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培訓(xùn)班考試試題一、選擇題(共20題,每題2分)1、技術(shù)擴(kuò)增,須要的條件是(A)①目的基因②引物③四種脫氧核甘酸④聚合酶等⑤⑥核糖體A、①②③④ B、②③④⑤ C、①③④⑤ D、①②③⑥2、鎂離子在或體外擴(kuò)增反應(yīng)的濃度一般為(D)A、0.3-1B、0.5-1C、0.3-2D、0.5-23、多重須要的引物對(duì)為(D)A、一對(duì)引物B、半對(duì)引物 C、兩對(duì)引物D、多對(duì)引物4、是在引物、模板和4種脫氧核糖核昔酸存在的條件下依靠于聚合酶的酶促合成反應(yīng),其特異性確定因素為(B)A、模板B、引物C、D、鎂離子5、在反應(yīng)中,下列哪項(xiàng)可以引起非靶序列的擴(kuò)增的擴(kuò)增(C)A、聚合酶加量過(guò)多B、引物加量過(guò)多C、A、B都可 D、緩沖液中鎂離子含量過(guò)高6、技術(shù)的獨(dú)創(chuàng)人是(A)A、B、史蒂文.沙夫C、蘭德?tīng)?才木7、產(chǎn)物短期存放可在(A)保存。A、4℃B、常溫 C、-80℃D、高溫8、產(chǎn)物長(zhǎng)期儲(chǔ)存最好置于(D)。A、4℃B、常溫 C、16℃ D、-20℃9、的基本反應(yīng)過(guò)程包括(A)A、變性、退火、延長(zhǎng)B、變性、延長(zhǎng)C、變性、退火10、在實(shí)際工作中,基因擴(kuò)增試驗(yàn)室污染類型包括(D)A、擴(kuò)增產(chǎn)物的污染B、自然基因組的污染C、試劑污染和標(biāo)本間交叉污染D、A、B、C都可能11、技術(shù)于哪一年獨(dú)創(chuàng)(A)A、1983 B、1971 C、1987 D、199312、聚合酶酶促反應(yīng)最快最適溫度為(C)A、37℃ B、50-55℃ C、70-75℃ D、80-85℃13、以下哪種物質(zhì)在反應(yīng)中不須要(D)A、聚合酶B、C、鎂離子D、酶14、檢測(cè)中,經(jīng)過(guò)n個(gè)循環(huán)的擴(kuò)增,拷貝數(shù)將增加(C)A、n B、2n C>2n D、n215、基因擴(kuò)增儀最關(guān)鍵的部分是(A)A、溫度限制系統(tǒng)B、熒光檢測(cè)系統(tǒng)C、軟件系統(tǒng) D、熱蓋16、以下哪項(xiàng)不是臨床試驗(yàn)室設(shè)計(jì)的一般原則(A)A、各區(qū)合并B、留意風(fēng)向 C、因地制宜D、便利工作17、試驗(yàn)室一般包括(D)A、試劑準(zhǔn)備區(qū)B、標(biāo)本制備區(qū) C、擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū) D、A、B、C都含18、技術(shù)不僅為遺傳病的診斷帶來(lái)了便利,而且改進(jìn)了檢測(cè)細(xì)菌和病毒的方法。若要檢測(cè)一個(gè)人是否感染了艾滋病病毒,你認(rèn)為可以用擴(kuò)增血液中的(D)oA、白細(xì)胞B、病毒蛋白質(zhì)C、血漿抗體D、病毒核酸19、假如反應(yīng)體系中加入模板分子100個(gè),則經(jīng)過(guò)30個(gè)循環(huán)后,分子的數(shù)量將達(dá)到(D)個(gè)。A、100X30B、100X30X2C、100X302D、100X23020、擴(kuò)增產(chǎn)物的分析方法主要有(D)A、凝膠電泳分析法B、點(diǎn)雜交法C、熒光探針定量法D、A、B、C都二、推斷題(共20題,每題2分)1、引物設(shè)計(jì)的目的是在擴(kuò)增特異性和擴(kuò)增效率間間取得平衡。(J)2、在反應(yīng)中,在擴(kuò)增中可以供應(yīng)能量,同時(shí)作為合成的原料。(V)3、擴(kuò)增過(guò)程未加解旋酶,可以通過(guò)先適當(dāng)加溫的方法破壞氫鍵,使模板解旋。(V)4、反應(yīng)中,復(fù)性過(guò)程中引物與模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補(bǔ)配對(duì)原則完成。(J)5、與細(xì)胞內(nèi)復(fù)制相比所須要酶的最適溫度較高。(J)6、技術(shù)可用于基因診斷,推斷親緣關(guān)系等。(J)7、技術(shù)需在體內(nèi)進(jìn)行。(義)8、反應(yīng)體系中的緩沖液相當(dāng)于細(xì)胞中的體液。(J)9、核酸的復(fù)制是由5, >3,方向進(jìn)行的。(J)10、配對(duì)的堿基總是A與T和G與C。(V)11、轉(zhuǎn)陰性后一段時(shí)間才出現(xiàn)可檢測(cè)的,此段間隔期稱之為“窗口期”。(V)12、市面上多數(shù)試劑用淬滅基團(tuán)Q基團(tuán)和報(bào)告基團(tuán)R基團(tuán)來(lái)標(biāo)記熒光定量的探針。(J)13、反應(yīng)體系中2+的作用是促進(jìn)聚合酶活性。(J)14、若標(biāo)本中含有蛋白變性劑(如甲醛),、離子強(qiáng)度、2+等有較大變更都會(huì)影響酶活性。(V)15、每個(gè)子代分子中均保留一條親代鏈和一條新合成的鏈,這種復(fù)制方式稱之為半保留復(fù)制。(J)16、發(fā)生溶血的標(biāo)本對(duì)結(jié)果沒(méi)影響。(X)17、“平臺(tái)效應(yīng)”是描述后期循環(huán)產(chǎn)物對(duì)數(shù)累積趨于飽和。(J)18、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(,)就是在應(yīng)用方法檢測(cè)病毒時(shí),以為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下形成鏈,然后以為模板進(jìn)行正常的循環(huán)擴(kuò)增。(J)19、在定量中,72℃這一步對(duì)熒光探針的結(jié)合有影響,故去除,事實(shí)上55℃仍可充分延長(zhǎng),完成擴(kuò)增復(fù)制。(J)20、可應(yīng)用于遺傳病、腫瘤與病原體檢測(cè)三大方面(J)三、簡(jiǎn)答(共兩題,每題10分)1、技術(shù)答:技術(shù)是用一對(duì)寡聚核昔酸作為引物(要點(diǎn)1:2分),通過(guò)高溫變性、低溫退火、中溫延長(zhǎng)(要點(diǎn)2:5分)這一周期的多次循環(huán),使特異的片段數(shù)量指數(shù)倍數(shù)增
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