藤茶的藥用植物資源及其開發(fā)利用

藤茶的藥用植物資源及其開發(fā)利用

1系茶總結(jié)1.1藤茶植物的分布特點哲倫茶的學名是桂花（hadmaya）w.t.wang。這是葡萄科的一種野生木屑科植物。屬于典型的茶類植物，俗稱山甜茶、白茶、甘草茶、白茶等，主要分布在我國湖南、湖北、云南、貴州、廣東、廣東、福建等地。藤茶原植物生長于海拔400～1300m之間,集中或散生在山坡的混雜林中,野生貯量大,分布和生長規(guī)律比較清晰,為可以直接利用的野生植物資源[1～3]。我國湖南、廣西等地對藤茶植物的開發(fā)應用較早,據(jù)資料,湖南省年產(chǎn)野生顯齒蛇葡萄可達450～500t。經(jīng)過近10年來的開發(fā),目前已在湖南、湖北等省開始人工栽培研究[6～8]。湖北省內(nèi)藤茶植物主要分布于鄂西南山區(qū),特別是恩施州的來鳳縣大河地區(qū)盛產(chǎn)野生藤茶,該地區(qū)除了分布顯齒蛇葡萄(藤茶)外,還分布有同科同屬植物大葉蛇葡萄(A.megalophyllaDiels)、光葉蛇葡萄(A.sinicavarhancei(pl.)W.T.Wang)等;2000年開始,當?shù)乜蒲胁块T聯(lián)合高校開展藤茶仿野生栽培試驗并獲成功,結(jié)果表明,人工栽培藤茶與現(xiàn)有野生藤茶藥用品質(zhì)相同。1.2商品藤茶加工工藝開發(fā)藤茶植物資源,目前最主要的加工產(chǎn)品為類茶產(chǎn)品,即沖泡型商品“藤茶”,各地分別有“藤茶”、“白猴”、“甘露茶”、“茅巖霉茶”、“野藤茶”、“龍須茶”等俗稱。通常于春夏季采回植株上的幼嫩莖葉,經(jīng)炒制加工而成。商品藤茶加工工藝流程:原料→分級→清洗→攤放→殺青→揉捻→燜青→曬干→冷卻回潤→密封保存。其它加工產(chǎn)品主要有:粉沫狀的袋泡茶、壓榨成型的藤茶餅、與綠茶或紅茶為伍的拼和茶、由藤茶莖葉水提取物濃縮加工的速溶茶、藤茶飲料、藤茶含片、果凍等產(chǎn)品[14～16]。1.3加味神茶,初療效藤茶為藥食兩用植物,最初作為一劑草藥應用于民間。我國廣西、湖南等省區(qū)壯族、瑤族和湖北土家族苗族人民常用其幼嫩莖葉入茶,夏天泡茶,數(shù)日不餿。有“神茶”之稱,已有數(shù)百年的歷史。據(jù)《中草藥匯編》等文獻記載,該藥性味甘淡、清熱解毒,主治黃疸型肝炎、感冒風熱、咽喉腫痛等。民間認為,大凡失音、中暑、口舌生瘡、風火牙痛、便秘等癥,用開水泡飲藤茶,療效明顯;對馬牙疳、腳丫濕疹等用藤茶外敷、外洗,也有一定療效。藤茶可全株藥用,主要采用莖葉或根部,藥用量因加工方法不同而異,磨服量小,代茶沖服量較大。2白堊系及蛇葡萄素近年來,關(guān)于同科同屬不同種的蛇葡萄屬植物的化學成分研究,國內(nèi)外均有報道。如日本學者研究了光葉蛇葡萄A.brevipedunculatavar.hancei(pl.)Rehd根的甲醇提取物中的化學成分,從中分離出白藜蘆醇苷及蛇葡萄素等成分;李文武等對羽葉蛇葡萄Ampelopsischaffanjonii(Levl.)Rehd.進行研究,從中分離得到酚甙成分蛇葡萄素Ampelopsisin。關(guān)于顯齒蛇葡萄植物(藤茶)化學成分的研究,目前僅限于國內(nèi),主要針對我國湖南、廣西、福建、湖北等省分布的藤茶植物,包括對藤茶中存在的化學成分種類、含量分析和主要成分的分離、鑒定及相關(guān)分析方法的建立等,特別是對藤茶黃酮及其分離成分二氫楊梅素的研究較為系統(tǒng)和全面。