光學(xué)分析技術(shù)-紫外可見分光光度計(jì)

技能點(diǎn):比色皿

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—比色皿簡述一比色皿的規(guī)格類型二比色皿的洗滌三比色皿的使用四

目錄頁比色皿的注意事項(xiàng)五

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比色皿的簡述比色皿也叫吸收池、比色杯，一般為長方體，其底及兩側(cè)為磨毛玻璃，另兩面為光學(xué)玻璃制成的透光面采用熔融一體、玻璃粉高溫?zé)Y(jié)和膠粘合而成。

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比色皿的規(guī)格類型1.規(guī)格：0.5，1.0，2.0，3.0,5.0cm等2.類型：可分為石英吸收池和玻璃吸收池，用于盛放試液。石英材質(zhì)的吸收池用于紫外-可見區(qū)的測量，玻璃材質(zhì)的吸收池只用于可見光區(qū)的測量。

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比色皿的洗滌1.對比較不干凈的比色皿，通常用95%的乙醇進(jìn)行清洗，2.分別在用自來水和蒸餾水清洗三次3.最后用待測溶液清洗三次

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比色皿的使用1.配套性配對檢驗(yàn)（1）選定（2）標(biāo)記（3）盛放相同溶液（4）測吸光度2.測定3.測定完成

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比色皿的注意事項(xiàng)1)拿取比色皿時(shí)，只能用手指接觸兩側(cè)的毛玻璃，不可接觸光學(xué)面2)不能將光學(xué)面與硬物或贓物接觸，只能用擦鏡紙或絲綢擦拭光學(xué)面3)凡含有腐蝕玻璃的物質(zhì)的溶液，不得長時(shí)間盛放在吸收池中4)吸收池使用后應(yīng)立即用水沖洗干凈5)不得在火焰或電爐上進(jìn)行加熱、烘烤知識點(diǎn)：常見比色皿的電子圖片

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比色皿也叫吸收池、比色杯，一般為長方體，其底及兩側(cè)為磨毛玻璃，另兩面為光學(xué)玻璃制成的透光面采用熔融一體、玻璃粉高溫?zé)Y(jié)和膠粘合而成

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石英比色皿用于紫外光的測量玻璃比色皿用于可見光的測定

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規(guī)格：0.5cm

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規(guī)格：1.0cm

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規(guī)格：2.0cm

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規(guī)格：3.0cm技能點(diǎn):比色皿的配套性檢驗(yàn)方法

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—比色皿配套檢驗(yàn)的必要性一比色皿配套性檢驗(yàn)方法步驟二

目錄頁

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比色皿配套檢驗(yàn)的必要性為了消除吸收池的誤差，提高測量的準(zhǔn)確度，需要分別對每個(gè)吸收池進(jìn)行校正及配對

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比色皿配套檢驗(yàn)方法步驟1）選定：檢查吸收池透光面是否有劃痕或斑點(diǎn)，吸收池各面是否有裂紋，如有則不應(yīng)使用

2）標(biāo)記：在選定的吸收池毛面上口附近，用鉛筆標(biāo)上進(jìn)光方向并編號。用蒸餾水沖洗

2～

3

次

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比色皿配套檢驗(yàn)方法步驟3)盛放相同溶液：

拇指和食指捏住吸收池兩側(cè)毛面，分別在吸收池內(nèi)注入相同溶液到池高

的2/3-3/4

處

用濾紙吸干池外壁的水滴，再用擦鏡紙或絲綢輕輕擦試光面至無痕跡

按吸收池上所標(biāo)箭頭方向（進(jìn)光方向）垂直放在吸收池槽內(nèi)。為減少光的損失，吸收池的光學(xué)面必須完全垂直于光束方向

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比色皿配套檢驗(yàn)方法步驟（4）測吸光度：

分別測定其吸光度，讀取并記錄。

若所測各吸收池吸光度為零或相同，則這些吸收池可配套使用。若不相等，可以選出吸光度值最小的吸收池為參比，測定其他吸收池的吸光度，求出修正值（皿差）。

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比色皿配套檢驗(yàn)方法步驟5)測定樣品時(shí):將待測溶液裝入校正過的吸收池，測量其吸光度，所測得的吸光度減去該吸收池的修正值即為此待測溶液真正的吸光度。透射比的偏差大于0.5%的吸收池不能配套使用。知識點(diǎn):比色皿的注意事項(xiàng)

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比色皿的注意事項(xiàng)拿取比色皿時(shí)，只能用手指接觸兩側(cè)的毛玻璃，不可接觸光學(xué)面

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比色皿的注意事項(xiàng)不能將光學(xué)面與硬物或贓物接觸，只能用擦鏡紙或絲綢擦拭光學(xué)面

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比色皿的注意事項(xiàng)凡含有腐蝕玻璃的物質(zhì)的溶液，不得長時(shí)間盛放在吸收池中

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比色皿的注意事項(xiàng)吸收池使用后應(yīng)立即用水沖洗干凈

