內蒙古包頭稀土高新區(qū)第二中學2023-2024學年生物高二上期末質量檢測模擬試題含解析

內蒙古包頭稀土高新區(qū)第二中學2023-2024學年生物高二上期末質量檢測模擬試題注意事項:1．答題前，考生先將自己的姓名、準考證號碼填寫清楚，將條形碼準確粘貼在條形碼區(qū)域內。2．答題時請按要求用筆。3．請按照題號順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試卷上答題無效。4．作圖可先使用鉛筆畫出，確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5．保持卡面清潔，不要折暴、不要弄破、弄皺，不準使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．下列有關激素發(fā)現(xiàn)史的敘述，錯誤的是（）A.促胰液素是人們發(fā)現(xiàn)的第一種激素，是由胰腺分泌的B.沃泰默認為，狗小腸黏膜受稀鹽酸刺激引起胰液的分泌是神經調節(jié)C.斯他林和貝利斯成功的關鍵是敢于質疑，大膽假設，巧妙設計實驗D.制備胰腺提取物治療糖尿病收效甚微，因為胰島素被胰液中的蛋白酶分解2．我國嫦娥四號完成了人類在月球表面進行的首次生物實驗。搭載嫦娥四號上月球的“罐子”中有土壤、空氣、水和透明設備等，搭載著棉花、油菜、土豆、擬南芥、果蠅和酵母菌六種生物。在條件合適的情況下，這個“罐子”能形成一個簡單、微型生態(tài)系統(tǒng)。下列有關說法錯誤的是A.“罐子”中的的六種生物分屬生產者、消費者和分解者B.“罐子”生態(tài)系統(tǒng)的結構由生物成分和非生物的物質和能量構成C.“罐子”生態(tài)系統(tǒng)的營養(yǎng)結構簡單，抵抗力穩(wěn)定性較低D.“罐子”登月為人類今后建立月球基地提供研究基礎和經驗3．酵母菌細胞具有而藍細菌細胞中沒有的結構是（）A.細胞壁 B.細胞膜 C.線粒體 D.核糖體4．關于在某棄耕農田中發(fā)生的演替，下列敘述中正確的是（）A.灌木出現(xiàn)時，由于遮擋了草本植物，導致群落對光的利用率減少B.只要溫度適宜、時間充足，該地群落最終一定能演替到森林階段C.演替中當土壤表層有機物增多時，其保水能力也會隨之逐漸增強D.該演替發(fā)生時要依次經歷地衣階段、苔蘚階段、草本植物階段等5．下列關于自主神經系統(tǒng)的敘述，正確的是（）A.自主神經系統(tǒng)受意識支配B.交感神經屬于傳入神經和副交感神經屬于傳出神經C.副交感神經興奮會使支氣管擴張D.當人處于興奮狀態(tài)時，交感神經活動占據(jù)優(yōu)勢6．下列有關人類遺傳病調查和優(yōu)生的敘述，正確的是（）A.調查人群中的遺傳病時，最好選用群體中發(fā)病率較高的多基因遺傳病B.常見的優(yōu)生措施有禁止近親結婚、提倡晚婚晚育和進行產前診斷等C.對遺傳病的發(fā)病率進行統(tǒng)計時，只需在患者家系中進行調查D.通過基因診斷確定胎兒不攜帶致病基因，但仍有可能患遺傳病二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）圖1表示細胞有絲分裂的不同時期與每條染色體中DNA含量變化的關系；圖2表示處于細胞分裂不同時期的細胞圖像。據(jù)圖回答問題：（1）圖1中，AB段形成的原因是________，CD段形成的原因是________。