中藥藥理學(xué)實驗

實驗一附子炮制前后致小鼠中毒死亡的情況比較實驗?zāi)康模河眯∈笏劳鰯?shù)觀察附子炮制前后毒性的不同實驗原理：附子的有毒成份主要是烏頭堿。它的性質(zhì)不穩(wěn)定，經(jīng)長時間用水浸泡和加熱煎煮炮制，都可使烏頭堿水解成毒性較小的苯甲酰烏頭胺和烏頭胺。生附子中烏頭堿含量高，經(jīng)過炮制后烏頭堿含量減少，毒性也降低，引起動物中毒死亡的劑量就比生附子大得多。

實驗器材：小鼠籠（或罐）、電子天平、注射器（1ml），小鼠灌胃針頭。

藥品：生附子和熟附子水煎液1g/1ml、苦味酸。材料：小白鼠。體重18-22g，雌雄不拘。

實驗方法

1，取4只小白鼠，稱重，用苦味酸標(biāo)記后隨機(jī)分為兩組，分別0.2ml/10g的生附子和炮制后的附子水煎液灌胃。30min后觀察兩組小鼠中毒癥狀和死亡數(shù)有無不同。2，生附子灌服后約20min動物出現(xiàn)腹部收縮，身體搖擺，步態(tài)不穩(wěn)和不安靜等現(xiàn)象；30min左右可能死亡。而炮制附子水煎液灌服后則無此中毒現(xiàn)象。觀察結(jié)果并記錄。實驗結(jié)果：分組數(shù)量性別體重給藥劑量結(jié)果生附子制附子思考題：中藥炮制后對臨床有何指導(dǎo)意義為預(yù)防附子中毒，應(yīng)如何降低其毒性延胡索炮制前后鎮(zhèn)痛作用的影響實驗?zāi)康模和ㄟ^醋酸扭體法觀察延胡索炮制前后鎮(zhèn)痛作用的變化實驗原理：延胡索的醇制浸膏、醋制浸膏、散劑等均有明顯鎮(zhèn)痛作用。延胡索乙素鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng)，丑素次之，甲素較弱。延胡索乙素為鎮(zhèn)痛主要有效成分，其鎮(zhèn)痛作用較嗎啡弱但優(yōu)于復(fù)方阿司匹林，對鈍痛的作用優(yōu)于銳痛。與嗎啡等麻醉性鎮(zhèn)痛藥相比副作用少而安全，沒有成癮性。鎮(zhèn)痛時對呼吸沒有明顯抑制，也無便秘等副作用。生品中游離生物堿難溶于水，煎液中有效成分低，醋制后生物堿成鹽，易溶于水，鎮(zhèn)痛作用增強(qiáng)。

左旋四氫巴馬汀是一個多巴胺受體阻斷劑，其鎮(zhèn)痛作用機(jī)制可能與阻斷腦內(nèi)多巴胺D1受體，使紋狀體亮氨酸腦啡肽含量增加有關(guān)。實驗方法：

取4只小白鼠，稱重，用苦味酸標(biāo)記后隨機(jī)分為兩組，分別0.2ml/10g的生延胡索和炮制后的延胡索水煎液灌胃。45分鐘后分別腹腔注射0.7％冰醋酸溶液。15min后觀察小鼠們15分鐘內(nèi)扭體的次數(shù)。實驗結(jié)果：分組動物數(shù)性別體重給藥劑量冰醋酸量扭體次數(shù)生延胡索制延胡索思考題：炮制后延胡索鎮(zhèn)痛作用增強(qiáng)的原因?qū)嶒灦荷簏S制大黃對小腸運動的影響實驗?zāi)康模河^察瀉下藥大黃、制大黃對小白鼠腸蠕動的影響以及它們的藥理研究。實驗原理：大黃的主要成分為蒽醌衍生物及二蒽酮類衍生物，大黃為瀉下藥的代表，臨床發(fā)現(xiàn)病人大量服用大黃后會產(chǎn)生繼發(fā)性便秘，在中醫(yī)治療中，常以芒硝、厚樸、枳實等配伍應(yīng)用，以減輕此副作用?，F(xiàn)代研究表明，是因為大黃同時含有瀉下作用的蒽苷及止瀉作用的鞣質(zhì)所致，蒽苷瀉下作用強(qiáng)而作用時間較短，鞣質(zhì)止瀉作用強(qiáng)度較弱而作用時間長，大黃不同炮制品的致瀉強(qiáng)度亦不同，生大黃的致瀉強(qiáng)度高于熟大黃（九蒸九曬品、熱壓一次品及熱壓三次品）和制大黃酒（或醋）炒后瀉下效力降低30%左右。有研究表明，大黃煎煮時間越長，致瀉作用愈小，以熱水浸50℃實驗步驟：取體重20±2g相近的小白鼠8只，隨機(jī)均分為2組，每組4只，用苦味酸做標(biāo)記。分別用上述3種炭末液0.2ml/10g體重灌胃。給藥30min后脫頸椎處死，切開腹腔分離腸系膜，剪取上端至幽門，下端至回盲腸的腸管，置于托盤上。輕輕將小腸拉成直線，測量腸管長度作為“小腸總長度”，從幽門至炭末前沿的距離作為“炭末在腸內(nèi)推進(jìn)距離”，取各組小鼠平均值，用公式計算炭末推進(jìn)百分率。

