2024版新教材高考生物全程一輪總復(fù)習(xí)第十二單元生物技術(shù)與工程課堂互動(dòng)探究案6基因工程及生物技術(shù)的安全性與倫理問題學(xué)生用書

課堂互動(dòng)探究案6基因工程及生物技術(shù)的安全性與倫理問題考點(diǎn)一基因工程的概念及操作工具任務(wù)1完善基因工程的理論基礎(chǔ)任務(wù)2與DNA有關(guān)的酶的比較名稱作用部位作用底物作用結(jié)果限制酶DNA將DNA切成兩個(gè)片段DNA連接酶DNA片段將兩個(gè)DNA片段連接為一個(gè)DNA分子DNA聚合酶磷酸二酯鍵將單個(gè)脫氧核苷酸依次連接到DNA單鏈末端DNA酶DNA將DNA片段水解為單個(gè)脫氧核苷酸解旋酶堿基對(duì)之間的氫鍵將雙鏈DNA分子局部解旋為單鏈，形成兩條長鏈RNA聚合酶核糖核苷酸將單個(gè)核糖核苷酸依次連接到RNA單鏈末端任務(wù)3明確載體上標(biāo)記基因的標(biāo)記原理載體上的標(biāo)記基因一般是一些抗生素的抗性基因。目的基因要轉(zhuǎn)入的受體細(xì)胞沒有抵抗相關(guān)抗生素的能力。當(dāng)含有抗生素抗性基因的載體進(jìn)入受體細(xì)胞后，抗性基因在受體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，使受體細(xì)胞能夠抵抗相應(yīng)抗生素，所以在受體細(xì)胞的培養(yǎng)體系中加入該種抗生素就可以只保留轉(zhuǎn)入載體的受體細(xì)胞，原理如圖所示：1.基因載體與膜載體的區(qū)別基因工程中的載體是DNA分子，能將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞內(nèi)，它能在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在，并可對(duì)目的基因進(jìn)行大量復(fù)制；膜載體是蛋白質(zhì)，與細(xì)胞膜的通透性有關(guān)。2．正確認(rèn)識(shí)限制酶（1）限制酶是一類酶，而不是一種酶。（2）將一個(gè)基因從DNA分子上切割下來，需要切兩處，同時(shí)產(chǎn)生四個(gè)黏性末端或平末端。（3）不同DNA分子用同一種限制酶切割，產(chǎn)生的末端都相同，同一個(gè)DNA分子用不同的限制酶切割，產(chǎn)生的末端一般不相同。（4）限制酶切割位點(diǎn)應(yīng)位于標(biāo)記基因之外，不能破壞標(biāo)記基因，以便進(jìn)行檢測。（5）限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物中不存在該酶的識(shí)別序列或識(shí)別序列已經(jīng)被修飾。考向一基因工程操作工具的基礎(chǔ)考查1.用XhoⅠ和SalⅠ兩種限制性內(nèi)切核酸酶分別處理同一DNA片段，酶切位點(diǎn)及酶切產(chǎn)物分離結(jié)果如圖。以下敘述錯(cuò)誤的是（）A．圖1中兩種酶識(shí)別的核苷酸序列不同B．圖2中酶切產(chǎn)物可用于構(gòu)建重組DNAC．泳道①中是用SalⅠ處理得到的酶切產(chǎn)物D．圖中被酶切的DNA片段是單鏈DNA2．[2023·江蘇省東臺(tái)中學(xué)高三檢測]“工欲善其事，必先利其器”。限制性內(nèi)切核酸酶、DNA連接酶的發(fā)現(xiàn)為DNA切割、連接、功能基因的獲得以及表達(dá)載體的構(gòu)建創(chuàng)造了條件，下列關(guān)于限制性內(nèi)切核酸酶和DNA連接酶的敘述，正確的是（）A．兩者都是從原核生物中分離純化出來的B．兩者的催化都會(huì)導(dǎo)致磷酸二酯鍵數(shù)目的改變C．限制性內(nèi)切核酸酶都能在特定位點(diǎn)切割產(chǎn)生黏性末端D．T4DNA連接酶只能連接雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端3．下列關(guān)于載體的敘述中，錯(cuò)誤的是（）A．載體與目的基因結(jié)合后，實(shí)質(zhì)上就是一個(gè)重組DNA分子B．對(duì)某種限制酶而言，載體最好只有一個(gè)切點(diǎn)，但還要有其他多種酶的切點(diǎn)C．目前常用的載體有質(zhì)粒、λ噬菌體的衍生物和動(dòng)植物病毒D．載體具有某些標(biāo)記基因，便于對(duì)其進(jìn)行切割4．近年誕生的CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)可進(jìn)行基因定點(diǎn)編輯。CRISPR/Cas9系統(tǒng)主要包括Cas9（限制性內(nèi)切核酸酶）和向?qū)NA，其原理是由向?qū)NA引導(dǎo)Cas9到一個(gè)特定的基因位點(diǎn)進(jìn)行切割（上述過程見下圖）。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．CRISPR/Cas9的組成物質(zhì)是在核糖體上合成的B.向?qū)NA的合成需要逆轉(zhuǎn)錄酶的參與C．基因的定點(diǎn)編輯過程只涉及堿基A—U，G—C的互補(bǔ)配對(duì)D．切割后形成的每個(gè)DNA片段均含有兩個(gè)游離的磷酸基團(tuán)考向二基因工程操作工具的綜合考查5.[2023·湖北高三模擬]大米的鐵含量極低，科研人員通過基因工程、植物組織培養(yǎng)等現(xiàn)代生物技術(shù)，培育出了鐵含量比普通大米高60%的轉(zhuǎn)基因水稻，改良了稻米的營養(yǎng)品質(zhì)。下圖為培育轉(zhuǎn)基因水稻過程示意圖，其中①～⑥為過程，EcoRⅠ、HindⅢ、BamHⅠ為限制酶。（1）該轉(zhuǎn)基因水稻培育過程中選取目的基因用到的限制酶是。這么操作的優(yōu)點(diǎn)是。（回答3點(diǎn)）（2）PCR是獲取大量目的基因的一種方法，反應(yīng)體系的成分中有兩種引物，對(duì)兩種引物的設(shè)計(jì)要求之一是：兩種引物之間不能堿基互補(bǔ)配對(duì)，試分析原因；下圖展示了用PCR技術(shù)從DNA分子中獲取鐵合蛋白基因的過程，A、B、C、D是四種引物，選擇圖中的引物通過PCR三次循環(huán)就可將鐵合蛋白基因分離出來。