2.1人體必須氨基酸氨基酸張友勝等對湖南顯齒蛇葡萄幼嫩莖葉的干樣進行了較全面的化學分析,測得粗蛋白含量為13.94%,水溶性蛋白0.55%,總氨基酸2.53%,17種氨基酸中包含8種人體必需氨基酸;總灰分6.80%,包含豐富的無機營養(yǎng)元素;總多酚18.5%;特別是水浸出物含量高,5次浸提總浸提率高達72.97%,其中高含量的總黃酮和二氫楊梅素體現(xiàn)了該植物的特點;對揮發(fā)油成分分析顯示,其揮發(fā)油總得率較低,以葉綠醇、正十六酸和雪松醇為主。2.2藤茶主要黃酮類化合物采用水、乙醇、丙酮等作介質(zhì),對不同產(chǎn)地藤茶原料的提取物中經(jīng)萃取、分離,主要得到黃酮類化合物,其次是酚類及甙類化合物。覃潔萍等從廣西瑤族藤茶的醇提物中分離到雙氫楊梅樹皮素(DL-dihydromyricetin,C15H12O6)和楊梅樹皮素(Myricetin,C15H10O6)兩種黃酮物質(zhì)。袁阿興等以廣西產(chǎn)藤茶地上部的水煎液冷卻后得到沉淀和水相部分,從沉淀分離得到雙氫黃酮醇結(jié)晶(福建茶素,即蛇葡萄素或稱二氫楊梅素),水相部分經(jīng)濃縮、乙酸乙酯萃取、分離得到4種結(jié)晶化合物:龍涎香醇、β-谷甾醇、楊梅黃素(即楊梅素)和楊梅甙(楊梅素-鼠李糖甙)。對藤茶丙酮-水提取物進行分離,乙酸乙酯萃取、聚酰胺柱層析純化得到1種化合物(蘆丁);水相部分經(jīng)分離得到3種化合物:沒食子酰-β-D-葡萄糖、沒食子酸乙酯和沒食子酸。對福建藤茶醇提物再進行乙酸乙酯抽提得到的浸膏,分離出9種化合物:棕櫚酸、β-谷甾醇、大黃素、沒食子酸甲酯、槲皮素、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖甙、花旗松素、洋芹素和蛇葡萄素;以后再次從醇提物中分離得到2種新的甙類化合物:藤茶甙(grossedentataside)和藤茶素(grossedentstasin)。2.3藤茶黃酮的提取就現(xiàn)有資料顯示,黃酮是藤茶中含量最高的一類化合物,原料經(jīng)脫脂脫色后,一般以80%～95%乙醇浸泡或回流提取得到總黃酮,也可以甲醇回流或用水煎煮法提取得到總黃酮粗提物;依據(jù)藤茶黃酮溶于熱水不溶于冷水、以及兩種組分在乙醇、甲醇、丙酮中的溶解性差異對總黃酮提取液采用除醇、重結(jié)晶、過柱等方法加以分離,可得到二氫楊梅素、楊梅素2種主要活性成分。覃潔萍等以ZrOCl2·8H2O為絡(luò)合劑,以二氫楊梅素為標樣,用差示分光光度法,最大吸收波長為318nm,測得廣西瑤族藤茶精制品中總黃酮含量高達45%以上;何桂霞等以同樣方法對湖南不同產(chǎn)地不同采收期藤茶的葉、莖以95%乙醇提取總黃酮并進行含量測定,結(jié)果以5月份采集的藤茶葉中總黃酮含量最高,為41.2%～45.3%,葉中含量高于莖中3～4倍。用甲醇回流提取藤茶黃酮,以二氫楊梅素為標樣,用三氯化鋁分光光度法,最大吸收波長為294nm,總黃酮含量達45%左右,以薄層色譜法測得二氫楊梅素的含量高達37.4%～38.5%;熊皓平等用95%的乙醇回流浸提顯齒蛇葡萄幼嫩莖葉中有效成分,以類似方法測得幼葉干樣及加工成品中總黃酮含量均在36%以上。