雞新城疫抗體水平測(cè)定

附件1：一、競(jìng)賽內(nèi)容本項(xiàng)目為雞新城疫抗體水平測(cè)定（微量法），測(cè)定辦法按《新城疫抗體診療技術(shù)》（GB/T16550-）原則進(jìn)行。本賽項(xiàng)不設(shè)理論考試，只對(duì)技能操作進(jìn)行綜合考核，技能競(jìng)賽題為公開(kāi)試題，見(jiàn)本賽項(xiàng)規(guī)程的重要技術(shù)規(guī)程及規(guī)定。二、競(jìng)賽方式本賽項(xiàng)為2人小組賽，以院校為單位組隊(duì)參賽，不得跨校組隊(duì)。三、競(jìng)賽時(shí)量比賽時(shí)間為3小時(shí)。比賽時(shí)由參賽隊(duì)自行擬定分工完畢有關(guān)競(jìng)賽內(nèi)容。四、名次擬定方法本賽項(xiàng)滿(mǎn)分100分，采用分項(xiàng)計(jì)分法。按總分由高到低排序，總分相似按完畢時(shí)間先后排序，用時(shí)少者列前；若二項(xiàng)均相似，則按抗體滴度報(bào)告、西凝實(shí)驗(yàn)得分高低依次排序。五、評(píng)分原則與評(píng)分細(xì)則1．評(píng)分原則及分值項(xiàng)目技能競(jìng)賽評(píng)分原則及分值見(jiàn)表1。表1項(xiàng)目技能競(jìng)賽評(píng)分原則及分值序號(hào)考核內(nèi)容考核要點(diǎn)分值評(píng)分原則1實(shí)驗(yàn)器材準(zhǔn)備（8分）儀器使用與材料準(zhǔn)備2儀器對(duì)的使用，1分；材料準(zhǔn)備到位，1分。物品標(biāo)記4標(biāo)記合理，2分；標(biāo)示清晰，2分。實(shí)桌面整潔度2擺放合理,2分；2配制1%雞紅細(xì)胞懸液（18分）采血辦法采血量6抗凝劑適量，2分；采血辦法規(guī)范、純熟，2分；采血量控制在2-4mL之間，2分。離心機(jī)使用4離心機(jī)使用規(guī)范，4分。紅細(xì)胞懸液配制辦法8稀釋液倍數(shù)對(duì)的（離心時(shí)原抗凝血的3-4倍稀釋?zhuān)♂尯竺抗茏畲蟛豢沙?0mL），2分；離心機(jī)轉(zhuǎn)數(shù)、離心時(shí)間對(duì)的2分；洗滌次數(shù)適宜，2分；壓積紅細(xì)胞吸取對(duì)的，2分。3血凝實(shí)驗(yàn)（20分）器材使用4微量移液器使用規(guī)范，2分；槍頭更換操作符合規(guī)范，2分。操作程序6及時(shí)換槍頭，2分；加樣次序?qū)Φ模?分；倍比稀釋操作規(guī)范，1分；震蕩及感作時(shí)間得當(dāng)，2分。成果鑒定精確10生理鹽水對(duì)照孔的RBC呈明顯鈕扣狀沉到孔底時(shí)鑒定成果，4分；對(duì)照孔成果對(duì)的，能擬定完全凝集的新城疫原則抗原最高稀釋倍數(shù)，4分；能把完全凝集的病毒的最高稀釋倍數(shù)作為1個(gè)血凝單位，2分。4配制四單位病毒（10分）器材選擇4器材選擇合理，2分；使用規(guī)范、純熟，2分。配制辦法4稀釋倍數(shù)計(jì)算對(duì)的，3分；稀釋液加入得當(dāng)、操作規(guī)范，2分。