第2章-藥物鑒別

第二章藥物的鑒別試驗(yàn)1一、概述

藥物的鑒別試驗(yàn)（identificationtest)是根據(jù)藥物的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì),采用化學(xué)、物理化學(xué)或生物學(xué)方法來證明已知藥物的真?zhèn)?。而不是?duì)未知物進(jìn)行定性分析。是藥檢工作的首要任務(wù)，雜質(zhì)檢查、含量測(cè)定的前提。2二、鑒別試驗(yàn)的項(xiàng)目性狀一般鑒別試驗(yàn)專屬鑒別試驗(yàn)3性狀外觀：感觀規(guī)定，一般性的描述。溶解度：反映了在某種溶劑中的溶解性能。物理常數(shù):評(píng)價(jià)藥品質(zhì)量的重要指標(biāo)，反映藥品的純凈程度。熔點(diǎn)、

比旋度、收系數(shù)、凝點(diǎn)、折光率相對(duì)密度、餾程、黏度、酸值、皂化值、羥值、碘值等4外觀：指藥品的外表感觀和色澤，包括聚集狀態(tài)、晶型、色澤以及嗅、味如：維生素B1“本品為白色結(jié)晶或結(jié)晶粉末；

有微弱的特臭，味苦；

干燥品在空氣中迅即吸收約4%的水分”（色澤）（聚集狀態(tài)）（嗅）（味）5溶解度試驗(yàn)法：①供試品準(zhǔn)確稱取研成細(xì)粉

②在25℃±2℃，加溶劑

③每隔5min振搖30s無目視可見的溶質(zhì)顆?；蛞旱螘r(shí)，即視為完全溶解

6極易溶解系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑不到1ml中溶解；易溶系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑1～不到10ml中溶解；溶解系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑10～不到30ml中溶解；略溶系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑30～不到100ml中溶解；微溶系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑100～不到1000ml中溶解;極微溶解系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑1000～不到10000ml中溶解；幾乎不溶或不溶系指溶質(zhì)1g(ml)在溶劑10000ml中不能完全溶解。7物理常數(shù)1、熔點(diǎn)1）定義：Ch.P規(guī)定,熔點(diǎn)系指一種物質(zhì)由固體熔化成液體的溫度、熔融同時(shí)分解的溫度，或在熔化時(shí)自初熔至全熔的一段溫度。如：雌二醇：175～180℃醋酸地塞米松：223～233℃樣品發(fā)毛收縮液滴（初熔）澄清（全熔）82）測(cè)定方法分三法：第一法：測(cè)定易粉碎的固體藥品第二法：測(cè)定不易粉碎的固體藥品第三法：測(cè)定凡士林或其他類似物質(zhì)（詳見：Ch.P2010年版二部附錄ⅥC

）92、比旋度偏振光透過長(zhǎng)1dm并每1ml中含有旋光性物質(zhì)1g的溶液，在一定波長(zhǎng)與溫度下測(cè)得的旋光度稱為比旋度。本藥典系用鈉光譜的D線(589.3nm)測(cè)定旋光度，除另有規(guī)定外，測(cè)定管長(zhǎng)度為1dm，測(cè)定溫度為20℃。偏振光向右旋轉(zhuǎn)者（順時(shí)針方向）為右旋，以“＋”符號(hào)表示；使偏振光向左旋轉(zhuǎn)者(逆時(shí)針方向)為左旋，以“－”符號(hào)表示Ch.P2010年版二部附錄ⅥE103、吸收系數(shù)

吸光物質(zhì)在給定波長(zhǎng)、溶劑和溫度等條件下，單位濃度、單位液層厚度時(shí)的吸收度

溶液濃度液層厚度溶液濃度液層厚度摩爾吸收系數(shù)(ε)百分吸收系數(shù)11具有相似結(jié)構(gòu)的化合物可能有相同的λmax，但吸收系數(shù)有差異12一般鑒別試驗(yàn)

（generalidentificationtest）是指依據(jù)某一類藥物的共同的化學(xué)結(jié)構(gòu)或相同的理化特性，來鑒別藥物的真?zhèn)?。有機(jī)藥物--------官能團(tuán)無機(jī)藥物--------陰離子、陽離子一般鑒別試驗(yàn)用于證實(shí)藥物是哪一類，要進(jìn)一步證實(shí)是哪一種藥物，還需要結(jié)合專屬鑒別試驗(yàn)

13一般鑒別試驗(yàn)

