生物制品的生產(chǎn)管理-生物制品的質量管理

治療用生物制品的主要特點（一）質量控制特點生物制品的化學結構難以通過標準化學分析方法確認，是需要應用免疫學、生物分析技術測定表達量和活性的高分子量物質。該類產(chǎn)品的生物活性與其氨基酸序列和空間結構等有密切關系。與化學藥物相比，其質量控制的特點表現(xiàn)在：1、結構確認的不完全性生物制品多數(shù)為蛋白質或多肽及其修飾物，具有分子量相對較大，結構復雜多樣性和可變性等特點，通過現(xiàn)有的理化方法和手段不能完全確認其化學結構特征，如產(chǎn)品的空間構象等。2、質量控制的過程性生物制品的結構特性容易受到各種理化因素的影響，且分離提純工藝復雜，因此其質量控制體系是針對生產(chǎn)全過程，采用化學、物理和生物學等手段而進行的全程、實時的質量控制。生產(chǎn)過程中每一環(huán)節(jié)或制備條件的改變均可能影響其非臨床安全性評價的合理性。3、生物活性檢測的重要性生物制品的生物活性與其藥效和毒性有一定或較好的相關性，因此藥效學和安全性研究應關注生物活性的測定。鑒于生物制品結構確認的不完全性，生物活性檢測成為反映生物制品天然結構是否遭受破壞、生產(chǎn)各階段工藝合理性和評價終產(chǎn)品質量控制的重要內容，也成為非臨床藥理毒理、藥代等試驗方案中劑量確定的依據(jù)。（二）生物學特點1、種屬特異性生物制品在不同動物種屬的作用靶點（例如受體）存在結構差異，或信號傳導通路不同，從而可表現(xiàn)出不同的反應類型。安全性試驗需采用能反映人體生物制品活性的相關動物種屬來進行研究。2、免疫原性免疫原性是指機體受刺激后產(chǎn)生的對該抗原的特異的適應性免疫應答，涉及細胞和體液免疫應答，也包括固有性免疫應答。許多人源性大分子（蛋白質和多肽）生物制品對試驗動物而言都是異源分子，可存在免疫原性如抗體產(chǎn)生。非臨床試驗中應關注免疫原性對生物制品藥效學和安全性評價的影響。3、多功能性多肽和蛋白質類生物制品往往具有廣泛的作用靶點和病理生理、藥理作用（可能包括繼發(fā)性基因表達所誘導的反應），有的是預期的藥效作用，有的為非預期的毒性作用，這與多肽和蛋白質在體內受體（對單克隆抗體產(chǎn)品而言為抗原）的多器官廣泛分布有關，有時可在某些重要的生命器官,如心臟、大腦等組織分布，出現(xiàn)嚴重的非預期不良反應。常規(guī)化學藥物的安全性評價方法和模式并不都適用于治療用生物制品。生物制品的非臨床安全性研究更多強調根據(jù)生物制品特點采取具體問題具體分析的原則來評價其安全性,以支持該類生物制品的臨床開發(fā)和上市批準。生物制品質控中采用的方法包括理化分析方法和生物學測定方法。生物制品的理化分析方法與化學藥品基本相同，針對生物學測定方法，生物學測定方法可廣泛用于各種檢測目的，包括鑒別、生物活性和雜質檢測等，其中最主要的是生物活性（或效價、效力）測定。動物試驗對于某些治療用的制品，由于其作用機理或本身化學性質的原因，難以建立體外測活的方法，也可以采用動物試驗方法測定，但由于這類方法的變異一般相對較大，在進一步的研究中應盡可能以體外法代替。生物制品及其質量管理中國藥品生物制品檢定所

12本資源由藥智網(wǎng)主要內容

一、生物制品定義二、生物制品種類三、生物制品的基本屬性和特點四、生物制品的管理五、生物制品GMP現(xiàn)場檢查要點13本資源由藥智網(wǎng)一、生物制品定義

