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文檔簡介
課前自主預習案4動物細胞工程素能目標★考向?qū)Ш交A梳理——系統(tǒng)化知識點一動物細胞培養(yǎng)1.原理:。2.培養(yǎng)條件(1)營養(yǎng):糖類、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等,還需加入等一些天然成分,一般使用液體培養(yǎng)基。(2)無菌、無毒的環(huán)境:對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行以及在無菌環(huán)境下進行操作,定期更換培養(yǎng)液以清除代謝物。(3)適宜的溫度、pH和滲透壓:溫度為(哺乳動物),pH為。(4)氣體環(huán)境:含95%空氣和的混合氣體。特別提醒動物細胞培養(yǎng)時加入CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH,O2的作用是促進細胞的有氧呼吸。3.基本過程4.生長特點(1)細胞貼壁:將細胞懸液放入培養(yǎng)瓶內(nèi),置于適宜環(huán)境中培養(yǎng),懸液中分散的細胞很快就上,稱為細胞貼壁。(2)接觸抑制:當貼壁細胞分裂生長到表面時,細胞通常會的現(xiàn)象稱為細胞的接觸抑制。5.原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)(1)原代培養(yǎng):通常指的細胞培養(yǎng),即動物組織經(jīng)處理后的。(2)傳代培養(yǎng):指的細胞培養(yǎng)。6.干細胞培養(yǎng)及其應用種類胚胎干細胞成體干細胞誘導多能干細胞來源骨髓、臍帶血等體細胞(如成纖維細胞等)特點能分化成任何一種細胞、組織或器官,甚至成為分化成能誘導分化成類似的細胞應用分化成心肌細胞、神經(jīng)元和造血干細胞等造血干細胞用于治療白血病,神經(jīng)干細胞用于治療帕金森病、阿爾茨海默病等治療鐮狀細胞貧血、阿爾茨海默病、心血管疾病等知識點二動物細胞融合技術與單克隆抗體一、動物細胞融合技術1.概念:使個動物細胞結合形成的技術。2.結果:形成細胞,且具有原來兩個或多個細胞的。3.誘導方法:融合法、融合法和法等。4.意義:突破了的局限,使遠緣雜交成為可能。5.應用:(1)是研究細胞遺傳、、腫瘤和培育等的重要手段。(2)雜交瘤技術為制造開辟了新途徑。二、單克隆抗體及其應用1.單克隆抗體的制備(1)制備原理:①B淋巴細胞特點:一種B淋巴細胞只分泌種特異性抗體。②骨髓瘤細胞特點:能在體外。③雜交瘤細胞的特點:既能,又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的。(2)制備過程2.單克隆抗體的應用(1)作,在多種疾病的診斷和鑒定中發(fā)揮重要作用。(2)用于運載藥物和。輕巧記憶單克隆抗體制備的“三個新”①新融合方法(與誘導植物體雜交相比):滅活病毒誘導法。②新細胞:雜交瘤細胞。③新產(chǎn)物:單克隆抗體。知識點三動物體細胞核移植技術和克隆動物1.動物細胞核移植技術的概念和類型(1)動物細胞核移植技術的概念分析①供體:動物一個細胞的;②受體:去掉細胞核的;③結果:重新組合的細胞發(fā)育成,繼而發(fā)育成動物個體。(2)哺乳動物核移植類型:細胞核移植和體細胞核移植。2.體細胞核移植的過程3.體細胞核移植技術的應用前景(1)在畜牧生產(chǎn)中,可以加速家畜進程、促進優(yōu)良畜群。(2)在醫(yī)藥衛(wèi)生領域:①生物產(chǎn)品:培育轉(zhuǎn)基因克隆動物作為,生產(chǎn)。②器官移植:轉(zhuǎn)基因克隆動物的細胞、組織或器官可以作為的供體;以患者作為培育的人核移植,經(jīng)過誘導分化形成相應的細胞、組織或器官,將它們移植給患者時可以避免反應。