（2）觀察染色體的最佳時期是圖2中的____圖，此時，染色體∶染色單體∶DNA=________。（3）圖2中_____________細胞處于圖1中的BC段。（4）高度分化的體細胞看不到分裂圖像原因是______________________。8．（10分）新型冠狀病毒最初侵染人體時，人體的免疫系統(tǒng)可以摧毀大多數(shù)病毒?；卮鹣铝袉栴}：（1）人體的免疫系統(tǒng)是由__________組成的。（2）冠狀病毒經脫毒處理后可成為類冠狀病毒，可用于預防接種。類冠狀病毒在免疫學上被稱為__________，注射的目的是使人體內產生較多的_____。（3）該類病毒作為抗原侵入人體后，在體液中機體需要借助__________細胞產生的抗體將其凝集并抑制其繁殖，對于感染病毒的靶細胞，機體則需要通過__________細胞的作用促其裂解并釋放病毒。（4）隨著新型冠狀病毒在人體內的增殖，患者出現(xiàn)發(fā)熱現(xiàn)象，體溫調定學說認為正常情況下丘腦預設的一個體溫調定點為37℃，而病毒感染會導致體溫調定點升高，如體溫升高到39℃，這時人的感覺是_______（填“冷”或“熱”），機體的產熱量______________（填“大于”“小于”或“等于”）散熱量，體溫上升，導致發(fā)熱出現(xiàn)。若患者服用退燒藥，機體可以通過__________和__________等生理途徑來增加散熱，使體溫恢復正常。（5）在隔離治療期間，醫(yī)生建議患者多喝水，從而增強機體的新陳代謝?；颊叽罅匡嬎?，_____滲透壓下降，_______釋放的抗利尿激素_______（填“增多”“減少”或“不變”），引起腎小管和集合管對水的重吸收_______（填“增強”或“減弱”），有利于排出代謝廢物。機體的水平衡調節(jié)過程屬于__________調節(jié)。9．（10分）下列是關于酶促反應的實驗探究過程。請回答下面問題：①取3支試管標為A、B、C，各加入等量的一定濃度H2O2溶液，放入38℃恒溫水浴鍋中保溫。②向A中加入一定量的蒸餾水，B中加入等量的質量分數(shù)為3．5%的FeCl3溶液，C中加入等量的質量分數(shù)為20%新鮮肝臟研磨液（所加試劑均經過38℃恒溫水浴保溫）。③觀察各試管產生氣泡的速率。（1）酶對化學反應的_______________稱為酶活性。（2）上述實驗可以探究酶具有____________作用和_____________特性。（3）實驗開始后，B、C組產生氣泡速率比A組快，但一段時間后三組都沒有氣泡產生，原因是________________________________________________________________。（4）若實驗過程中，B、C組產生氣泡的速率都非?？臁槭箤嶒灲Y果的差異更明顯，重復實驗時可采取的方法是___________________________________________________。（5）如果將實驗中的恒溫水浴改為80℃，其余條件不變，重復上述實驗，產生氣泡最快的一組是__________組，這說明酶具有的特性是_____________________________。10．（10分）2020年兩位女科學家?，敿~埃爾·卡彭蒂娜和詹妮弗·杜德娜因發(fā)現(xiàn)“CRISPR/Cas9基因剪刀”而獲得2020年諾貝爾化學獎。CRISPR/Cas9系統(tǒng)可對基因組進行定點編輯，其工作原理如圖1所示。