì),體積大。雌蝦需達(dá)到8—10月齡,體重40～45g,體長>16cm,卵巢四期(成熟)。用定量或定性PCR法檢測對(duì)蝦病毒攜帶情況,確定為無特定病原(SPF)的親蝦,方可投入生產(chǎn)使用。2.2.2親蝦的催熟培育(1)催熟培育池的準(zhǔn)備:氣石沿池邊布置,每隔50～80cm布置1個(gè)。親蝦入池前用含氯消毒劑浸泡1d,洗凈后用碘液消毒。水經(jīng)上述水處理設(shè)施處理后使用,鹽度≥28,pH8.0～8.5,水溫27～30℃,光照度500～1000lx。培育池加水至水深50～70cm。(2)親蝦催熟培育密度:親蝦密度保持10～15尾/m2,雌蝦和雄蝦分池培養(yǎng),雄蝦數(shù)量為雌蝦數(shù)量的1.5倍。(3)親蝦催熟培育方法:在雌蝦殼硬活力強(qiáng)時(shí),用鑷燙法或結(jié)扎法來摘除單側(cè)眼柄。親蝦單側(cè)眼柄摘除后,控制水溫28～30℃,pH8.0～8.3,NH+4-N濃度<0.04mg/L,NO-2-N濃度<0.01mg/L,DO>5mg/L,總堿度140～180。促熟期間投喂經(jīng)嚴(yán)格消毒和檢測、確定不攜帶特定病原的鮮活餌料(新鮮青蟲、紅蟲、魷魚、蠔肉等),日投喂量占親蝦體重的10%～25%,以親蝦攝食后略有剩余為宜,每天投喂4次。(4)日常管理:親蝦培育池的水深保持50～70cm,日換水量為原池水的80%～120%。雌蝦切除眼柄4～7d后,每天早、晚觀察其背部性腺發(fā)育情況。每天對(duì)親蝦培育池的各項(xiàng)水質(zhì)指標(biāo)以及細(xì)菌含量進(jìn)行檢測,根據(jù)情況適時(shí)調(diào)節(jié)水質(zhì)。2.2.3自然交配,不死光照度每天06:00—07:00,把性腺成熟的雌蝦移至雄蝦培育池,讓其自然交配。白天光照度500～1000lx,夜晚光照度120～150lx。在交配期間檢查2次(15:00和17:30),交配后將已經(jīng)獲得精莢的雌蝦撈入產(chǎn)卵池,等待產(chǎn)卵。2.2.4成蟲、產(chǎn)卵及產(chǎn)卵質(zhì)量評(píng)定(1)產(chǎn)卵池的準(zhǔn)備:產(chǎn)卵池經(jīng)高錳酸鉀消毒后,注入處理過的海水1.0～1.3m深,控制產(chǎn)卵池水溫28～30℃,光照度<50lx,布置氣石1個(gè)/m2。(2)移放產(chǎn)卵親蝦:已交配的雌蝦,用濃度為200mg/L的福爾馬林溶液浸泡30～60s,用處理過的海水沖洗干凈后,放入產(chǎn)卵池中,密度4～6尾/m2。(3)雌蝦產(chǎn)卵:已交配的雌蝦在19:00—22:00產(chǎn)卵,產(chǎn)卵期間保持微充氣,保持安靜,減少干擾,以免驚嚇親蝦影響受精率。產(chǎn)卵后小心及時(shí)將雌蝦撈出,放回原培育池中繼續(xù)精心培育,并清除干凈產(chǎn)卵池中的污物。(4)卵子的質(zhì)量評(píng)定:雌蝦產(chǎn)卵后,在電子顯微鏡下檢測卵子的受精情況,若受精卵的比例(受精率)>80%,說明精子和卵子的質(zhì)量達(dá)標(biāo);如果受精率<70%,說明精子或卵子質(zhì)量差或是交配情況不好,應(yīng)排掉。2.2.5胚胎發(fā)育情況(1)受精卵孵化:直接在產(chǎn)卵池中孵化,保證受精卵的密度30×104～80×104粒/m3,充氣使水呈微波狀,水中溶氧達(dá)到5～6mg/L,孵化水溫保持28～30℃,鹽度>28。孵化過程中,每1～2h用攪卵器攪動(dòng)池水1次,及時(shí)把臟物撈出,定時(shí)檢查胚胎發(fā)育情況。(2)孵化率評(píng)定標(biāo)準(zhǔn):胚胎發(fā)育過程中適時(shí)鏡檢,檢測受精卵發(fā)育情況及孵化率,要求孵化率>80%,不能<70%,將檢測結(jié)果及時(shí)反饋給技術(shù)員,做到檢測與生產(chǎn)結(jié)合。(3)無節(jié)幼體質(zhì)量評(píng)定:在電子顯微鏡下觀察卵黃顆粒大,附肢劃動(dòng)有力,黑剛毛完整無損傷,尾棘分開,體表不掛臟,定性或定量PCR檢測不攜帶常見病原(WSSV、TSV、IHHNV等),有強(qiáng)趨光性的幼體為優(yōu)質(zhì)無節(jié)幼體。要求優(yōu)質(zhì)無節(jié)幼體的比率>90%,不能<80%,若畸形率>10%即淘汰。(4)無節(jié)幼體的收集:幼體全部孵出后,用孔徑75μm的排水器(換水網(wǎng))排水至水深40～50cm,在集幼體槽中用孔徑75μm的網(wǎng)箱收集幼體,除去臟物。將幼體移入容積為0.5m3的幼體桶中,微充氣。