蘭索拉唑的藥代動力學(xué)研究

蘭索拉唑的藥代動力學(xué)研究

子泵抑制劑蘭索拉唑主要用于治療與胃腸道疾病有關(guān)的疾病，如潰瘍、胃食管反流疾?。╣erd）和伴有佐-埃氏綜合征的疾病。已經(jīng)證明,蘭索拉唑在肝臟中由細(xì)胞色素P4502C19(CYP2C19)和3A(CYP3A)進(jìn)行代謝,由于CYP2C19的基因多態(tài)性,蘭索拉唑的清除有明顯的個體差異。除細(xì)胞色素P450代謝酶會影響蘭索拉唑的代謝外,近年來的體外研究表明,蘭索拉唑是P-糖蛋白的底物,MDR1C3435T突變可能會通過改變腸道P-糖蛋白的表達(dá),對蘭索拉唑的吸收產(chǎn)生影響。在本試驗中將對可能影響蘭索拉唑體內(nèi)分布的蛋白和酶的基因多態(tài)性進(jìn)行研究,檢測健康受試者的CYP3A5*3、MDR1C3435T突變基因型,分析其對蘭索拉唑腸溶膠囊代謝的影響,同時對CYP2C19*2、CYP2C19*3也進(jìn)行考察。材料、對象和方法1聚合酶、基因組dna純化試劑盒蘭索拉唑腸溶膠囊,規(guī)格:每粒30mg,批號:050201,天津武田藥品有限公司生產(chǎn)。DNAMarker、dNTP,為大連寶生物公司生產(chǎn);TaqDNA聚合酶、基因組DNA純化試劑盒,美國Promega公司生產(chǎn):瓊脂糖,上海生工生產(chǎn);實驗所用其他試劑,均為分析純或優(yōu)級純;水為滅菌去離子水。PCR擴(kuò)增儀(Mastercycler),德國Eppendorf公司產(chǎn)品。2實驗室檢查及知情同意書篩選男性健康志愿者,既往無肝腎疾病、出血性疾病、心腦血管疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、血液病史,無過敏史,經(jīng)查體及實驗室檢查證實身體健康。實驗室檢查包括血常規(guī)、血生化、尿常規(guī)、HBsAg、十二導(dǎo)心電圖,均在正常范圍內(nèi)。受試者自愿簽署知情同意書。共有24名健康受試者入選本研究,受試者的平均年齡為34.9歲(30～39歲),受試者的平均身高為1.70m(1.60～1.79m),平均體質(zhì)量65.3kg(54～78kg)。3pcr和測序驗證取入選受試者EDTA-Na2抗凝血2mL,用DNA純化試劑盒提取基因組DNA;用PCR-RFLP檢測志愿者M(jìn)DR1C3435T、CYP3A5*3、CYP2C19*2和CYP2C19*3變異情況。用PCR產(chǎn)物測序驗證結(jié)果。受試者在服藥前1天晚入住本研究中心,在服藥前隔夜禁食10h以上,然后服用蘭索拉唑腸溶膠囊30mg,用溫開水150mL送服;受試者服藥后2h內(nèi)不能平臥,以避免影響胃腸蠕動,2h內(nèi)禁水,并在4h后給予統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)午餐。每次分別于服藥前、服藥后0.5、1、1.5、2、2.5、3、4、6、8、12、24h采集靜脈血5mL,血樣在1h內(nèi)4℃,3000r·min-1離心10min,分離出血清,保存于-20℃冰箱至測定。5u3000酸相采用高效液相-紫外檢測法,分析人血清中的蘭索拉唑。色譜條件:TSK-gelODS120T色譜柱(5μm,150mm×4.6mm);流動相為乙腈-20mmol·L-1磷酸氫二鉀水溶液(pH=7.46)(37:63);流量為1.0mL·min-1,柱溫40℃;UV波長285nm;進(jìn)樣量為40μL。血清中蘭索拉唑分析濃度范圍為20～2000ng·mL-1(γ=0.996)。各樣品的日內(nèi)、日間精密度均≤15%。