該系統(tǒng)主要包含單鏈向導RNA和Cas9蛋白兩個部分，能特異性識別并結合特定的DNA序列，從而引導Cas9蛋白到相應位置并剪切DNA，最終實現(xiàn)對靶基因序列的編輯。請回答下列問題：（1）圖1為CRISPR/Cas9系統(tǒng)作用示意圖，該系統(tǒng)能精準識別相關基因的原理是sgRNA與目標DNA發(fā)生______，Cas9蛋白可催化_____(化學鍵名稱)水解，剪切特定DNA片段。（2）LMNA基因編碼的核纖層蛋白與維持細胞核正常形態(tài)有關?？蒲腥藛T利用CRISPR/Cas9技術對體外培養(yǎng)的HepG2(人源肺癌細胞)細胞株進行基因編輯，獲得了LMNA基因敲除的穩(wěn)定細胞系。①HepG2細胞中沒有編碼Cas9的基因，需將Cas9基因及sgRNA基因拼接形成拼接基因并與質粒結合導入HepG2細胞，sgRNA的合成需要______催化。②用下圖2中的質粒以及含Cas9-sgRNA拼接基因的DNA片段構建表達載體時，應選用_______進行酶切。將構建好的表達載體與用______處理的細菌置于適宜反應體系中培養(yǎng)。然后將培養(yǎng)的細菌涂布于含______的平板培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)，24h后挑取菌落，提取質粒作為模板，選擇圖3中引物組合________和______，通過PCR和電泳技術鑒定是否重組成功。③用鑒定成功的工程菌對HepG2細胞進行轉染，培養(yǎng)三天后收集HepG2細胞，提取基因組，對其______序列進行檢測，判斷Cas9-sgRNA拼接基因是否導入成功。若從細胞水平進行檢測，可以檢測HepG2細胞數(shù)目增長量或______。（3）華人科學家張鋒是首個將CRISPR基因編輯技術應用于哺乳動物和人類細胞的科學家，為此項技術廣泛應用于生命科學和醫(yī)學領域做出了不可磨滅的貢獻。但是更多的學者提出了CRISRP/Cas9基因編輯技術有時存在編輯對象出錯而造成“脫靶”，實驗發(fā)現(xiàn)sgRNA的序列長短影響成功率，越短脫靶率越______，脫靶最可能的原因是______。11．（15分）如表是植物不同部位各種激素的相對濃度，請分析回答：部位激素的相對濃度生長素赤霉素細胞分裂素脫落酸莖尖+++++++++﹣幼葉++++++﹣﹣伸長莖++++﹣﹣側芽++﹣﹣成熟葉++﹣+++根++﹣﹣根尖++﹣﹣﹣+++表示含量高；++表示含量中等；+表示含量低；﹣表示無（1）目前公認的植物激素共有五大類，除上表中的四大類外，植物體內還有一類物質也屬于植物激素，該激素是_____，它的主要作用是_____。（2）生長素的化學本質是_____，它的生理作用的特點具有兩重性。（3）由表中可知植物成熟葉含有較多的_____，其作用是抑制細胞分裂，促進葉和果實的_____。（4）幼葉和伸長莖中都不含有細胞分裂素，而含有較多的生長素和赤霉素，則對幼葉和伸長莖的生長的合理解釋是：他們的生長主要是通過細胞的_____（細胞伸長/細胞分裂）來實現(xiàn)的，而不是通過_____（細胞伸長/細胞分裂）實現(xiàn)的。（5）生長素對植物的生理作用具有兩重性：A．促進植物生長（低濃度）B．抑制植物生長（高濃度）。請用A或B填空回答生產實踐中對生長素的應用，是利用生長素作用的哪一種原理。①用生長素處理未授粉的番茄花蕾，獲得無籽番茄：_____。②扦插繁殖時，用生長素處理插枝，使其容易生根成活：_____。