配制量適宜2配制量適宜，2分；5血凝克制實(shí)驗(yàn)（20分）器材使用4器材使用規(guī)范、純熟，4分；操作程序696孔V型微量反映板各孔加入的稀釋劑對(duì)的，1分；被檢血清、新城疫原則陰性血清對(duì)照、原則陽(yáng)性血清對(duì)照加入對(duì)的，2分；感作時(shí)間適宜（以國(guó)標(biāo)為準(zhǔn)，時(shí)間不對(duì)的扣2分），2分；槍頭更換對(duì)的，1分。成果鑒定精確10能在生理鹽水對(duì)照孔紅細(xì)胞呈明顯鈕扣狀沉淀到孔底時(shí)鑒定成果，2分；在對(duì)照孔成果對(duì)的狀況下，能從背側(cè)觀(guān)察RBC有無(wú)呈淚珠樣流淌，2分；能把完全不凝集（RBC完全流下）作為被檢血清的最高稀釋倍數(shù)，3分；陰性血清與原則對(duì)照的HI滴度不不不大于2log2，陽(yáng)性血清與原則抗原對(duì)照的HI滴度與已知滴度相差1個(gè)稀釋度范疇內(nèi)，3分。6抗體滴度報(bào)告（24分）抗體滴度報(bào)告2抗體滴度報(bào)告方式對(duì)的，2分；注：若超出10孔，應(yīng)寫(xiě)成≥10。成果誤差20每個(gè)樣本1分，共20個(gè)樣本，成果誤差±1，得1分；場(chǎng)地整潔度2場(chǎng)地整潔，2分?？偡?002．評(píng)分細(xì)則項(xiàng)目技能競(jìng)賽評(píng)分細(xì)則見(jiàn)表2。表2項(xiàng)目技能競(jìng)賽評(píng)分細(xì)則序號(hào)考核內(nèi)容考核要點(diǎn)分值評(píng)分原則細(xì)則1實(shí)驗(yàn)器材準(zhǔn)備（8分）儀器使用與材料準(zhǔn)備2儀器使用不對(duì)的扣1分；材料準(zhǔn)備不到位扣1分。物品標(biāo)記4不標(biāo)示不得分；標(biāo)記不合理，扣2分；注：缺一種器皿未標(biāo)注，扣0.5分，扣完2分為止。實(shí)桌面整潔度2擺放不合理,酌情扣分，最多不超出2分。2配制1%雞紅細(xì)胞懸液（18分）采血辦法采血量6雞未保定好，扣1分；采血前未消毒扣1分；血液與抗凝劑比為1:4，差別較小扣1分，差別較大扣2分；采血未一針見(jiàn)血，每多加一針扣0.5分；未用干棉球按壓止血，扣1分；采血未成功的，扣6分等。以上細(xì)節(jié)累加，6分扣完為止。離心機(jī)使用4未做好平衡扣2分，平衡時(shí)未加套管等，各扣1分，累積扣完4分為止。紅細(xì)胞懸液配制辦法8稀釋液倍數(shù)有誤（離心時(shí)原抗凝血的3-4倍稀釋?zhuān)♂尯竺抗茏畲蟪?0mL）扣2分；離心機(jī)轉(zhuǎn)數(shù)、離心時(shí)間(r/m，5-10min)有誤，扣2分；洗滌未能達(dá)原則次數(shù)扣2分；最后配備1%紅細(xì)胞為10-20mL，每超出10mL扣1分，最多扣2分。3血凝實(shí)驗(yàn)（20分）器材使用4加槍頭時(shí)操作規(guī)范，不可用力撞擊槍盒，移液槍垂直加樣為規(guī)范，傾斜角度不要過(guò)大，否則酌情扣分，最多不超出4分。操作程序6不及時(shí)換槍頭扣2分；加樣次序有誤扣1分；倍比稀釋操作欠規(guī)范扣1分；震蕩及感作時(shí)間得不當(dāng)（能夠使用振蕩器，以液體不震出來(lái)為準(zhǔn)），扣2分。