色譜分析-乙醇中微量水分測定

項(xiàng)目2.1乙醇中微量水分測定模塊2：色譜分析任務(wù)引入課件決定讓檢測其中水分含量，并提交檢測報(bào)告?！锷V分析基本原理★氣相色譜儀的構(gòu)造及使用方法★外標(biāo)法定量分析方法任務(wù)分析完成乙醇中少量水分測定，需要具備的基本知識和基本技能任務(wù)資訊

制定檢測方案

決策計(jì)劃

實(shí)施樣品檢測任務(wù)實(shí)施

任務(wù)檢查評價(jià)

檢查評價(jià)獲取相關(guān)知識乙醇中少量水分測定

什么是氣相色譜法？任務(wù)資訊茨維特實(shí)驗(yàn)（動(dòng)畫茨維特實(shí)驗(yàn).swf）色譜法由來色譜柱流動(dòng)相固定相色譜法動(dòng)畫：步行上街任務(wù)資訊色譜法定義色譜分析法實(shí)質(zhì)上是一種物理化學(xué)分離方法，即利用不同物質(zhì)在兩相（固定相和流動(dòng)相）中具有不同的分配系數(shù)（或吸附系數(shù)），當(dāng)兩相作相對運(yùn)動(dòng)時(shí)，這些物質(zhì)在兩相中反復(fù)多次分配（即組分在兩相之間進(jìn)行反復(fù)多次的吸附、脫附或溶解、揮發(fā)過程）從而使各物質(zhì)得到完全分離。任務(wù)資訊色譜法發(fā)展歷史1茨維特發(fā)現(xiàn)他的色譜法之后的20多年里，幾乎無人問津這一技術(shù)。到了1931年，德籍奧地利化學(xué)家?guī)於鳎≧.Kuhn）利用茨維特的方法在纖維狀氧化鋁和碳酸鈣的吸附柱上將過去一個(gè)世紀(jì)以來公認(rèn)為單一的結(jié)晶狀胡蘿卜素分離成a和b兩個(gè)同分異構(gòu)體，并由所取得的純胡蘿卜素確定出了其分子式。隨后他還發(fā)現(xiàn)了八種新類胡蘿卜素，并把它們制成純品，進(jìn)行了結(jié)構(gòu)分析。同年，庫恩又把注意力集中在維生素的研究上，確定了維生素A的結(jié)構(gòu)。此外，他還用色譜法從蛋黃中分離出了葉黃素；還曾把腌魚腐敗細(xì)菌中所含的紅色類胡蘿卜素確定離析出來并制成結(jié)晶。1933年庫恩從35000升脫脂牛奶中分離出1g核黃素（即維生素B2），制得結(jié)晶，并測定了它的結(jié)構(gòu)。任務(wù)資訊色譜法發(fā)展歷史21938年，Kuhn因在維生素和胡蘿卜素的離析與結(jié)構(gòu)分析中取得了重大研究成果被授予諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。從此色譜法開始為人們所重視，迅速為各國科學(xué)家們所注目，廣泛被采用起來。此后，相繼出現(xiàn)了各種色譜方法（如下表所示）?，F(xiàn)在的色譜分析已經(jīng)失去顏色的含義，只是沿用色譜這個(gè)名詞。年代發(fā)明者發(fā)明的色譜方法或重要應(yīng)用1906Tswett用碳酸鈣作吸附劑分離植物色素。最先提出色譜概念。1931Kuhn,Lederer用氧化鋁和碳酸鈣分離a-、b-和g-胡蘿卜素。使色譜法開始為人們所重視。1938Izmailov,Shraiber最先使用薄層色譜法。1938Taylor,Uray用離子交換色譜法分離了鋰和鉀的同位素。1941Martin,Synge提出色譜塔板理論；發(fā)明液-液分配色譜；預(yù)言了氣體可作為流動(dòng)相（即氣相色譜）。任務(wù)資訊色譜法發(fā)展歷史3年代發(fā)明者發(fā)明的色譜方法或重要應(yīng)用1944Consden等發(fā)明了紙色譜。1949Macllean在氧化鋁中加入淀粉黏合劑制作薄層板使薄層色譜進(jìn)入實(shí)用階段。1952Martin,James從理論和實(shí)踐方面完善了氣-液分配色譜法。1956VanDeemter等提出色譜速率理論，并應(yīng)用于氣相色譜。1957基于離子交換色譜的氨基酸分析專用儀器問世。1958Golay發(fā)明毛細(xì)管柱氣相色譜。1959Porath,Flodin發(fā)表凝膠過濾色譜的報(bào)告。1964Moore發(fā)明凝膠滲透色譜。1965Giddings發(fā)展了色譜理論，為色譜學(xué)的發(fā)展奠定了理論基礎(chǔ)。1975Small發(fā)明了以離子交換劑為固定相、強(qiáng)電解質(zhì)為流動(dòng)相，采用抑制型電導(dǎo)檢測的新型離子色譜法。1981Jorgenson等創(chuàng)立了毛細(xì)管電泳法。任務(wù)資訊

