第2章-藥物鑒別

第二章藥物的鑒別試驗1一、概述

藥物的鑒別試驗（identificationtest)是根據(jù)藥物的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì),采用化學(xué)、物理化學(xué)或生物學(xué)方法來證明已知藥物的真?zhèn)?。而不是對未知物進(jìn)行定性分析。是藥檢工作的首要任務(wù)，雜質(zhì)檢查、含量測定的前提。2二、鑒別試驗的項目性狀一般鑒別試驗專屬鑒別試驗3性狀外觀：感觀規(guī)定，一般性的描述。溶解度：反映了在某種溶劑中的溶解性能。物理常數(shù):評價藥品質(zhì)量的重要指標(biāo)，反映藥品的純凈程度。熔點(diǎn)、

比旋度、收系數(shù)、凝點(diǎn)、折光率相對密度、餾程、黏度、酸值、皂化值、羥值、碘值等4外觀：指藥品的外表感觀和色澤，包括聚集狀態(tài)、晶型、色澤以及嗅、味如：維生素B1“本品為白色結(jié)晶或結(jié)晶粉末；

有微弱的特臭，味苦；

干燥品在空氣中迅即吸收約4%的水分”（色澤）（聚集狀態(tài)）（嗅）（味）5溶解度試驗法：①供試品準(zhǔn)確稱取研成細(xì)粉

②在25℃±2℃，加溶劑

③每隔5min振搖30s無目視可見的溶質(zhì)顆?；蛞旱螘r，即視為完全溶解

6極易溶解系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑不到1ml中溶解；易溶系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑1～不到10ml中溶解；溶解系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑10～不到30ml中溶解；略溶系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑30～不到100ml中溶解；微溶系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑100～不到1000ml中溶解;極微溶解系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑1000～不到10000ml中溶解；幾乎不溶或不溶系指溶質(zhì)1g(ml)在溶劑10000ml中不能完全溶解。7物理常數(shù)1、熔點(diǎn)1）定義：Ch.P規(guī)定,熔點(diǎn)系指一種物質(zhì)由固體熔化成液體的溫度、熔融同時分解的溫度，或在熔化時自初熔至全熔的一段溫度。如：雌二醇：175～180℃醋酸地塞米松：223～233℃樣品發(fā)毛收縮液滴（初熔）澄清（全熔）82）測定方法分三法：第一法：測定易粉碎的固體藥品第二法：測定不易粉碎的固體藥品第三法：測定凡士林或其他類似物質(zhì)（詳見：Ch.P2010年版二部附錄ⅥC

）92、比旋度偏振光透過長1dm并每1ml中含有旋光性物質(zhì)1g的溶液，在一定波長與溫度下測得的旋光度稱為比旋度。本藥典系用鈉光譜的D線(589.3nm)測定旋光度，除另有規(guī)定外，測定管長度為1dm，測定溫度為20℃。偏振光向右旋轉(zhuǎn)者（順時針方向）為右旋，以“＋”符號表示；使偏振光向左旋轉(zhuǎn)者(逆時針方向)為左旋，以“－”符號表示Ch.P2010年版二部附錄ⅥE103、吸收系數(shù)

吸光物質(zhì)在給定波長、溶劑和溫度等條件下，單位濃度、單位液層厚度時的吸收度

溶液濃度液層厚度溶液濃度液層厚度摩爾吸收系數(shù)(ε)百分吸收系數(shù)11具有相似結(jié)構(gòu)的化合物可能有相同的λmax，但吸收系數(shù)有差異12一般鑒別試驗

（generalidentificationtest）是指依據(jù)某一類藥物的共同的化學(xué)結(jié)構(gòu)或相同的理化特性，來鑒別藥物的真?zhèn)巍Ｓ袡C(jī)藥物--------官能團(tuán)無機(jī)藥物--------陰離子、陽離子一般鑒別試驗用于證實(shí)藥物是哪一類，要進(jìn)一步證實(shí)是哪一種藥物，還需要結(jié)合專屬鑒別試驗

13一般鑒別試驗

（generalidentificationtest）Ch.P附錄Ⅲ中有：有機(jī)氟類、有機(jī)酸鹽類（水楊酸鹽）、芳香第一胺類、托烷生物堿類、丙二酰脲類無機(jī)金屬類（Na+,K+,Ca2+,Ba2+,Li+,Fe3+,Al3+,Zn2+,Cu2+,Ag+,Hg2+等）無酸鹽類(Cl-、