成果鑒定精確10生理鹽水對(duì)照孔的RBC呈明顯鈕扣狀沉到孔底時(shí)鑒定成果，4分；對(duì)照孔成果有誤，不能擬定完全凝集的新城疫原則抗原最高稀釋倍數(shù)，酌情扣分，最多不超出4分；能把完全凝集的病毒的最高稀釋倍數(shù)作為1個(gè)血凝單位，讀數(shù)時(shí)，有跳孔現(xiàn)象的，每跳1孔扣2分。4配制四單位病毒（10分）器材選擇4器材選擇不合理，扣2分；使用不規(guī)范酌情扣分，最多不超出3分。配制辦法4稀釋倍數(shù)計(jì)算對(duì)的，3分；稀釋液加入得當(dāng)、操作規(guī)范，2分。配制量適宜2配備量10-20mL為適量，每超出10mL扣1分，最多扣2分。5血凝克制實(shí)驗(yàn)（20分）器材使用4器材使用不規(guī)范、純熟，酌情扣分，最多不超出4分。操作程序696孔V型微量反映板各孔加入的稀釋劑有誤1分；被檢血清、新城疫原則陰性血清對(duì)照、原則陽(yáng)性血清對(duì)照加入對(duì)的，得2分，參考國(guó)標(biāo)，每缺一種對(duì)照扣1分；感作時(shí)間適宜2分；以國(guó)標(biāo)為準(zhǔn)，時(shí)間不對(duì)的扣2分，槍頭不及時(shí)更換扣1分。成果鑒定精確10能在生理鹽水對(duì)照孔紅細(xì)胞呈明顯鈕扣狀沉淀到孔底時(shí)鑒定成果，有誤酌情扣分，最多不超出2分；在對(duì)照孔成果對(duì)的狀況下，能從背側(cè)觀(guān)察RBC有無(wú)呈淚珠樣流淌，有誤酌情扣分，最多不超出2分；能把完全不凝集（RBC完全流下）作為被檢血清的最高稀釋倍數(shù)，有誤酌情扣分，最多不超出3分；陰性血清與原則對(duì)照的HI滴度不不不大于2log2，陽(yáng)性血清與原則抗原對(duì)照的HI滴度與已知滴度相差1個(gè)稀釋度范疇內(nèi)，超出的扣3分。6抗體滴度報(bào)告（24分）抗體滴度報(bào)告2抗體滴度報(bào)告方式對(duì)的，若超出10孔，應(yīng)寫(xiě)成≥10。有誤酌情扣分；酌情扣分，最多不超出2分。成果誤差20每個(gè)樣本1分，共20個(gè)樣本，成果誤差±1，得1分；誤差超出±1，0分。場(chǎng)地整潔度2若移液槍未調(diào)到最大量程，其它儀器和器皿未復(fù)位；注射器未放入廢物缸等，每錯(cuò)1項(xiàng)扣1分，扣完為止?？偡?00六、賽點(diǎn)提供的設(shè)施設(shè)備儀器清單儀器設(shè)備按《新城疫診療技術(shù)》（GB/T16550-）原則規(guī)定配制，且均為慣用儀器、設(shè)備與材料。本賽項(xiàng)所用的儀器、設(shè)備與材料見(jiàn)表3。

表3項(xiàng)目競(jìng)賽用儀器、設(shè)備與材料序號(hào)器材或設(shè)備名稱(chēng)數(shù)量規(guī)格1普通托盤(pán)天平1臺(tái)500g2普通離心機(jī)1臺(tái)L6003微型振蕩器（MH-2）1臺(tái)4DRAGON微量移液器1支0.005～0.05mL5DRAGON微量移液器1支0.1～1mL6Thermo微量移液器1支1～10mL7微量移液器吸頭150個(gè)0.005～0.05mL20個(gè)0.1～1mL10個(gè)1～10mL8微量移液器吸頭盒2個(gè)0.005～0.05mL1個(gè)0.1～1mL9板式微量移液器架1個(gè)1096孔V型血凝