生物制品(BiologicalProducts)是應用普通的或以基因工程、細胞工程、蛋白質工程、發(fā)酵工程等生物技術獲得的微生物、細胞及各種動物和人源的組織和液體等生物材料制備，用于疾病預防、治療和診斷的藥品。14本資源由藥智網(wǎng)二、生物制品分類

按生物制品的組成和性質可分為:疫苗（Vaccines）抗毒素及免疫血清(AntitoxinandAntisera)血液制品（BloodProducts）細胞因子和重組DNA產(chǎn)品（CytokinesandRecombinantDNAProducts）診斷制品(DiagnosticReagents)其他制品15本資源由藥智網(wǎng)細菌類疫苗由細菌、螺旋體或其衍生物制備而成，包括：減毒活疫苗：卡介苗、人用炭疽和人用鼠疫疫苗等滅活疫苗：霍亂菌體疫苗、鉤端螺旋體疫苗等亞單位疫苗：腦膜炎球菌多糖疫苗、傷寒Vi多糖疫苗等重組DNA疫苗：重組瘧疾疫苗、重組幽門螺桿菌疫苗等16本資源由藥智網(wǎng)病毒類疫苗由病毒、衣原體、立克次體或其衍生物制備而成，包括：減毒活疫苗：乙型腦炎減毒疫苗、麻疹疫苗、風疹疫苗、OPV等滅活疫苗：乙型腦炎滅活疫苗、出血熱疫苗、狂犬疫苗等亞單位疫苗：重組乙肝疫苗等重組DNA疫苗：重組乙肝疫苗等17本資源由藥智網(wǎng)聯(lián)合疫苗

由兩種或兩種以上疫苗抗原原液配制而成的具有多種免疫原性的疫苗。例如：吸附百白破聯(lián)合疫苗麻風腮三聯(lián)疫苗

18本資源由藥智網(wǎng)抗毒素及免疫血清

——由特定抗原免疫的動物血清而制備

主要產(chǎn)品：白喉抗毒素破傷風抗毒素抗狂犬病血清等19本資源由藥智網(wǎng)血液制品

——由健康人的血漿或特異免疫人血漿分離、提純或由重組技術制成的血漿蛋白組分或血細胞組分制品。主要產(chǎn)品：人血白蛋白人免疫球蛋白人凝血因子等

20本資源由藥智網(wǎng)細胞因子和重組DNA產(chǎn)品

——由健康人血細胞增值、分離、提純或由重組技術制成的多肽類或蛋白類制劑。主要產(chǎn)品：干擾素(IFN)白細胞介素(IL)集落刺激因子(CSF)紅細胞生成素(EPO)等

21本資源由藥智網(wǎng)診斷制品

體外診斷制品——由特定抗原、抗體或有關生物物質制成的用于體外診斷疾病的試劑或試劑盒，如傷寒、副傷寒等細菌的診斷菌液，沙門氏菌屬診斷血清，HBsAg診斷試劑盒等。體內診斷制品——由抗原制成的用于體內診斷疾病的試劑，如卡介苗純蛋白衍生物（BCG-PPD）、錫克試劑毒素、標記的單克隆抗體等。

22本資源由藥智網(wǎng)其他制品

由有關生物材料或特定方法制成的，上述5類產(chǎn)品以外的生物制品，如變態(tài)反應原、微生態(tài)制劑、重組DNA產(chǎn)品、基因治療產(chǎn)品、單克隆抗體制劑、某些細胞治療制劑等。23本資源由藥智網(wǎng)生物制品按用途分類