（3）圖中④⑤⑥過程，屬于技術(shù)，制備的培養(yǎng)基是由無機(jī)營養(yǎng)成分、有機(jī)營養(yǎng)成分、四部分組成?？键c(diǎn)二基因工程的基本操作程序及應(yīng)用任務(wù)1結(jié)合抗蟲棉的培育過程圖填空（1）從圖中可以看出，目的基因是，使用的載體是，將目的基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法是。（2）請寫出兩種檢測目的基因是否表達(dá)的方法：。任務(wù)2觀察基因工程的操作過程，分析每一步驟的操作程序（1）eq\x(\a\al(目的基因的,篩選與獲取))—eq\b\lc\{(\a\vs4\al\co1(①利用獲取和擴(kuò)增,②通過化學(xué)方法,③從中獲取))↓（2）eq\x(基因表達(dá)載體的構(gòu)建)—組成eq\b\lc\{(\a\vs4\al\co1(①目的基因,②,③終止子,④))↓（3）eq\x(將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞)—方法eq\b\lc\{(\a\vs4\al\co1(①植物：、,基因槍法、,②動(dòng)物：技術(shù),③微生物：感受態(tài)細(xì)胞法))↓（4）eq\x(目的基因的檢測與鑒定)eq\b\lc\{(\a\vs4\al\co1(①利用技術(shù)檢測目的,基因的有無,②利用技術(shù)檢測目的基因的轉(zhuǎn)錄,③利用技術(shù)檢測目的,基因的翻譯,④利用的鑒定檢測重,組性狀的表達(dá)))任務(wù)3目的基因的檢測和鑒定任務(wù)4完善基因工程的應(yīng)用技術(shù)名稱應(yīng)用植物基因工程培育轉(zhuǎn)基因抗蟲植物、轉(zhuǎn)基因抗病植物和轉(zhuǎn)基因植物，利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)動(dòng)物基因工程提高動(dòng)物生長速率，改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)，用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)，用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作的供體基因治療把導(dǎo)入病人體內(nèi)，使其表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮作用，從而治療疾病，分為體內(nèi)基因治療和體外基因治療任務(wù)5獲取目的基因1.基因工程操作的四個(gè)易錯(cuò)點(diǎn)（1）目的基因的插入位點(diǎn)不是隨意的，基因表達(dá)需要啟動(dòng)子與終止子的調(diào)控，所以目的基因應(yīng)插入啟動(dòng)子與終止子之間的部位。（2）基因工程操作過程中只有第三步（將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞）沒有堿基互補(bǔ)配對(duì)現(xiàn)象。（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法原理：農(nóng)桿菌易感染雙子葉或裸子植物的細(xì)胞，并將其Ti質(zhì)粒上的T-DNA轉(zhuǎn)移并整合到受體細(xì)胞染色體DNA上。（4）啟動(dòng)子≠起始密碼子，終止子≠終止密碼子啟動(dòng)子和終止子位于DNA片段上，分別控制轉(zhuǎn)錄過程的啟動(dòng)和終止；起始密碼子和終止密碼子位于mRNA上，分別控制翻譯過程的啟動(dòng)和終止。2．限制酶的選擇技巧（1）根據(jù)目的基因兩端的限制酶切點(diǎn)來確定限制酶的種類①應(yīng)選擇切點(diǎn)位于目的基因兩端的限制酶，如圖甲可選擇PstⅠ。②不能選擇切點(diǎn)位于目的基因內(nèi)部的限制酶，如圖甲不能選擇SmaⅠ。③為避免目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化和隨意連接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，如圖甲也可選擇用PstⅠ和EcoRⅠ兩種限制酶（但要確保質(zhì)粒上也有這兩種酶的切點(diǎn)）。（2）根據(jù)質(zhì)粒的特點(diǎn)來確定限制酶的種類①所選限制酶要與切割目的基因的限制酶一致，以確保產(chǎn)生相同的黏性末端。②質(zhì)粒作為載體必須具備標(biāo)記基因等，所以所選擇的限制酶盡量不要破壞這些結(jié)構(gòu)，如圖乙中限制酶SmaⅠ會(huì)破壞標(biāo)記基因。如果所選酶的切點(diǎn)不止一個(gè)，則切割重組后可能會(huì)丟失某些片段，若丟失的片段含復(fù)制原點(diǎn)，則切割重組后的片段進(jìn)入受體細(xì)胞后將不能自主復(fù)制。考向一對(duì)基因工程的操作程序的考查1．[經(jīng)典模擬]如圖表示用化學(xué)方法合成目的基因Ⅰ的過程。據(jù)圖分析，下列敘述正確的是（）A．過程①需要DNA連接酶B．過程②需要限制性內(nèi)切核酸酶C．目的基因Ⅰ的堿基序列是已知的D．若某質(zhì)粒能與目的基因Ⅰ重組，則該質(zhì)粒和目的基因Ⅰ的堿基序列相同2.甲基對(duì)硫磷是常見的農(nóng)藥污染物。科研人員嘗試改造并分離得到能夠降解甲基對(duì)硫磷的微生物。下列操作中錯(cuò)誤的是（）A．構(gòu)建含有甲基對(duì)硫磷分解酶基因的表達(dá)載體B．將甲基對(duì)硫磷分解酶基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體菌C.用甲基對(duì)硫磷為唯一碳源的培養(yǎng)基選擇所需工程菌D．提取工程菌的質(zhì)粒并檢測甲基對(duì)硫磷基因的含量考向二基因工程的綜合考查3．