6力學(xué)參數(shù)的測定用WinNonLin5.0軟件計算主要藥代動力學(xué)參數(shù);Cmax和tmax均為實測值,AUC0～tn用梯形法計算;用Spss16.0軟件對Cmax、AUC等藥代動力學(xué)參數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果1cyp2c1924名志愿者的基因型:CYP3A5*1/*1為1名;*1/*3為11名;*3/*3為12名;MDR1CC為9名;CT為11名;TT為4名。CYP2C19*1/*1為9名;*1/*2為11名;*2/*2為3名。僅1名受試者攜帶CYP2C19*1/*3。各基因型間體質(zhì)量、身高無統(tǒng)計學(xué)差異。2蘭索拉唑致-4.3/3的比較本試驗中對不同基因型的藥代動力學(xué)參數(shù)進(jìn)行了比較,見下表。從表可見,CYP3A5*3突變型純合子與表達(dá)CYP3A5*1的受試者比較,蘭索拉唑各個藥代動力學(xué)參數(shù)間不存在顯著性差異;但*3/*3較*1攜帶者AUC0～∞和Cmax分別降低22.8%和19.8%;CYP2C19*1/*1與*2/*2比較,AUC0～∞存在顯著性差異(P=0.04);MDR13435C與3435TT比較,tmax存在顯著性差異(P=0.026)。3物的吸收速率AUC0～2是蘭索拉唑從給藥至tmax的血藥濃度時間曲線下面積,用其表示藥物的吸收速率具有更高的統(tǒng)計意義。MDR13435C與3435TT2組比較,平均AUC0～2分別為(250.7±200.03)、(504.4±192.49)ng·h·mL-1,2組間存在顯著性差異(P=0.03),見圖1、2。cyp3a1.3和mdr135t-3對蘭索拉唑藥代動力學(xué)參數(shù)的影響蘭索拉唑是一種具有H+-K+腺苷三磷酸(ATP)酶抑制作用的苯并咪唑類衍生物,口服蘭索拉唑腸溶膠囊30mg后,1.5～2.2h就可達(dá)到血藥濃度,血中主要檢測到藥物原形。蘭索拉唑在肝臟中由細(xì)胞色素P4502C19(CYP2C19)和3A(CYP3A)進(jìn)行代謝。CYP2C19基因突變對蘭索拉唑藥代動力學(xué)的影響已有一些研究報道;但在以中國人為對象的研究報道中以中國漢族健康志愿者為研究對象,蘭索拉唑AUC0～∞在CYP2C19*1/*1、*1/*2和*2/*2間存在顯著相關(guān)性(P<0.001)。Hu等也得到一致的結(jié)果(P<0.01)。CYP3A5*3和MDR1C3435T對蘭索拉唑藥代動力學(xué)影響,國內(nèi)外少見報道。MiuraM等的研究顯示,CYP3A5*3對日本腎移植患者蘭索拉唑代謝沒有影響,在CYP2C19快代謝者中,攜帶MDR1C3435TC的患者蘭索拉唑血藥濃度較高。本研究結(jié)果顯示,CYP2C19*1/*1與*2/*2比較,AUC0～∞存在顯著性差異(P=0.04),表達(dá)CYP2C19*2/*2的受試者,其體內(nèi)蘭索拉唑的暴露量是*1/*1者的1.75倍。與以往的研究比較,本研究中CYP2C19*2基因組間藥代動力學(xué)差異顯著性較低,這可能是因為本研究入選的24名受試者中,僅3名為CYP2C19*2/*2。AUC0～2表示蘭索拉唑的吸收速率,MDR13435C與3435TT2組比較,平均AUC0＿2分別為(250.7±200.03)、(504.4±192.49)ng·h·mL-1,2組間存在顯著性差異(P=0.03),說明表達(dá)MDR13435TT的受試者蘭索拉唑的吸收快于其他基因型受試者;但由于總暴露量(AUC0～∞)2組間沒有差異,所以并不能得出MDR13435TT基因型表達(dá)者,蘭索拉唑吸收強于其他受試者的結(jié)論。本研究未發(fā)現(xiàn)CYP3A5*3突變與蘭索拉唑藥代動力學(xué)參數(shù)的統(tǒng)計學(xué)相關(guān)性;但是CYP3A5*3/*3突變型純合子的平均AUC0～∞和Cmax,均低于表達(dá)CYP3A5*1者。因為樣本量限制,本文未能進(jìn)行多因素相關(guān)性分析。本研究分析了CYP3A5*3、MDR1C3435T和CYP2