反映板5塊11燒杯5個(gè)50mL2個(gè)500mL12禽用采血器2支5mL2支10mL13具蓋塑料離心管6支15mL14指型離心管6支1.5mL15試管架1個(gè)16指型離心管架1個(gè)17細(xì)記號(hào)筆1支18消毒服2件19生理鹽水250mL20檸檬酸鈉溶液20mL3.8%21雞新城疫原則抗原1份22被檢血清樣本20個(gè)23雞新城疫原則陽(yáng)性血清1份24雞新城疫原則陰性血清1份25酒精棉球若干75%26干棉球若干27非免疫公雞1只28橡膠手套4副29醫(yī)用防護(hù)口罩2只 30實(shí)驗(yàn)報(bào)告單1張31標(biāo)簽紙若干33A4紙2張34簽字筆2支七、選手須知（一）重要技術(shù)規(guī)程及規(guī)定雞新城疫抗體水平測(cè)定（微量法）按《新城疫抗體診療技術(shù)》（GB/T16550-）原則進(jìn)行,具體環(huán)節(jié)及其分值以下：（一）實(shí)驗(yàn)器材準(zhǔn)備（占總成績(jī)的8%）按照操作規(guī)程進(jìn)行器材準(zhǔn)備，規(guī)定器材擺放有序，物品標(biāo)記合理，桌面整潔等。（二）配制1%雞紅細(xì)胞懸液（占總成績(jī)的18%）按照操作規(guī)程進(jìn)行采血、離心、洗滌、配制1%雞紅細(xì)胞懸液，規(guī)定采血規(guī)范、純熟、采血量適量、離心機(jī)使用規(guī)范、洗滌次數(shù)及洗滌時(shí)間適宜等。（三）血凝實(shí)驗(yàn)（占總成績(jī)的20%）按照操作規(guī)程，用微量移液器在96孔V型血凝反映板滴加稀釋液、新城疫原則抗原，充足混勻，倍比稀釋后，添加1%雞紅細(xì)胞懸液，充足振蕩混勻，對(duì)的鑒定抗原的血凝效價(jià)。規(guī)定微量移液器使用規(guī)范、倍比稀釋操作規(guī)范、成果對(duì)的等。（四）配制四單位病毒（占總成績(jī)的10%）根據(jù)血凝實(shí)驗(yàn)成果，按照操作規(guī)程配制四單位病毒。規(guī)定稀釋倍數(shù)計(jì)算對(duì)的，稀釋液體積加入得當(dāng)、四單位病毒配制量適宜等。（五）血凝克制實(shí)驗(yàn)（占總成績(jī)的20%）按照操作規(guī)程，對(duì)20個(gè)被檢血清進(jìn)行血凝克制實(shí)驗(yàn)操作，并設(shè)新城疫原則陽(yáng)性血清對(duì)照、陰性血清對(duì)照；對(duì)的讀取抗體滴度成果，完畢報(bào)告。規(guī)定移液器使用規(guī)范、反映板各孔的稀釋對(duì)的、感作時(shí)間得當(dāng)、成果判斷對(duì)的等。（六）抗體滴度報(bào)告（占總成績(jī)的24%）按照操作規(guī)程，對(duì)的讀取抗體滴度成果，完畢報(bào)告。規(guī)定抗體滴度報(bào)告方式對(duì)的、場(chǎng)地整潔、成果誤差小等。（二）選手注意事項(xiàng)1.參賽選手必須持本人身份證或戶(hù)口簿、學(xué)生證和參賽證參加比賽。2.參賽選手不得穿戴有學(xué)校名稱(chēng)或有特殊標(biāo)記的服裝進(jìn)入賽場(chǎng)。3.參賽選手務(wù)必于賽前20分鐘到賽場(chǎng)，遲到15分鐘以上按棄權(quán)解決，已檢錄入場(chǎng)的