[2023·重慶市江津中學(xué)高三模擬]黃萎病是危害棉花種植的常見疾病，科學(xué)家通過基因工程技術(shù)將抗黃萎病基因——葡萄糖氧化酶基因（GO）導(dǎo)入棉花，獲得抗黃萎病棉花。已知T-DNA上的基因在農(nóng)桿菌中不表達(dá)，在植物細(xì)胞中可以表達(dá)，請將轉(zhuǎn)基因棉花培育步驟補(bǔ)充完整：（1）構(gòu)建上圖所示重組Ti質(zhì)粒，用處理農(nóng)桿菌，使重組Ti質(zhì)粒進(jìn)入農(nóng)桿菌中，將農(nóng)桿菌接種到含的LB液體培養(yǎng)基中振蕩培養(yǎng)。培養(yǎng)適宜時(shí)間后，離心，去除上清液，加入適量MS液體培養(yǎng)基，可通過測定菌液在600nm波長處的OD值來確定農(nóng)桿菌密度是否適宜。（2）切取經(jīng)培養(yǎng)的棉花幼苗的下胚軸，直接轉(zhuǎn)入菌液中侵染5～10min后，倒出菌液，用滅菌濾紙吸取下胚軸表面多余菌液，將下胚軸放入愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)2天。2天后，向培養(yǎng)基中加入適量和青霉素，其目的是篩選出轉(zhuǎn)化成功的棉花細(xì)胞和。（3）將所得愈傷組織接種到適宜培養(yǎng)基中培養(yǎng)，誘導(dǎo)形成胚狀體，在適宜人工條件下繼續(xù)發(fā)育成棉花幼苗。利用技術(shù)檢測棉花細(xì)胞是否合成，選出抗黃萎病棉花。通過可以從個(gè)體水平上鑒定該棉花對(duì)黃萎病的抗性?？键c(diǎn)三DNA的粗提取與鑒定及PCR技術(shù)任務(wù)1完善實(shí)驗(yàn)原理（1）DNA與蛋白質(zhì)在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同溶解規(guī)律2mol/LNaCl溶液0.14mol/LNaCl溶液DNA蛋白質(zhì)NaCl溶液物質(zhì)的量濃度從2mol/L逐漸降低的過程中，溶解度逐漸部分發(fā)生鹽析沉淀（2）DNA不溶于，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精，利用這一原理可將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步分離。（3）DNA與二苯胺在沸水浴加熱，呈色。任務(wù)2實(shí)驗(yàn)步驟①稱取30g洋蔥，切碎，加入10mL研磨液，充分研磨。②漏斗中墊，將研磨液過濾到燒杯中，℃處理，取上清液。③在上清液中加入體積相等的、預(yù)冷的溶液，靜置2～3min，用玻璃棒沿同一方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸去水分。④取兩支20mL的試管編號(hào)A、B，各加入2mol/L的溶液5mL，將絲狀物溶于B試管的NaCl溶液中。然后向兩支試管中各加入4mL的?；靹蚝?，將試管置于中加熱5min。⑤結(jié)果觀察：A試管，B試管。任務(wù)3通過PCR技術(shù)（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）擴(kuò)增DNA片段（1）PCR原理：在一定的緩沖溶液中提供，分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種，四種脫氧核苷酸，耐高溫的，同時(shí)控制溫度使DNA復(fù)制在體外反復(fù)進(jìn)行。（2）PCR的反應(yīng)過程①：當(dāng)溫度上升到以上時(shí)，雙鏈DNA解聚為單鏈，如下圖：②：系統(tǒng)溫度下降至左右時(shí)，兩種通過堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合，如下圖：③：當(dāng)系統(tǒng)溫度上升至72℃左右，溶液中的四種脫氧核苷酸（A、T、G、C）在的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA鏈，如下圖：（3）結(jié)果①PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)可以分為、復(fù)性和三步。②兩引物間固定長度的DNA序列呈擴(kuò)增（即）。1.DNA粗提取過程中的注意事項(xiàng)（1）破碎細(xì)胞應(yīng)徹底、充分。（2）酒精必須經(jīng)過充分預(yù)冷后才能使用。（3）實(shí)驗(yàn)過程中，攪拌時(shí)玻璃不能直插燒杯底部，并且攪拌要輕緩，并沿一個(gè)方向攪拌以便獲得完整的DNA分子。（4）將絲狀物溶于2mol/L的NaCl溶液中時(shí)，需要不斷攪拌以增加溶解的DNA的量。（5）二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用，否則會(huì)影響鑒定的效果。2．瓊脂糖凝膠電泳注意事項(xiàng)（1）為避免外源DNA等的影響，實(shí)驗(yàn)中的微量離心管、一次性吸液槍頭和蒸餾水等使用前必須進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理。（2）緩沖液和酶應(yīng)分裝成小份，并在－20℃儲(chǔ)存。使用前，放在冰塊上緩慢融化。（3）移液器每吸取一種試劑后，都必須更換槍頭。（4）操作時(shí)，戴好一次性手套。3．PCR與DNA復(fù)制的比較（1）DNA復(fù)制與PCR技術(shù)的區(qū)別①解旋方式：DNA復(fù)制是解旋酶催化；PCR技術(shù)是DNA在高溫作用下變性解旋。②場所：DNA復(fù)制在細(xì)胞內(nèi)（主要在細(xì)胞核內(nèi)）；PCR技術(shù)在細(xì)胞外（主要在PCR擴(kuò)增儀內(nèi)）。③酶：DNA復(fù)制需要DNA解旋酶、普通的DNA聚合酶等；PCR技術(shù)需要耐熱的DNA聚合酶。④溫度條件：DNA復(fù)制需要在細(xì)胞內(nèi)的溫度條件下進(jìn)行；PCR技術(shù)需控制溫度，在較高溫度下進(jìn)行。⑤合成的對(duì)象：DNA復(fù)制的合成對(duì)象是DNA分子；PCR技術(shù)合成的對(duì)象是DNA片段或基因。