色譜法分類以氣體為流動(dòng)相氣相色譜法(GC)氣固色譜法(GSC)氣液色譜法(GLC)以固體為固定相以液體為固定相以液體為流動(dòng)相液相色譜法(LC)液固色譜法(LSC)液液色譜法(LLC)以固體為固定相以液體為固定相？1.按兩相狀態(tài)分任務(wù)資訊

色譜法分類固定相均為液體分配色譜：據(jù)不同組分在固定液中溶解度大小而分離氣液色譜法液液色譜法固定相均為固體吸附色譜：據(jù)不同組分在吸附劑上的吸附和解析能力大小而分離氣固色譜法液固色譜法2.按分離原理分任務(wù)資訊色譜法分類3.按固定相形式分柱色譜：填充柱色譜開管柱色譜（毛細(xì)管柱色譜）平板色譜：紙色譜薄層色譜離子交換色譜：利用離子交換劑與溶液中的離子之間發(fā)生交換反應(yīng)進(jìn)行分離的方法尺寸排阻色譜（凝膠色譜）：對高分子物質(zhì)有很高的分離效果鍵合相色譜任務(wù)資訊紙色譜是以濾紙為載體，固定相是濾紙纖維上吸附的水分；流動(dòng)相(通常稱為展開劑)一般是指與水相混溶的有機(jī)溶劑，樣品在固定相水與流動(dòng)相展開劑之間連續(xù)抽提，依靠溶質(zhì)在兩相間的分配系數(shù)不同而達(dá)到分離的目的。任務(wù)資訊任務(wù)資訊薄層色譜（1）適用于揮發(fā)性較小或在較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物質(zhì)（2）是柱色譜的先導(dǎo)（3）分類：吸附型（Al2O3、硅膠G等作吸附劑）分配型（硅藻土、纖維素等作支持劑）（4）定義：在洗滌干凈的玻板（15×3cm）上均勻地涂上一層吸附劑或支持劑，待干燥、活化后將樣品溶液用管口平整的毛細(xì)管滴加于離薄層板一端約1cm處的起點(diǎn)線上，晾干或吹干后，置薄層板于盛有展開劑的展開槽內(nèi)，浸入深度為0.5cm。待展開劑前沿離頂端約1cm附近時(shí)，將板取出，干燥后噴以顯色劑或在紫外燈下顯色或直接觀察。比移值Rf==任務(wù)資訊薄層層析硅膠薄層板點(diǎn)樣展開顯色任務(wù)資訊薄層色譜裝置圖任務(wù)資訊離子交換劑的種類強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂無機(jī)離子交換劑有機(jī)離子交換劑(離子交換樹脂)特種樹脂螯合樹脂大孔樹脂萃淋樹脂纖維素交換劑負(fù)載螯合劑樹脂陽離子交換樹脂陰離子交換樹脂弱酸性陽離子交換樹脂強(qiáng)堿性陰離子交換樹脂弱堿性陰離子交換樹脂R-SO3H樹脂,如國產(chǎn)732R-COOH,R-OH樹脂R4N+Cl-樹脂任務(wù)資訊凝膠色譜法原理任務(wù)資訊鍵合相色譜法：是由液－液色譜法即分配色譜發(fā)展起來的。