SO42-、NO3-)141.有機(jī)氟化物有機(jī)氟氧瓶燃燒無機(jī)氟離子pH4.3

茜素氟藍(lán)硝酸亞鈰藍(lán)紫色絡(luò)合物+F-+Ce3+pH4.3堿液吸收152.有機(jī)酸鹽(1)水楊酸鹽水楊酸+FeCl3中性條件弱酸性條件紅色配位化合物紫色配位化合物6+4FeCl3+12HCl水楊酸鹽+稀鹽酸→水楊酸（白色沉淀）溶于醋酸銨16(2)酒石酸鹽供試品溶液（中性）+氨制硝酸銀

銀鏡水浴中HO—CH—COOHHO—CH—COOH+2Ag(NH3)2OHHO—C—COONH4HO—C—COONH42Ag++2NH3+2H2O

水浴中173.芳香第一胺類供試品+

稀鹽酸0.1mol/L亞硝酸鈉堿性-萘酚試液橙黃色到猩紅色沉淀N2+Cl-.+NaNO2+2HCl+NaCl+2H2ON2+Cl-.++NaOH+NaCl+2H2O18

4.托烷生物堿類此類生物堿中具有莨菪酸結(jié)構(gòu)，有Vitaili反應(yīng),顯紫色。

水解3HNO3三硝基衍生物KOH(C2H5OH)KOH深紫色莨菪酸195.無機(jī)金屬鹽（Na,K,Ca,NH4+)

焰色反應(yīng)：Na顯鮮黃色；K顯紫色；Ca顯磚紅色

銨鹽：

供試品+NaOH

氨氣使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變藍(lán)使硝酸亞汞試液濕潤的濾紙顯黑色206.無機(jī)酸根氯化物：Cl-+Ag+AgCl白色乳狀

Cl-+MnO2Mn2++Cl2硫酸鹽：SO42-+Ba2+BaSO4白色

SO42-+Pb2+PbSO4白色加鹽酸，無白色沉淀硝酸鹽：Cu+NO3-Cu(NO3)2+2NO2（紅棕色）Fe2++NO3-Fe3++NO區(qū)分NO3-、NO2-H2SO4使?jié)駶櫟腒I_淀粉試紙變藍(lán)

KMnO4褪色NO2-不褪色NO3-H2SO4H2SO421專屬鑒別試驗

（specificidentificationtest）是證實(shí)某一種藥物的依據(jù)。根據(jù)一類藥物中每一種藥物化學(xué)結(jié)構(gòu)的差異理化特性，選用某些特有的靈敏的定性反應(yīng)，來鑒別藥物的真?zhèn)?。一般鑒別試驗依據(jù)某類藥物共同的特點(diǎn)，區(qū)別不同類藥物。專屬鑒別試驗在一般鑒別試驗的基礎(chǔ)上，利用各種藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)差異，鑒別各個藥物單體。22共性丙二酰脲-CONHCONHCO-

可與某些金屬離子（Ag+、Cu2+、Hg2+等）反應(yīng)呈色或產(chǎn)生沉淀巴比妥類藥物R+2AgNO3+2HNO3一般鑒別試驗23與Pb2+反應(yīng)生成黑色PbS甲醛硫酸反應(yīng)碘取代反應(yīng)專屬鑒別試驗

硫噴妥鈉司可巴比妥苯巴比妥24二、鑒別方法（一）化學(xué)鑒別法（二）光譜鑒別法（三）X射線衍射法（四）色譜鑒別法（五）生物法25（一）化學(xué)鑒別法

供試品加入適當(dāng)?shù)脑噭?，在一定條件下，發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，通過產(chǎn)生可觀測到的明顯現(xiàn)象，來鑒別藥物真?zhèn)蔚姆椒ā?/p>

化學(xué)鑒別法特點(diǎn)

