一株煙用產(chǎn)纖維素酶菌株的篩選、鑒定及酶學(xué)特性研究

產(chǎn)生菌株。通過形態(tài)學(xué)、生化特性、16SrRNA序列分析等方法對(duì)該菌株pHpH變化而變pH4.8。該菌株的發(fā)現(xiàn)為煙草纖維素降解與改良提供了新的Thispaperaimstoscreenandidentifyastrainofcellulase-producingbacteriasuitablefortobaccouse,andtopreliminarilystudyitsenzymaticcharacteristics.Theresultsshowedthatacellulase-producingstrainwasscreenedfrommultipletobaccosamples.Thestrainwasidentifiedasacellulase-secretingstrainwithapreferenceforcellulosebymorphology,biochemicalcharacteristics,and16SrRNAsequenceanalysis.FurtherstudiesshowedthatthestrainwasabletoproduceenzymesunderawiderangeoftemperatureandpHconditions,withstableenzymeactivity.TheactivityoftheenzymechangedwiththepHvalue,andtheoptimalpHwas4.8.ThediscoveryofthisstrainprovidesnewideasforthedegradationandmodificationoftobaccoKeywordscellulase,tobacco,strainscreening,enzymaticcharacteristics,cellulasepreference改良已有一定的研究，但難以實(shí)現(xiàn)高效、成本低廉、環(huán)保的利用。因此，在煙草中發(fā)現(xiàn)一株能夠高效產(chǎn)生纖維素酶的細(xì)菌株對(duì)煙草的優(yōu)化改良具本研究選擇已經(jīng)發(fā)酵完成的煙草葉片和煙草桿作為菌株篩選的樣品。在樣品處理前應(yīng)先消毒殺菌，避免來自其他來源的干擾。對(duì)于葉片樣品，利用無菌剪刀將煙草葉切成小片狀，并在滅菌瓶內(nèi)進(jìn)行震蕩消毒處理。將樣品按一定比例（比例由前期測(cè)試確定）1%纖維素的固體培養(yǎng)基中，在37℃下進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)。在不同的培養(yǎng)時(shí)間點(diǎn)采用無菌膠行涂布。涂板后置于溫度適宜的條件（本實(shí)驗(yàn)在30℃下培養(yǎng)）進(jìn)行培養(yǎng)，生化特性、16SrRNA1%纖維素固體培養(yǎng)基上可以產(chǎn)生較多纖維素酶的菌株進(jìn)行進(jìn)PonceauS法進(jìn)行酶活定量。對(duì)酶的最適溫度、最適pH、酶活性隨pH變化的情況進(jìn)16SrRNA序列分析，確定該菌株屬于嗜好性纖維素酶分泌菌株，命名為CFB-1。CFB-1的纖維素酶在較寬的溫度范圍內(nèi)均可產(chǎn)生，其中最適溫度為40℃，在40℃至60℃之間酶活性較高。CFB-1pHpHCFB-1的纖維素酶活性較高，pH的變化會(huì)對(duì)酶的活性產(chǎn)生一定程度的影響。在pH=7時(shí)，該菌株酶活性降低至40%。纖維素是一種復(fù)雜的多糖物質(zhì)，在煙草中的含量極高，然而纖維素降