鍵合相色譜法將固定相共價(jià)結(jié)合在載體顆粒上，克服了分配色譜中由于固定相在流動(dòng)中有微量溶解，及流動(dòng)相通過色譜柱時(shí)的機(jī)械沖擊，固定相不斷損失，色譜柱的性質(zhì)逐漸改變等缺點(diǎn)。鍵合相色譜法可分為正常相色譜法和反相色譜法。任務(wù)資訊如何使用氣相色譜儀？任務(wù)資訊認(rèn)識氣相色譜儀任務(wù)資訊問題：氣相色譜儀的基本組成？總結(jié)氣相色譜儀的基本組成及作用（共由六大系統(tǒng)組成）氣路系統(tǒng)。作用是提供連續(xù)運(yùn)行且具有穩(wěn)定流速與流量的載氣與其它輔助氣體。主要由鋼瓶、減壓閥、凈化器、穩(wěn)壓閥、穩(wěn)流閥等部件組成。進(jìn)樣系統(tǒng)。作用是將樣品定量引入色譜系統(tǒng)，并使樣品有效地氣化，然后用載氣將樣品快速“掃入”色譜柱。主要包括進(jìn)樣器和氣化室。分離系統(tǒng)。主要由柱箱和色譜柱組成，其中色譜柱是核心，主要作用是將多組分樣品分離為單一組分的樣品。任務(wù)資訊檢測系統(tǒng)。其作用是將經(jīng)色譜柱分離后順序流出的化學(xué)組分的信息轉(zhuǎn)變?yōu)楸阌谟涗浀碾娦盘?，然后對被分離物質(zhì)的組成和含量進(jìn)行鑒定和測量，是色譜儀的“眼睛”。主要有FID檢測器與TCD檢測器。數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。最基本的功能是將檢測器輸出的模擬信號隨時(shí)間的變化曲線，即將色譜圖繪制出來。目前使用較多的是色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)與色譜工作站。溫度控制系統(tǒng)。在氣相色譜測定中，溫度的控制（主要對色譜柱、氣化室與檢測器三處的溫度進(jìn)行控制）是重要的指標(biāo)，它直接影響柱的分離效能、檢測器的靈敏度和穩(wěn)定性?？偨Y(jié)氣相色譜儀的基本組成（續(xù)）任務(wù)資訊程序升溫恒溫氣化室溫度比柱溫高10~50℃檢測器溫度與柱溫相同或略高于柱溫；☆當(dāng)被分析組分的沸點(diǎn)范圍很寬時(shí)，用同一柱溫往往造成低沸點(diǎn)組分分離不好，而高沸點(diǎn)組分峰形扁平，此時(shí)采用程序升溫的辦法就能使高沸點(diǎn)及低沸點(diǎn)組分都能獲得滿意結(jié)果?！钏^程序升溫就是指在一個(gè)分析周期里，色譜柱的溫度連續(xù)的隨分析時(shí)間的增加從低溫升到高溫，升溫速率可為1～30℃/min。☆采用程序升溫的方式可改善寬沸程樣品的分離度并縮短分析時(shí)間。問題：氣相色譜儀的分析流程？學(xué)生討論、總結(jié)（動(dòng)畫：儀器分析流程）打開流動(dòng)相氣體(載氣)開機(jī)，設(shè)置參數(shù)進(jìn)樣分析信號記錄顯示任務(wù)資訊