⑥引物：DNA復(fù)制的引物是RNA；PCR技術(shù)的引物是DNA或RNA。（2）DNA復(fù)制與PCR技術(shù)的聯(lián)系①模板：均需要脫氧核苷酸鏈作為模板進(jìn)行物質(zhì)合成。②原料：均為四種脫氧核苷酸。③酶：均需要DNA聚合酶進(jìn)行催化。考向一對(duì)DNA粗提取過程的考查1.圖1、2分別為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中部分操作步驟示意圖，下列敘述不正確的是（）A．圖1、2中加入蒸餾水稀釋的目的相同B．圖1中完成過濾之后保留濾液C．圖2中完成過濾之后棄去濾液D．在圖1雞血細(xì)胞液中加入少許嫩肉粉有助于去除雜質(zhì)2．下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)敘述，錯(cuò)誤的是（）A．酵母和菜花均可作為提取DNA的材料B．DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸餾水C．過濾時(shí)用濾紙代替紗布效果更好D．DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱，冷卻后變藍(lán)考向二對(duì)PCR技術(shù)的考查3.目前廣泛應(yīng)用的新型冠狀病毒檢測方法是實(shí)時(shí)熒光RT－PCR技術(shù)。RT－PCR是將RNA逆轉(zhuǎn)錄（RT）和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增反應(yīng)相結(jié)合的技術(shù)，具體過程如圖所示。下列說法錯(cuò)誤的是（）A．與該mRNA結(jié)合的引物，可以是A也可以是BB.引物A與引物B的基本單位都是脫氧核苷酸C．過程Ⅱ通過控制溫度的變化實(shí)現(xiàn)目標(biāo)序列的循環(huán)擴(kuò)增D．該反應(yīng)體系中應(yīng)加入逆轉(zhuǎn)錄酶、TaqDNA聚合酶等物質(zhì)4．熒光定量PCR技術(shù)可定量檢測樣本中某種DNA含量。其原理是在PCR體系中每加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)與某條模板鏈互補(bǔ)的熒光探針（探針是指以放射性同位素、生物素或熒光染料等進(jìn)行標(biāo)記的已知核苷酸序列的核酸片段），當(dāng)TaqDNA聚合酶催化子鏈延伸至探針處，會(huì)水解探針，使熒光監(jiān)測系統(tǒng)接收到熒光信號(hào)，即每擴(kuò)增一次，就有一個(gè)熒光分子生成。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．引物與探針均具特異性，與模板結(jié)合時(shí)遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則B．反應(yīng)最終的熒光強(qiáng)度與起始狀態(tài)模板DNA含量呈正相關(guān)C．若用cDNA（部分基因文庫）作模板，上述技術(shù)也可檢測某基因的轉(zhuǎn)錄水平D．TaqDNA聚合酶催化DNA的合成方向總是從子鏈的3′端向5′端延伸考向三PCR技術(shù)的應(yīng)用5.[2023·四省八校高三開學(xué)考試]用PCR技術(shù)將DNA分子中的A1片段進(jìn)行擴(kuò)增，實(shí)驗(yàn)中設(shè)計(jì)了引物Ⅰ、Ⅱ，其連接部位如圖所示，X為某限制酶的識(shí)別序列。擴(kuò)增后得到的絕大部分DNA片段是下圖中的（）6．SRY基因?yàn)閅染色體上的性別決定基因，可用SRY－PCR法鑒定胚胎性別，其基本程序如圖。相關(guān)說法正確的是（）eq\x(\a\al(提取少量胚胎,細(xì)胞DNA))eq\o(→,\s\up7(SRY基因引物))eq\x(\a\al(PCR,擴(kuò)增))→eq\x(\a\al(大量,DNA))→eq\x(\a\al(SRY探,針檢測))A．PCR擴(kuò)增的操作步驟依次是：高溫變性、中溫復(fù)性、低溫延伸B．上述過程需要使用的工具酶之一是RNA聚合酶C．PCR技術(shù)中以核糖核苷酸為原料，以指數(shù)方式擴(kuò)增D．SRY探針能與雄性胚胎樣品中DNA配對(duì)考點(diǎn)四蛋白質(zhì)工程、轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全性及生物武器任務(wù)1完善蛋白質(zhì)工程概念的相關(guān)填空蛋白質(zhì)工程具體內(nèi)容別稱第二代基因工程目標(biāo)獲得的蛋白質(zhì)原理由于基因決定蛋白質(zhì)，因此要對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造，必須從入手手段，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)關(guān)鍵技術(shù)基礎(chǔ)蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系結(jié)果改造了現(xiàn)有蛋白質(zhì)或制造出任務(wù)2完善轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全性的相關(guān)內(nèi)容（1）安全性問題①安全：滯后效應(yīng)、、營養(yǎng)成分改變等。②生物安全：對(duì)的影響等。③環(huán)境安全：對(duì)的影響等。（2）理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)①需要正確的社會(huì)輿論導(dǎo)向：，不能因噎廢食。②制定，最大程度保證轉(zhuǎn)基因技術(shù)和產(chǎn)品的安全性。任務(wù)3完善生物武器的相關(guān)內(nèi)容（生物武器的特點(diǎn)）①致病力強(qiáng)、；②污染面廣、危害時(shí)間長；③難以防治；④具有一定的；⑤受影響大。