第二章 海洋動物細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)術(shù)語

細(xì)胞培養(yǎng)的現(xiàn)實(shí)意義

生物技術(shù)上：生產(chǎn)各種生技術(shù)產(chǎn)品如：狂犬病、小兒麻痹癥等病毒疫苗，表皮生長因子及干擾素、白細(xì)胞介素等生長因子及單克隆抗體等?？茖W(xué)研究上：在病毒學(xué)、免疫學(xué)、遺傳學(xué)、腫瘤學(xué)等方面。臨床醫(yī)學(xué)上：胎兒的遺傳性疾病分析，藥物篩選及某些疾病的治療等細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)

1.研究的對象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

可以根據(jù)需要，控制包括pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)、記錄方法：

研究:倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記--

記錄:攝影照片、縮時(shí)電影、電視--5.研究的范圍比較廣泛

學(xué)科多：細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等

對象廣：

各種動物：低等動物--高等動物--人類

一種動物：不同年齡--

不同組織--

正?；虍惓＃[瘤--）

6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)

可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象細(xì)胞培養(yǎng)的缺點(diǎn)

現(xiàn)人工模擬體內(nèi)環(huán)境的技術(shù)已經(jīng)很高,

但,人工所模擬的條件與體內(nèi)實(shí)際情況

仍不完全相同.

當(dāng)細(xì)胞被置于體外培養(yǎng)后,

生活在缺乏動態(tài)平衡的環(huán)境中,

久了，必然發(fā)生變化.

因此，對于體外培養(yǎng)的細(xì)胞，應(yīng)該把他們視作一種既能保持動物體內(nèi)原細(xì)胞一定的性狀、結(jié)構(gòu)和功能又具有某些改變的特定的細(xì)胞群體，而不能將之與體內(nèi)的細(xì)胞完全等同。細(xì)胞培養(yǎng)的工作原則有標(biāo)準(zhǔn)化的工作方法培養(yǎng)用的液體極多（如培養(yǎng)液、胰蛋白酶、HANKS液及抗菌素等），應(yīng)由專人負(fù)責(zé)，并保證做到按規(guī)程行事，配制濃度準(zhǔn)確，滅菌可靠，所有配好的溶液瓶上都要標(biāo)明名稱、濃度、消毒與否和制備日期等。一切培養(yǎng)用品都要有固定的存放點(diǎn)，避免雜亂無章，其中尤其重要的是：培養(yǎng)用品與非培養(yǎng)用品應(yīng)嚴(yán)格分開，已消毒品與未消毒品應(yīng)分別存放。第二章細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)術(shù)語動物細(xì)胞與組織培養(yǎng)（cellandtissueculture）是動物細(xì)胞工程的重要技術(shù)基礎(chǔ)。動物的細(xì)胞與組織培養(yǎng)是指從活的機(jī)體中取出組織或細(xì)胞，模擬機(jī)體內(nèi)生理?xiàng)l件，在體外建立無菌、適溫和一定營養(yǎng)條件等，使之生長和生存，并維持其結(jié)構(gòu)和功能的技術(shù)。組織培養(yǎng)的概念組織培養(yǎng)這一名詞實(shí)際上是一個(gè)通用名詞，習(xí)慣上泛指所有的體外培養(yǎng)。根據(jù)培養(yǎng)物的不同可概括為三個(gè)不同概念：細(xì)胞培養(yǎng)、組織培養(yǎng)和器官培養(yǎng)。組織培養(yǎng)：將活體的一小片組織放在盛有培養(yǎng)液的玻璃或塑料培養(yǎng)器皿中，待組織塊粘著后，沿底面平面移動生長的過程稱為組織培養(yǎng)。從組織塊中生長出來的仍然是細(xì)胞，細(xì)胞在生長的同時(shí)也發(fā)生移動，至使組織培養(yǎng)難以長時(shí)間維持其原有結(jié)構(gòu)，結(jié)果也就成了細(xì)胞培養(yǎng)。器官培養(yǎng)：是指采取某些措施使器官的原基、器官的一部分或整個(gè)器官在體外存活、生長，并保持其原有結(jié)構(gòu)和功能的培養(yǎng)技術(shù)。細(xì)胞培養(yǎng)：是指用機(jī)械或化學(xué)的方法將組織分散成單個(gè)細(xì)胞后，選用最佳生存條件對活細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)和研究的技術(shù)。體外培養(yǎng)的種類培養(yǎng)方式群體培養(yǎng)：將大量細(xì)胞置與培養(yǎng)瓶中，讓其貼壁或懸浮生長，形成均勻的單細(xì)胞層獲單細(xì)胞懸液?？寺∨囵B(yǎng)：將少數(shù)的細(xì)胞加入培養(yǎng)瓶中，貼壁后彼此間隔距離較遠(yuǎn)，經(jīng)過繁殖每一個(gè)細(xì)胞形成一個(gè)集落，成為克隆。原代培養(yǎng)（primaryculture）：從直接取自生物體細(xì)胞、組織或器官開始的培養(yǎng)。。傳代(passage)：細(xì)胞生長繁殖一定時(shí)間和達(dá)到一定密度后，須將細(xì)胞從一個(gè)培養(yǎng)器皿轉(zhuǎn)移或移植到另一個(gè)培養(yǎng)器皿，即稱為傳代或傳代培養(yǎng)。細(xì)胞系(cellline)：原代培養(yǎng)物經(jīng)首次傳代成功后即成細(xì)胞系。有限細(xì)胞系（finitecellline）:如果不能繼續(xù)傳代或傳代數(shù)有限，為有限細(xì)胞系。連續(xù)細(xì)胞系（continuouscellline）:如果可以連續(xù)傳代，則稱為連續(xù)細(xì)胞系。細(xì)胞株（cellstrain）：通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的培養(yǎng)物稱為細(xì)胞株克隆(clone)：亦稱無性繁殖系。對細(xì)胞來說，克隆是指由同一個(gè)祖先細(xì)胞通過有絲分裂產(chǎn)生的遺傳性狀一致的細(xì)胞群。無菌（asepsis）：無真菌、細(xì)菌、支原體或其他微生物存在。無菌技術(shù)（aseptictechnique）：采用化學(xué)或物理手段防止微生物污染的技術(shù)。在組織細(xì)胞培養(yǎng)中還意味著防止有害物質(zhì)污染及其他細(xì)胞的交叉污染。合成培養(yǎng)基（chemicallydefinedmedium）：是一種各種成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)均明確地用于細(xì)胞培養(yǎng)的營養(yǎng)液。