預防類生物制品

疫苗、類毒素、被動免疫制劑

診斷類生物制品免疫學診斷試劑、基因診斷試劑、生化試劑

治療類生物制品血液制劑、細胞因子制劑、酶和激素、

特異性抗體、非特異性免疫治療制劑、基因及細胞治療制品等

24本資源由藥智網(wǎng)預防類生物制品減毒活疫苗與滅活疫苗的比較減毒活疫苗滅活疫苗優(yōu)點注射一次即可有效接種后似自然感染，形成完整免疫在一定范圍內疫苗病毒可排斥野毒可多種抗原混合制成多價疫苗抗原性穩(wěn)定經(jīng)過滅活處理不會污染其它病原可提純抗原，加入佐劑增加免疫效果缺點抗原不穩(wěn)定，滅活即失效易污染其它病原一般需注射2~3次才明顯有效一般僅產(chǎn)生體液免疫抗原要求量大，制造工藝較繁瑣25本資源由藥智網(wǎng)三、生物制品的基本屬性和特點（一）

其起始材料均為生物活性物質；生物制品生產(chǎn)加工全過程是生物學過程，是無菌操作過程；有些生物制品的生產(chǎn)過程是有毒或有菌的過程;生物制品多為蛋白質或多肽類物質，分子量較大，并具有復雜的分子結構,較不穩(wěn)定，易失活，易被微生物污染，易被酶解破壞。26本資源由藥智網(wǎng)三、生物制品的基本屬性和特點（二）其質量控制和質量檢定是采用生物學分析方法，其效價或生物活性檢定有其變異性；生物制品原材料、中間品、成品、運輸、貯存、甚至使用保持在“冷鏈”系統(tǒng)中；特別是預防制品使用對象不是病人，而是健康人群；生物制品的質量控制實行生產(chǎn)全過程監(jiān)控;