任務(wù)4蛋白質(zhì)工程與基因工程的區(qū)別和聯(lián)系項(xiàng)目蛋白質(zhì)工程基因工程區(qū)別過程預(yù)期蛋白質(zhì)的→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)→推測應(yīng)有的氨基酸→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸（基因）或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)的篩選與獲取→的構(gòu)建→將目的基因?qū)搿康幕虻膶?shí)質(zhì)定向改造或生產(chǎn)人類所需要的蛋白質(zhì)定向改造生物的遺傳特性，以獲得人類所需的生物類型或生物產(chǎn)品結(jié)果生產(chǎn)自然界中沒有的蛋白質(zhì)生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)聯(lián)系蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來的第二代基因工程，因?yàn)閷?duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)的改造或制造新的蛋白質(zhì)，都必須通過來實(shí)現(xiàn)任務(wù)5填寫蛋白質(zhì)工程流程圖中字母代表的含義A.，B.，C.，D.，E.。1.轉(zhuǎn)基因生物存在安全性問題的原因（1）目前對(duì)基因的結(jié)構(gòu)、調(diào)控機(jī)制及基因間的相互作用了解有限。（2）目的基因往往是異種生物的基因。（3）外源基因插入宿主細(xì)胞基因組的部位往往是隨機(jī)的。2．根據(jù)改造蛋白質(zhì)的部位的多少，對(duì)蛋白質(zhì)的改造可分為三類：（1）“大改”：設(shè)計(jì)并制造出自然界不存在的全新蛋白質(zhì)。（2）“中改”：在蛋白質(zhì)分子中替換某一個(gè)肽段或某一個(gè)特定的結(jié)構(gòu)域。（3）“小改”：改造蛋白質(zhì)分子中的幾個(gè)氨基酸殘基。考向一對(duì)蛋白質(zhì)工程的考查1.[2023·寧夏石嘴山三中高三月考]目前科學(xué)家們通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白、黃色熒光蛋白等。采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過程的正確順序是（）①推測藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)序列③藍(lán)色熒光蛋白基因的合成④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白A．①②③④ B．②①③④C．②③①④D．④②①③2．下圖表示蛋白質(zhì)工程的操作過程，相關(guān)說法不正確的是（）A．蛋白質(zhì)工程中對(duì)蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的了解是非常關(guān)鍵的工作B．蛋白質(zhì)工程是完全擺脫基因工程技術(shù)的一項(xiàng)全新的生物工程技術(shù)C．a(chǎn)、b過程分別是轉(zhuǎn)錄、翻譯D．蛋白質(zhì)工程中可能構(gòu)建出一種全新的基因考向二轉(zhuǎn)基因技術(shù)安全性的考查3.下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因生物安全性的敘述中，錯(cuò)誤的是（）A．我國已經(jīng)對(duì)轉(zhuǎn)基因食品和轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品強(qiáng)制實(shí)施了產(chǎn)品標(biāo)識(shí)制度B．國際上大多數(shù)國家都在轉(zhuǎn)基因食品標(biāo)簽上警示性注明可能的危害C．開展風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、預(yù)警跟蹤和風(fēng)險(xiǎn)管理是保障轉(zhuǎn)基因生物安全的前提D．目前對(duì)轉(zhuǎn)基因生物安全性的爭論主要集中在食用安全性和環(huán)境安全性上4．病毒疫苗的研制是現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用最廣泛的領(lǐng)域，現(xiàn)在研發(fā)的第二、三代病毒疫苗都基于DNA重組技術(shù)而建立。請分析并回答下列問題：（1）第二代疫苗是以編碼病毒抗原蛋白的RNA為模板，經(jīng)酶的作用而獲得目的基因，再利用這些工具酶來構(gòu)建重組質(zhì)粒。形成的重組質(zhì)粒與經(jīng)過處理的大腸桿菌細(xì)胞混合可轉(zhuǎn)化大腸桿菌，再擴(kuò)增大腸桿菌以獲得大量的抗原蛋白。（2）在構(gòu)建好的重組質(zhì)粒中，引導(dǎo)目的基因表達(dá)的序列是，它是的識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)。（3）第三代疫苗即“DNA疫苗”，是將編碼某種抗原蛋白的DNA注射到動(dòng)物體內(nèi)，該DNA可在生物體內(nèi)出相應(yīng)的抗原蛋白。（4）現(xiàn)代對(duì)于基因工程產(chǎn)品安全性的爭論越來越激烈，轉(zhuǎn)基因生物的安全性主要體現(xiàn)在、、三個(gè)方面。[網(wǎng)絡(luò)建構(gòu)提升][長句應(yīng)答必備]1．限制酶具有特異性，即一種限制酶只能識(shí)別特定的核苷酸序列，并在特定的位點(diǎn)上切割DNA分子。2．DNA連接酶的作用部位是磷酸二酯鍵。3．質(zhì)粒是常用的載體，它是一種小型的雙鏈環(huán)狀DNA分子，具有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)及標(biāo)記基因。4．基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。