維生素B2注射液的質(zhì)量檢測(cè)-維生素B2注射液檢查

任務(wù)二VB2注射液檢查【檢查】pH值應(yīng)為4.5～6.5（附錄ⅥH）。其他應(yīng)符合注射劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定（附錄ⅠB）。

取樣數(shù)量不大于2ml者取供試品5支標(biāo)示裝量2ml以上至50ml者取供試品3支

50ml以上的注射液照最低裝量檢查法（1）裝量檢查檢查法

將內(nèi)容物分別用相應(yīng)體積的干燥注射器及注射針頭抽盡，然后注入經(jīng)標(biāo)化的量具內(nèi)，在室溫下檢視。測(cè)定油溶液或混懸液的裝量時(shí)，應(yīng)先加溫?fù)u勻，再用干燥注射器及注射針頭抽盡后，同前法操作，放冷，檢視。結(jié)果判斷每支的裝量均不得少于其標(biāo)示量。

（1）裝量檢查檢查法

取供試品5瓶(支)，除去標(biāo)簽、鋁蓋，容器外壁用乙醇擦凈，干燥，開(kāi)啟時(shí)注意避免玻璃屑等異物落入容器中，分別迅速精密稱(chēng)定，傾出內(nèi)容物，容器用水或乙醇洗凈，在適宜條件下干燥后，再分別精密稱(chēng)定每一容器的重量，求出每瓶(支)的裝量與平均裝量。每瓶(支)裝量與平均裝量相比較，應(yīng)符合規(guī)定。（2）裝量差異檢查——注射用無(wú)菌粉末結(jié)果判斷

平均裝量裝量差異限度

0.05g至0.05g以下±15%0.05-0.15g±10%0.15-0.50g±7%0.5g以上±5%

如有l(wèi)瓶(支)不符合規(guī)定，應(yīng)另取10瓶

(支)復(fù)試，應(yīng)符合規(guī)定。

（2）裝量差異檢查定義可見(jiàn)異物是指在規(guī)定條件下目視可以觀測(cè)至的不溶性物質(zhì)，其粒徑或長(zhǎng)度通常大于50μm檢查方法燈檢法光散射法(如用有色透明容器包裝或液體色澤較深的品種

)（3）可見(jiàn)異物檢查

最常用傘棚式檢查燈

1白色底板2黑色背景3日光燈傘棚式檢查燈（3）可見(jiàn)異物檢查——裝置

檢查法取供試品20支(瓶)，除去容器標(biāo)簽，擦凈容器外壁，輕輕旋轉(zhuǎn)和翻轉(zhuǎn)容器使藥液中存在的可見(jiàn)異物懸浮(注意不使藥液產(chǎn)生氣泡)，置供試品于遮光板邊緣處，在明視距離(指供試品至人眼的距離，通常為25cm)，分別在黑色和白色背景下，手持供試品頸部使藥液輕輕翻轉(zhuǎn)，用目檢視。（3）可見(jiàn)異物檢查——燈檢法

結(jié)果判定

（1）溶液型靜脈用注射液、注射用濃溶液20支(瓶)供試品中，均不得檢出可見(jiàn)異物。如檢出可見(jiàn)異物的供試品超過(guò)1支(瓶)，應(yīng)另取20支(瓶)同法檢查，均不得檢出。（2）混懸型注射液20支(瓶)供試品中，均不得檢出色塊、纖毛等可見(jiàn)異物。（3）可見(jiàn)異物檢查——燈檢法

本法系在可見(jiàn)異物檢查符合規(guī)定后，用以檢查溶液型靜脈用注射劑中不溶性微粒的大小及數(shù)量。包括光阻法和顯微計(jì)數(shù)法。

（4）不溶性微粒檢查不適用于黏度過(guò)高和易析出結(jié)晶的制劑，也不適用于進(jìn)入傳感器時(shí)容易產(chǎn)生氣泡的注射劑。

一般先采用光阻法，當(dāng)光阻法測(cè)定結(jié)果不符合規(guī)定或供試品不適于用光阻法測(cè)定時(shí)，應(yīng)采用顯微計(jì)數(shù)法進(jìn)行測(cè)定，并以顯微計(jì)數(shù)法的測(cè)定結(jié)果作為判斷依據(jù)），標(biāo)示量為100ml或100ml以上的靜脈注射液，除另有規(guī)定外，光阻法為每1ml中含10μm以上的微粒不得超過(guò)25粒，含25μm以上的微粒不得超過(guò)3粒，而顯微計(jì)數(shù)法分別為12粒、2粒。標(biāo)示量為100ml以下的靜脈注射液，除另有規(guī)定外，光阻法為每個(gè)供試品容器中含有10μm以上的微粒不得過(guò)6000粒，含25μm以上的微粒不得超過(guò)600粒，而顯微計(jì)數(shù)法分別為3000粒、300粒。