③用人工合成的生長素類似物作為除草劑：_____。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、A【解析】促胰液素是人們發(fā)現(xiàn)的第一種激素，是由小腸黏膜產生的，進入血液，由血液傳送到胰腺，使胰腺分泌胰液。在發(fā)現(xiàn)過程中，沃泰默實驗分為三組，兩組為對照組，一組對照是排除鹽酸對胰腺作用的影響，另一組是想驗證胰液分泌是由神經作用的結果，所以將神經切除。斯他林和貝麗斯能成功的一個重要原因是具有大膽質疑、探索和創(chuàng)新的精神?！驹斀狻緼、促胰液素是人們發(fā)現(xiàn)的第一種激素，是由小腸黏膜分泌的，A錯誤；B、法國學者沃泰默認為小腸黏膜受鹽酸刺激引起胰液分泌是神經調節(jié)，非體液調節(jié)，B正確；C、斯他林和貝利斯成功的關鍵是敢于質疑，大膽假設，巧妙設計實驗，C正確；D、制備胰腺提取物治療糖尿病收效甚微，是因為胰島素的本質是蛋白質，會被胰腺分泌的胰蛋白酶所分解，D正確。故選A。2、B【解析】生態(tài)系統(tǒng)的組成成分包括生產者、消費者、分解者和非生物的物質和能量?！驹斀狻緼、棉花、油菜、土豆、擬南芥屬于生產者，果蠅屬于消費者，酵母菌屬于分解者，A正確；B、生態(tài)系統(tǒng)的結構包括生態(tài)系統(tǒng)的組成成分和食物鏈、食物網，B錯誤；C、生物種類越多，營養(yǎng)結構越復雜，抵抗力穩(wěn)定性越高，“罐子”生態(tài)系統(tǒng)的營養(yǎng)結構簡單，抵抗力穩(wěn)定性較低，C正確；D、月球生物科普實驗，為人類今后建立月球基地提供研究基礎和經驗，D正確。故選B。3、C【解析】真核生物與原核生物的本質區(qū)別：有無以核膜為界限的細胞核。藍細菌屬于原核生物，其存在細胞壁，成分主要是肽聚糖，只存在一種細胞器核糖體。真原核細胞共同之處：都有細胞膜、細胞質、核糖體和遺傳物質DNA?！驹斀狻克{細菌是原核生物，其具有細胞壁(成分主要是肽聚糖)、細胞膜、細胞質、核糖體和遺傳物質DNA。而酵母菌是真核生物，其具有細胞壁(成分主要幾丁質)、細胞膜、細胞質、核糖體、線粒體等細胞器，因有成形細胞核，故有核膜，也存在遺傳物質DNA。綜上所述酵母菌細胞具有而藍細菌細胞中沒有的結構是線粒體，C正確，ABD錯誤。故選C。4、C【解析】棄耕農田上的演替過程：草本階段→灌木階段→喬木階段。群落演替的根本原因在于群落內部，所以不遭受外界干擾因素時也會發(fā)生演替。隨著群落演替的進行，植物類型逐漸增加，分層現(xiàn)象會更加明顯，光能利用率提高。【詳解】A、由于灌木叢較高，灌木遮擋草本植物，這體現(xiàn)了群落的垂直結構，可以提高群落中植物對光的利用率，A錯誤；B、漫長演替過程的最終結果，即群落演替的頂級群落不一定是森林，這取決于當?shù)氐沫h(huán)境氣候條件，B錯誤；C、一般情況下，農田棄耕后物種豐富度增加，土壤表層有機物質會逐漸增多，其保水能力也會逐漸增強，C正確；D、棄耕農田上發(fā)生的演替不會再經歷地衣、苔蘚等階段，D錯誤。故選C。5、D【解析】自主神經由交感神經和副交感神經兩部分組成，它們的作用通常是相反的。當人體處于興奮狀態(tài)時，交感神經活動占據(jù)優(yōu)勢，心跳加快，支氣管擴張，但胃腸的蠕動和消化腺的分泌活動減弱；而當人處于安靜狀態(tài)時，副交感神經活動則占據(jù)優(yōu)勢，此時，心跳減慢但胃腸的蠕動和消化液的分泌會加強，有利于食物的消化和營養(yǎng)物質的吸收?！