5．目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞常用顯微注射法，導(dǎo)入微生物細(xì)胞常用感受態(tài)細(xì)胞法。[等級(jí)選考研考向]1．[2023·浙江1月]以哺乳動(dòng)物為研究對(duì)象的生物技術(shù)已獲得了長足的進(jìn)步。對(duì)生物技術(shù)應(yīng)用于人類，在安全與倫理方面有不同的觀點(diǎn)，下列敘述正確的是（）A．試管嬰兒技術(shù)應(yīng)全面禁止B．治療性克隆不需要監(jiān)控和審查C．生殖性克隆不存在倫理道德方面的風(fēng)險(xiǎn)D．我國不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)2．[2022·遼寧卷]抗蟲和耐除草劑玉米雙抗12－5是我國自主研發(fā)的轉(zhuǎn)基因品種。為給監(jiān)管轉(zhuǎn)基因生物安全提供依據(jù)，采用PCR方法進(jìn)行目的基因監(jiān)測，反應(yīng)程序如圖所示。下列敘述正確的是（）A．預(yù)變性過程可促進(jìn)模板DNA邊解旋邊復(fù)制B．后延伸過程可使目的基因的擴(kuò)增更加充分C．延伸過程無需引物參與即可完成半保留復(fù)制D．轉(zhuǎn)基因品種經(jīng)檢測含有目的基因后即可上市3．[2022·江蘇卷]采用基因工程技術(shù)調(diào)控植物激素代謝，可實(shí)現(xiàn)作物改良。下列相關(guān)敘述不合理的是（）A．用特異啟動(dòng)子誘導(dǎo)表達(dá)iaaM（生長素合成基因）可獲得無子果實(shí)B．大量表達(dá)ipt（細(xì)胞分裂素合成關(guān)鍵基因）可抑制芽的分化C．提高ga2ox（氧化赤霉素的酶基因）的表達(dá)水平可獲得矮化品種D．在果實(shí)中表達(dá)acs（乙烯合成關(guān)鍵酶基因）的反義基因可延遲果實(shí)成熟4．[2022·廣東卷]“綠水逶迤去，青山相向開”大力發(fā)展低碳經(jīng)濟(jì)已成為全社會(huì)的共識(shí)。基于某些梭菌的特殊代謝能力，有研究者以某些工業(yè)廢氣（含CO2等一碳溫室氣體，多來自高污染排放企業(yè)）為原料，通過厭氧發(fā)酵生產(chǎn)丙酮，構(gòu)建一種生產(chǎn)高附加值化工產(chǎn)品的新技術(shù)?；卮鹣铝袉栴}：（1）研究者針對(duì)每個(gè)需要擴(kuò)增的酶基因（如圖）設(shè)計(jì)一對(duì)，利用PCR技術(shù)，在優(yōu)化反應(yīng)條件后擴(kuò)增得到目標(biāo)酶基因。（2）研究者構(gòu)建了一種表達(dá)載體pMTL80k，用于在梭菌中建立多基因組合表達(dá)庫，經(jīng)篩選后提高丙酮的合成量。該載體包括了啟動(dòng)子、終止子及抗生素抗性基因等，其中抗生素抗性基因的作用是，終止子的作用是________________________________________________________________________。（3）培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)重組梭菌大量表達(dá)上述酶蛋白時(shí)，出現(xiàn)了生長遲緩的現(xiàn)象，推測其原因可能是，此外丙酮的積累會(huì)傷害細(xì)胞，需要進(jìn)一步優(yōu)化菌株和工藝才能擴(kuò)大應(yīng)用規(guī)模。（4）這種生產(chǎn)高附加值化工產(chǎn)品的新技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了，體現(xiàn)了循環(huán)經(jīng)濟(jì)特點(diǎn)。從“碳中和”的角度看，該技術(shù)的優(yōu)勢在于________________________________________________________________________，具有廣泛的應(yīng)用前景和良好的社會(huì)效益。5．[2022·河北卷]蛋白酶抑制劑基因轉(zhuǎn)化是作物抗蟲育種的新途徑。某研究團(tuán)隊(duì)將胰蛋白酶抑制劑（NaPI）和胰凝乳蛋白酶抑制劑（StPin1A）的基因單獨(dú)或共同轉(zhuǎn)化棉花，獲得了轉(zhuǎn)基因植株?；卮鹣铝袉栴}：（1）蛋白酶抑制劑的抗蟲機(jī)制是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。（2）是實(shí)施基因工程的核心。（3）利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法時(shí)，必須將目的基因插入到質(zhì)粒的上，此方法的不足之處是。（4）為檢測目的基因在受體細(xì)胞基因組中的整合及其轉(zhuǎn)錄和翻譯，可采用的檢測技術(shù)有（寫出兩點(diǎn)即可）。（5）確認(rèn)抗蟲基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定表達(dá)后，還需進(jìn)一步做抗蟲的以鑒定其抗性程度。下圖為三種不同遺傳操作產(chǎn)生的轉(zhuǎn)基因棉花抗蟲實(shí)驗(yàn)結(jié)果，據(jù)結(jié)果分析（填“NaPI”或“StPin1A”或“NaPI＋StPin1A”）轉(zhuǎn)基因棉花的抗蟲效果最佳，其原因是。（6）基因突變可產(chǎn)生新的等位基因，在自然選擇的作用下，昆蟲種群的基因頻率會(huì)發(fā)生。導(dǎo)致昆蟲朝著一定的方向不斷進(jìn)化。據(jù)此推測，胰蛋白酶抑制劑轉(zhuǎn)基因作物長期選擇后，某些害蟲具有了抗胰蛋白酶抑制劑的能力，其分子機(jī)制可能是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________（寫出兩點(diǎn)即可）。6．[2022·湖南卷]水蛭是我國的傳統(tǒng)中藥材，主要藥理成分水蛭素為水蛭蛋白中重要成分之一，具有良好的抗凝血作用。