（generalidentificationtest）Ch.P附錄Ⅲ中有：有機(jī)氟類、有機(jī)酸鹽類（水楊酸鹽）、芳香第一胺類、托烷生物堿類、丙二酰脲類無機(jī)金屬類（Na+,K+,Ca2+,Ba2+,Li+,Fe3+,Al3+,Zn2+,Cu2+,Ag+,Hg2+等）無酸鹽類(Cl-、

SO42-、NO3-)141.有機(jī)氟化物有機(jī)氟氧瓶燃燒無機(jī)氟離子pH4.3

茜素氟藍(lán)硝酸亞鈰藍(lán)紫色絡(luò)合物+F-+Ce3+pH4.3堿液吸收152.有機(jī)酸鹽(1)水楊酸鹽水楊酸+FeCl3中性條件弱酸性條件紅色配位化合物紫色配位化合物6+4FeCl3+12HCl水楊酸鹽+稀鹽酸→水楊酸（白色沉淀）溶于醋酸銨16(2)酒石酸鹽供試品溶液（中性）+氨制硝酸銀

銀鏡水浴中HO—CH—COOHHO—CH—COOH+2Ag(NH3)2OHHO—C—COONH4HO—C—COONH42Ag++2NH3+2H2O

水浴中173.芳香第一胺類供試品+

稀鹽酸0.1mol/L亞硝酸鈉堿性-萘酚試液橙黃色到猩紅色沉淀N2+Cl-.+NaNO2+2HCl+NaCl+2H2ON2+Cl-.++NaOH+NaCl+2H2O18

4.托烷生物堿類此類生物堿中具有莨菪酸結(jié)構(gòu)，有Vitaili反應(yīng),顯紫色。

水解3HNO3三硝基衍生物KOH(C2H5OH)KOH深紫色莨菪酸195.無機(jī)金屬鹽（Na,K,Ca,NH4+)

焰色反應(yīng)：Na顯鮮黃色；K顯紫色；Ca顯磚紅色

銨鹽：

供試品+NaOH

氨氣使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變藍(lán)使硝酸亞汞試液濕潤的濾紙顯黑色206.無機(jī)酸根氯化物：Cl-+Ag+AgCl白色乳狀

Cl-+MnO2Mn2++Cl2硫酸鹽：SO42-+Ba2+BaSO4白色

SO42-+Pb2+PbSO4白色加鹽酸，無白色沉淀硝酸鹽：Cu+NO3-Cu(NO3)2+2NO2（紅棕色）Fe2++NO3-Fe3++NO區(qū)分NO3-、NO2-H2SO4使?jié)駶櫟腒I_淀粉試紙變藍(lán)

KMnO4褪色NO2-不褪色NO3-H2SO4H2SO421專屬鑒別試驗(yàn)

（specificidentificationtest）是證實(shí)某一種藥物的依據(jù)。根據(jù)一類藥物中每一種藥物化學(xué)結(jié)構(gòu)的差異理化特性，選用某些特有的靈敏的定性反應(yīng)，來鑒別藥物的真?zhèn)巍Ｒ话汨b別試驗(yàn)依據(jù)某類藥物共同的特點(diǎn)，區(qū)別不同類藥物。專屬鑒別試驗(yàn)在一般鑒別試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，利用各種藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)差異，鑒別各個(gè)藥物單體。22共性丙二酰脲-CONHCONHCO-

可與某些金屬離子（Ag+、Cu2+、Hg2+等）反應(yīng)呈色或產(chǎn)生沉淀巴比妥類藥物R+2AgNO3+2HNO3一般鑒別試驗(yàn)23與Pb2+反應(yīng)生成黑色PbS甲醛硫酸反應(yīng)碘取代反應(yīng)專屬鑒別試驗(yàn)

硫噴妥鈉司可巴比妥苯巴比妥24二、鑒別方法（一）化學(xué)鑒別法（二）光譜鑒別法（三）X射線衍射法（四）色譜鑒別法（五）生物法25（一）化學(xué)鑒別法

供試品加入適當(dāng)?shù)脑噭?，在一定條件下，發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，通過產(chǎn)生可觀測(cè)到的明顯現(xiàn)象，來鑒別藥物真?zhèn)蔚姆椒ā?/p>

化學(xué)鑒別法特點(diǎn)