熱導(dǎo)檢測器（TCD）是利用被測組分和載氣的導(dǎo)熱系數(shù)不同而響應(yīng)的濃度型檢測器工作原理散熱差異兩臂電阻值差異電橋失去平衡信號輸出輸出的電壓信號與樣品的濃度或正比載氣參比池試樣測量池

TCD的結(jié)構(gòu)和工作原理熱導(dǎo)池外觀動(dòng)畫熱導(dǎo)檢測器工作原理.swf任務(wù)資訊設(shè)置氣化室溫度、柱溫和檢測室溫度打開鋼瓶總壓并調(diào)節(jié)減壓閥調(diào)節(jié)載氣柱前壓打開色譜電源開關(guān)設(shè)置橋流待基線穩(wěn)定即可進(jìn)樣開機(jī)步驟關(guān)機(jī)步驟設(shè)置橋流為零設(shè)置氣化室溫度、柱溫和檢測室溫度為20℃待柱溫降至50℃以下關(guān)閉電源開關(guān)關(guān)閉柱前壓關(guān)閉鋼瓶總閥，旋松減壓閥

TCD操作實(shí)訓(xùn)動(dòng)畫熱導(dǎo)池檢測器的使用.swf任務(wù)資訊色譜圖是色譜輸出數(shù)據(jù)。如何“看”懂色譜圖？如何從色譜圖中獲取相應(yīng)檢測結(jié)果的信息？任務(wù)資訊色譜流出曲線常用術(shù)語色譜流出曲線圖保留值(定性分析參數(shù))死時(shí)間保留時(shí)間調(diào)整保留時(shí)間色譜流出曲線基線色譜峰選擇性因子相對保留值任務(wù)資訊色譜峰及相關(guān)術(shù)語峰寬w半峰寬w1/2

標(biāo)準(zhǔn)偏差峰面積A峰高h(yuǎn)區(qū)域?qū)挾榷繑?shù)據(jù)參數(shù)注：任務(wù)資訊分配系數(shù)KK值與固定相和溫度有關(guān)，K小的組分先流出柱，K大的組分后出柱。分配比k（分配容量比、容量因子）k值越大，保留時(shí)間越長。

β表示相比率，柱形特點(diǎn)參數(shù)。任務(wù)資訊任務(wù)資訊定性分析—保留值定量分析—峰高、峰面積定性分析的依據(jù)：保留值（tR或tR’）當(dāng)我們得到一張色譜圖，譜圖中有多個(gè)色譜峰，我們怎么能夠知道每個(gè)峰代表什么物質(zhì)呢，這就是定性。從色譜圖中我們可以知道每個(gè)色譜峰都有一個(gè)對應(yīng)的保留時(shí)間，就是說不同的物質(zhì)保留時(shí)間不同，之所以保留時(shí)間不同，主要是在于色譜柱的分離作用，由于不同物質(zhì)與色譜柱中固定相的作用不同，而從色譜柱中流出快慢的因素。因此我們可以利用保留時(shí)間進(jìn)行定性。定性分析任務(wù)資訊1.保留時(shí)間定性2.利用不同檢測方法定性3.保留指數(shù)定性4.柱前或柱后化學(xué)反應(yīng)定性5.與其他儀器聯(lián)用定性任務(wù)資訊定性分析方法1.保留時(shí)間定性在一定的色譜系統(tǒng)和操作條件下，每種物質(zhì)都有一定的保留時(shí)間，如果在相同色譜條件下，未知物的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)相同，則可初步認(rèn)為它們?yōu)橥晃镔|(zhì)。(見圖示)為了提高定性分析的可靠性，還可進(jìn)一步改變色譜條件(分離柱、流動(dòng)相、柱溫等)或在樣品中添加標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，如果被測物的保留時(shí)間仍然與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)一致，則可認(rèn)為它們?yōu)橥晃镔|(zhì)。任務(wù)資訊1.保留時(shí)間定性用已知純物質(zhì)與未知樣品對照比較進(jìn)行定性分析圖示a.甲醇峰；b.乙醇峰；c.正丙醇峰；d.正丁醇峰；e.正戊醇峰；1-9：未知物色譜峰任務(wù)資訊2.利用不同檢測方法定性同一樣品可以采用多種檢測方法檢測，如果待測組分和標(biāo)準(zhǔn)物在不同的檢測器上有相同的響應(yīng)行為，則可初步判斷兩者是同一種物質(zhì)。在液相色譜中，還可通過二極管陣列檢測器比較兩個(gè)峰的紫外或可見光譜圖。任務(wù)資訊3.保留指數(shù)定性在氣相色譜中，可以利用文獻(xiàn)中的保留指數(shù)數(shù)據(jù)定性。保留指數(shù)隨溫度的變化率還可用來判斷化合物的類型，因?yàn)椴煌愋突衔锏谋Ａ糁笖?shù)隨溫度的變化率不同。4.柱前或柱后化學(xué)反應(yīng)定性一般不采用5.與其他儀器聯(lián)用定性將具有定性能力的分析儀器如質(zhì)譜(MS)、紅外(IR)、原子吸收光譜(AAS)、原子發(fā)射光譜(AES，ICP-AES)等儀器作為色譜儀的檢測器即可獲得比較準(zhǔn)確的定性信息。任務(wù)資訊定量分析的依據(jù)：峰高h(yuǎn)，峰面積A色譜圖A或h樣品的量樣品的量m∝A或h校正因子任務(wù)資訊定量分析的依據(jù)：被測組分的量與檢測器的響應(yīng)值成正比，也就是與它在色譜圖上的峰面積或峰高成正比。