③科學研究:研究克隆動物,深入了解及衰老過程;克隆一批遺傳背景相同的動物,對比分析;克隆特定疾病模型的動物,為研究和開發(fā)相應的藥物提供幫助。(3)在保護瀕危物種方面,有望增加瀕危物種的。4.體細胞核移植技術存在的問題(1)體細胞核移植技術的成功率。(2)克隆動物存在健康問題,表現(xiàn)出缺陷等。特別提醒動物體細胞核移植技術(克?。纳撤绞降慕嵌瓤磳儆跓o性生殖。重組細胞相當于受精卵,需要動物細胞培養(yǎng)和胚胎工程技術的支持?;苓^關——問題化一、判一判(判斷正誤并找到課本原話)(一)動物細胞培養(yǎng)1.動物細胞雜交是動物細胞工程的基礎。(選擇性必修3P43正文)()2.動物細胞培養(yǎng)過程中需將動物細胞放于含95%氧氣和5%CO2的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。(選擇性必修3P44正文)()3.體外培養(yǎng)的動物細胞一類能懸浮在培養(yǎng)液中生長增殖,另一類需要貼附于某些基質(zhì)表面才能生長增殖。(選擇性必修3P44正文)()4.干細胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中。(選擇性必修3P46正文)()5.iPS細胞的應用前景優(yōu)于胚胎干細胞。(選擇性必修3P46正文)()(二)動物細胞融合技術與單克隆抗體1.細胞融合技術突破了有性雜交的局限,使遠緣雜交成為可能。(選擇性必修3P48正文)()2.早期制備的抗體產(chǎn)量高,純度低,特異性差。(選擇性必修3P49正文)()3.多種B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合篩選后,還需經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測,才能獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細胞。(選擇性必修3P49圖2-16)()4.抗體—藥物偶聯(lián)物(ADC)通常由抗體、接頭、藥物(如細胞毒素)三部分組成。(選擇性必修3P50思考·討論)()5.單克隆抗體能準確地識別抗原的細微差異,與特定的抗原發(fā)生特異性結合,并且可以大量制備。(選擇性必修3P50正文)()(三)動物體細胞核移植技術和克隆動物1.動物體細胞核移植的難度明顯高于胚胎細胞核移植。(選擇性必修3P52正文)()2.核移植所用的牛卵母細胞需在體外培養(yǎng)到MⅡ期。(選擇性必修3P53圖2-18)()3.重構胚的激活可用Ca2+載體、蛋白酶合成抑制劑等。(選擇性必修3P53圖2-18)()4.重構胚是天然形成的胚胎,具有發(fā)育成完整個體的能力。(選擇性必修3P53相關信息)()5.體細胞核移植技術成功率非常高,各個環(huán)節(jié)也相對完善。(選擇性必修3P54正文)()二、議一議【教材易漏拾遺】1.[選擇性必修3P44正文拓展]動物細胞培養(yǎng)時,為什么要將動物組織分散成單個細胞?2.[選擇性必修3P44正文拓展]動物細胞培養(yǎng)需要控制怎樣的氣體環(huán)境?各自起什么作用?3.[選擇性必修3P44正文拓展]動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)一樣可以獲得完整個體嗎?4.[選擇性必修3P48正文]動物細胞融合特有的融合方法是什么?5.[選擇性必修3P49圖2-16拓展]B淋巴細胞、骨髓瘤細胞和雜交瘤細胞各有何特點?6.[選擇性必修3P50思考·討論拓展]抗體—藥物偶聯(lián)物中真正起治療作用的物質(zhì)是什么?是單克隆抗體嗎?7.