3對藤茶藥理作用和生物活性的研究3.1藤茶的毒副作用基于藤茶在民間的藥用功效,經(jīng)動物藥理試驗及臨床應用,均顯示藤茶水提液、藤茶沖劑或復方藤茶制劑具有增強免疫功能、抑菌、消炎、鎮(zhèn)痛、消腫等作用,毒理學試驗表明長期飲服藤茶無毒副作用[33～35]。3.2黃酮類化合物的生物活性研究3.2.1藤茶總黃酮的抑菌效果體外抑菌試驗顯示,直接作用于金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌、大腸埃希菌時,藤茶總黃酮有明顯抑菌作用,其抑菌濃度多低于1.0mg/ml;小鼠體內(nèi)抑菌試驗表明,藤茶總黃酮局部給藥口腔粘膜0.73g/kg,對金葡菌和甲型溶血性鏈球菌感染的小鼠具有一定的保護作用,小鼠存活率分別提高50%和40%左右;金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、大腸桿菌、副傷寒沙門氏菌等7種致病菌株的抑菌作用顯示,二氫楊梅素與鹽酸黃連素的抑菌效果相當,酸性和堿性環(huán)境下,二氫楊梅樹皮素的抑菌效果顯著強于中性條件下的抑菌效果。3.2.2抗氧化酶系統(tǒng)mda淋淑英等對藤茶黃酮分離成分二氫楊梅素在植物油和豬油體系中的抗氧化效果進行了研究。以95%純度的二氫楊梅素添加到豬油體系中,測定丙二醛吸光值和過氧化物值來評價其抗氧化效果,結(jié)果顯示,二氫楊梅素在豬油體系的抗氧化作用明顯,最優(yōu)添加量為0.04%;當同時添加0.02%的抗壞血酸或檸檬酸或EDTA作增效劑時,可有效地提高二氫楊梅素的抗氧化性能;在植物油體系中設(shè)定DMY(二氫楊梅素)與其它抗氧化劑濃度0.02%,以MDA作檢測指標,各種抗氧化劑的抗氧化效果依次是:TBHQ>DMY>兒茶酚>大豆異黃酮>葛根異黃酮>對照;DMY在0～0.1%的濃度范圍內(nèi),其抗氧化效果隨濃度增加而增強;發(fā)揮抗氧化效果的適宜pH4～5,醇溶DMY優(yōu)于水溶,低濃度下DMY的抗氧化效果受Fe2+影響而降低。何桂霞等研究了藤茶總黃酮及二氫楊梅素清除氧自由基和抗脂質(zhì)過氧化作用。藤茶總黃酮(TCF)對黃嘌呤-黃嘌呤氧化酶系統(tǒng)產(chǎn)生的O2-·有顯著的抑制作用,存在良好的量效關(guān)系;TCF對大鼠肝勻漿自氧化的抑制作用在2.5～40.0μg/ml范圍內(nèi)呈劑量-效應關(guān)系,EC50<10.0μg/ml;對Cys-Fe2+誘導的大鼠肝勻漿脂質(zhì)過氧化抑制效果顯著,EC50為38.1μg/ml;對VC-Fe2+誘導的肝勻漿脂過氧化及肝線粒體腫脹均有較強的抑制作用。通過分光光度法測定過氧化產(chǎn)物MDA,研究二氫楊梅素(DMY)的體外抗脂質(zhì)過氧化作用,結(jié)果顯示,DMY對離體的大鼠臟器組織勻漿脂質(zhì)過氧化以及由Fe2+-VC體系、Fe2+-H2O2體系、Fe2+-Cys體系誘導的組織勻漿及肝線粒體脂質(zhì)過氧化均有較強的抑制作用,在DMY終濃度為5～20μmol/L的范圍內(nèi),呈現(xiàn)較明顯的量效關(guān)系,對肝組織勻漿的抗氧化效果最顯著。