生產(chǎn)現(xiàn)場檢查時要充分考慮這些特點27本資源由藥智網(wǎng)四、生物制品的管理生物制品國家管理6項基本職能1．完整的疫苗和生物制品審批程序和審批標準的法規(guī)文件；2．審批結論要以實驗和臨床試驗數(shù)據(jù)為依據(jù)；3．國家質控當局對疫苗和生物制品出廠銷售實行國家批簽發(fā)制度；4．要有對疫苗和生物制品進行質量評價的法定的實驗檢定機構和實驗實施；5．對生物制品生產(chǎn)企業(yè)實施GMP定期檢查；6．對生物制品有效性和不良反應進行上市后檢測。28本資源由藥智網(wǎng)生物制品實行國家批簽發(fā)《藥品管理法實施辦法》中規(guī)定，國家對所規(guī)定的生物制品實行國家批簽發(fā)制度。國家批簽發(fā)——國家藥品監(jiān)督管理部門授權國家藥品檢定機構，對所規(guī)定的生物制品，在出廠前或進口時，按批進行審查和簽發(fā)，凡審查或檢定不合格的不允許銷售或者進口。29本資源由藥智網(wǎng)生物制品國家批簽發(fā)分為三種類型一、僅對某種制品每批的批記錄摘要進行審查，符合要求發(fā)給批簽發(fā)證；二、審查批記錄摘要＋對部分批次制品進行抽檢檢定、審查和檢定符合要求發(fā)給批簽發(fā)證；三、審查批記錄摘要＋批批檢定，審查和批批檢定符合要求發(fā)給批簽發(fā)證。30本資源由藥智網(wǎng)菌種篩選#種子批的#建立及檢定菌種接種#原液合并半成品*配置殺菌原液收獲#擴大培養(yǎng)原液保存分裝*包裝檢定圖-１細菌疫苗工藝流程及環(huán)境區(qū)域劃分示意圖10000級100000級31本資源由藥智網(wǎng)毒種篩選#種子批的#建立及檢定毒種接種#培養(yǎng)細胞原液合并半成品*配置病毒滅活病毒的收獲過濾#擴大細胞培養(yǎng)病毒原液保存分裝*包裝檢定圖-２病毒疫苗工藝流程及環(huán)境區(qū)域劃分示意圖原代細胞的制備或傳代細胞復蘇減毒活疫苗10000級100000級32本資源由藥智網(wǎng)細菌和病毒類疫苗質控要點1．所有原輔材料符合《中國藥典》或《中國生物制品主要原輔料質量標準》；2．采用強毒菌株（鼠疫、霍亂、炭疽等）、芽胞菌和強毒病毒株，應有專用生產(chǎn)操作間，專用生產(chǎn)設備及隔離實施，操作人員應有安全防護設施；3．所用生產(chǎn)的菌株或病毒株，要建立原始種子批、主代種子批、生產(chǎn)種子批三級種子批系統(tǒng)；病毒疫苗生產(chǎn)用細胞也要建立上述三級細胞庫系統(tǒng)；4．菌苗及疫苗原液、中間品合并、分離、純化等每道加工工序后均要做無菌試驗和鑒別試驗；33本資源由藥智網(wǎng)細菌和病毒類疫苗質控要點5．細菌類及病毒類的滅活疫苗，加入滅活劑后，必須要做活菌或活毒試驗，確保徹底滅活；6．原材料、半成品及成品，應按現(xiàn)行《中國生物制品規(guī)程》相關標準進行檢定；7．對制品的安全、效價或免疫力試驗等項目檢定所用實驗動物應符合清潔級；8．從起始材料直至使用，全過程，必須無菌操作，制品2—8℃保存；9．