操作條件在潔凈度10000級(jí)條件下的局部100級(jí)單向流空氣區(qū)域內(nèi)或隔離系統(tǒng)中進(jìn)行。全過(guò)程必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止微生物污染。檢查方法直接接種法和薄膜過(guò)濾法返回(5)無(wú)菌檢查1）直接接種法——非抗菌作用的供試品

檢查法即每支(或瓶)供試品按規(guī)定量分別接種至好氧菌、厭氧菌和真菌培養(yǎng)基的容器中。除另有規(guī)定外，好氧菌、厭氧菌培養(yǎng)基每管裝量不少于15ml，真菌培養(yǎng)基每管裝量不少于10ml，每種培養(yǎng)基接種的管數(shù)同供試品的檢驗(yàn)數(shù)量。另取供試品1支（瓶）作陽(yáng)性對(duì)照；取溶劑和稀釋液同法操作，作陰性對(duì)照。1）直接接種法——非抗菌作用的供試品培養(yǎng)與觀察陽(yáng)性對(duì)照管培養(yǎng)48～72小時(shí)好氧菌、厭氧菌30-35℃，真菌23-28℃培養(yǎng)14天。培養(yǎng)期間應(yīng)逐日觀察并記錄是否有菌生長(zhǎng)。1）直接接種法——非抗菌作用的供試品結(jié)果判斷

陽(yáng)性對(duì)照混濁并確定有菌生長(zhǎng)；陰性對(duì)照應(yīng)澄清。

供試品管均澄清，或雖顯渾濁但經(jīng)確證無(wú)菌生長(zhǎng)，判供試品符合規(guī)定，若供試品管中任何一管顯渾濁并確證有菌生長(zhǎng)，判供試品不符合規(guī)定。

（2）薄膜過(guò)濾法——抗菌作用的供試品檢查法取規(guī)定量，直接過(guò)濾，或混合至含適量稀釋液的無(wú)菌容器內(nèi)，混勻，立即過(guò)濾。用適量的沖洗液沖洗濾膜，沖洗次數(shù)不得少于三次。2）薄膜過(guò)濾法——抗菌作用的供試品檢查法（1）如用封閉式薄膜過(guò)濾器，分別將100ml好氧、厭氧菌培養(yǎng)基及真菌培養(yǎng)基加入相應(yīng)的濾筒內(nèi)。（2）如用一般薄膜過(guò)濾器，取出濾膜，將其剪成3等份，分別置于含50ml好氧、厭氧菌培養(yǎng)基及真菌培養(yǎng)基的容器中，其中一份做陽(yáng)性對(duì)照用。結(jié)果判斷同直接接種法

熱原檢查法—家兔法

本法系將一定劑量的供試品，靜脈注入家兔體內(nèi)，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)，觀察家兔體溫升高的情況，以判定供試品中所含熱原的限度是否符合規(guī)定。(6)熱原或細(xì)菌內(nèi)毒素檢查試驗(yàn)前準(zhǔn)備（1）75％酒精、脫脂棉、甘油或凡士林、注射用水

（2）設(shè)備及用具：臺(tái)秤、獸用溫度計(jì)；注射器、針頭等應(yīng)置烘箱中用250℃加熱30分鐘除去熱原

（3）供試用家兔，測(cè)體溫——正常體溫（4）供試品溶液檢查法

取適用的家兔3只，測(cè)定其正常體溫后15分鐘以?xún)?nèi)，自耳靜脈緩緩注入規(guī)定劑量并溫?zé)嶂良s38℃的供試品溶液，然后每隔30分鐘測(cè)量其體溫1次，共測(cè)6次，以6次體溫中最高的一次減去正常體溫，即為該兔體溫的升高溫度(℃)。結(jié)果判斷

在初試的3只家兔中，體溫升高均低于0.6℃，并且3只家兔體溫升高總和低于1.4℃；或在復(fù)試的5只家兔中，體溫升高0.6℃或0.6℃以上的家兔不超過(guò)1只，并且初試、復(fù)試合并8只家兔的體溫升高總和為3.5℃或3.5℃以下，均判為供試品的熱原檢查符合規(guī)定。

細(xì)菌內(nèi)毒素檢查

本法系利用鱟試劑來(lái)檢測(cè)或量化由革蘭陰性菌產(chǎn)生的細(xì)菌內(nèi)毒素，以判斷供試品中細(xì)菌內(nèi)毒素的限量是否符合規(guī)定的一種方法。細(xì)菌內(nèi)毒素檢查包括兩種方法：即凝膠法和光度測(cè)定法。

凝膠法試驗(yàn)前準(zhǔn)備（1）細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品（2）鱟試劑

（3）細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水

（4）試驗(yàn)所用器皿等：250℃干烤至少60分鐘（5）供試品溶液（6）鱟試劑靈敏度復(fù)核及供試液干擾試驗(yàn)

操作方法

（1）檢驗(yàn)用內(nèi)毒素溶液（2）鱟試劑原安瓿8支，2支供試品管，2支陽(yáng)性對(duì)照管，2支陰