[選擇性必修3P49圖2-16]讀圖回答下列問題:(1)制備單克隆抗體時,不直接用經(jīng)過免疫的B淋巴細胞來獲得單克隆抗體的原因是什么?(2)選擇雜交瘤細胞過程中兩步篩選的目的各是什么?8.[選擇性必修3P50“思考·討論”]抗體—藥物偶聯(lián)物(antibody—drugconjugates,ADC)通過將細胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結合,實現(xiàn)了對腫瘤細胞的選擇性殺傷。ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細胞毒素)三部分組成,它的作用機制如下圖所示。據(jù)此回答下列問題:(1)ADC的抗體和藥物各具有什么作用?(2)除了細胞毒素,還有哪些物質(zhì)理論上可以作為ADC偶聯(lián)的藥物?(3)ADC在臨床應用上的作用機理是什么?9.[選擇性必修3P52正文拓展]克隆動物的誕生是否證明了動物細胞具有全能性?10.[選擇性必修3P53圖2-18拓展]動物體細胞核移植屬于有性生殖還是無性生殖?并分析原因。課前自主預習案4基礎梳理——系統(tǒng)化【知識點一】1.細胞增殖2.(1)血清(2)滅菌處理(3)36.5±0.5℃7.2~7.4(4)5%CO23.胰蛋白酶細胞懸液原代培養(yǎng)胰蛋白酶4.(1)貼附在瓶壁(2)相互接觸停止分裂增殖5.(1)分瓶之前初次培養(yǎng)(2)分瓶后6.早期胚胎個體特定的細胞或組織胚胎干細胞【知識點二】一、1.兩個或多一個細胞2.雜交遺傳信息3.PEG電滅活病毒誘導4.有性雜交5.(1)細胞免疫生物新品種(2)單克隆抗體二、1.(1)一大量增殖大量增殖特定抗體(2)B淋巴細胞選擇培養(yǎng)雜交瘤細胞克隆化培養(yǎng)2.(1)診斷試劑病原體(2)治療疾病【知識點三】1.(1)細胞核卵母細胞新胚胎(2)胚胎2.MⅡ期去核卵母3.(1)遺傳改良繁育(2)生物反應器醫(yī)用蛋白異種移植供體胚胎干細胞免疫排斥胚胎發(fā)育致病基因致病機制(3)存活數(shù)量4.(1)非常低(2)遺傳和生理基能過關——問題化一、判一判(一)動物細胞培養(yǎng)1.×2.×3.√4.√5.√(二)動物細胞融合技術與單克隆抗體1.√2.×3.√4.√5.√(三)動物體細胞核移植技術和克隆動物1.√2.√3.√4.×5.×二、議一議1.提示:①保證細胞所需要的營養(yǎng)供應;②保證細胞內(nèi)有害代謝物的及時排出。2.提示:95%空氣加5%CO2;O2維持細胞代謝,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。3.提示:動物細胞培養(yǎng)時細胞只進行生長和增殖,不能得到完整個體,但是植物組織培養(yǎng)可以獲得完整個體。4.提示:與植物原生質(zhì)體融合相比,動物細胞融合特有的融合方法為用滅活的病毒進行誘導。5.提示:免疫的B淋巴細胞:能產(chǎn)生單一抗體,但不能無限增殖。骨髓瘤細胞:能無限增殖,不能產(chǎn)生抗體。雜交瘤細胞既能產(chǎn)生特定的抗體,又能在培養(yǎng)條件下進行無限增殖。6.提示:在抗體—藥物偶聯(lián)物中真正發(fā)揮治療作用的物質(zhì)是相關藥物,單克隆抗體所起的作用是將藥物定向帶到靶細胞所在位置,借助其導向作用,在原位殺死癌細胞,這樣既不損傷正常細胞,又減少了用藥劑量。7.提示:(1)用于獲得雜交瘤細胞的B淋巴細胞為漿細胞,是高度分化的動物細胞,培養(yǎng)時很難恢復分裂能力,不能進行無限增殖,難以獲得單克隆抗體。(2)第一步篩選的目的是獲得雜交瘤細胞。第二步篩選的目的是獲得能產(chǎn)生所需單一抗體的雜交瘤細胞。8.提示:(1)ADC的抗體和藥物具有的作
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