化學(xué)純試劑

CP

Chemicalpure

實(shí)驗(yàn)試劑

LR

Laboratoryreagent

超純試劑

UP

Ultrapure

生化試劑

BC

Biochemical

光譜純

SP

Spectrumpure

氣相色譜

GC

Gaschromatography

指示劑

Ind

Indicator

層析用

FCP

Forchromatographpurpose

工業(yè)用

Tech

Technicalgrade

飼養(yǎng)層（feederlayer）：又稱飼養(yǎng)細(xì)胞。是在細(xì)胞培養(yǎng)中使用的一層具有飼養(yǎng)其他細(xì)胞作用的細(xì)胞，在其表面可培養(yǎng)那些需要復(fù)雜營養(yǎng)的細(xì)胞。生長曲線（growthcurve）:以正在生長繁殖的培養(yǎng)物中細(xì)胞的數(shù)目或生物量為時(shí)間的函數(shù)所繪制的曲線。體外培養(yǎng)細(xì)胞的分型

粘附型細(xì)胞:附著在某一固相支持物表面才能生長的細(xì)胞。懸浮型細(xì)胞:不必附著于固相支持物表面，而在懸浮狀態(tài)下即可生長的細(xì)胞。貼附(粘附)型細(xì)胞

粘附:是大多數(shù)有機(jī)體細(xì)胞在體內(nèi)

生存和生長發(fā)育的基本存在方式結(jié)果基于粘附特性，使細(xì)胞與細(xì)胞之間相互結(jié)合形成組織，有機(jī)體的絕大多數(shù)細(xì)胞必須粘附于一固相表面才能生存和生長。

培養(yǎng)時(shí)：這些細(xì)胞被放到體外環(huán)境中以后,同樣需要粘附于某一固相表面才能生存和生長，因而屬于粘附型細(xì)胞。粘附(錨定或錨著)依賴型(性)細(xì)胞：唯有粘附于固相表面才能生存的細(xì)胞

類型

細(xì)胞在體內(nèi)、外的粘附方式：存在差異

體內(nèi)：粘附是全方位

外形具有復(fù)雜的立體特征

體外：多數(shù)情況，細(xì)胞只有一個(gè)附著平面

外形一般與體內(nèi)時(shí)明顯不同

按照培養(yǎng)細(xì)胞粘附生長時(shí)的主要形態(tài)，可分為幾大類型

貼附(粘附)型細(xì)胞分類

上皮細(xì)胞型成纖維細(xì)胞型

上皮細(xì)胞型

名稱：僅形態(tài)上似體內(nèi)，實(shí)