2.3人工育苗2.3.1細(xì)胞統(tǒng)一檢測法單細(xì)胞藻類需處于指數(shù)生長期,生活力強(qiáng)、生長旺盛,顏色正常,上浮或懸浮;鏡檢細(xì)胞個(gè)體大,飽滿,無敵害和大量沉淀,經(jīng)檢測不含弧菌,不含有特定病原,水質(zhì)指標(biāo)一切正常才可使用;孵化出的鹵蟲無節(jié)幼體需經(jīng)檢測確定不攜帶病原才可投喂。2.3.2池內(nèi)、池內(nèi)消毒(1)消毒:育苗室中各類水泥池,先用海水沖刷幾遍,后用200mg/L的漂白粉溶液洗刷,池內(nèi)育苗工具也一同浸泡于池中消毒。24h后用淡水沖洗干凈。(2)進(jìn)水:用水為處理過的海水,確保海水鹽度26～35,pH8.0～8.5,NH+4-N濃度<0.04mg/L,NO-2-N濃度<0.01mg/L,DO>5.0mg/L,總堿度150～180。2.3.3育苗池和培育條件(1)無節(jié)幼體入池:將無節(jié)幼體倒入塑料桶或盆中,靜置5～10min,然后輕輕移入手抄網(wǎng)(孔徑75μm)中,放在200mg/L福爾馬林溶液中浸泡30～60s,用育苗池的干凈海水沖洗幾遍,按密度15×104～25×104尾/m3移入池中。(2)無節(jié)幼體培育條件:保持微弱充氣,使幼體不下沉為度。培育水溫29～30℃,控制光照度<500lx,無節(jié)幼體培育期間只加水不換水。2.3.4餌料投喂及日常管理(1)培育條件:溞Ⅰ期(Z1),水溫28～30℃,微弱充氣;溞Ⅱ期(Z2),水溫30.5～31.0℃,充氣使水面呈微波狀;溞Ⅲ期(Z3),水溫30.5～31.0℃,充氣逐漸增大至沸騰狀。溫度每天升高0.5～1.0℃。溶解氧>5mg/L,pH7.8～8.6,鹽度25～35,光照度200～1000lx。(2)餌料投喂:以植物性餌料(單胞藻)為主,兼投動(dòng)物性餌料。Z1、Z2、Z3分別按苗池中2.5×104個(gè)細(xì)胞/mL、3.5×104個(gè)細(xì)胞/mL、4.5×104個(gè)細(xì)胞/mL的量投喂單細(xì)胞藻(骨條藻、角毛藻)3～6次/d。同時(shí)每次投喂人工配合餌料0.5～2.0mg/L,每天6次。Z2期開始投喂蛋黃粉(B.P),投喂量為0.5～1.5mg/L,投喂輪蟲5～10個(gè)/mL。Z3期適量投喂鹵蟲無節(jié)幼體。盡量使投喂的餌料多樣化,營養(yǎng)均衡。(3)日常管理:只加水不換水,施用有益菌改良水質(zhì),保證有充足的藻類供給,配合水溫的逐步提升,使幼體能順利地蛻皮變態(tài)。(4)質(zhì)量檢測:經(jīng)檢測活力好,趨光性強(qiáng),胃腸充滿食物,體表不黏附臟物、不附著寄生蟲,附肢完整不畸形,剛毛自然、不彎曲,拖便長度約為體長的1～3倍,經(jīng)檢疫不攜帶特定病原的溞狀幼體為健康幼體。要求整體健康率>90%,若<70%被認(rèn)定不合格;若同池中Z1、Z2、Z3期同時(shí)存在,成活率<50%,此幼體應(yīng)該淘汰。2.3.5蝦類健康管理(1)培育條件:各期水溫控制范圍,糠Ⅰ期(M1)為30.5～31.0℃;糠Ⅱ期(M2)為31.0～31.5℃;糠Ⅲ期(M3)為31.5～32.0℃。從M1到M3,充氣量由沸騰狀逐漸增大至強(qiáng)沸騰狀,光照度可調(diào)至較強(qiáng)光至強(qiáng)光,光照度通常控制在200～2000lx。(2)餌料投喂:以動(dòng)物性餌料為主,輔以單細(xì)胞藻類。每天按10～20個(gè)鹵蟲無節(jié)幼體/每尾對(duì)蝦幼體量分3～6次來投喂;按苗池中5×104～10×104個(gè)細(xì)胞/mL的量投喂單胞藻2～4次/d;投喂配合餌料6次/d,每次1.2～2.5mg/L。(3)日常管理:培育過程中若水色過濃,要適量換水,換水量不超過30%。同時(shí),添加益生菌改良水質(zhì)。每天數(shù)次檢查幼體胃腸飽滿情況和水中生物餌料數(shù)量,靈活調(diào)整投餌量。(4)質(zhì)量檢測:經(jīng)檢測活力好,趨光性強(qiáng),攝食良好,胃腸充滿食物,腸蠕動(dòng)有力,75%以上拖便,拖便長度為體長的0.2～0.5倍,體表不黏附臟物,附肢完整不畸形無損傷,體色無白濁、不變紅、肌肉飽滿,經(jīng)檢疫不攜帶特定病原的即為健康糠蝦幼體。健康率在90%以上,若低于80%認(rèn)定為不合格,若同池中M1、M2、M3同時(shí)存在,成活率<50%,應(yīng)淘汰。2.3.6苗種放養(yǎng)管理(1)培育條件:仔蝦期前8d,培育水溫32～31℃;從第9天開始,逐漸降溫,直至調(diào)節(jié)到養(yǎng)殖時(shí)所需的水溫。充氣量應(yīng)保持在強(qiáng)沸騰狀態(tài)。光照度通常為2000～20000lx。(2)餌料投喂:P1—P4,以鹵蟲無節(jié)幼體為主,可投喂骨條藻、角毛藻等單胞藻2～3次/d