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高考一輪復(fù)習(xí):選修3專題二細(xì)胞工程(二)動物細(xì)胞工程晉江市英林中學(xué)高三生物備課組林鳳珠2014年2月19日問題探討
“番茄—馬鈴薯”(理想圖)
通過長期的實驗,科學(xué)家們采用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得了“番茄—馬鈴薯”植株。如果將奶牛的細(xì)胞與植物細(xì)胞雜交,得到綠色的小奶牛,那豈不是只要曬曬太陽就可以擠出牛奶嗎?動物細(xì)胞也能融合嗎?常用技術(shù)手段:動物細(xì)胞培養(yǎng)、動物細(xì)胞核移植、動物細(xì)胞融合、生產(chǎn)單克隆抗體最基礎(chǔ):動物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用:細(xì)胞產(chǎn)物、藥物、器官供體等動物細(xì)胞工程1、動物細(xì)胞培養(yǎng)(基因、細(xì)胞、胚胎工程的基礎(chǔ))動物胚胎或幼齡動物器官或組織單個細(xì)胞剪碎
酶培養(yǎng)液細(xì)胞懸浮液原代培養(yǎng)細(xì)胞株傳代培養(yǎng)細(xì)胞系(2)過程:(1)原理:胰蛋白細(xì)胞增殖生長特點(diǎn)培養(yǎng)基特點(diǎn)影響因素應(yīng)用10代以內(nèi)10-50代無限傳代遺傳物質(zhì)不變遺傳物質(zhì)改變項目植物組織培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)原理不同培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基的成分最終產(chǎn)物過程液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖植物激素動物血清植株或細(xì)胞產(chǎn)物細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物脫分化、再分化原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)1.下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)說法正確的是:A.任何動物任何器官組織細(xì)胞均可取材B.原理是細(xì)胞的全能性C.動物細(xì)胞培養(yǎng)需要加入動物血清等營養(yǎng)成分。D.只要傳代培養(yǎng),所有細(xì)胞就都能無限增殖C冷凍保存的細(xì)胞通常在10代以內(nèi),以保持細(xì)胞正常的二倍體核型??寺⊙蚺嘤^程黑面綿羊去核卵細(xì)胞細(xì)胞核細(xì)胞核移植重組細(xì)胞電脈沖刺激早期胚胎胚胎移植另一頭綿羊的子宮妊娠、出生克隆羊多利白面綿羊乳腺細(xì)胞有絲分裂2、細(xì)胞核移植技術(shù)(1)胚胎細(xì)胞核移植(2)體細(xì)胞核移植對比課本P48頁,發(fā)現(xiàn)不同:(2)體細(xì)胞核移植(用于克隆動物或組織器官移植)供體細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)體細(xì)胞取細(xì)胞核卵巢卵母細(xì)胞MⅡ中期去核去核的卵母細(xì)胞或卵重組細(xì)胞早期胚胎培養(yǎng)早期胚胎胚胎移植代孕母體子宮核移植分娩克隆動物②原理:
①過程:
③應(yīng)用:④存在問題:供體細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)體細(xì)胞取細(xì)胞核卵細(xì)胞(或卵母)去核去核的卵細(xì)胞(或卵母)重組細(xì)胞體外早期胚胎培養(yǎng)早期胚胎胚胎移植代孕母體子宮核移植分娩嬰兒⑤克隆人當(dāng)然是不被允許的,理論上來說,克隆人的過程是:治療性克?。≒49)需要胚胎移植嗎?⑥克隆人與治療性克隆的區(qū)別屬于個體水平,目的產(chǎn)生新個體,而治療性克隆則屬于細(xì)胞(或組織、器官)水平,目的是治療疾病。2、下列說法正確的是A.只要動物細(xì)胞培養(yǎng)就能生產(chǎn)出動物個體B.凡用到細(xì)胞核移植的過程均要結(jié)合胚胎移植C.克隆違反倫理道德,要堅決反對D.在治療人類疾病時,人的核移植胚胎干細(xì)胞經(jīng)過誘導(dǎo)分化,形成相應(yīng)組織、器官后,可用于組織器官移植D3、動物細(xì)胞融合(也稱動物細(xì)胞雜交技術(shù))(1)過程(2)原理:(3)誘導(dǎo)方式(4)意義:植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合的比較比較項目植物體細(xì)胞雜交動物細(xì)胞融合原理融合前處理誘導(dǎo)融合方法用途獲得植物新品種細(xì)胞膜的流動性細(xì)胞膜的流動性植物細(xì)胞全能性去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合離心、振蕩、電刺激、聚乙二醇離心、振蕩、電刺激、聚乙二醇滅活的病毒制備單克隆抗體強(qiáng)調(diào):效應(yīng)B淋巴細(xì)胞是能夠產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞,下文將其簡稱為B淋巴細(xì)胞抗體:能夠與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白。能產(chǎn)生抗體的細(xì)胞是漿細(xì)胞(即效應(yīng)B細(xì)胞)。B淋巴細(xì)胞效應(yīng)B淋巴細(xì)胞記憶B淋巴細(xì)胞分化4.單克隆抗體抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法抗原
反復(fù)注射動物從動物的血清中分離抗體該法制備抗體的缺點(diǎn):產(chǎn)量低、純度低,且抗體的特異性差、靈敏度低。動物細(xì)胞融合技術(shù)B、BB、B瘤、瘤瘤、瘤只有雜種細(xì)胞才能活動物細(xì)胞培養(yǎng)獲得免疫的B淋巴細(xì)胞(2)過程:(1)概念:雜交瘤細(xì)胞特點(diǎn)單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):應(yīng)用多次選出產(chǎn)所需抗體的雜交瘤細(xì)胞總結(jié)第一步:免疫機(jī)體誘導(dǎo)相應(yīng)B淋巴細(xì)胞的產(chǎn)生第二步:獲取B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合第三步:在選擇培養(yǎng)基上選擇雜交瘤細(xì)胞第四步:培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞從中挑選出能產(chǎn)生所
需抗體的雜交瘤細(xì)胞第五步:將該雜交瘤細(xì)胞在體內(nèi)或體外培養(yǎng)
增殖,從中提取單克隆抗體3、通過細(xì)胞工程生產(chǎn)單克隆抗體時,要涉及到以下三個篩選過程:在特定培養(yǎng)基中篩選出雜交瘤細(xì)胞②選出經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞③選出能產(chǎn)生特定抗體并能大量增殖的細(xì)胞群。這三個過程的先后次序是
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