1.峰面積的計(jì)算2.定量校正因子3.定量計(jì)算方法任務(wù)資訊1.峰面積的計(jì)算(1)對稱峰：（2）不對稱峰：（3）色譜工作站：直接給出A、h、任務(wù)資訊引入定量校正因子的原因：我們知道，被測組分的量與它在色譜圖上的峰面積或峰高成正比。但是，相同量的兩種不同組分在同一檢測器(例如紫外檢測器)中的響應(yīng)值并不相同，也就是兩者的峰面積或峰高不相同。所以，兩者的峰面積或峰高之比并不等于兩者的含量之比。因此，需要引入定量校正因子，使峰面積或峰高經(jīng)過校正后，與其代表物質(zhì)的量相適應(yīng)。2.定量校正因子任務(wù)資訊定量校正因子的定義：進(jìn)入檢測器的組分的量(W)與其色譜峰面積(A)或峰高(h)之比為一比例常數(shù)f′,該比例常數(shù)f′就稱為該組分的絕對校正因子。W的單位校正因子名稱符號質(zhì)量(g)絕對質(zhì)量校正因子物質(zhì)的量(mol)絕對物質(zhì)的量的校正因子體積(L/mL)絕對體積校正因子任務(wù)資訊相對校正因子：由于化合物的絕對校正因子難以測定，它隨實(shí)驗(yàn)條件的變化而變化，故很少采用，實(shí)際工作中一般采用相對校正因子：某組分i與所選定的基準(zhǔn)物質(zhì)s的絕對定量校正因子之比。任務(wù)資訊獲得校正因子的方法：一是查文獻(xiàn)、手冊獲得；二是實(shí)驗(yàn)測定。因所用檢測器類型和色譜條件與文獻(xiàn)不同或者查不到，需自行測定。方法：一定量的待測物＋選定的基準(zhǔn)物→制成一定濃度的混合溶液進(jìn)樣，測得兩組分色譜峰面積Ai和As，由公式求得。注意事項(xiàng)：相對校正因子與待測物、基準(zhǔn)物和檢測器類型有關(guān)，與操作條件(進(jìn)樣量)無關(guān)。選取基準(zhǔn)物的原則：與待測物保留時(shí)間比較接近；TCD→苯，F(xiàn)ID→正庚烷。以氫氣和氦氣作載氣的校正因子可通用；以氮?dú)庾鬏d氣測的校正因子與兩者差別大。任務(wù)資訊請?jiān)O(shè)計(jì)甲苯對苯相對校正因子的測定步驟并測定準(zhǔn)確稱取色譜純（或已知準(zhǔn)確含量）的被測組分和基準(zhǔn)物質(zhì)，配制成已知準(zhǔn)確濃度的樣品，在已定的色譜實(shí)驗(yàn)條件下，取一定體積的樣品進(jìn)樣，準(zhǔn)確測量所得組分和基準(zhǔn)物質(zhì)的色譜峰峰面積，根據(jù)計(jì)算公式就可以計(jì)算出該組分的相對校正因子。測定方法配制已知準(zhǔn)確濃度的樣品用色譜分析根據(jù)公式計(jì)算相對校正因子的測定任務(wù)資訊（1）外標(biāo)法（2）內(nèi)標(biāo)法（3）面積歸一化法（4）標(biāo)準(zhǔn)加入法3.定量計(jì)算方法任務(wù)資訊外標(biāo)法提示：可以峰面積或峰高對組分濃度或體積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。在可見分光光度法、原子吸收分光光度法中我們大家都學(xué)習(xí)過“標(biāo)準(zhǔn)曲線法”的相應(yīng)知識與技能，我們先請一位同學(xué)起來簡述一下其相應(yīng)的測定過程。