操作簡(jiǎn)便、反應(yīng)快速、實(shí)驗(yàn)成本低、應(yīng)用廣

但專屬性比儀器分析法差

分為：

（1）呈色反應(yīng)鑒別法

（2）沉淀生成反應(yīng)鑒別法

（3）熒光反應(yīng)鑒別法

（4）氣體生成反應(yīng)鑒別法

（5）試劑褪色的鑒別法

26（一）、化學(xué)鑒別法

（1）呈色反應(yīng)鑒別法

供試品加入適當(dāng)?shù)脑噭谝欢l件下，反應(yīng)生成有色產(chǎn)物

鑒別方法①三氯化鐵呈色反應(yīng)（酚羥基）②有機(jī)氟化物的茜素氟藍(lán)法③芳香第一胺類重氮化-偶合反應(yīng)④托烷生物堿類-Vitaili反應(yīng)⑤腎上腺皮質(zhì)激素類的四氮唑⑥含羰基結(jié)構(gòu)的苯肼反應(yīng)⑦氨基酸及氨基糖苷類的茚三酮呈色反應(yīng)⑧雙縮脲反應(yīng)27③芳香第一胺類芳伯胺+

稀鹽酸0.1mol/L亞硝酸鈉堿性-萘酚試液橙黃色到猩紅色重氮化-偶合反應(yīng)對(duì)乙酰氨基酚紅色28①三氯化鐵呈色反應(yīng)（酚羥基）藍(lán)紫色對(duì)乙酰氨基酚

（一）化學(xué)鑒別法

（1）呈色反應(yīng)鑒別法

②有機(jī)氟化物氧瓶燃燒無機(jī)氟離子pH4.3

茜素氟藍(lán)硝酸亞鈰堿液吸收藍(lán)紫色絡(luò)合物有機(jī)氟29④托烷生物堿類-Vitali反應(yīng)此類生物堿中具有莨菪酸結(jié)構(gòu)，有Vitali反應(yīng),顯紫色。

水解3HNO3三硝基衍生物KOH(C2H5OH)KOH深紫色30⑤腎上腺皮質(zhì)激素類的四氮唑+2e[H]四氮唑甲臜

皮質(zhì)激素具有還原性，能將四氮唑還原為有色甲臜

31⑥含羰基結(jié)構(gòu)的苯肼反應(yīng)++H2O苯肼苯腙32⑦氨基酸及氨基糖苷類的茚三酮呈色反應(yīng)

左旋多巴+CO2+3H2O+例如：33⑧雙縮脲反應(yīng)（開環(huán)分解）藍(lán)紫色34（2）沉淀生成反應(yīng)鑒別法

供試品加入適當(dāng)?shù)脑噭?，在一定條件下，反應(yīng)生成沉淀

（一）化學(xué)鑒別法③還原性基團(tuán)的銀鏡反應(yīng)①丙二酰脲類的硝酸銀反應(yīng)②氯化物的銀鹽沉淀⑦含氮雜環(huán)類與生物堿沉淀劑（碘化鉍鉀、硅鎢酸）的沉淀反應(yīng)⑤苯甲酸鹽類的三氯化鐵反應(yīng)④生成氧化亞銅紅色沉淀反應(yīng)⑥與重金屬離子的沉淀反應(yīng)⑧磺胺類藥物的銅鹽反應(yīng)35丙二酰脲類的硝酸銀反應(yīng)+2AgNO3+2HNO3Cl-+Ag+AgCl氯化物的銀鹽沉淀36含有還原性基團(tuán)的藥物——銀鏡反應(yīng)+AgNO3+NH3·H2OAg異煙肼葡萄糖+堿性酒石酸銅試液（Fehling試液）氧化亞銅+葡萄糖酸37苯甲酸鹽類的三氯化鐵反應(yīng)+3FeCl3+OH-+7NaCl+2Cl-赭色沉淀38利多卡因與重金屬離子反應(yīng)2+CoCl2H+亮綠色細(xì)小鈷鹽沉淀39含氮雜環(huán)類的生物堿的沉淀反應(yīng)苯并二氮雜類+BiI3·橙紅色沉淀

氯氮氟西泮氯硝西泮+12W03·Si02灰白色沉淀4KIC2H5OH白色C2H5OH黃色阿托品+HgCl2東莨菪堿+HgCl2托烷類生物堿40吡啶環(huán)類2+CuSO4+2NH4SCNCu(SCN)2+(NH4)2SO4草綠色配合物沉淀41磺胺類藥物的成銅鹽反應(yīng)

磺酰氨基上的活潑氫原子，可被某些金屬離子取代，生成有色的金屬鹽沉淀。磺胺類藥物鈉鹽溶液，加硫酸銅試液生成不同顏色的銅鹽沉淀，可供區(qū)別及鑒別。42

(3)熒光反應(yīng)鑒別法

①藥物本身在可見光下發(fā)射熒光

如：硫酸奎寧溶液顯藍(lán)色熒光

②藥物與適當(dāng)試劑反應(yīng)后發(fā)射熒光

如：氯普噻噸+HNO3后，紫外下顯綠色

VB1硫色素（藍(lán)色熒光）堿性K3Fe(CN)6（一）化學(xué)鑒別法43（4）氣體生成反應(yīng)鑒別法

①大多數(shù)伯胺（銨）類藥物、酰尿類以及某些酰胺類藥物，可經(jīng)強(qiáng)堿處理后加熱產(chǎn)生氨氣。

紅色石蕊試紙變藍(lán)

