蘭索拉唑的藥代動(dòng)力學(xué)研究

蘭索拉唑的藥代動(dòng)力學(xué)研究

子泵抑制劑蘭索拉唑主要用于治療與胃腸道疾病有關(guān)的疾病，如潰瘍、胃食管反流疾?。╣erd）和伴有佐-埃氏綜合征的疾病。已經(jīng)證明,蘭索拉唑在肝臟中由細(xì)胞色素P4502C19(CYP2C19)和3A(CYP3A)進(jìn)行代謝,由于CYP2C19的基因多態(tài)性,蘭索拉唑的清除有明顯的個(gè)體差異。除細(xì)胞色素P450代謝酶會(huì)影響蘭索拉唑的代謝外,近年來(lái)的體外研究表明,蘭索拉唑是P-糖蛋白的底物,MDR1C3435T突變可能會(huì)通過(guò)改變腸道P-糖蛋白的表達(dá),對(duì)蘭索拉唑的吸收產(chǎn)生影響。在本試驗(yàn)中將對(duì)可能影響蘭索拉唑體內(nèi)分布的蛋白和酶的基因多態(tài)性進(jìn)行研究,檢測(cè)健康受試者的CYP3A5*3、MDR1C3435T突變基因型,分析其對(duì)蘭索拉唑腸溶膠囊代謝的影響,同時(shí)對(duì)CYP2C19*2、CYP2C19*3也進(jìn)行考察。材料、對(duì)象和方法1聚合酶、基因組dna純化試劑盒蘭索拉唑腸溶膠囊,規(guī)格:每粒30mg,批號(hào):050201,天津武田藥品有限公司生產(chǎn)。DNAMarker、dNTP,為大連寶生物公司生產(chǎn);TaqDNA聚合酶、基因組DNA純化試劑盒,美國(guó)Promega公司生產(chǎn):瓊脂糖,上海生工生產(chǎn);實(shí)驗(yàn)所用其他試劑,均為分析純或優(yōu)級(jí)純;水為滅菌去離子水。PCR擴(kuò)增儀(Mastercycler),德國(guó)Eppendorf公司產(chǎn)品。2實(shí)驗(yàn)室檢查及知情同意書篩選男性健康志愿者,既往無(wú)肝腎疾病、出血性疾病、心腦血管疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、血液病史,無(wú)過(guò)敏史,經(jīng)查體及實(shí)驗(yàn)室檢查證實(shí)身體健康。實(shí)驗(yàn)室檢查包括血常規(guī)、血生化、尿常規(guī)、HBsAg、十二導(dǎo)心電圖,均在正常范圍內(nèi)。受試者自愿簽署知情同意書。共有24名健康受試者入選本研究,受試者的平均年齡為34.9歲(30～39歲),受試者的平均身高為1.70m(1.60～1.79m),平均體質(zhì)量65.3kg(54～78kg)。3pcr和測(cè)序驗(yàn)證取入選受試者EDTA-Na2抗凝血2mL,用DNA純化試劑盒提取基因組DNA;用PCR-RFLP檢測(cè)志愿者M(jìn)DR1C3435T、CYP3A5*3、CYP2C19*2和CYP2C19*3變異情況。用PCR產(chǎn)物測(cè)序驗(yàn)證結(jié)果。受試者在服藥前1天晚入住本研究中心,在服藥前隔夜禁食10h以上,然后服用蘭索拉唑腸溶膠囊30mg,用溫開水150mL送服;受試者服藥后2h內(nèi)不能平臥,以避免影響胃腸蠕動(dòng),2h內(nèi)禁水,并在4h后給予統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)午餐。每次分別于服藥前、服藥后0.5、1、1.5、2、2.5、3、4、6、8、12、24h采集靜脈血5mL,血樣在1h內(nèi)4℃,3000r·min-1離心10min,分離出血清,保存于-20℃冰箱至測(cè)定。5u3000酸相采用高效液相-紫外檢測(cè)法,分析人血清中的蘭索拉唑。色譜條件:TSK-gelODS120T色譜柱(5μm,150mm×4.6mm);流動(dòng)相為乙腈-20mmol·L-1磷酸氫二鉀水溶液(pH=7.46)(37:63);流量為1.0mL·min-1,柱溫40℃;UV波長(zhǎng)285nm;進(jìn)樣量為40μL。血清中蘭索拉唑分析濃度范圍為20～2000ng·mL-1(γ=0.996)。各樣品的日內(nèi)、日間精密度均≤15%。6力學(xué)參數(shù)的測(cè)定用WinNonLin5.0軟件計(jì)算主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù);Cmax和tmax均為實(shí)測(cè)值,AUC0～tn用梯形法計(jì)算;用Spss16.0軟件對(duì)Cmax、AUC等藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果1cyp2c1924名志愿者的基因型:CYP3A5*1/*1為1名;*1/*3為11名;*3/*3為12名;MDR1CC為9名;CT為11名;TT為4名。