3.2.3雙氫楊樹素的降血糖作用鐘正賢等將實驗小鼠分為正常對照組、模型組、二甲雙胍(150mg/kg)組,每天灌胃給藥1次,廣西藤茶總黃酮(GXTF)大小劑量組分別125mg/kg和62mg/kg,對照組和模型組給予等體積蒸餾水,連續(xù)7d。于末次給藥后1h,小鼠眼眶靜脈叢取血測定血糖水平。與模型組比較,GXTF大小劑量組對四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖升高有抑制作用;于末次給藥后1h,給藥組ip.葡萄糖(2g/kg)溶液或射腎上腺素(240μg/kg)并開始計時,于0.5、1h后,取血測定血糖值,結(jié)果表明,GXTF對0.5、1h葡萄糖引起的血糖升高具有明顯抑制作用,具有明顯對抗腎上腺素的升血糖作用;陽性對照藥優(yōu)降糖則有明顯地降低正常小鼠血糖作用,而GXTF對正常小鼠血糖值未見明顯影響;急性毒性試驗顯示,GXTF對正常小鼠無明顯毒副作用,最大灌胃量為26.0g/kg。以正常小鼠、四氧嘧啶所致糖尿病小鼠模型及由葡萄糖、腎上腺素引起的高血糖小鼠模型,進行雙氫楊梅樹皮素的降血糖試驗。以二甲雙胍(0.15g/kg)組作陽性對照,每天灌胃雙氫楊梅樹皮素一次,大小劑量組分別為0.25g/kg和0.125g/kg,對照組和四氧嘧啶組給予等體積蒸餾水,連續(xù)7d,末次給藥后1h測定血糖水平。結(jié)果顯示,雙氫楊梅樹皮素對正常小鼠血糖無無明顯影響;對四氧嘧啶所致糖尿病小鼠有明顯的降血糖作用,其中高劑量組效果與陽性組對照組的效果相當;大、小劑量的二氫楊梅素對葡萄糖、腎上腺素引起的高血糖模型小鼠也有明顯的降血糖效果。3.2.4gxf活性動物實驗結(jié)果表明,GXTF能降低高血脂癥模型小鼠血脂和血糖水平;明顯抑制大鼠體外血小板聚集和體內(nèi)血栓形成;提高D-半乳糖所致衰老模型小鼠血清和肝臟中超氧化物歧化酶(SOD)活性,抑制丙二醛(MDA)的生成,說明GXTF具有降血脂和抗氧化作用、抗血小板聚集和血栓形成的作用。陳曉軍等以高脂血癥模型小鼠和實驗性高脂血癥鵪鶉進行藤茶總黃酮(TFAG)的降血脂實驗,結(jié)果表明TFAG高、低劑量(400,200mg/kg)均有降低實驗動物血清TC、TG及AI和升高血清HDL-C的作用,可抑制肝臟脂肪化病變動脈粥樣硬化。3.2.5肝損傷小鼠血清因子水平的變化對實驗小鼠連續(xù)灌胃藤茶總黃酮(TCF/800,400,200mg/kg)7d,再腹腔注射0.1%CCl4的花生油溶液致小鼠急性肝損傷,16h后測定肝損傷鼠血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性、肝中超氧化物歧化酶(SOD)活性和肝中丙二醛(MDA)生成量,結(jié)果表明,TCF可降低肝損傷小鼠血清ALT、AST值,減少肝組織勻漿MDA的生成,增強SOD的活性,呈劑量依賴關(guān)系;病理學檢查顯示TCF對肝臟細胞的病理損傷有減輕作用;鄭作文等證實廣西藤茶雙氫楊梅樹皮素對四氯化碳和半乳糖胺致小鼠急性肝損傷具有保護作用。3.2.6對hbv基因的抑制率曾春暉等對小鼠脾細胞體外培養(yǎng)試驗顯示,藤茶二氫楊梅素(APS)對ConA誘導的小鼠淋巴細胞增殖有明顯的增強作用,提示APS有免疫增強功能;藤茶總黃酮在最大無毒濃度(62.50μg/ml)下,對HBV基因轉(zhuǎn)染的人肝癌細胞系2215細胞分泌乙型肝炎病毒HBsAg和HBeAg的抑制率