驹斀狻緼、交感神經和副交感神經是調節(jié)人體內臟功能的神經裝置，所以也叫內臟神經系統(tǒng)，因為其功能不完全受人類的意識支配，所以又叫自主神經系統(tǒng)，A錯誤；B、交感神經和副交感神經是調節(jié)人體內臟功能的神經裝置，都屬于傳出神經，B錯誤；C、副交感神經興奮，會使支氣管收縮，肺的通氣量減少，C錯誤；D、當人處于興奮狀態(tài)時，交感神經活動占據(jù)優(yōu)勢，當人處于興奮安靜時，副交感神經活動則占據(jù)優(yōu)勢，D正確。故選D。6、D【解析】1、調查人類遺傳病時，最好選取群體中發(fā)病率相對較高的單基因遺傳病，如色盲、白化病等；若調查的是遺傳病的發(fā)病率，則應在群體中抽樣調查，選取的樣本要足夠的多，且要隨機取樣；若調查的是遺傳病的遺傳方式，則應以患者家庭為單位進行調查，然后畫出系譜圖，再判斷遺傳方式。2、遺傳病的監(jiān)測和預防（1）產前診斷：胎兒出生前，醫(yī)生用專門的檢測手段確定胎兒是否患某種遺傳病或先天性疾病，產前診斷可以大大降低病兒的出生率。（2）遺傳咨詢：在一定的程度上能夠有效的預防遺傳病的產生和發(fā)展。（3）禁止近親婚配：可降低隱性遺傳病的發(fā)病率?！驹斀狻空{查人群中的遺傳病時，最好選取群體中發(fā)病率較高的單基因遺傳病而不是多基因遺傳病，A錯誤；常見的優(yōu)生措施有禁止近親結婚、提倡適齡生育和進行產前診斷等，而不是晚婚晚育，B錯誤；對遺傳病的發(fā)病率進行統(tǒng)計時，需在人群中隨機調查，調查遺傳方式則需要在患者家系中調查，C錯誤；通過基因診斷確定胎兒不攜帶致病基因，但也有可能患染色體異常遺傳病，D正確。故選D?！军c睛】本題考查人類遺傳病的相關知識，要求考生識記調查人類遺傳病的調查對象及調查范圍；識記常見的人類遺傳病的類型、特點及實例，能結合所學的知識準確判斷各選項。二、綜合題：本大題共4小題7、(1).DNA復制(2).著絲點分裂(3).乙(4).1∶2∶2(5).乙、丙(6).高度分化的體細胞不再分裂【解析】分析圖1：AB形成的原因是DNA的復制；BC段表示有絲分裂G2期、前期和中期；CD段形成的原因是著絲點分裂；DE段表示有絲分裂后期和末期。分析圖2：甲細胞中含有同源染色體，且著絲點分裂，甲細胞處于有絲分裂后期；乙細胞中含有同源染色體，且染色體的著絲點都排列在赤道板上，乙細胞處于有絲分裂中期；丙細胞中含有同源染色體，且染色體分布散亂，丙細胞處于有絲分裂前期；丁細胞處于有絲分裂末期?！驹斀狻浚?）圖1中AB段形成的主要原因是DNA復制，每條染色體上的DNA含量由1變?yōu)?；CD段形成的原因是著絲點分裂，姐妹染色單體分開，每條染色體上的DNA含量由2變?yōu)?。（2）觀察染色體的最佳時期是圖2中的乙圖，該細胞處于有絲分裂中期，此時染色體形態(tài)穩(wěn)定，數(shù)目清晰。每條染色體上有兩個DNA分子，兩條染色單體，因此染色體∶染色單體∶DNA=1∶2∶2。（3）圖1中的BC段表示有絲分裂的染色體復制后單體還沒有分離的時期，表示有絲分裂G2期，前期和中期，圖2中乙細胞處于有絲分裂中期，丙細胞處于有絲分裂前期，乙、丙細胞都含有染色單體，因此圖2中乙和丙處于BC段。（4）高度分化的體細胞不再分裂，因此高度分化的體細胞看不到分裂圖像?！