鵝副粘病毒滅活疫苗的研制

鵝副粘病毒滅活疫苗的研制小組名稱：哈藥集團黑龍江省生物制品一廠”跨越QC小組”注冊編號：HY/QC20060781目錄

一、小組概況二、確定課題三、設(shè)定目標(biāo)四、提出各種方案并確定最佳方案五、制定對策計劃表六、對策實施七、效果確認八、標(biāo)準(zhǔn)化九、總結(jié)與下一步打算2一小組概況表1制表人：孫德君制表日期：2006.013項目內(nèi)容小組名稱跨越QC小組成立日期2006年01月課題名稱鵝副粘病毒滅活疫苗的制備課題類型創(chuàng)新型小組注冊號HY/QC2006－121小組人數(shù)8人出勤率100％活動次數(shù)4次/周人均QC教育時間60小時活動時間2006.01——2006.12核心理念全面創(chuàng)新求真務(wù)實以人為本共創(chuàng)價值(一)小組情況簡介姓名性別年齡學(xué)歷職稱小組分工姜力女50本科高級獸醫(yī)師方案實施馬世華男49本科高級獸醫(yī)師方案實施周今采女60本科研究員方案實施劉方悅女30大專獸醫(yī)師組長白同臣男30大專獸醫(yī)師方案實施付麗杰女40碩士高級獸醫(yī)師方案實施孫德君女27本科助理獸醫(yī)師方案實施馮聞迪女28本科助理獸醫(yī)師方案實施表2制表人：馬世華制表日期：2006.014(二)小組人員介紹

我廠是生產(chǎn)動物用疫苗的專業(yè)廠家，主要產(chǎn)品是禽流感疫苗和豬用疫苗,其中鵝副粘病毒滅活疫苗是應(yīng)市場的需要，自主研發(fā)的產(chǎn)品，該產(chǎn)品在國內(nèi)外屬空白。我廠的鵝副粘病毒滅活疫苗研制工作現(xiàn)已進入臨床實驗階段，生產(chǎn)文號正在審批當(dāng)中。5二確定課題課題簡介1、市場的需要

小組成員在哈爾濱市郊區(qū)六個中型鵝場進行了調(diào)查，發(fā)現(xiàn)鵝的副粘病毒病發(fā)病率、死亡率較高，到了不用疫苗難以控制的程度。鵝場名稱養(yǎng)鵝量（只）發(fā)病量（只）死亡量（只）發(fā)病率（%）新屯鵝場15000500020030.0周家鵝場22000800045036.3興隆鵝場11000460017041.8勝利鵝場17000680017040.0興安鵝場21000820040039.8大勝鵝場26000940038036.26選題理由2、工廠的要求

工廠對研發(fā)中心的工作要求是1－2年報批一個新產(chǎn)品，新品必須是市場前景良好，有廣闊應(yīng)用空間的產(chǎn)品。鵝副粘病毒滅活疫苗正是適應(yīng)養(yǎng)鵝業(yè)大發(fā)展的需要，提供預(yù)防鵝副粘病毒病的一個產(chǎn)品。73、部門的要求研發(fā)中心要求課題組要自選課題，創(chuàng)造價值。確立課題

1、市場的需要。

2、工廠的要求。

3、部門的要求。8鵝副粘病毒滅活疫苗的研制基于這三點理由確立課題：三確定目標(biāo)

中華人民共和國獸藥典對疫苗制品規(guī)定合格疫苗的保護率在80％以上，因此我們小組把鵝副粘病毒滅活疫苗的保護率定在80％作為本次QC活動的目標(biāo)值。圖1：目標(biāo)圖制圖人：劉方悅制圖日期：2006年01月9四提出各種方案并確定最佳方案針對鵝副粘病毒滅活疫苗的研制我們小組成員用“頭腦風(fēng)暴法”進行了難點分析：10如何制備鵝副粘病毒滅活疫苗

毒種來源不清需鑒定項目

病毒含量

對鵝胚的毒力安全性免疫原性特異性

疫苗檢驗項目疫苗效力檢驗用雞胚檢驗

特異性檢驗

無菌檢驗

用雞檢驗免疫持續(xù)期

最小免疫量

疫苗安全檢驗

外源病毒檢驗超劑量注射臨床檢驗方法不清（一）難點分析

圖2：親和圖制圖人：孫德君制圖日期：2006年02月11（二）提出方案方案123步驟一現(xiàn)地分離毒種用雞的副粘病毒疫苗毒株作種毒用外單位引進的副粘病毒毒種步驟二用RT-PCR方法測定分離毒種的基因排序自行鑒定毒種請外單位同行作鑒定步驟三生產(chǎn)3批疫苗生產(chǎn)2批疫苗生產(chǎn)1批疫苗步驟四實驗室效檢試驗現(xiàn)地鵝場檢驗控制范圍作攻擊強毒檢驗步驟五實驗室安全檢驗實驗室超劑量檢驗實驗室外源病毒檢驗表3：方案對比表制表人：付麗杰制表日期：2006年02月12（三）確定最佳方案