擬通過蛋白質(zhì)工程改造水蛭素結(jié)構(gòu)，提高其抗凝血活性?；卮鹣铝袉栴}：（1）蛋白質(zhì)工程流程如圖所示，物質(zhì)a是，物質(zhì)b是。在生產(chǎn)過程中，物質(zhì)b可能不同，合成的蛋白質(zhì)空間構(gòu)象卻相同，原因是。（2）蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸，基因工程中獲取目的基因的常用方法有、和利用PCR技術(shù)擴(kuò)增。PCR技術(shù)遵循的基本原理是。（3）將提取的水蛭蛋白經(jīng)甲、乙兩種蛋白酶水解后，分析水解產(chǎn)物中的肽含量及其抗凝血活性，結(jié)果如圖所示。推測兩種處理后酶解產(chǎn)物的抗凝血活性差異主要與肽的（填“種類”或“含量”）有關(guān)，導(dǎo)致其活性不同的原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。（4）若要比較蛋白質(zhì)工程改造后的水蛭素、上述水蛭蛋白酶解產(chǎn)物和天然水蛭素的抗凝血活性差異，簡要寫出實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路________________________________________________________________________________________________________________________________________________。[國考真題研規(guī)律]7．[2022·全國乙卷]新冠疫情出現(xiàn)后，病毒核酸檢測和疫苗接種在疫情防控中發(fā)揮了重要作用?；卮鹣铝袉栴}。（1）新冠病毒是一種RNA病毒，檢測新冠病毒RNA（核酸檢測）可以采取RT-PCR法。這種方法的基本原理是先以病毒RNA為模板合成cDNA，這一過程需要的酶是，再通過PCR技術(shù)擴(kuò)增相應(yīng)的DNA片段。根據(jù)檢測結(jié)果判斷被檢測者是否感染新冠病毒。（2）為了確保新冠病毒核酸檢測的準(zhǔn)確性，在設(shè)計(jì)PCR引物時(shí)必須依據(jù)新冠病毒RNA中的來進(jìn)行。PCR過程每次循環(huán)分為3步，其中溫度最低的一步是。（3）某人同時(shí)進(jìn)行了新冠病毒核酸檢測和抗體檢測（檢測體內(nèi)是否有新冠病毒抗體），若核酸檢測結(jié)果為陰性而抗體檢測結(jié)果為陽性，說明（答出1種情況即可）；若核酸檢測和抗體檢測結(jié)果均為陽性，說明。（4）常見的病毒疫苗有滅活疫苗、蛋白疫苗和重組疫苗等。已知某種病毒的特異性蛋白S（具有抗原性）的編碼序列（目的基因）。為了制備蛋白疫苗，可以通過基因工程技術(shù)獲得大量蛋白S?；蚬こ痰幕静僮髁鞒淌莀_______________________________________________________________________________________________________________________________________________。課堂互動(dòng)探究案6考點(diǎn)一【任務(wù)驅(qū)動(dòng)】任務(wù)2磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵脫氧核苷酸磷酸二酯鍵DNA磷酸二酯鍵【過程評(píng)價(jià)】1．解析：限制酶識(shí)別特定的核苷酸序列，不同的限制酶能識(shí)別不同的核苷酸序列，由電泳圖可知XhoⅠ和SalⅠ兩種酶分別切割時(shí)，識(shí)別的序列不同，A正確；同種限制酶切割出的DNA片段，具有相同的黏性末端，再用DNA連接酶進(jìn)行連接，可以構(gòu)成重組DNA，B正確；SalⅠ將DNA片段切成4段，XhoⅠ將DNA片段切成3段，根據(jù)電泳結(jié)果可知泳道①為SalⅠ，泳道②為XhoⅠ，C正確；限制酶切割雙鏈DNA，酶切后的DNA片段仍然是雙鏈DNA為主，只在黏性末端出現(xiàn)部分單鏈，D錯(cuò)誤。答案：D2．答案：B3．解析：載體與目的基因結(jié)合后會(huì)形成一個(gè)重組DNA分子，A正確；載體中，對(duì)某種限制酶而言，最好只有一個(gè)切點(diǎn)，但還要有其他多種限制酶的切點(diǎn)，便于與目的基因定向連接，B正確；目前常用的載體有質(zhì)粒、λ噬菌體的衍生物和動(dòng)植物病毒，C正確；載體上要具有某些標(biāo)記基因，便于篩選重組DNA分子，D錯(cuò)誤。答案：D4．解析：CRISPR/Cas9系統(tǒng)主要包括Cas9(限制性內(nèi)切核酸酶)和向?qū)NA，前者是在核糖體上合成，后者是通過轉(zhuǎn)錄形成的，其場所不在核糖體，A錯(cuò)誤；向?qū)NA可通過轉(zhuǎn)錄形成，逆轉(zhuǎn)錄酶以RNA為模板合成DNA，B錯(cuò)誤；向?qū)NA和目標(biāo)DNA互補(bǔ)配對(duì)過程中，涉及的配對(duì)方式有A—U，G—C，T—A，C—G，C錯(cuò)誤；由于DNA分子是雙鏈結(jié)構(gòu)，因此切割后形成的每個(gè)DNA分子的片段中均含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，D正確。答案：D5．答案：(1)BamHⅠ和HindⅢ防止自身環(huán)化，避免反向連接，防止目的基因被破壞(2)防止引物之間結(jié)合形成雙鏈，并因此降低了引物與DNA模板鏈結(jié)合的效率B和C(3)植物組織培養(yǎng)激素、瓊脂考點(diǎn)二【任務(wù)驅(qū)動(dòng)】任務(wù)1(1)Bt毒蛋白基因Ti質(zhì)粒農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(2)抗原—抗體雜交法、用棉葉飼喂棉鈴蟲任務(wù)2(1)PCR人工合成基因文庫(2)啟動(dòng)子標(biāo)記基因(3)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法花粉管通道法顯微注射(4)DNA分子雜交分子雜交抗原—抗體雜交個(gè)體生物學(xué)水平任務(wù)3是否出現(xiàn)雜交帶是否出現(xiàn)雜交帶是否出現(xiàn)雜交帶是否抗蟲；是否抗病任務(wù)4抗除草劑藥物器官移植正?