军c睛】本題結合曲線圖和細胞分裂圖，考查細胞有絲分裂過程及變化規(guī)律，要求考生識記細胞有絲分裂不同時期的特點，掌握有絲分裂過程中染色體和DNA含量變化規(guī)律，能正確分析題圖，同時能結合所學的知識準確答題。8、（1）免疫器官、免疫細胞和免疫活性物質（2）①.疫苗②.抗體和記憶細胞（3）①.漿細胞##效應B②.細胞毒性T（4）①.冷②.大于③.出汗④.皮膚血管舒張（5）①.細胞外液②.垂體③.減少④.減弱⑤.神經--體液【解析】體溫調節(jié)是指溫度感受器接受體內、外環(huán)境溫度的刺激，通過體溫調節(jié)中樞的活動，相應地引起內分泌腺、骨骼肌、皮膚血管和汗腺等組織器官活動的改變，從而調整機體的產熱和散熱過程，使體溫保持在相對恒定的水平。人體的體溫調節(jié)是個自動控制系統(tǒng)，控制的最終目標是核心溫度，以心、肺為代表。而機體的內、外環(huán)境是在不斷地變化，許多因素會干擾深部溫度的穩(wěn)定，此時通過反饋系統(tǒng)將干擾信息傳遞給體溫調節(jié)中樞，經過它的整合作用，再調整受控系統(tǒng)的活動，從而在新的基礎上達到新的體熱平衡，達到穩(wěn)定體溫的效果。【小問1詳解】免疫系統(tǒng)由免疫器官（骨髓、脾臟、淋巴結、扁桃體、小腸集合淋巴結、闌尾、胸腺等）、免疫細胞（淋巴細胞、單核吞噬細胞、中性粒細胞、嗜堿粒細胞、嗜酸粒細胞、肥大細胞、血小板（因為血小板里有IgG）等），以及免疫活性物質（抗體、溶菌酶、補體、免疫球蛋白、干擾素、白細胞介素、腫瘤壞死因子等細胞因子）組成?！拘?詳解】類冠狀病毒是減毒的微生物，在免疫學上被稱為疫苗；疫苗能引起機體產生特定的免疫應答，注射疫苗的目的是使人體內產生較多的抗體和記憶細胞?！拘?詳解】抗體是漿細胞（效應B細胞）產生的，針對特定抗原的免疫球蛋白。對于感染病毒的靶細胞，機體則需要通過細胞毒性T細胞的作用促其裂解并釋放病毒。【小問4詳解】人是恒溫動物，產熱等于散熱，新型冠狀病毒侵入人體后，人體通常會出現(xiàn)發(fā)熱的現(xiàn)象，在該過程中，人體感覺寒冷，所以通過有機物的氧化分解升高體溫；在這個過程中，產熱大于散熱，導致人體體溫升高；機體可以通過出汗、皮膚血管舒張（血流量增大，體表溫度增大，散熱量增大）等生理途徑來增加散熱?！拘?詳解】大量飲水后，細胞外液滲透壓下降；下丘腦中存在滲透壓感受器，導致其合成的并至垂體釋放的抗利尿激素減少；抗利尿激素可以促進腎小管和集合管對水的重吸收，因此抗利尿激素減少會導致對水的重吸收減少，從而出現(xiàn)尿量增多；機體的水平衡調節(jié)過程既涉及神經調節(jié)（垂體釋放抗利尿激素），也涉及體液調節(jié)（抗利尿激素作用于腎小管和集合管），為神經--體液調節(jié)?！军c睛】本題主要考查免疫及水鹽平衡調節(jié)，要求學生有一定的理解分析能力。9、(1).催化效率(2).催化(3).高效性(4).過氧化氫被分解完，不再產生O2(5).減少FeCl3溶液和肝臟研磨液的用量（降低過氧化氫濃度）(6).B(7).酶的作用條件較溫和【解析】據(jù)題意分析可知，該實驗的變量是加入試劑的種類，是否加入蒸餾水、FeCl3溶液、肝臟研磨液，可以證明酶具有催化作用，且酶具有高效性。【詳解】（1）酶活性是指酶對化學反應的催化效率。（2）向A中加入一定量的蒸餾水，B中加入等量的質量分數(shù)為3.5%的FeCl3溶液，C中加入等量的質量分數(shù)為20%新鮮肝臟研磨液，AC組對比，可以證明酶具有催化作用，BC組對比，可以證明酶具有高效性。