方案步驟

對比結(jié)果方案1方案2方案3

步驟一分離毒種抗原性好血清型不同，疫苗效果不好外單位毒種針對性不強

步驟二RT-PCR方法準(zhǔn)確性高自行鑒定不具權(quán)威性請哈爾濱獸醫(yī)科學(xué)研究所作鑒定，有鑒定證書

步驟三差別不大差別不大差別不大

步驟四應(yīng)進行應(yīng)進行應(yīng)進行步驟五應(yīng)進行應(yīng)進行應(yīng)進行13表5制表人:孫德君制表時間:2006年03月小組用了1個月的時間，對三組方案分別進行了實施、論證，

得出的評估結(jié)果如下：方案評估小組成員累計得分姜力周今采馬世華劉方悅孫德君白同臣付麗杰馮聞迪單項綜合選擇1重要性5555555540100選難易性5444444433可行性33333444272、重要性333333332480不選難易性3333333324可行性44444444323、重要性333333332472不選難異性2222222216可行性4444444432表4制表人:劉方悅制表時間2006年03月14注:分值為1-5分基于以上的試驗結(jié)果和小組成員的評估結(jié)果，大家一致選定最佳方案如下：最佳方案(方案1)自行分離毒種請哈獸研鑒定，作RT-PCR試驗測定基因排序用鑒定合格的毒種繁殖原液，制造疫苗效力檢驗作實驗室和現(xiàn)地聯(lián)合檢驗，并控制范圍作攻擊強毒試驗安全檢驗作實驗室超劑量試驗和外源病毒檢驗15序號對策目標(biāo)措施負責(zé)人完成時間完成地點1分離病毒ELD50≧107.0／0.1ml雞胚尿囊腔接種試驗、劉方悅4周無菌室2檢測病毒符合毒種要求血凝試驗RT-PCR試驗姜力6周實驗室3制造疫苗符合規(guī)程要求原液繁殖馬世華孫德君6周無菌室4疫苗效力檢驗保護率80％肌肉注射劉方悅付麗杰6周

畜舍實驗室5疫苗安全試驗

雞胚、雞死亡為0肌肉注射白同臣馮聞迪10周畜舍五制定對策計劃依據(jù)我們選定的方案，制定了相應(yīng)的對策：表7制表人：馮聞迪制表時間：2006.0416

實施一病毒的分離六對策實施表8制表人：孫德君制表時間：2006年0417采集病料研磨無菌處理接種10日齡SPF雞胚收獲胚液,測出血凝價8log2收獲胚液測血凝價并接種10日齡SPF雞胚病毒分離成功了！實施二哈獸研作RT-PCR方法檢測雞胚液病毒基因序列。表9制表人：白同臣制表時間：2006年04月18實施結(jié)果：哈獸研出具了雞胚液病毒F基因序列與經(jīng)典副粘病毒F基因序列同源性97%相同。說明所分離病毒確為鵝副粘病毒。是符合種毒標(biāo)準(zhǔn)的病毒制造疫苗按《中華人民共和國獸用生物制品規(guī)程》中雞新城疫滅活疫苗的制造方法制備疫苗。19實施結(jié)果：制備出3批鵝副粘病毒滅活疫苗共500瓶×250ml/瓶=62.5萬毫升疫苗實施三試制的三批疫苗符合規(guī)程標(biāo)準(zhǔn)把疫苗按一定比例稀釋后注射20日齡雛鵝20只，另外將疫苗稀釋后，接種10日齡SPF雞胚，測病毒含量。表11制表人：劉方悅制表時間：2006年05月20實施四

疫苗效力檢驗接種SPF雞胚實施結(jié)果：HI抗體5log2，EID50≥10-7/0.1ml(病毒半數(shù)感染量），把免苗后的雛鵝攻擊強毒，100％保護無一死亡。疫苗稀釋稀釋接種雛鵝42天后測HI抗體測病毒半數(shù)感染量保護率超過80％了實施五疫苗安全檢驗制圖人：孫德君制圖時間：2006年5月21

將疫苗10倍量分點注射20日齡雛鵝20只，觀察30天，看雛鵝有無不良反應(yīng)和死亡情況。實施結(jié)果：鵝只健康，無一死亡。七效果驗證效果一：制備出的疫苗經(jīng)過各項效力、安全檢驗，均達到要求標(biāo)準(zhǔn)，對雛鵝保護力的測試顯示：保護率平均已達94.73%。22鵝場名稱養(yǎng)鵝量（只）發(fā)病量（只）發(fā)病率（％）保護率（％）新屯鵝場150009006.094.0周家鵝場2200011005.095.0興隆鵝場110007707.093.0勝利鵝場170008845.294.8興安鵝場210008824.295.8大勝鵝場2600011004.2395.76制表時間：2006年10月用苗前后發(fā)病率比較曲線23用苗后保護率和目標(biāo)值比較24通過本次小組創(chuàng)新活動完成了設(shè)定目標(biāo)效果二

社會效益：在我國鵝業(yè)發(fā)展迅猛的今天，研制、開發(fā)成功的鵝副粘病毒滅活疫苗做為鵝場的預(yù)防用生物制品，具有良好的社會效益，會給鵝場的發(fā)展帶來新希望。這在未來的時間里會體現(xiàn)出來。25效果三小組成員個人能力的提高小組人員各項能力活動前活動后創(chuàng)新精神24團結(jié)合作精神34主人翁精神45QC知識45解決問題的能力