生物制品生產(chǎn)用水均為注射用水。34本資源由藥智網(wǎng)血漿合并病毒滅活精洗滅菌除熱原低溫乙醇法超濾濃縮入庫外包材血漿內包材圖-３血液制品工藝流程及環(huán)境區(qū)域劃分示意圖除菌過濾*分裝*包裝粗洗10000級100000級35本資源由藥智網(wǎng)血液制品質量控制要點1．生產(chǎn)用具，經(jīng)過嚴格清洗、去熱原處理、滅菌處理；2．原料血漿要經(jīng)過乙肝、丙肝、艾滋、梅毒、ABO定型診斷試劑檢測合格，-20℃以下保存；3．生產(chǎn)工藝采用低溫乙醇法分部提取各組份；工藝中應有去除/滅活病毒工藝步驟；4．原液、半成品、成品符合現(xiàn)行《中國生物制品規(guī)程》相應標準；5．所用血源檢測和成品檢測的乙肝、丙肝、艾滋、梅毒等檢測的試劑均為國家批批檢定試劑。36本資源由藥智網(wǎng)細胞復蘇擴大培養(yǎng)大罐培養(yǎng)粗純擴大培養(yǎng)發(fā)酵粗純接種＊滅菌除熱原精洗粗洗內包材菌種細胞種子原液除菌過濾除菌過濾＊配制及除菌過濾＊分裝＊包裝入庫外包裝圖-４重組產(chǎn)品工藝流程及環(huán)境區(qū)域劃分示意圖原核表達真核表達10000級100000級37本資源由藥智網(wǎng)重組DNA產(chǎn)品質量控制要點

1．生產(chǎn)用工程菌株或工程細胞株要建立原始種子批、主代種子批、生產(chǎn)種子批系統(tǒng)，定期進行質粒穩(wěn)定性檢查；2．發(fā)酵用培養(yǎng)基應不含抗生素，生產(chǎn)用細胞培養(yǎng)液應不含血清和抗生素；3．發(fā)酵培養(yǎng)過程中應根據(jù)工藝要求控制其培養(yǎng)溫度、pH、溶氧、輔料及培養(yǎng)時間；4．根據(jù)其工藝要求，通過初步純化和高度純化達到規(guī)定質量要求；5．重組產(chǎn)品的原液，應做：蛋白質含量、比活性、純度、效價、SDS法、高效液相色譜法、分子量、外源性DNA殘留含量、宿主蛋白殘留含量、等電點、紫外光譜肽圖（至少每年1次），N末端氨基酸序列（至少每年測一次）；38本資源由藥智網(wǎng)重組DNA產(chǎn)品質量控制要點6．半成品及成品應按現(xiàn)行《中國生物制品規(guī)程》相關標準進行檢定；7．工程菌株應進行菌落形態(tài)、革蘭氏染色、抗生素的抗性、電鏡檢查、生化反應、表達量、質粒酶切圖譜等檢查；8．工程細胞應進行外源因子（細菌、真菌、支原體、病毒）檢查、致病性實驗、細胞鑒別試驗、表達量測定等；9．重組DNA產(chǎn)品生產(chǎn)，必須按其生產(chǎn)所用工程菌株或工程細胞株、將原核細胞系與真核細胞系徹底分離分別進行生產(chǎn)。39本資源由藥智網(wǎng)菌種篩選#組裝圖-5酶聯(lián)免疫診斷試劑工藝流程及環(huán)境區(qū)域劃分示意圖抗原包被微孔板酶標記抗體其它組分陽性對照*100000級隔離區(qū)40本資源由藥智網(wǎng)酶聯(lián)免疫診斷試劑質控要點

