哈工大酶工程試題(A)答案

酶工程試題(A)年級(jí)2001專業(yè)生物技術(shù)一名詞解釋（每題3分，共計(jì)30分）酶工程自殺性底物別構(gòu)酶誘導(dǎo)酶Mol催化活性離子交換層析固定化酶修飾酶非水酶學(xué)模擬酶二填空題(每空1分,共計(jì)30分)1.決定酶催化活性的因素有兩個(gè)方面，一是，二是。2.求Km最常用的方法是。3.多底物酶促反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)機(jī)制可分為兩大類，一類是，另一類是。4.可逆抑制作用可分為，，，。5.對(duì)生產(chǎn)酶的菌種來說，我們必須要考慮的條件有，一是看它是不是，二是能夠利用廉價(jià)原料，發(fā)酵周期，產(chǎn)酶量，三是菌種不易，四是最好選用能產(chǎn)生酶的菌種，有利于酶的分離純化，回收率高。6.酶活力的測(cè)定方法可用反應(yīng)法和反應(yīng)法。7.酶制劑有四種類型即酶制劑，酶制劑，酶制劑和酶制劑。8.通常酶的固定化方法有法，法，法，法。9.酶分子的體外改造包括酶的修飾和修飾。10.模擬酶的兩種類型是酶和酶。11.抗體酶的制備方法有法和法。三問答題(每題10分,共計(jì)40分)固定化酶和游離酶相比，有何優(yōu)缺點(diǎn)？寫出三種分離純化酶蛋白的方法，并簡述其原理。為什么酶制劑的生產(chǎn)主要以微生物為材料？下面是某人對(duì)酶測(cè)定的一些數(shù)據(jù)，據(jù)此求出該酶的最大反應(yīng)速度和米氏常數(shù)。[S](mol/L)V0(umol/min)0.510-6284.010-6401.010-5702.010-5954.010-51121.010-41282.010-41391.010-2140/一1抗體酶：是一種具有催化作用的免疫球蛋白，屬于化學(xué)人工酶2酶反應(yīng)器：是利用生物化學(xué)原理使酶完成催化作用的裝置，他為酶促反應(yīng)提供合適的場所和最佳的反應(yīng)條件，使底物最大限度的轉(zhuǎn)化為物。3模擬酶：利用有機(jī)化學(xué)合成的方法合成的比酶結(jié)構(gòu)簡單的具有催化作用的非蛋白質(zhì)分子叫模擬酶。4底物抑制：在酶促反應(yīng)中，高底物濃度使反應(yīng)速度降低的現(xiàn)象。5穩(wěn)定pH：酶在一定的pH范圍之內(nèi)是穩(wěn)定的，超過這個(gè)限度易變性失活，這樣的pH范圍為此酶的穩(wěn)定pH6產(chǎn)酶動(dòng)力學(xué)：主要研究細(xì)胞產(chǎn)酶速率及各種因素對(duì)產(chǎn)酶速率的影響，包括宏觀產(chǎn)酶動(dòng)力學(xué)和微觀產(chǎn)酶動(dòng)力學(xué)。7凝膠過濾：又叫分子排阻層析，分子篩層析，在層析柱中填充分子篩，加入待純化樣品再用適當(dāng)緩沖液淋洗，樣品中的分子經(jīng)過一定距離的層析柱后，按分子大小先后順序流出的，彼此分開的層析方法。8固定化酶：通過物理的或化學(xué)的方法，將酶束縛于水不溶的載體上，或?qū)⒚甘`于一定的空間內(nèi)，限制酶分子的自由流動(dòng)，但能使酶發(fā)揮催化作用的酶9非水酶學(xué)：通常酶發(fā)揮催化作用都是在水相中進(jìn)行的，研究酶在有機(jī)相中的催化機(jī)理的學(xué)科即為非水酶學(xué)10液體發(fā)酵法：以液體培養(yǎng)基為原料進(jìn)行微生物的繁殖和產(chǎn)酶的方法，根據(jù)通風(fēng)方法不同又分為液體表層發(fā)酵法和液體深層發(fā)酵法。二競爭性非競爭性反競爭性固體液體溫度pH通風(fēng)量（或氧氣）攪拌泡沫濕度。控制條件遺傳控制其它方法同步合成型延續(xù)合成型中期合成型滯后合成型熱變性法酸堿變性法表面變性法吸附法共價(jià)鍵結(jié)合法交聯(lián)法包埋法表面修飾內(nèi)部修飾過渡態(tài)能障基三一般必須符合下列條件不應(yīng)當(dāng)是致病菌，在系統(tǒng)發(fā)育上最好是與病原菌無關(guān)能夠利用廉價(jià)原料，發(fā)酵周期短，產(chǎn)酶量高菌種不易變異退化，不易感染噬菌體最好選用產(chǎn)胞外酶的菌種，有利于酶的分離純化，回收率高在食品和醫(yī)藥工業(yè)上應(yīng)用，安全問題更顯得重要。每點(diǎn)2分2.（1）被修飾酶的性質(zhì)，包括酶的穩(wěn)定性，酶活性中心的狀況，側(cè)鏈基團(tuán)的性質(zhì)及反應(yīng)性（2）修飾反應(yīng)的條件，包括PH與離子強(qiáng)度，修飾反應(yīng)時(shí)間和溫度，反應(yīng)體系中酶與修飾劑的比例等每項(xiàng)5分3.（1）酶蛋白N端的α氨基或賴氨酸的∑氨基2分（2）酶蛋白C端的羧基及天冬氨酸的β羧基或谷氨酸的γ羧基2分（3）半胱氨酸的巰基1分絲氨酸駱氨酸蘇氨酸上的羥基2分苯丙氨酸和駱氨酸上的苯環(huán)1分組氨酸上的咪唑基1分色氨酸上的吲哚基1分4.（1）起始總活力：200120＝24000（單位）1分（2）起始比活力：2002.5＝80（單位/毫克蛋白氮）1