問題：能否將這種定量方法應(yīng)用于氣相色譜分析？比如測定乙醇中的微量水份。今天我們就一起來學(xué)習(xí)氣相色譜分析中的“標(biāo)準(zhǔn)曲線法”，即外標(biāo)法。任務(wù)資訊問題：能否配制相同濃度的標(biāo)樣，以不同體積進(jìn)樣，繪制A（h）～V曲線？標(biāo)準(zhǔn)曲線法也稱外標(biāo)法或直接比較法，它與可見分光光度法、原子吸收分光光度法中所學(xué)習(xí)過“標(biāo)準(zhǔn)曲線法”完全類似。外標(biāo)工作曲線的繪制用標(biāo)準(zhǔn)樣品配制成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)系列，在與待測組分相同的色譜條件下，等體積準(zhǔn)確進(jìn)樣，測量各峰的峰面積或峰高，用峰面積或峰高對樣品濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，此標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)通過原點(diǎn)。若標(biāo)準(zhǔn)曲線不通過原點(diǎn)，則說明存在系統(tǒng)誤差。標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率即為絕對校正因子任務(wù)資訊以待測組分純品為對照物，與試樣中待測組分的響應(yīng)信號相比較進(jìn)行定量的方法。特點(diǎn)：①不需要校正因子，不需要所有組分出峰；②結(jié)果受進(jìn)樣量、進(jìn)樣重復(fù)性和操作條件影響大。a.工作曲線法：純品→工作曲線，同體積樣品與之比較濃度c。前提是進(jìn)入檢測器樣品量與峰面積成正比:A=kc(理想)；A=b+kc(實(shí)際)。b.外標(biāo)一點(diǎn)法：一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度對比樣品中待測組分含量。前提是截距為0，對照品濃度與待測組分濃度接近c(diǎn).外標(biāo)二點(diǎn)法：用兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液代替標(biāo)準(zhǔn)系列。前提是選取兩點(diǎn)對照品的濃度，需涵蓋待測濃度。任務(wù)資訊mm標(biāo)m樣A樣A標(biāo)外標(biāo)一點(diǎn)法定量示意圖任務(wù)資訊查閱資料◆《儀器分析實(shí)驗(yàn)》中氣象色譜分析乙醇中少量水的測定◆GB/T603化學(xué)試劑◆GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法決策計(jì)劃決策計(jì)劃外標(biāo)工作曲線的繪制儀器開機(jī)，設(shè)置參數(shù)，調(diào)試。待儀器調(diào)試至基線平直后，進(jìn)樣繪制h～V工作曲線。標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制測定樣品溶液關(guān)機(jī)確定乙醇中少量水分的測定方法