操作簡便、反應(yīng)快速、實(shí)驗成本低、應(yīng)用廣

但專屬性比儀器分析法差

分為：

（1）呈色反應(yīng)鑒別法

（2）沉淀生成反應(yīng)鑒別法

（3）熒光反應(yīng)鑒別法

（4）氣體生成反應(yīng)鑒別法

（5）試劑褪色的鑒別法

26（一）、化學(xué)鑒別法

（1）呈色反應(yīng)鑒別法

供試品加入適當(dāng)?shù)脑噭谝欢l件下，反應(yīng)生成有色產(chǎn)物

鑒別方法①三氯化鐵呈色反應(yīng)（酚羥基）②有機(jī)氟化物的茜素氟藍(lán)法③芳香第一胺類重氮化-偶合反應(yīng)④托烷生物堿類-Vitaili反應(yīng)⑤腎上腺皮質(zhì)激素類的四氮唑⑥含羰基結(jié)構(gòu)的苯肼反應(yīng)⑦氨基酸及氨基糖苷類的茚三酮呈色反應(yīng)⑧雙縮脲反應(yīng)27③芳香第一胺類芳伯胺+

稀鹽酸0.1mol/L亞硝酸鈉堿性-萘酚試液橙黃色到猩紅色重氮化-偶合反應(yīng)對乙酰氨基酚紅色28①三氯化鐵呈色反應(yīng)（酚羥基）藍(lán)紫色對乙酰氨基酚

（一）化學(xué)鑒別法

（1）呈色反應(yīng)鑒別法

②有機(jī)氟化物氧瓶燃燒無機(jī)氟離子pH4.3

茜素氟藍(lán)硝酸亞鈰堿液吸收藍(lán)紫色絡(luò)合物有機(jī)氟29④托烷生物堿類-Vitali反應(yīng)此類生物堿中具有莨菪酸結(jié)構(gòu)，有Vitali反應(yīng),顯紫色。

水解3HNO3三硝基衍生物KOH(C2H5OH)KOH深紫色30⑤腎上腺皮質(zhì)激素類的四氮唑+2e[H]四氮唑甲臜

皮質(zhì)激素具有還原性，能將四氮唑還原為有色甲臜

31⑥含羰基結(jié)構(gòu)的苯肼反應(yīng)++H2O苯肼苯腙32⑦氨基酸及氨基糖苷類的茚三酮呈色反應(yīng)

左旋多巴+CO2+3H2O+例如：33⑧雙縮脲反應(yīng)（開環(huán)分解）藍(lán)紫色34（2）沉淀生成反應(yīng)鑒別法

供試品加入適當(dāng)?shù)脑噭?，在一定條件下，反應(yīng)生成沉淀

（一）化學(xué)鑒別法③還原性基團(tuán)的銀鏡反應(yīng)①丙二酰脲類的硝酸銀反應(yīng)②氯化物的銀鹽沉淀⑦含氮雜環(huán)類與生物堿沉淀劑（碘化鉍鉀、硅鎢酸）的沉淀反應(yīng)⑤苯甲酸鹽類的三氯化鐵反應(yīng)④生成氧化亞銅紅色沉淀反應(yīng)⑥與重金屬離子的沉淀反應(yīng)⑧磺胺類藥物的銅鹽反應(yīng)35丙二酰脲類的硝酸銀反應(yīng)+2AgNO3+2HNO3Cl-+Ag+AgCl氯化物的銀鹽沉淀36含有還原性基團(tuán)的藥物——銀鏡反應(yīng)+AgNO3+NH3·H2OAg異煙肼葡萄糖+堿性酒石酸銅試液（Fehling試液）氧化亞銅+葡萄糖酸37苯甲酸鹽類的三氯化鐵反應(yīng)+3FeCl3+OH-+7NaCl+2Cl-赭色沉淀38利多卡因與重金屬離子反應(yīng)2+CoCl2H+亮綠色細(xì)小鈷鹽沉淀39含氮雜環(huán)類的生物堿的沉淀反應(yīng)苯并二氮雜類+BiI3·橙紅色沉淀

氯氮氟西泮氯硝西泮+12W03·Si02灰白色沉淀4KIC2H5OH白色C2H5OH黃色阿托品+HgCl2東莨菪堿+HgCl2托烷類生物堿40吡啶環(huán)類2+CuSO4+2NH4SCNCu(SCN)2+(NH4)2SO4草綠色配合物沉淀41磺胺類藥物的成銅鹽反應(yīng)