CYP2C19*1/*1為9名;*1/*2為11名;*2/*2為3名。僅1名受試者攜帶CYP2C19*1/*3。各基因型間體質(zhì)量、身高無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2蘭索拉唑致-4.3/3的比較本試驗(yàn)中對(duì)不同基因型的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)進(jìn)行了比較,見(jiàn)下表。從表可見(jiàn),CYP3A5*3突變型純合子與表達(dá)CYP3A5*1的受試者比較,蘭索拉唑各個(gè)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)間不存在顯著性差異;但*3/*3較*1攜帶者AUC0～∞和Cmax分別降低22.8%和19.8%;CYP2C19*1/*1與*2/*2比較,AUC0～∞存在顯著性差異(P=0.04);MDR13435C與3435TT比較,tmax存在顯著性差異(P=0.026)。3物的吸收速率AUC0～2是蘭索拉唑從給藥至tmax的血藥濃度時(shí)間曲線下面積,用其表示藥物的吸收速率具有更高的統(tǒng)計(jì)意義。MDR13435C與3435TT2組比較,平均AUC0～2分別為(250.7±200.03)、(504.4±192.49)ng·h·mL-1,2組間存在顯著性差異(P=0.03),見(jiàn)圖1、2。cyp3a1.3和mdr135t-3對(duì)蘭索拉唑藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的影響蘭索拉唑是一種具有H+-K+腺苷三磷酸(ATP)酶抑制作用的苯并咪唑類衍生物,口服蘭索拉唑腸溶膠囊30mg后,1.5～2.2h就可達(dá)到血藥濃度,血中主要檢測(cè)到藥物原形。蘭索拉唑在肝臟中由細(xì)胞色素P4502C19(CYP2C19)和3A(CYP3A)進(jìn)行代謝。CYP2C19基因突變對(duì)蘭索拉唑藥代動(dòng)力學(xué)的影響已有一些研究報(bào)道;但在以中國(guó)人為對(duì)象的研究報(bào)道中以中國(guó)漢族健康志愿者為研究對(duì)象,蘭索拉唑AUC0～∞在CYP2C19*1/*1、*1/*2和*2/*2間存在顯著相關(guān)性(P<0.001)。Hu等也得到一致的結(jié)果(P<0.01)。CYP3A5*3和MDR1C3435T對(duì)蘭索拉唑藥代動(dòng)力學(xué)影響,國(guó)內(nèi)外少見(jiàn)報(bào)道。MiuraM等的研究顯示,CYP3A5*3對(duì)日本腎移植患者蘭索拉唑代謝沒(méi)有影響,在CYP2C19快代謝者中,攜帶MDR1C3435TC的患者蘭索拉唑血藥濃度較高。本研究結(jié)果顯示,CYP2C19*1/*1與*2/*2比較,AUC0～∞存在顯著性差異(P=0.04),表達(dá)CYP2C19*2/*2的受試者,其體內(nèi)蘭索拉唑的暴露量是*1/*1者的1.75倍。與以往的研究比較,本研究中CYP2C19*2基因組間藥代動(dòng)力學(xué)差異顯著性較低,這可能是因?yàn)楸狙芯咳脒x的24名受試者中,僅3名為CYP2C19*2/*2。AUC0～2表示蘭索拉唑的吸收速率,MDR13435C與3435TT2組比較,平均AUC0＿2分別為(250.7±200.03)、(504.4±192.49)ng·h·mL-1,2組間存在顯著性差異(P=0.03),說(shuō)明表達(dá)MDR13435TT的受試者蘭索拉唑的吸收快于其他基因型受試者;但由于總暴露量(AUC0～∞)2組間沒(méi)有差異,所以并不能得出MDR13435TT基因型表達(dá)者,蘭索拉唑吸收強(qiáng)于其他受試者的結(jié)論。本研究未發(fā)現(xiàn)CYP3A5*3突變與蘭索拉唑藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性;但是CYP3A5*3/*3突變型純合子的平均AUC0～∞和Cmax,均低于表達(dá)CYP3A5*1者。因?yàn)闃颖玖肯拗?本文未能進(jìn)行多因素相關(guān)性分析。本研究分析了CYP3A5*3、MDR1C3435T和CYP2