質(zhì)檢員準(zhǔn)備檢測用儀器任務(wù)實(shí)施氣相色譜儀；GDX-102不銹鋼填充柱（柱長2m）；色譜工作站；微量注射器（1μL）一支/組；10mL比色管5支/組。質(zhì)檢員準(zhǔn)備檢測用試劑任務(wù)實(shí)施無水乙醇，在分析純試劑無水乙醇中，加入500℃加熱處理過的5A分子篩，密封放置1天，以除去試劑中的微量水分；三級蒸餾水；乙醇中少量水分檢測任務(wù)實(shí)施配制標(biāo)準(zhǔn)系列溶液；2.開啟色譜儀和色譜工作站；3.設(shè)置儀器條件TCD檢測器，橋電流160mA；柱溫140℃；氣化室溫度150℃；檢測室溫度140℃；H2作載氣，流速30mL/min；進(jìn)樣量1μL。4.定量測定；有計(jì)算機(jī)調(diào)出色譜操作系統(tǒng)，按照要求進(jìn)行界面設(shè)定。極限穩(wěn)定后，依次注射標(biāo)準(zhǔn)樣品和待測樣品（重復(fù)進(jìn)樣3次），由工作站給出相應(yīng)組分的A或h。5.結(jié)束工作。依次關(guān)閉熱導(dǎo)池電流開關(guān)、操作系統(tǒng)恢復(fù)初始溫度，冷卻后關(guān)主機(jī)，關(guān)載氣。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后清洗注射器，清理臺面，填寫儀器使用記錄。6.根據(jù)標(biāo)樣濃度與相應(yīng)的峰面積繪制工作曲線；7.根據(jù)試樣中水的峰面積在標(biāo)準(zhǔn)曲線中查出乙醇試樣中水的濃度（mg/mL），并寫出檢測報(bào)告?！鰞x器規(guī)范使用方面■數(shù)據(jù)記錄、計(jì)算方面■結(jié)果準(zhǔn)確度、精密度方面■誤差原因分析檢查與評價(jià)前提是試樣中所有組分都產(chǎn)生信號并能檢出色譜峰；依據(jù)是組分含量與峰面積成正比。優(yōu)點(diǎn)：簡便，準(zhǔn)確，色譜條件略有變化對結(jié)果幾乎無影響，定量結(jié)果與進(jìn)樣量、重復(fù)性無關(guān)。缺點(diǎn)：必須已知所有組分的校正因子，不適合微量組分的測定。歸一化法測丁醇異構(gòu)體(動(dòng)畫)面積歸一化法：任務(wù)引領(lǐng)下的知識拓展與深化