炭末推進(jìn)率=炭末在腸內(nèi)推進(jìn)距離（cm）÷小腸全長（cm）×100%實驗結(jié)果：分組數(shù)量給藥劑量腸全場推進(jìn)距離推進(jìn)率生大黃制大黃思考題：1.大黃瀉下的主要成分及機(jī)制2.大黃炮制前后化學(xué)成分有何變化實驗三：豬苓澤瀉對家兔的利尿作用實驗?zāi)康模簩W(xué)校導(dǎo)尿法，觀察豬苓澤瀉的利尿作用實驗原理：豬苓味甘、淡、性平，歸腎、膀胱經(jīng)，具有利尿滲濕作用,且作用于黃芪、玉米須、木通、淡竹葉等。主治小便不利、水腫、泄瀉、淋濁、帶下。實驗研究表明豬苓的利尿作用與抑制腎小管對水、電解質(zhì)的重吸收有關(guān),但其利尿特點及分子生物學(xué)機(jī)制尚不明確。研究發(fā)現(xiàn)，其為利尿藥，也有降血壓的作用，可醫(yī)治腎性水腫、心臟性水腫、煩熱口渴、小便不利、瀉痢及其他新陳代謝障礙等。豬苓提取物對腎結(jié)石大鼠實驗表明:豬苓具有明顯促進(jìn)腎排泄Na+、k+、cl-,而抑制尿ca+排泄及抑制尿草酸鈣結(jié)晶的生長與聚集作用，同時其腎臟骨橋蛋白(OPN)mRNA的表達(dá)也得到抑制，表現(xiàn)出明顯的利尿和抑制尿結(jié)石形成作用，并具有明顯的腎功能保護(hù)作用。研究發(fā)現(xiàn)，豬苓含鉀量不高(30mg)，亦不稀釋血液，其利尿作用可能是由于抑制了腎小管對電解質(zhì)和水的重吸收。澤瀉性寒,味甘、淡，歸腎、膀胱經(jīng)。具有利水滲濕、泄熱之功效。用于小便不利、水腫脹滿、泄瀉、尿少、痰飲、眩暈、熱淋澀痛等癥。澤瀉有明顯的利尿作用,這與其含有大量的鉀鹽有關(guān)。澤瀉可用于小便不利、水腫脹滿、泄瀉尿少、痰飲眩暈、熱淋澀痛、高脂血癥、澤瀉含三萜類化合物及甾醇、生物堿、苷類、黃酮、有機(jī)酸、氨基酸、多糖、揮發(fā)油等成分。研究發(fā)現(xiàn)，澤瀉對人及家兔均有利尿作用，可使健康人尿量增加63%，尿中排鈉、尿素量也增加，而澤瀉經(jīng)甲醇、苯和丙酮提取的組分T10mg/kg給藥可使貓和兔的血壓下降。實驗步驟：取一只家兔稱重,固定，耳緣靜脈注射生理鹽水10ml/kg,固定在手術(shù)臺上，插導(dǎo)尿管，排空膀胱內(nèi)尿液，收集5～10min內(nèi)尿液兩次，一只家兔灌胃豬苓澤瀉水煎液，另一只灌胃等量的生理鹽水，30min后收集30min的尿液。實驗結(jié)果：分組數(shù)量給藥劑量30min尿量60min尿量豬苓澤瀉生理鹽水思考題：影響中藥利尿的因素有哪些？豬苓利尿作用機(jī)制澤瀉利尿作用機(jī)制實驗四三七對小鼠出血時間和凝血時間的影響實驗?zāi)康模簩W(xué)習(xí)玻片法測定出血時間及凝血時間的測定，觀察三七縮短出血時間的作用實驗原理：三七具有良好的止血功效，能明顯縮短出血和凝血時間。研究表明，三七的止血成分主要為三七素（Dencichine）。三七素能促使血小板聚集、變形，釋放ADP、血小板因子Ⅲ和鈣離子等物質(zhì)而達(dá)到止血作用。三七中含有的三七皂苷與人參皂苷均對ADP誘導(dǎo)的家兔血小板聚集有明顯抑制作用，且表現(xiàn)出劑量——反應(yīng)模式。在同等劑量下三七總皂苷與人參總皂苷的作用沒有明顯差異。三七皂苷表現(xiàn)出對血漿凝血因子與血小板聚集性均有抑制作用。且在對血小板聚集的抑制方面，三七皂苷與人參皂苷的作用相當(dāng)。人參三醇型皂苷具有溶血作用，人參二醇型皂苷的溶血活性很低。因此，三七具有活血化瘀的功效！