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比色皿的注意事項(xiàng)不得在火焰或電爐上進(jìn)行加熱、烘烤紫外-分光光度計(jì)的使用操作（技能點(diǎn)）—1—機(jī)器預(yù)熱一調(diào)節(jié)波長二固定靈敏度擋三調(diào)節(jié)“0”點(diǎn)四調(diào)節(jié)T=100%五目錄頁測定六關(guān)機(jī)七—1—紫外-可見分光光度計(jì)的使用操作機(jī)器預(yù)熱為使測定穩(wěn)定，將電源開關(guān)打開，使儀器預(yù)熱20min，為了防止光電管疲勞，不要連續(xù)光照。預(yù)熱儀器時(shí)和在不測定時(shí)應(yīng)將比色皿暗箱蓋打開，使光路切斷?！?—紫外-可見分光光度計(jì)的使用操作調(diào)節(jié)波長根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求，轉(zhuǎn)動波長調(diào)節(jié)器，使指針指示所需要的單色光波長。。—1—紫外-可見分光光度計(jì)的使用操作固定靈敏度擋根據(jù)有色溶液對光的吸收情況，為使吸光度讀數(shù)為0.2-0.7，選擇合適的靈敏度。為此，旋動靈敏度檔，使其固定于某一檔，在實(shí)驗(yàn)過程中不再變動。一般測量固定在“1”檔?！?—紫外-可見分光光度計(jì)的使用操作調(diào)節(jié)“0”點(diǎn)輕輕旋動調(diào)“0”電位器，使讀數(shù)表頭指針恰好位于透光度為“0”處(此時(shí)，比色皿暗箱蓋是打開的，光路被切斷，光電管不受光照)?！?—紫外-可見分光光度計(jì)的使用操作調(diào)節(jié)T=100%將盛蒸餾水(或空白溶液或純?nèi)軇?的比色皿放入比色皿座架中的第一格內(nèi)，有色溶液放在其它格內(nèi)，把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上，轉(zhuǎn)動光量調(diào)節(jié)器，使透光度T=100%，即表頭指針恰好指在T=100%處。—1—紫外-可見分光光度計(jì)的使用操作測定輕輕拉動比色皿座架拉桿，使有色溶液進(jìn)入光路，此時(shí)表頭指針?biāo)緸樵撚猩芤旱奈舛華。讀數(shù)后，打開比色皿暗箱蓋?！?—紫外-可見分光光度計(jì)的使用操作關(guān)機(jī)實(shí)驗(yàn)完畢，切斷電源，將比色皿取出洗凈，并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈。紫外-分光光度計(jì)使用原理及結(jié)構(gòu)（知識點(diǎn)）—1—紫外-可見分光光度計(jì)使用原理一紫外-可見分光光度計(jì)結(jié)構(gòu)二目錄頁—2—紫外-可見分光光度計(jì)的使用原理一朗伯比爾定律—1—（知識點(diǎn)名稱）紫外-可見分光光度計(jì)的使用原理-----朗伯比爾定律透光度：透光度為透過光的強(qiáng)度It與入射光強(qiáng)度I0之比，用T表示：

即

T=It/I0吸光度：為透光度倒數(shù)的對數(shù)，用A表示，即

A=lg1/T=lgI0/It朗伯比爾定律1、吸光度和透光度設(shè)入射光強(qiáng)度為I0，吸收光強(qiáng)度為Ia,透射光強(qiáng)度為It，反射光強(qiáng)度為Ir，則

I0=Ia+It+Ir由于反射光強(qiáng)度基本相同，其影響可相互抵消，上式可簡化為：

I0=Ia+It—1—（知識點(diǎn)名稱）紫外-可見分光光度計(jì)的使用原理-----朗伯比爾定律2、朗伯比爾定律當(dāng)一束平行單色光通過含有吸光物質(zhì)的稀溶液時(shí)，溶液的吸光度與吸光物質(zhì)濃度、液層厚度乘積成正比，即

A=κcl式中比例常數(shù)κ與吸光物質(zhì)的本性，入射光波長及溫度等因素有關(guān)。c為吸光物質(zhì)濃度，l為透光液層厚度。

朗伯-比爾定律是紫外-可見分光光度法的理論基礎(chǔ)?！?—（知識點(diǎn)名稱）紫外-可見分光光度計(jì)的使用原理-----朗伯比爾定律3、吸光系數(shù)當(dāng)l以cm，c以g/L為單位，κ稱為吸光系數(shù)，用a表示。A=acla

的單位為L/(g.cm)—2—過渡頁紫外-可見分光光度計(jì)的結(jié)構(gòu)二1.檢測的定義及作用2.檢測的重要性3.檢測的類別4.檢測的原理圖5.XXXXXXXXX—1—（知識點(diǎn)名稱）紫外-可見分光光度計(jì)的結(jié)構(gòu)基本結(jié)構(gòu)：光源→單色器→吸收池→檢測器→信號顯示系統(tǒng)樣品—1—（知識點(diǎn)名稱）紫外-可見分光光度計(jì)的結(jié)構(gòu)1、光源在紫外可見分光光度計(jì)中，常用的光源有兩類：熱輻射光源和氣體放電光源。熱輻射光源用于可見光區(qū)，如鎢燈和鹵鎢燈；氣體放電光源用于紫外光區(qū)，如氫燈和氘燈。2、單色器單色器的主要組成：入射狹縫、出射狹縫、色散元件和準(zhǔn)直鏡部分。單色器質(zhì)量的優(yōu)劣，主要決定于色散元件的質(zhì)量。色散元件常用棱鏡和光柵。。3、