AB

CD

請仔細(xì)觀察右面的4個(gè)色譜分離圖，并指出其中哪一個(gè)分離效果最佳？說出你的理由。從色譜圖上觀察，你認(rèn)為相鄰譜峰分離效果的優(yōu)劣與哪些因素有關(guān)？保留值差值峰寬任務(wù)引領(lǐng)下的知識拓展與深化

問題：如何進(jìn)行分離條件的選擇與優(yōu)化？討論（可從下列2個(gè)方面入手）兩相鄰色譜峰的距離，越大則分離越好；色譜峰的峰形，越尖銳或?qū)ΨQ則分離越好。

總結(jié)2種情況的核心基于保留時(shí)間的差值；基于色譜峰的峰寬與對稱度。

任務(wù)引領(lǐng)下的知識拓展與深化

分離度R是色譜柱總分離效能指標(biāo)。分離度RR值越大，兩相鄰組分分離越完全；R=1.5，兩相鄰組分分離程度99.7%；R=1，兩相鄰組分分離程度98%；R＜1，兩相鄰色譜峰有明顯重疊；通常用R≥1.5作為相鄰兩峰完全分離的指標(biāo)。任務(wù)引領(lǐng)下的知識拓展與深化

保留值差值——色譜熱力學(xué)因素影響分離度R的主要因素峰寬——色譜動(dòng)力學(xué)因素反映了試樣中各組分在色譜柱中的運(yùn)動(dòng)況；與各組分在兩相間的傳質(zhì)阻力有關(guān)。速率理論任務(wù)引領(lǐng)下的知識拓展與深化

塔板理論反映了試樣中各組分在兩相間的分配情況；與各組分在兩相間的分配系數(shù)有關(guān)；與各物質(zhì)(組分、固定相、流動(dòng)相)的分子結(jié)構(gòu)與性質(zhì)有關(guān)。

塔板理論的假設(shè)：(1)在每一個(gè)平衡過程間隔內(nèi)，平衡可以迅速達(dá)到；(2)將載氣看作成脈動(dòng)（間歇）過程；(3)試樣沿色譜柱方向的擴(kuò)散可忽略；(4)每次分配的分配系數(shù)相同。半經(jīng)驗(yàn)理論；將色譜分離過程比擬作蒸餾過程，將連續(xù)的色譜分離過程分割成多次的平衡過程的重復(fù)（類似于蒸餾塔塔板上的平衡過程）；

塔板理論-柱分離效能指標(biāo)任務(wù)引領(lǐng)下的知識拓展與深化

色譜柱長：L，虛擬的塔板間距離：H，色譜柱的理論塔板數(shù)：n，則三者的關(guān)系為：

n=L/H理論塔板數(shù)與色譜參數(shù)之間的關(guān)系為：保留時(shí)間包含死時(shí)間，在死時(shí)間內(nèi)不參與分配!任務(wù)引領(lǐng)下的知識拓展與深化

有效塔板數(shù)和有效塔板高度

單位柱長的塔板數(shù)越多，表明柱效越高。用不同物質(zhì)計(jì)算可得到不同的理論塔板數(shù)。組分在tM時(shí)間內(nèi)不參與柱內(nèi)分配。需引入有效塔板數(shù)和有效塔板高度：任務(wù)引領(lǐng)下的知識拓展與深化

塔板理論的特點(diǎn)和不足(1)當(dāng)色譜柱長度一定時(shí)，塔板數(shù)n越大(塔板高度H越小)，被測組分在柱內(nèi)被分配的次數(shù)越多，柱效能則越高，所得色譜峰越窄。

(2)不同物質(zhì)在同一色譜柱上的分配系數(shù)不同，用有效塔板數(shù)和有效塔板高度作為衡量柱效能的指標(biāo)時(shí)，應(yīng)指明測定物質(zhì)。(3)柱效不能表示被分離組分的實(shí)際分離效果，當(dāng)兩組分的分配系數(shù)K相同時(shí)，無論該色譜柱的塔板數(shù)多大，都無法分離。(4)塔板理論無法解釋同一色譜柱在不同的載氣流速下柱效不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，也無法指出影響柱效的因素及提高柱效的途徑。任務(wù)引領(lǐng)下的知識拓展與深化

速率理論色譜峰在分離過程中為什么會擴(kuò)展？A渦流擴(kuò)散(固定相)B分子擴(kuò)散（流動(dòng)相）C傳質(zhì)阻力（兩相間的相對運(yùn)動(dòng)）范第姆特方程：任務(wù)引領(lǐng)下的知識拓展與深化

渦流擴(kuò)散（動(dòng)畫渦流擴(kuò)散過程.swf）A=2λdp

dp：固定相的平均顆粒直徑；λ：固定相的填充不均勻因子。

固定相顆粒越小dp↓，填充的越均勻，A↓，H↓，柱效n↑，則渦流擴(kuò)散所引起的色譜峰變寬現(xiàn)象減輕，色譜峰變窄。任務(wù)引領(lǐng)下的知識拓展與深化

分子擴(kuò)散（動(dòng)畫分子擴(kuò)散過程.swf）B