層析分離技術(shù)-吸附層析法提取分離葛根素（生物分離技術(shù)課件）

任務(wù)5.1吸附層析法提取分離葛根素學(xué)習(xí)目標(biāo)了解層析技術(shù)的發(fā)展歷史；掌握層的基本理論。重難點(diǎn)重點(diǎn)：了解吸附層析的原理；難點(diǎn)：了解色譜圖。概述1層析的基本理論2目錄吸附層析的原理3一.概述層析技術(shù)早在1903年就應(yīng)用于植物色素的分離提取，各種顏色的色素從上到下在吸附柱上排列成色譜，也稱色譜分離法。1931年有人用氧化鋁柱分離了胡蘿卜素的兩種同分異構(gòu)體，顯示了這一分離技術(shù)的高度分辨力，從此引起了人們的廣泛注意。隨著人們認(rèn)識(shí)和實(shí)踐的提高以及物理化學(xué)技術(shù)的發(fā)展，應(yīng)用范圍更加廣泛，沒有顏色的物質(zhì)同樣可用此法分離，這時(shí)的工作全是使用吸附劑的吸附層析法。自1944年應(yīng)用濾紙作為固定支持物的紙層析誕生以來，層析技術(shù)的發(fā)展越來越快。20世紀(jì)50年代開始，相繼出現(xiàn)了氣相層析和高壓液相層析，其他如薄層層析、薄膜層析、親和層析、凝膠層析等也迅速發(fā)展。在生物化學(xué)領(lǐng)域里，層析技術(shù)已成為一項(xiàng)常用的分離分析方法。一.概述石油醚碳酸鈣顆粒色素色譜組分一.概述1941年馬丁和辛格建立的“塔板理論”模型將色譜柱看作一個(gè)分餾塔，設(shè)想其中均勻分布許多塔板，并認(rèn)為在每個(gè)塔板的間隔空間內(nèi)，組分在兩相中立即達(dá)到分配平衡，經(jīng)過多次的分配平衡后，分配系數(shù)小的組分先流出色譜柱，并得到描述色譜流出曲線的表達(dá)式。同時(shí)塔板理論還引入理論塔板數(shù)(platentlIllberoftheoretit·alplates)和理論塔板高度(plateheight)作為衡量色譜柱效的指標(biāo)。一.概述一.概述輸液泵進(jìn)樣器色譜柱柱溫箱檢測(cè)器單一或混合溶劑一.概述兩相所處狀態(tài)操作形式分離機(jī)理一.概述常用層析技術(shù)吸附層析分配層析凝膠層析親和層析二.層析的基本理論1.平衡系數(shù)平衡分配系數(shù)與組分、流動(dòng)相和固定相的熱力學(xué)性質(zhì)有關(guān)，也與溫度、壓力有關(guān)。在不同的色譜分離機(jī)制中，K有不同的概念：吸附色譜法為吸附系數(shù)，離子交換色譜法為選擇性系數(shù)（或稱交換系數(shù)），凝膠色譜法為滲透參數(shù)。但一般情況可用分配系數(shù)來表示。二.層析的基本理論2.層析基本過程二.層析的基本理論2.層析基本過程吸濾頭單向閥柱塞密封圈線路過濾器手動(dòng)進(jìn)樣器檢測(cè)器二.層析的基本理論二.層析的基本理論物理吸附化學(xué)吸附交換吸附任務(wù)5.1吸附層析法提取分離葛根素學(xué)習(xí)目標(biāo)了解層析技術(shù)的發(fā)展歷史；掌握層的基本理論。重難點(diǎn)重點(diǎn)：了解吸附層析的原理；難點(diǎn)：了解色譜圖。吸附薄層層析法1吸附法提取分離葛根素2目錄一.吸附薄層層析法薄層色譜法（TLC），系將適宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或鋁基片上，成一均勻薄層。待點(diǎn)樣、展開后，根據(jù)比移值（Rf）與適宜的對(duì)照物按同法所得的色譜圖的比移值（Rf）作對(duì)比，用以進(jìn)行藥品的鑒別、雜質(zhì)檢查或含量測(cè)定的方法。薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，也用于跟蹤反應(yīng)進(jìn)程。一.吸附薄層層析法一.吸附薄層層析法優(yōu)點(diǎn)簡(jiǎn)單時(shí)間短高效容量高限制小顯色劑一.吸附薄層層析法1、原理利用各成分對(duì)同一吸附劑吸附能力不同，使在流動(dòng)相(溶劑)流過固定相(吸附劑)的過程中，連續(xù)的產(chǎn)生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，從而達(dá)到各成分的互相分離的目的。一.吸附薄層層析法2、吸附劑和展開劑的選擇吸附劑氧化鋁硅膠聚酰胺極性溶劑一.吸附薄層層析法3、基本操作薄層板市售制備預(yù)處理過程有機(jī)溶劑點(diǎn)樣制備市售展開裝置顯跡物理化學(xué)（噴霧）Rf值公式二.吸附法提取分離葛根素吸附柱層析是以固體吸附劑為固定相，以有機(jī)溶劑或緩沖液為流動(dòng)相構(gòu)成柱的一種層析方法。利用吸附劑對(duì)混合試樣各組分的吸附力不同而使各組分分離。當(dāng)采用溶劑洗脫時(shí)，發(fā)生一系列吸附→解吸→再吸附→再解吸的過程，吸附力