；颉具^程評(píng)價(jià)】1．解析：過程①僅僅是單鏈a和單鏈b之間形成氫鍵，不需要DNA連接酶，A錯(cuò)誤；過程②與過程①的本質(zhì)相同，故不需要DNA限制性內(nèi)切核酸酶，B錯(cuò)誤；圖中顯示的是人工合成基因的流程圖，因此需要知道目的基因Ⅰ的堿基序列，C正確；形成重組DNA分子的過程中，質(zhì)粒與目的基因Ⅰ的堿基序列是不可能相同的，D錯(cuò)誤。答案：C2．解析：要改造能夠降解甲基對(duì)硫磷的微生物，需要構(gòu)建含有甲基對(duì)硫磷分解酶基因的表達(dá)載體，A正確；將甲基對(duì)硫磷分解酶基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體菌，是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，是基因工程的核心步驟，B正確；甲基對(duì)硫磷是一種含碳農(nóng)藥，故用甲基對(duì)硫磷為唯一碳源的培養(yǎng)基選擇所需工程菌，C正確；目的基因的檢測和鑒定應(yīng)重點(diǎn)監(jiān)測目的基因的插入與否及插入后的表達(dá)結(jié)果，可采用DNA分子雜交技術(shù)等手段，而非提取工程菌的質(zhì)粒并檢測甲基對(duì)硫磷基因的含量，D錯(cuò)誤。答案：D3．答案：(1)CaCl2(或Ca2＋)卡那霉素(2)無菌草丁膦抑制農(nóng)桿菌生長(3)抗原－抗體分子雜交葡萄糖氧化酶病原體感染實(shí)驗(yàn)考點(diǎn)三【任務(wù)驅(qū)動(dòng)】任務(wù)1(1)溶解析出增大溶解(2)酒精溶液(3)藍(lán)任務(wù)2紗布4酒精NaCl二苯胺試劑沸水不變藍(lán)變藍(lán)任務(wù)3(1)DNA模板引物DNA聚合酶(2)變性90℃復(fù)性50℃引物延伸耐高溫的DNA聚合酶(3)變性延伸指數(shù)2n【過程評(píng)價(jià)】1．解析：圖1中加入蒸餾水的目的是使雞血細(xì)胞吸水漲破，釋放其中的核物質(zhì)，圖2中加入蒸餾水的目的是降低NaCl的濃度，使DNA的溶解度降低而析出，A錯(cuò)誤；DNA溶于水，圖1中完成過濾后，DNA溶解于濾液中，需保留濾液，B正確；圖2中DNA已析出，則過濾后棄去濾液，保留含DNA的黏稠物，C正確；在圖1中雞血細(xì)胞液中加入少許嫩肉粉，其中的木瓜蛋白酶能分解DNA中的雜質(zhì)蛋白，有利于去除雜質(zhì)蛋白，D正確。答案：A2．解析：只要含DNA的生物材料原則上都可進(jìn)行本實(shí)驗(yàn)，只是DNA含量高的成功的可能性更大，所以酵母和菜花均可作為提取DNA的材料，A正確；DNA在2mol/LNaCl溶液中溶解度較大，也可溶解于蒸餾水中，B正確；DNA會(huì)被吸附到濾紙上而大量損失，影響最終提取的DNA量，C錯(cuò)誤；DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱，冷卻后變藍(lán)，故D正確。答案：C3．解析：通過圖示可知，與該mRNA結(jié)合的是引物A，A錯(cuò)誤；引物A與引物B是一段DNA序列，其基本單位都是脫氧核苷酸，B正確；過程Ⅱ?yàn)镻CR的反應(yīng)階段，通過控制溫度的變化實(shí)現(xiàn)變性、復(fù)性、延伸，實(shí)現(xiàn)目標(biāo)序列的循環(huán)擴(kuò)增，C正確；RT－PCR反應(yīng)體系中應(yīng)加入緩沖液、引物、四種脫氧核糖核苷酸、逆轉(zhuǎn)錄酶、TaqDNA聚合酶等物質(zhì)，D正確。答案：A4．答案：D5．解析：利用PCR技術(shù)將DNA分子中的A1片段進(jìn)行擴(kuò)增，當(dāng)引物與母鏈通過堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合后，子鏈延伸的方向總是從5′端到3′端，據(jù)此依題意和圖示分析可知，A、B、C均錯(cuò)誤，D正確。答案：D6．解析：PCR擴(kuò)增的操作步驟依次是高溫變性、低溫復(fù)性及適溫延伸等，A錯(cuò)誤；上述過程需要使用的工具酶之一是耐高溫的DNA聚合酶，B錯(cuò)誤；PCR技術(shù)的原理是DNA雙鏈的復(fù)制，其產(chǎn)物是大量的DNA，所以需要以脫氧核苷酸為原料，C錯(cuò)誤；SRY基因?yàn)閅染色體上的性別決定基因，SRY探針是用位于Y染色體上的性別決定基因(SRY基因)制成的，因此SRY探針能與雄性胚胎樣品中DNA配對(duì)，D正確。答案：D考點(diǎn)四【任務(wù)驅(qū)動(dòng)】任務(wù)1滿足人類生產(chǎn)和生活需求基因基因修飾或基因合成基因工程新的蛋白質(zhì)任務(wù)2(1)食品過敏原生物多樣性生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性(2)趨利避害政策和法規(guī)任務(wù)3傳染性大潛伏期自然條件任務(wù)4功能結(jié)構(gòu)序列序列目的基因基因表達(dá)載體受體細(xì)胞檢測與鑒定基因修飾或基因合成任務(wù)5轉(zhuǎn)錄翻譯分子設(shè)計(jì)氨基酸序列預(yù)期功能【過程評(píng)價(jià)】1．解析：蛋白質(zhì)工程的基本途徑是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列(基因)或合成新的基因→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)→相應(yīng)的表達(dá)。因此，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過程的正確順序是：②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)→①推測藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列→③藍(lán)色熒光蛋白基因的