1．所用抗原或抗體的純度、帶型、效價及穩(wěn)定性等符合現(xiàn)行國家標準，來源要固定；2．辣根過氧化物酶R2不應低于3.0；3．微孔板CV（%）不大于10%；4．選擇最佳濃度進行抗原或抗體包被，選擇最佳濃度進行酶標記5．酶標記后抗體加入有關保護劑，低溫保存；6．應有陽性血清處理、分裝的隔離操作間。41本資源由藥智網(wǎng)菌種篩選#組裝圖-６PCR診斷試劑工藝流程及環(huán)境區(qū)域劃分示意圖PCR組份１PCR組份２PCR組份３陽性對照*100000級隔離區(qū)42本資源由藥智網(wǎng)PCR診斷試劑質控要點

1．應有陽性血清處理、分裝的隔離操作間；2．PCR試劑的生產(chǎn)區(qū)與檢定區(qū)嚴格分開；3．PCR引物設計要合理，引物合成要有固定場所及專用設備；純度達到現(xiàn)行國家標準；4．DNA聚合酶活性及穩(wěn)定性達現(xiàn)行國家標準并有固定來源；5．PCR檢測方法要可靠，操作人員經(jīng)專門培訓。43本資源由藥智網(wǎng)五、生物制品GMP檢查要點保護環(huán)境和操作者防止交叉污染，嚴格分區(qū)，獨立空調局部負壓盡可能一個產(chǎn)品、一個車間徹底消毒和清場嚴格動物使用及動物管理環(huán)境溫度44本資源由藥智網(wǎng)1．強毒與弱毒“強毒”系指生物制品生產(chǎn)及檢定用細菌株及病毒株，其致病力強，傳染性強，感染的機率高，感染后癥狀較重，可危及生命健康，甚至引起傳染病爆發(fā)流行的細菌菌株及病毒株?！叭醵尽毕抵干镏破飞a(chǎn)及檢定用細菌株及病毒株，經(jīng)過天然或人工改造方法，去除或封閉其毒力因子，使其致病力減弱，一般不引起感染或發(fā)病的細菌菌株及病毒株。強毒株與弱毒株，不允許混放在一起，其生產(chǎn)及檢定操作場所須嚴格分開，并有專用設備。生物制品GMP認證檢查要點45本資源由藥智網(wǎng)2．死毒與活毒“活毒”是制備滅活疫苗的第一階段或減毒活疫苗生產(chǎn)時，將生產(chǎn)用細菌或病毒株進行大規(guī)模培養(yǎng)制備，其生產(chǎn)過程和生產(chǎn)場所、生產(chǎn)設備、器材含有大量活的細菌或活的病毒生物體，稱之為“活毒”?！八蓝尽笔侵苽錅缁钜呙鐣r，第一階段生產(chǎn)出大量活細菌或或病毒后，到第二階段，對活生物體加入一定量甲醛或適宜滅活劑，將全部細菌或病毒殺死，稱之為“死毒”?！盎疃尽迸c“死毒”的生產(chǎn)場所、生產(chǎn)設備及器材，須嚴格分開。46本資源由藥智網(wǎng)3．“脫毒前”與“脫毒后”“脫毒前”系指破傷風梭狀菌、白喉桿菌繁殖培養(yǎng)時，生產(chǎn)大量破傷風毒素及白喉毒素，對人體有致病性，這一階段為“脫毒前”。“脫毒后”系指毒素中加入一定量甲醛或適宜脫毒劑，將毒素去掉毒性，不再具有致病性，仍保留其抗原性和免疫原性，稱之為“脫毒后”。“脫毒前”與“脫毒后”的生產(chǎn)場所、生產(chǎn)設備及器材須嚴格分開。47本資源由藥智網(wǎng)4．血液制品、抗血清、人和動物組織制備的制品，其生產(chǎn)所用的原材料，為人血漿、動物免疫血清、人和動物器官、組織及組織液等，均含有大量的人和動物的異種蛋白質或細胞活性物質，具有較強的致敏原物質，不經(jīng)過相應處理和加工，可致人體過敏反應或血清病。因此，血液制品、抗血清、人和動物組織生產(chǎn)制備制品時，須有專用生產(chǎn)場所、生產(chǎn)設備及器材，不可與其他生物制品混用。48本資源由藥智網(wǎng)5．芽孢菌制品，系用炭疽桿菌、破傷風梭菌、肉毒梭菌等含有芽孢菌來生產(chǎn)制備的制品，芽孢菌是微生物對外周環(huán)境抵抗力最強的生命單位。芽孢菌在自然界可存活數(shù)十年及百年之久，100℃可耐受2小時以上，在70％酒精中存活20年，低溫和干燥對其毫無作用。生產(chǎn)芽孢菌制品的生產(chǎn)場所、生產(chǎn)設備和器材須專用，與其他制品生產(chǎn)嚴格分開。49本資源由藥智網(wǎng)6．卡介苗與結核菌制品生產(chǎn)場所，必須嚴格分開，其生產(chǎn)設備、器材、生產(chǎn)用菌種必須專用，不能混用。1930年德國Lubeck地方，給251名嬰兒誤用結核菌液，而不是減毒的卡介苗，造成72名嬰兒死亡，病死率為28.68％，有142名嬰兒感染結核，感染率為56.5％，稱之為“Lubeck疫苗接種事故”。50本資源由藥智網(wǎng)7．衛(wèi)生部1985年衛(wèi)藥第11號文《中國醫(yī)學微生物菌毒種保藏管理辦法》，規(guī)定一類、二類菌種和毒種為“強毒微生物”。一類：鼠疫桿菌、霍亂弧菌、天花病毒（已消滅）、黃熱病毒、馬腦炎病毒、Lassa病毒、Mstburg病毒、Ebola病毒、猴皰疹病毒等。二類：布氏菌、炭疽桿菌、肉毒梭菌、麻風桿菌、結核分枝桿菌等?？袢《荆ń侄荆?、流行性出血熱病毒、登革熱病毒、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、艾滋病病毒（當時尚未列上）等。51本資源由藥智網(wǎng)8．強毒操作區(qū)空氣潔凈特殊要求——必須設置氣閘和緩沖區(qū)；——與其他區(qū)域分開，自成一區(qū)；——通過兩道連鎖門，更衣進入；——在生物安全柜內操作；——操作區(qū)有高壓滅菌設備；——相對操作區(qū)外部保持相對負壓，相對壓強-30Pa～-40Pa，緩沖相對壓強-15Pa～-20Pa。52本資源由藥智網(wǎng)9．生產(chǎn)用菌、毒種三級種子批系統(tǒng)——原始種子批，來源清楚，生物特性典型最原始來源的單一培養(yǎng)物；——主代種子批，由原始種子批而來的單一培養(yǎng)物；——