磺酰氨基上的活潑氫原子，可被某些金屬離子取代，生成有色的金屬鹽沉淀?；前奉愃幬镡c鹽溶液，加硫酸銅試液生成不同顏色的銅鹽沉淀，可供區(qū)別及鑒別。42

(3)熒光反應(yīng)鑒別法

①藥物本身在可見光下發(fā)射熒光

如：硫酸奎寧溶液顯藍(lán)色熒光

②藥物與適當(dāng)試劑反應(yīng)后發(fā)射熒光

如：氯普噻噸+HNO3后，紫外下顯綠色

VB1硫色素（藍(lán)色熒光）堿性K3Fe(CN)6（一）化學(xué)鑒別法43（4）氣體生成反應(yīng)鑒別法

①大多數(shù)伯胺（銨）類藥物、酰尿類以及某些酰胺類藥物，可經(jīng)強(qiáng)堿處理后加熱產(chǎn)生氨氣。

紅色石蕊試紙變藍(lán)

硝酸亞汞試液濕潤的試紙顯黑色（一）化學(xué)鑒別法44②化學(xué)結(jié)構(gòu)含硫藥物，可經(jīng)強(qiáng)酸處理后加熱產(chǎn)生硫化氫氣體硫鳥嘌呤●7H2O強(qiáng)酸?H2S（臭雞蛋氣味）使醋酸鉛試紙變黑45③含碘有機(jī)藥物經(jīng)直火加熱可生成紫色碘蒸汽④含醋酸酯和乙酰胺類的藥物，經(jīng)硫酸水解后，加乙醇可產(chǎn)生醋酸乙酯的香味。46（一）化學(xué)鑒別法（5）試劑退色維生素C與二氯靛酚反應(yīng)47（6）測定生成物熔點(diǎn)法

制備衍生物測定熔點(diǎn)法藥物＋試劑新化合物有一定mp;藥物酸化或堿化生成游離酸或堿。操作繁瑣費(fèi)時間，應(yīng)用較少。（一）化學(xué)鑒別法48紫外光譜（UV）紅外光譜（IR）近紅外光譜法（NIRS）原子吸收法（AAS）核磁共振法（NMR）二、鑒別方法（二）光譜鑒別法491、紫外光譜鑒別法

紫外光譜法操作簡便、快速。

用作鑒別的專屬性遠(yuǎn)不如紅外光譜法。

紫外光譜相同的物質(zhì)不一定是同一種物質(zhì)。（二）光譜鑒別法50紫外光譜法常有的方法測定最大吸收波長，或同時測定最小吸收波長；規(guī)定濃度的供試液在最大吸收波長測定吸收度；

規(guī)定吸收波長和吸收系數(shù)法；規(guī)定吸收波長和吸光度比值法；

經(jīng)化學(xué)處理后,測定其反應(yīng)產(chǎn)物吸收光譜特性以上方法可單用，也可幾個結(jié)合起來使用，以提高專屬性

51①測定最大吸收波長,或同時測定最小吸收波長乙胺嘧啶供試品在0.1mol/L鹽酸介質(zhì)中的紫外吸收在272nm處為峰,216nm處為谷。52②規(guī)定吸收波長和吸光度比值法兩性霉素在362nm、381nm、405nm波長處有最大吸收.規(guī)定362nm/381nm處吸光度比值不大于0.6

381nm/405nm波長比值不大于0.9VB12361nm/278nm1.70～1.88361nm/550nm3.15～3.45

53

己稀雌酚注射液用供試品溶液250-450nm波長吸收光譜與對照品是否一致鑒別。③與對照品比較,對比吸收光譜的一致性54

Ch.P示例一鹽酸布比卡因的鑒別試驗0.40mg/mlλmax:263nm、271nmA:0.53~0.58;0.43~0.48規(guī)定一定濃度的供試液在最大吸收波長處的吸光度示例二地蒽酚的鑒別試驗λmax:257nm、289nm、356nmA257/A289=1.06~1.10A356/A289=0.90~0.94規(guī)定最大吸收波長和吸光度比值法55示例三氯貝丁酯的鑒別試驗

0.10mg/mlλmax:280nm、288nm

10μg/mlλmax:226nm規(guī)定一定濃度下的供試液的最大吸收波長示例二專屬性相對較好56USP采用對照品法

供試藥與其對照品按同一方法處理，在同樣條件下紫外光譜圖一致。BP規(guī)定一定波長范圍內(nèi)，僅有一個最大或最小吸收J(rèn)P與Ch.P相似

各國紫外鑒別法比較572、紅外分析法

IR光譜法是有機(jī)藥物分子的振動-轉(zhuǎn)