菌種質量鑒定與保藏 生產種的制備與轉接

實驗四、生產種的制備與轉接1.了解栽培種常用培養(yǎng)基的種類2.掌握食用菌栽培種培養(yǎng)基的配制方法及消毒滅菌方法3.熟練生產種的轉接技術一、實驗目的1、材料：1.材料：食用菌原種（上節(jié)課后轉接）、木糠（每組500克）、麩皮（每組150克），碳酸鈣，白砂糖2.工具：聚丙烯菌種袋、環(huán)蓋、鏟子（翻堆用）、托盤天平、超凈工作臺、高壓滅菌鍋、酒精燈、75%酒精棉球、接種匙或鑷子、培養(yǎng)箱二、實驗材料栽培種是由原種移接入栽培種培養(yǎng)基，經(jīng)培養(yǎng)而成，故稱三級種。栽培種與原種的生產程序是相同的。即培養(yǎng)基的配制→裝瓶→滅菌→接種→適溫培養(yǎng)。三、實驗內容與方法1、常用配方（1）棉籽殼82%、麥麩15%、白糖1%、碳酸鈣2%。

按比例稱取原料，棉籽殼應在配料的前一天先堆料，目的是為了讓水分能夠充分的滲透到棉籽過內部，能夠徹底的滅菌。（一）培養(yǎng)基的配制（2）木屑77%、麥麩20%、白糖1%、碳酸鈣2%

以上培養(yǎng)料拌料時，應掌握“均勻、濕透”的原則，其含水量調至60%～65%為宜。即將各種原料混勻；邊加水邊檢查培養(yǎng)料的含水量，直至用手握培養(yǎng)料時，指縫略有水滲出不滴為度，培養(yǎng)料不宜過濕或過干。2、培養(yǎng)基的配制（1）稱料：先稱主料，后稱輔料（2）拌料：先將難溶于水的輔料與主料拌均，再將易溶于水的輔料溶解于水中制成母液，每次加水均從母液桶中取水，邊加水邊攪拌，直至將培養(yǎng)料的含水量調至65%為宜。將緊合塑料袋松開，然后將配好的培養(yǎng)料裝入袋中，邊裝邊用手背壓實，裝袋時要求松緊適度。裝滿后，端部留出５cm左右的位置套頸圈，蓋上蓋子。（二）裝袋

將栽培料袋放高壓滅菌鍋或常壓滅菌鍋中進行滅菌。若采用高壓蒸汽滅菌，則標準為1.5kg/cm2（0.15MPa）,126～128℃,1.5h～2h。如果采用常壓蒸汽滅菌，則標準為100℃下8～10h。（三）滅菌1．將已滅菌的培養(yǎng)料袋移入事先消毒過的超凈工作臺內，紫外滅菌20～30min。2.母種管、用具及手要進行酒精消毒。（四）接種3.等培養(yǎng)料溫降至30℃左右時，按無菌操作方法進行接種：先打開蓋子，取出插入的接種棒，然后用接種鏟分別取菌種一塊放入培養(yǎng)料袋的底層、中層和上層，蓋上蓋子，貼上標簽，注明菌種名稱和接種日期。接種后，將菌種袋置于20℃培養(yǎng)室中培養(yǎng)。培養(yǎng)期間進行定期檢查，淘汰污染種瓶。一般兩周左右菌絲可長滿菌袋。培養(yǎng)成的菌絲濃白健壯，不干縮，生命力強，具有一定清香味，無