硝酸亞汞試液濕潤的試紙顯黑色（一）化學(xué)鑒別法44②化學(xué)結(jié)構(gòu)含硫藥物，可經(jīng)強(qiáng)酸處理后加熱產(chǎn)生硫化氫氣體硫鳥嘌呤●7H2O強(qiáng)酸?H2S（臭雞蛋氣味）使醋酸鉛試紙變黑45③含碘有機(jī)藥物經(jīng)直火加熱可生成紫色碘蒸汽④含醋酸酯和乙酰胺類的藥物，經(jīng)硫酸水解后，加乙醇可產(chǎn)生醋酸乙酯的香味。46（一）化學(xué)鑒別法（5）試劑退色維生素C與二氯靛酚反應(yīng)47（6）測(cè)定生成物熔點(diǎn)法

制備衍生物測(cè)定熔點(diǎn)法藥物＋試劑新化合物有一定mp;藥物酸化或堿化生成游離酸或堿。操作繁瑣費(fèi)時(shí)間，應(yīng)用較少。（一）化學(xué)鑒別法48紫外光譜（UV）紅外光譜（IR）近紅外光譜法（NIRS）原子吸收法（AAS）核磁共振法（NMR）二、鑒別方法（二）光譜鑒別法491、紫外光譜鑒別法

紫外光譜法操作簡(jiǎn)便、快速。

用作鑒別的專屬性遠(yuǎn)不如紅外光譜法。

紫外光譜相同的物質(zhì)不一定是同一種物質(zhì)。（二）光譜鑒別法50紫外光譜法常有的方法測(cè)定最大吸收波長(zhǎng)，或同時(shí)測(cè)定最小吸收波長(zhǎng)；規(guī)定濃度的供試液在最大吸收波長(zhǎng)測(cè)定吸收度；

規(guī)定吸收波長(zhǎng)和吸收系數(shù)法；規(guī)定吸收波長(zhǎng)和吸光度比值法；

經(jīng)化學(xué)處理后,測(cè)定其反應(yīng)產(chǎn)物吸收光譜特性以上方法可單用，也可幾個(gè)結(jié)合起來使用，以提高專屬性

51①測(cè)定最大吸收波長(zhǎng),或同時(shí)測(cè)定最小吸收波長(zhǎng)乙胺嘧啶供試品在0.1mol/L鹽酸介質(zhì)中的紫外吸收在272nm處為峰,216nm處為谷。52②規(guī)定吸收波長(zhǎng)和吸光度比值法兩性霉素在362nm、381nm、405nm波長(zhǎng)處有最大吸收.規(guī)定362nm/381nm處吸光度比值不大于0.6

381nm/405nm波長(zhǎng)比值不大于0.9VB12361nm/278nm1.70～1.88361nm/550nm3.15～3.45

53

己稀雌酚注射液用供試品溶液250-450nm波長(zhǎng)吸收光譜與對(duì)照品是否一致鑒別。③與對(duì)照品比較,對(duì)比吸收光譜的一致性54

Ch.P示例一鹽酸布比卡因的鑒別試驗(yàn)0.40mg/mlλmax:263nm、271nmA:0.53~0.58;0.43~0.48規(guī)定一定濃度的供試液在最大吸收波長(zhǎng)處的吸光度示例二地蒽酚的鑒別試驗(yàn)λmax:257nm、289nm、356nmA257/A289=1.06~1.10A356/A289=0.90~0.94規(guī)定最大吸收波長(zhǎng)和吸光度比值法55示例三氯貝丁酯的鑒別試驗(yàn)

0.10mg/mlλmax:280nm、288nm

10μg/mlλmax:226nm規(guī)定一定濃度下的供試液的最大吸收波長(zhǎng)示例二專屬性相對(duì)較好56USP采用對(duì)照品法

供試藥與其對(duì)照品按同一方法處理，在同樣條件下紫外光譜圖一致。BP規(guī)定一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)，僅有一個(gè)最大或最小吸收J(rèn)P與Ch.P相似

各國紫外鑒別法比較572、紅外分析法

IR光譜法是有機(jī)藥物分子的振動(dòng)-轉(zhuǎn)