實驗步驟：取4只小白鼠，稱重，用苦味酸標(biāo)記后隨機(jī)分為兩組，分別0.2ml/10g的三七和等量的生理鹽水灌胃。30min后剪去小鼠尾端尾巴3mm左右，每隔30秒用濾紙輕輕吸除尾巴上的血，直至血流自然停止。然后45min左右，眼球取血滴于再玻片上兩滴。計時，每隔30秒用針頭輕佻，直至有血絲出現(xiàn)，馬上挑另一只予以驗證。即為凝血時間。實驗結(jié)果：分組動物數(shù)給藥量出血時間凝血時間生理鹽水三七水煎液思考題：三七及三七傷藥片對凝血時間有何影響，此作用臨床意義何在？測定凝血時間有何臨床意義？實驗五桔梗對小鼠的祛痰作用實驗?zāi)康模簩W(xué)習(xí)酚紅從呼吸道分泌法，觀察桔梗對小鼠的祛痰作用實驗原理：指示劑酚紅自小鼠腹腔注射并經(jīng)腹腔吸收后，可部分地由支氣管黏液腺分泌入氣道，有祛痰作用的藥物在使支氣管分泌液增加的同時，其由呼吸道粘膜排出的酚紅也隨之增多。因而可從藥物對氣管內(nèi)酚紅排泌量的影響來觀察其祛痰作用。酚紅在堿性溶液中呈紅色，將氣管放入定量的生理鹽水中，加碳酸氫鈉使其顯色，用比色法，分光光度計，測出酚紅的排泌量。從而得到藥物的祛痰作用。實驗步驟：取小鼠4只，隨機(jī)分為對照組和桔梗水煎液組，按20ml/kg，體重，灌胃給藥30min后。對照組給同體積生理鹽水。由腹腔注射酚紅溶液0.5ml/只。30min后頸椎脫臼處死小鼠，剝?nèi)夤苤車M織，剪下自甲狀軟骨至氣管分支處的一段氣管，放進(jìn)盛有3ml生理鹽水的試管中，再加入0.1ml碳酸氫鈉溶液。比較生理鹽水組和桔梗組的液體顏色。實驗結(jié)果：組別動物數(shù)給藥劑量酚紅排泌量生理鹽水桔梗煎液思考題：1.桔梗祛痰作用的機(jī)制？實驗六人參對小鼠游泳時間的影響實驗?zāi)康模毫私馊藚π∈笥斡緯r間的影響，掌握疲勞作用藥物的常用篩選方法實驗原理：人參能促進(jìn)人體對糖原和三磷酸腺苷等能量物質(zhì)的合理利用，并使劇烈運動時產(chǎn)生的乳酸轉(zhuǎn)化為丙酮酸進(jìn)入三羧酸循環(huán)，為機(jī)體提供更多的能量，減輕體力運動時的疲勞。本實驗以小鼠游泳時間為指標(biāo)觀察人參的抗疲勞作用。實驗步驟：玻璃缸內(nèi)加水，水深20cm，水溫保持在20±0.5℃。取4只小鼠，雌雄不限，稱重，用苦味酸標(biāo)記，隨機(jī)分為兩組。給