（3）實驗開始后，B、C組產生氣泡的速率比A組快，但一段時間后都沒有氣泡產生，說明物質已消耗完，不會再產生氣體，故原因是過氧化氫被分解完。（4）若實驗過程中，B、C組產生氣泡的速率都非常快。為使實驗結果的差異更明顯，重復實驗時可采取的方法是減少FeCl3溶液和肝臟研磨液的用量或降低過氧化氫濃度，使反應速率減慢。（5）如果將實驗中的恒溫水浴改為80℃，其余條件不變，重復上述實驗，產生氣泡最快的一組是B組，因為酶的作用條件較溫和，80℃過氧化氫酶活性降低，甚至是失活?！军c睛】絕大多數(shù)酶的本質是蛋白質，少數(shù)是RNA。酶的特性：高效性、專一性和作用條件較溫和。10、①.堿基互補配對②.磷酸二酯鍵③.RNA聚合酶④.EcoRI⑤.Ca2+（CaCl2）⑥.嘌呤霉素⑦.Ⅱ⑧.Ⅲ（兩空位置可調換）⑨.堿基(或核苷酸)⑩.細胞核形態(tài)?.高?.sgRNA（向導RNA）越短越容易與DNA其他部位錯誤結合而脫靶【解析】1.基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的獲取，②基因表達載體的構建，③將目的基因導人受體細胞，④目的基因的檢測與鑒定。

基因工程的三種工具：限制性核酸內切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體。

標記基因的作用是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來?！驹斀狻浚?）圖1為CRISPR/Cas9系統(tǒng)作用示意圖，該系統(tǒng)能精準識別相關基因的原理根據(jù)堿基互補配對原則實現(xiàn)的，即為sgRNA與目標DNA發(fā)生堿基互補配對，同時Cas9蛋白可催化磷酸二酯鍵的水解，從而在特定的部位剪切特定DNA片段。（2）科研人員利用CRISPR/Cas9技術對體外培養(yǎng)的HepG2(人源肺癌細胞)細胞株進行基因編輯，獲得了LMNA基因敲除的穩(wěn)定細胞系。①HepG2細胞中沒有編碼Cas9的基因，需將Cas9基因及sgRNA基因拼接形成拼接基因并與質粒結合導入HepG2細胞，根據(jù)細胞中的RNA均來自轉錄過程推測sgRNA的合成需要RNA聚合酶的催化。②用下圖2中的質粒以及含Cas9-sgRNA拼接基因的DNA片段構建表達載體時，應選用EcoRI進行酶切，因為在質粒和目的基因的兩端均含有該酶的切割位點，而BamHⅠ的酶切位點正好在標記基因內，因此該酶不能選擇。將構建好的表達載體與用Ca2+（CaCl2）處理的細菌（增加細菌的通透性）置于適宜反應體系中培養(yǎng)。然后將培養(yǎng)的細菌涂布于含嘌呤霉素的平板培養(yǎng)基上進行篩選，凡是能正常生長的菌落即為帶有目的基因的細菌，37℃培養(yǎng)，24h后挑取菌落，提取質粒作為模板，根據(jù)圖中目的基因兩側的堿基序列以及引物的堿基順序，結合堿基互補配對原則可選擇圖3中引物組合Ⅱ和Ⅲ進行體外DNA復制，通過PCR和電泳技術鑒定是否重組成功。③用鑒定成功的工程菌對HepG2細胞進行轉染，培養(yǎng)三天后收集HepG2細胞，提取基因組，對其堿基(或核苷酸)序列進行檢測，判斷Cas9-sgRNA拼接基因是否導入成功。若從細胞水平進行檢測，可以檢測HepG2細胞數(shù)目增長量或細胞核形態(tài)是否變化來檢測。（3）但是更多的學者提出了CRISRP/Cas9基因編輯技術有時存在編輯對象出錯而造成“脫靶”由于其他DNA序列也含有